2022届高考生物一轮复习第2讲微生物的培养和应用课末总结课件新人教版选修1202106052278.pptx

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1、第2讲微生物的培养和应用课末总结知识导图知识导图思维缕析思维缕析下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：学科素养学科素养核心释疑核心释疑(1)图图甲甲是是利利用用平平板板划划线法法进进行行微微生生物物接接种种，图图乙乙是是利利用用稀稀释涂涂布布平平板板法法进进行行微微生生物物接接种种。对对这这两两种种接接种种工工具具进进行行灭灭菌菌和和消消毒毒的的方方法法依依次次是是灼灼烧灭菌和酒精消毒菌和酒精消毒。(2)接种操作要在火焰附近进行的原因是接种操作要在火焰附近进行的原因是火焰附近存在着无菌区域火焰附近存在着无菌区域。(3)接接种

2、种后后，在在固固体体培培养养基基上上培培养养细细菌菌时时进进行行倒倒置置培培养养的的目目的的是是防防止止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基染培养基。探究高考探究高考明确考向明确考向1(2020山山东东卷卷，20)野野生生型型大大肠肠杆杆菌菌可可以以在在基基本本培培养养基基上上生生长长，发发生生基基因因突突变变产产生生的的氨氨基基酸酸依依赖赖型型菌菌株株需需要要在在基基本本培培养养基基上上补补充充相相应应氨氨基基酸酸才才能能生生长长。将将甲甲硫硫氨氨酸酸依依赖赖型型菌菌株株M和和苏苏氨氨酸酸依依赖赖型型菌菌株株N单单独独接接种种在在基基本本培培养养基基上上时时

3、，均均不不会会产产生生菌菌落落。某某同同学学实实验验过过程程中中发发现现，将将M、N菌菌株株混混合合培培养养一一段段时时间间，充充分分稀稀释释后后再再涂涂布布到到基基本本培培养养基基上上，培培养养后后出出现现许许多多由由单单个个细细菌菌形形成成的的菌菌落落，将将这这些些菌菌落落分分别别接接种种到到基基本本培培养养基基上，培养后均有菌落出现上，培养后均有菌落出现。该该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是()A操作过程中出现杂菌污染操作过程中出现杂菌污染BM、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸菌株互为对方提供所缺失的氨基酸C混合培养过程中，菌株获得了对方的

4、遗传物质混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质D混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变B解解析析操操作作过程程中中出出现杂菌菌污染染，基基本本培培养养基基上上生生长的的为杂菌菌，A合合理理；若若M、N菌菌株株互互为对方方提提供供所所缺缺失失的的氨氨基基酸酸形形成成的的菌菌落落，需需要要MN混混合合在在一一起起才才能能生生存存，而而该菌菌落落来来自自单个个细菌菌形形成成的的菌菌落落，单个个细菌菌不不可可能能是是混混合合培培养养的的细菌菌。B项不不合合理理。M、N菌菌株株混混合合培培养养后后在在基基本本培培养养基基上上可可以以生生存存，推推测

5、可可能能是是混混合合培培养养过程程中中，菌菌株株间发生生了了基基因因交交流流，获得得了了对方方的的遗传物物质，C合合理理；基基因因突突变是是不不定定向向的的，在在混混合合培培养养过程程中中，菌菌株株中中已已突突变的的基基因因也也可可能能再再次次发生生突突变得得到到可可在在基基本本培培养养基基上上生存的野生型大生存的野生型大肠杆菌，杆菌，D合理。故合理。故选B。B解解析析倒倒平平板板后后无无需需晃晃动，A错误；区区、区区没没有有出出现单菌菌落落，说明明细菌菌数数量量太太多多，故故应从从区区挑挑取取单菌菌落落，B正正确确；出出现单菌菌落落即即达达到到了了菌菌种种纯化化的的目目的的，C错误；刚果果红

6、是是一一种种染染料料，它它可可以以与与像像纤维素素这样的的多多糖糖物物质形形成成红色色复复合合物物，但但并并不不和和水水解解后后的的纤维二二糖糖和和葡葡萄萄糖糖发生生这种反种反应，D错误。故。故选B。3(2020浙浙江江卷卷，19)下下列列关关于于微微生生物物培培养养及及利利用用的的叙叙述述，错错误误的的是是()A利利用用尿尿素素固固体体培培养养基基可可迅迅速速杀杀死死其其他他微微生生物物，而而保保留留利利用用尿尿素素的微生物的微生物B配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵

7、得到糯米酒D适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化A解解析析在在尿尿素素固固体体培培养养基基中中，由由于于不不能能利利用用尿尿素素做做氮氮源源的的微微生生物物不不能能生生长繁繁殖殖，而而保保留留利利用用尿尿素素的的微微生生物物，其其他他微微生生物物并并非非被被杀死死，A错误；不不同同的的微微生生物物所所需需的的pH不不同同，所所以以配配置置培培养养基基时应根根据据微微生生物物的的种种类调整整培培养养基基的的pH，B正正确确；酵酵母母菌菌不不能能直直接接利利用用淀淀粉粉，应用用酒酒曲曲中中的的根根霉霉和和米米曲曲霉霉等等微微生生物物把把淀淀粉粉糖糖化化，再再用用酵酵母母

8、菌菌发酵酵得得到到糯糯米米酒酒，C正确；醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精正确；醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，生醋酸，D正确。故正确。故选A。4(2019江苏卷，江苏卷，12)下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是()A培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C接种后的培养皿要倒置，以防培养污染接种后的培养皿要倒置，以防培养污染D菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基A解解析析培培养养

9、微微生生物物的的器器具具不不一一定定都都要要进行行高高压蒸蒸汽汽灭菌菌，如如接接种种环需需要要进行行灼灼烧灭菌菌，A项错误。接接种种前前灼灼烧接接种种环的的目目的的是是彻底底杀灭环上上的的细菌菌、芽芽孢等等，接接种种后后再再灼灼烧是是为了了防防止止菌菌种种逸逸出出，污染染接接种种室室或或者者超超净台台，影影响响整整体体接接种种环境境，B项正正确确。接接种种后后的的培培养养皿皿要要倒倒置置，既既可可以以防防止止皿皿盖盖上上的的水水珠珠落落入入培培养养基基造造成成污染染，又又可可以以避避免免培培养养基基里里的的水水分分过快快地地挥发，C项正正确确。固固体体培培养养基基可可通通过平平板板划划线法法或

10、或稀稀释涂涂布布平平板板法法进行行菌菌种种分分离离；在在固固体体培培养养基基上上才才能能形形成成菌菌落落，故故菌菌落落计数数用用固固体培养基，体培养基，D项正确正确。5(2020全全国国，37)某某种种物物质质S(一一种种含含有有C、H、N的的有有机机物物)难难以以降降解解，会会对对环环境境造造成成污污染染，只只有有某某些些细细菌菌能能降降解解S。研研究究人人员员按按照照下下图图所所示示流流程程从从淤淤泥泥中中分分离离得得到到能能高高效效降降解解S的的细细菌菌菌菌株株。实实验验过过程程中中需需要要甲甲、乙乙两两种种培培养养基基，甲甲的的组组分分为为无无机机盐盐、水水和和S，乙乙的的组组分分为为

11、无无机机盐盐、水、水、S和和Y。回答下列问题：回答下列问题：(1)实实验验时时，盛盛有有水水或或培培养养基基的的摇摇瓶瓶通通常常采采用用_的的方方法法进进行行灭灭菌菌。乙乙培培养养基基中中的的Y物物质质是是_。甲甲、乙乙培培养养基基均均属属于于_培养基。培养基。(2)实实验验中中初初步步估估测测摇摇瓶瓶M中中细细菌菌细细胞胞数数为为2107个个/mL，若若要要在在每每个个平平板板上上涂涂布布100L稀稀释释后后的的菌菌液液，且且保保证证每每个个平平板板上上长长出出的的菌菌落落数数不不超超过过200个，则至少应将摇瓶个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释中的菌液稀释_倍。倍。高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌琼

12、脂琼脂选择选择104(3)在在步步骤骤的的筛筛选选过过程程中中，发发现现当当培培养养基基中中的的S超超过过某某一一浓浓度度时时，某某菌菌株株对对S的的降降解解量量反反而而下下降降，其其原原因因可可能能是是_(答出答出1点即可点即可)。(4)若若要要测测定定淤淤泥泥中中能能降降解解S的的细细菌菌细细胞胞数数，请请写写出出主主要要实实验验步步骤骤：_。(5)上上述述实实验验中中，甲甲、乙乙两两种种培培养养基基所所含含有有的的组组分分虽虽然然不不同同，但但都都能能为细菌的生长提供为细菌的生长提供4类营养物质，即类营养物质，即_。S的浓度超过某一值时的浓度超过某一值时会会抑制菌株的生长抑制菌株的生长取

13、淤泥加入无菌水中，涂布取淤泥加入无菌水中，涂布(或稀释涂布或稀释涂布)到乙培养基上，培养后计数到乙培养基上，培养后计数水、碳源、氮源和无机盐水、碳源、氮源和无机盐解解析析本本题考考查微微生生物物的的培培养养、分分离离和和计数数。(1)为保保持持原原有有的的湿湿度度，盛盛有有水水或或培培养养基基的的器器皿皿常常采采用用高高压蒸蒸汽汽灭菌菌法法灭菌菌。乙乙培培养养基基为固固体体培培养养基基，需需要要加加入入凝凝固固剂琼脂脂。甲甲、乙乙培培养养基基均均只只含含S一一种种碳碳源源和和氮氮源源，故故只只有有能能利利用用S的的细菌菌才才能能生生长，因因而而都都属属于于选择培培养养基基。(2)M中中细菌菌浓

14、度度稀稀释倍倍数数涂涂布布时细菌菌的的浓度度，所所以以稀稀释倍倍数数M中中细菌菌浓度度涂涂布布时细菌菌的的浓度度。M中中细菌菌浓度度为2107个个/mL，涂涂布布时细菌菌浓度度最最高高为200个个/100L2103个个/mL，所所以以稀稀释倍倍数数为2107个个/mL(2103)个个/mL104。(3)当当培培养养基基中中的的S超超过某某一一浓度度时，细胞胞外外的的渗渗透透压增增大大，细胞胞吸吸水水减减少少，代代谢减减弱弱，菌菌株株生生长受受到到抑抑制制，对S的的降降解解量量下下降降。(4)采采用用稀稀释涂涂布布平平板板法法进行行培培养养计数数时，先先取取1g淤淤泥泥加加入入9mL无无菌菌水水

15、中中制制成成菌菌悬液液，稀稀释涂涂布布到到乙乙培培养养基基上上，培培养养后后统计菌菌落落数数，推推算算淤淤泥泥中中能能降降解解S的的细菌菌数数量量。(5)培培养养微微生生物物的的培培养养基基中中含含有有水水、碳碳源源、氮氮源源和和无无机机盐等等营养物养物质。W乙乙乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W(3)土土壤壤中中的的某某些些微微生生物物可可以以利利用用空空气气中中的的氮氮气气作作为为氮氮源源。若若要要设设计计实实验验进进一一步步确确定定甲甲、乙乙菌菌能能否否利利用用空空气气中中的的氮氮气气作作为为氮氮源源，请请简简要要写写出出实实验验思思路路、预预期期

16、结结果果和和结结论论，即即_。(4)该该小小组组将将人人工工合合成成的的一一段段DNA转转入入大大肠肠杆杆菌菌，使使大大肠肠杆杆菌菌产产生生能能降降解解W的的酶酶(酶酶E)。为为了了比比较较酶酶E与与天天然然酶酶降降解解W能能力力的的差差异异，该该小小组组拟拟进行如下实验，请完善相关内容。进行如下实验，请完善相关内容。将甲、乙菌分别接种在无氮源将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基培养基上上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源 在在含含有有一一定定浓浓度度W的的固固体体培培养养基基上上，A处处滴滴加加含含有有酶酶E的的缓缓冲冲液液

17、，B处处滴滴加加含含有有相相同同浓浓度度天天然然酶酶的的缓缓冲冲液液，C处处滴滴加加_，三三处处滴滴加加量相同。量相同。一一段段时时间间后后，测测量量透透明明圈圈的的直直径径。若若C处处没没有有出出现现透透明明圈圈，说说明明_；若若A、B处处形形成成的的透透明明圈圈直直径径大大小小相相近近，说说明明_。缓冲液缓冲液缓冲液不能降解缓冲液不能降解W酶酶E与天然酶降解与天然酶降解W的能力相近的能力相近解解析析(1)物物质W是是一一种种含含氮氮有有机机物物，要要分分离离能能够降降解解物物质W的的细菌菌，需需用用以以物物质W为唯唯一一氮氮源源的的选择培培养养基基进行行筛选。(2)由由题图可可知知，甲甲菌

18、菌落落周周围没没有有透透明明圈圈，说明明甲甲菌菌不不能能降降解解物物质W，乙乙菌菌落落周周围出出现透透明明圈圈，说明明乙乙菌菌能能降降解解物物质W，故故要要得得到到目目标菌菌，应选择乙乙菌菌落落进一一步步纯化化。(3)要要鉴定定甲甲、乙乙菌菌能能否否利利用用空空气气中中的的氮氮气气作作为氮氮源源，则培培养养基基中中不不能能添添加加氮氮源源，所所以以将将甲甲、乙乙菌菌分分别接接种种在在无无氮氮源源的的培培养养基基上上(其其他他条条件件相同且适宜相同且适宜)，若，若细菌能生菌能生长，则说明明细菌能利用空气中的氮气作菌能利用空气中的氮气作为氮源氮源。(4)实验目目的的是是比比较天天然然酶和和酶E降降

19、解解物物质W的的能能力力，做做实验时要要设计空空白白对照照实验，所所以以C处应滴滴加加缓冲冲液液。C处没没有有出出现透透明明圈圈，说明明缓冲冲液液不不能能降降解解物物质W，A、B处透透明明圈圈的的出出现说明明物物质W被被降降解解，若若两两个个透明圈直径大小相近，透明圈直径大小相近，则说明明酶E与天然与天然酶降解物降解物质W的能力相近。的能力相近。7(2019全全国国卷卷，37)已已知知一一种种有有机机物物X(仅仅含含有有C、H两两种种元元素素)不不易易降降解解，会会造造成成环环境境污污染染。某某小小组组用用三三种种培培养养基基筛筛选选土土壤壤中中能能高高效效降降解解X的细菌的细菌(目标菌目标菌

20、)。号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。号号培培养养基基：氯氯化化钠钠(5g/L)，硝硝酸酸铵铵(3g/L)，其其他他无无机机盐盐(适适量量)，X(15g/L)。号号培培养养基基：氯氯化化钠钠(5g/L)，硝硝酸酸铵铵(3g/L)，其其他他无无机机盐盐(适适量量)，X(45g/L)。回答回答下列问题。下列问题。(1)在在号号培培养养基基中中，为为微微生生物物提提供供氮氮源源的的是是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_。(2)若若将将土土壤壤悬悬浮浮液液接接种种在在号号液液体体培培养养基基中中，培培养

21、养一一段段时时间间后后，不不能能降降解解X的的细细菌菌比比例例会会_，其其原原因因是是_。牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨X下降下降不能降解不能降解X的细菌因缺乏的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖的细菌能够增殖(3)号号培培养养基基加加入入琼琼脂脂后后可可以以制制成成固固体体培培养养基基，若若要要以以该该固固体体培培养养基基 培培 养养 目目 标标 菌菌 并并 对对 菌菌 落落 进进 行行 计计 数数，接接 种种 时时，应应 采采 用用 的的 方方 法法 是是_。(4)假假设设从从号号培培养养基基中中得得到到了了能能高高效效降降解解X的的细细菌菌，且且该该菌菌

22、能能将将X代代谢谢为为丙丙酮酮酸酸，则则在在有有氧氧条条件件下下，丙丙酮酮酸酸可可为为该该菌菌的的生生长长提提供供_和和_。稀释涂布平板法稀释涂布平板法能量能量合成其他物质的原料合成其他物质的原料解解析析(1)号号培培养养基基中中含含有有牛牛肉肉膏膏、蛋蛋白白胨和和有有机机物物X等等，其其中中X仅含含有有C、H两两种种元元素素，故故为微微生生物物提提供供氮氮源源的的是是牛牛肉肉膏膏、蛋蛋白白胨。、号号培培养养基基中中除除无无机机盐外外，还含含有有有有机机物物X，故故为微微生生物物提提供供碳碳源源的的有有机机物物是是X。(2)因因号号液液体体培培养养基基中中的的有有机机碳碳源源只只有有X，故故培

23、培养养一一段段时间后后，不不能能降降解解X的的细菌菌因因缺缺乏乏碳碳源源不不能能增增殖殖，而而能能降降解解X的的细菌菌能能够增增殖，故不能降解殖，故不能降解X的的细菌比例会下降菌比例会下降。(3)对微微生生物物分分离离的的方方法法有有平平板板划划线法法和和稀稀释涂涂布布平平板板法法，但但其其中中只只有有稀稀释涂涂布布平平板板法法能能够用用于于计数数。(4)能能高高效效降降解解X的的细菌菌能能将将X代代谢为丙丙酮酸酸，丙丙酮酸酸在在有有氧氧条条件件下下被被降降解解时能能释放放出出大大量量能能量量，故故丙丙酮酸酸可可为该细菌菌的的生生长提提供供能能量量。丙丙酮酸酸还可可以以为该细菌菌中中其其他他物

24、物质的的合合成成提提供原料。供原料。8(2018全全国国卷卷)将将马马铃铃薯薯去去皮皮切切块块，加加水水煮煮沸沸一一定定时时间间，过过滤滤得得到到马马铃铃薯薯浸浸出出液液。在在马马铃铃薯薯浸浸出出液液中中加加入入一一定定量量蔗蔗糖糖和和琼琼脂脂，用用水水定定容容后后灭菌，得到灭菌，得到M培养基。培养基。回答下列问题：回答下列问题：(1)M培培养养基基若若用用于于真真菌菌的的筛筛选选，则则培培养养基基中中应应加加入入链链霉霉素素以以抑抑制制_的生长，加入了链霉素的培养基属于的生长，加入了链霉素的培养基属于_培养基。培养基。(2)M培培养养基基中中的的马马铃铃薯薯浸浸出出液液为为微微生生物物生生长

25、长提提供供了了多多种种营营养养物物质质，营营养养物物质质类类型型除除氮氮源源外外还还有有_(答答出出两两点点即即可可)。氮氮源源进进入入细胞后，可参与合成的生物大分子有细胞后，可参与合成的生物大分子有_(答出两点即可答出两点即可)。细菌细菌选择选择碳源、无机盐碳源、无机盐蛋白质、核酸蛋白质、核酸(3)若若在在M培培养养基基中中用用淀淀粉粉取取代代蔗蔗糖糖，接接种种土土壤壤滤滤液液并并培培养养，平平板板上上长长出出菌菌落落后后可可通通过过加加入入显显色色剂剂筛筛选选出出能能产产淀淀粉粉酶酶的的微微生生物物。加加入入的的显显色色剂剂是是_，该该方方法法能能筛筛选选出出产产淀淀粉粉酶酶微微生生物物的

26、的原原理理是是_。碘液碘液淀粉遇碘淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈(4)甲甲、乙乙两两位位同同学学用用稀稀释释涂涂布布平平板板法法测测定定某某一一土土壤壤样样品品中中微微生生物物的的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲甲同同学学涂涂布布了了3个个平平板板，统统计计的的菌菌落落数数分分别别是是110、140和和149，取取平平均值均值133；乙乙同同学学涂涂布布了了3个个平平板板，统统计计的的菌菌落落数数分分别别是是27、169和和176，取取平平均均值值124。有有人人认认为为这这

27、两两位位同同学学的的结结果果中中，乙乙同同学学的的结结果果可可信信度度低低，其其原原因因是是_。乙同学的结果中，乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性个相差悬殊，结果的重复性差差解解析析(1)链霉霉素素是是抗抗生生素素，可可抑抑制制细菌菌生生长，故故在在M培培养养基基中中加加入入链霉素作霉素作为选择培养基，可培养基，可筛选出真菌。出真菌。(2)培培养养基基中中的的营养养成成分分一一般般包包括括碳碳源源、氮氮源源、水水和和无无机机盐等等。细胞胞中中含含有有氮氮元元素素的的生生物物大大分分子子有有蛋蛋白白质、核核酸酸等等，故故所所加加入入的的氮氮源源可

28、可参参与与以上物以上物质的合成。的合成。(3)能能产生生淀淀粉粉酶的的微微生生物物可可将将淀淀粉粉分分解解成成麦麦芽芽糖糖，淀淀粉粉遇遇碘碘变蓝，向向加加有有淀淀粉粉的的培培养养基基中中加加入入碘碘液液后后培培养养基基呈呈现蓝色色，产淀淀粉粉酶的的菌菌落落周周围的的淀淀粉粉被被水水解解，形形成成透透明明圈圈，可可根根据据透透明明圈圈的的大大小小判判断断产生生淀淀粉粉酶的的多少多少。(4)统计菌菌落落数数时一一般般选择菌菌落落数数在在30300个个的的平平板板，甲甲同同学学统计的的3个个平平板板中中的的菌菌落落数数在在正正常常范范围内内且且差差距距不不大大，比比较准准确确；乙乙同同学学统计的的3

29、个平板中，个平板中，1个平板的个平板的计数数结果与另果与另2个相差个相差悬殊，殊，结果的重复性差。果的重复性差。9(2018全国卷全国卷，37)回答下列与酵母菌有关的问题：回答下列与酵母菌有关的问题：(1)分分离离培培养养酵酵母母菌菌通通常常使使用用_(填填“牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨”“MS”或或“麦麦芽芽汁汁琼琼脂脂”)培培养养基基，该该培培养养基基应应采采用用_灭灭菌菌法法灭灭菌菌。若若将将酵酵母母菌菌划划线线接接种种在在平平板板上上，培培养养一一段段时时间间后后可可观观察察到到菌菌落落，菌落的含义是菌落的含义是_。(2)酵酵母母菌菌液液体体培培养养时时，若若通通入入氧氧气气，可可促促进进

30、_(填填“菌菌体体快快速速增增殖殖”“”“乙乙醇醇产产生生”或或“乳乳酸酸产产生生”)；若若进进行行厌厌氧氧培培养养，可可促促进进_(填填“菌菌体体快快速速增增殖殖”“”“乙乙醇醇产产生生”或或“乳乳酸酸产产生生”)。麦芽汁琼脂麦芽汁琼脂高压蒸汽高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体菌体快速增殖菌体快速增殖乙醇产生乙醇产生(3)制制作作面面包包时时，为为使使面面包包松松软软通通常常要要在在面面粉粉中中添添加加一一定定量量的的酵酵母母菌菌，酵酵 母母 菌菌 引引 起起 面面 包包 松松 软软 的的 原原 因因 是是 _。酵母菌分解葡萄糖会酵母菌分

31、解葡萄糖会产生产生CO2，CO2使面包松软使面包松软解解析析(1)牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨培培养养基基是是一一种种应用用广广泛泛的的细菌菌培培养养基基；MS培培养养基基是是满足足植植物物细胞胞的的营养养和和生生理理需需要要的的培培养养基基；麦麦芽芽汁汁琼脂脂培培养养基基通通常常用用于于酵酵母母菌菌(真真菌菌)的的培培养养、鉴定定及及菌菌种种保保存存。培培养养基基的的灭菌菌方方法法为高高压蒸蒸汽汽灭菌菌法法。菌菌落落是是指指由由一一个个细胞胞繁繁殖殖而而来来的的肉肉眼眼可可见的的子子细胞胞群群体。体。(2)酵酵母母菌菌为兼兼型型厌氧氧型型微微生生物物，在在有有氧氧条条件件下下进行行有有氧氧呼呼吸吸

32、为酵酵母母菌的繁殖提供能量，在无氧条件下，酵母菌菌的繁殖提供能量，在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸行无氧呼吸产生乙醇。生乙醇。(3)面面包包松松软是是因因为制制作作过程程中中加加入入的的酵酵母母菌菌可可以以分分解解葡葡萄萄糖糖产生生大大量的量的CO2，CO2遇遇热膨膨胀，使得制作的面包松，使得制作的面包松软多孔多孔。10(2018江江苏苏卷卷，31)酵酵母母的的蛋蛋白白质质含含量量可可达达自自身身干干重重的的一一半半，可可作作为为饲饲料料蛋蛋白白的的来来源源。有有些些酵酵母母可可以以利利用用工工业业废废甲甲醇醇作作为为碳碳源源进进行行培培养养，这这样样既既可可减减少少污污染染又又可可降降低低生

33、生产产成成本本。研研究究人人员员拟拟从从土土壤壤样样品品中中分分离离该该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：(1)配配制制培培养养基基时时，按按照照培培养养基基配配方方准准确确称称量量各各组组分分，将将其其溶溶解解、定定容容后后，调调节节培培养养基基的的_，及及时时对对培培养养基基进进行行分分装装，并并进进行行_灭菌灭菌。pH高压蒸汽高压蒸汽(湿热湿热)(2)取取步步骤骤中中不不同同梯梯度度的的稀稀释释液液加加入入标标记记好好的的无无菌菌培培养养皿皿中中，在在步步骤骤中中将将温温度度约约_(在在25、50或或8

34、0中中选选择择)的的培培养养基基倒倒入入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。培养皿混匀，冷凝后倒置培养。(3)挑挑取取分分离离平平板板中中长长出出的的单单菌菌落落，按按步步骤骤所所示示进进行行划划线线。下下列列叙叙述合理的有述合理的有_。a为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌b划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落c挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量d可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得高甲醇耐受可以通过逐步

35、提高培养基中甲醇的浓度，获得高甲醇耐受株株50a、b、d(4)步步骤骤中中，为为使使酵酵母母数数量量迅迅速速增增加加，培培养养过过程程中中需需保保证证充充足足的的营营养养和和_供供应应。为为监监测测酵酵母母的的活活细细胞胞密密度度，将将发发酵酵液液稀稀释释1000倍倍后后，经经等等体体积积台台盼盼蓝蓝染染液液染染色色，用用2516型型血血细细胞胞计计数数板板计计数数5个个中中格格中中的的细细胞胞数数，理理论论上上_色色细细胞胞的的个个数数应应不不少少于于_，才才能能达达到到每每毫毫升升3109个活细胞的预期密度。个活细胞的预期密度。氧气氧气无无30解解析析(1)配配制制培培养养基基时，进行行计

36、算算、称称量量、溶溶化化后后，需需先先调pH再再分装到分装到锥形瓶中形瓶中进行高行高压蒸汽蒸汽灭菌。菌。(2)倒平板倒平板时的培养基温度的培养基温度约为50，冷凝后倒置培养。，冷凝后倒置培养。(3)平平板板划划线时，接接种种针、接接种种环使使用用前前和和每每次次划划线后后都都需需要要进行行灼灼烧灭菌菌，以以免免造造成成杂菌菌污染染，a正正确确；划划线时不不能能划划破破培培养养基基表表面面，否否则不不能能形形成成正正常常菌菌落落，b正正确确；挑挑取取菌菌落落时，应挑挑取取多多个个不不同同的的菌菌落落，分分别测定定酵酵母母细胞胞中中蛋蛋白白质含含量量，c错误；逐逐步步提提高高培培养养基基中中甲甲醇醇的的浓度度，能能筛选出其中的耐受菌，出其中的耐受菌，获得耐受高甲醇的菌株，得耐受高甲醇的菌株，d正确正确。(4)酵酵母母是是兼兼性性厌氧氧型型真真菌菌，在在有有氧氧条条件件下下可可大大量量繁繁殖殖。酵酵母母扩大大培培养养时，需需保保证充充足足的的营养养和和氧氧气气等等条条件件。计数数室室中中培培养养液液容容积实际只只有有0.120.05mm3。设5个个中中方方格格中中无无色色(活活细胞胞不不能能被被台台盼盼蓝染染色色)的的细胞胞数目数目为x个，个，则3109x/525100010000.05，解得，解得x30(个个)。