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1、实验四实验四 霉菌、放线菌的霉菌、放线菌的形态观察形态观察一、目的要求一、目的要求 n1 1 初步了解放线菌、霉菌的形态特征。初步了解放线菌、霉菌的形态特征。n2 2 观察放线菌、霉菌菌落特征。观察放线菌、霉菌菌落特征。n3 3 了解三类常见霉菌的基本形态特征。了解三类常见霉菌的基本形态特征。二、基本原理二、基本原理 n放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌,常见放线菌大多形成菌丝体,紧兰氏阳性细菌,常见放线菌大多形成菌丝体,紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝基内菌丝(简称(简称“基丝基丝”,
2、),基丝生长到一定阶段还能,基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出向空气中生长出气生菌丝气生菌丝简称简称“气丝气丝”),并进一步分化产生并进一步分化产生孢子丝及孢子孢子丝及孢子。n在显微镜下直接观察时,气丝在上层、基丝在下在显微镜下直接观察时,气丝在上层、基丝在下层,层,气丝色暗,基丝较透明。气丝色暗,基丝较透明。孢子丝依种类的不孢子丝依种类的不同,有直波曲、各种螺旋形或轮生。在油镜下观同,有直波曲、各种螺旋形或轮生。在油镜下观察,放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状察,放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状n能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征
3、是放线菌分类鉴定的重要依据。特征是放线菌分类鉴定的重要依据。放线菌放线菌放线菌的菌落放线菌的菌落n霉菌可产生复杂分枝的菌丝体,分为基生菌丝和霉菌可产生复杂分枝的菌丝体,分为基生菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段后分化产生气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段后分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。n 霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)其孢子的形态特霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)其孢子的形态特征是分类的重要依据。例如:征是分类的重要依据。例如:青霉的繁殖菌丝无青霉的繁殖菌丝无顶囊,经多次分枝,产生几轮对称或不对称的小顶囊,经多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,小梗上着生成串
4、的青色分生孢子,的孢子囊梗,小梗上着生成串的青色分生孢子,的孢子囊形如形如“扫帚扫帚”。而曲霉的分生孢子梗顶端膨大成而曲霉的分生孢子梗顶端膨大成顶囊,成球形。顶囊,成球形。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多(约菌和放线菌粗的多(约3 310um10um),常是细菌菌体),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍镜即可观察。宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍镜即可观察。根根 霉霉曲曲 霉霉青青 霉霉三、器材三、器材 n菌种菌种 链霉菌;曲霉,青霉,根霉链霉菌;曲霉,青霉,根霉n培养基培养基 马铃薯琼脂培养基马铃薯琼脂培养基n仪器或其他用具仪器或其他用具 灭
5、菌平皿、载玻片、灭菌平皿、载玻片、盖玻片、盖玻片、U U形玻棒,接种环,解剖刀,镊子,形玻棒,接种环,解剖刀,镊子,20%20%的甘油,显微镜等。的甘油,显微镜等。四、操作步骤四、操作步骤 n1 1 放线菌的形态观察放线菌的形态观察n用镊子小心拔出用扦片法培养的放线菌盖玻片,用镊子小心拔出用扦片法培养的放线菌盖玻片,擦去背面培养物,将有菌的一面朝上放在载玻擦去背面培养物,将有菌的一面朝上放在载玻片上,直接镜检。片上,直接镜检。n2 2 霉菌的形态观察霉菌的形态观察 根据需要可在不同的培养时间内取出用霉菌根据需要可在不同的培养时间内取出用霉菌载玻片培养法培养的载玻片,置低倍镜下观载玻片培养法培养
6、的载玻片,置低倍镜下观察,必要时换高倍镜。察,必要时换高倍镜。注意:注意:观察时观察时,宜用略暗光线;先用低倍镜找到适宜用略暗光线;先用低倍镜找到适当视野,再换高倍镜观察。当视野,再换高倍镜观察。放线菌观察时放线菌观察时如果用如果用0.1%0.1%美蓝对培养后的美蓝对培养后的盖玻片进行染色后观察,效果会更好。盖玻片进行染色后观察,效果会更好。n左上:根霉左上:根霉n右上:青霉右上:青霉n右下:根霉右下:根霉五、实验报告五、实验报告 n1 1 绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。特征。n2 2 绘制曲霉、青霉、根霉的个体形态图,并绘制曲霉、青霉、根霉的个体形态图,并注明各部位注明各部位名称。名称。六、思考题六、思考题1镜检时,你如何区分放线菌的基内菌丝和气镜检时,你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝?生菌丝?n2 2 你主要根据哪些形态特征来区分上述三种霉你主要根据哪些形态特征来区分上述三种霉菌?菌?