2.植物硝态氮的比色测定.doc

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1、2.植物硝态氮的比色测定中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告 2015年11月02号姓名：白杰 专业年级： 2014级生物科学 学号： 14050011001同组者：曹昱课程： 植物生理学实验 题目：植物硝态氮的比色测定一、实验目的 学会硝态氮的测定方法，学会分光光度计的使用。二、实验原理 用蒸馏水将植物组织中的硝酸盐和亚硝酸盐提取出来，加入锌粉将硝酸根还原成亚硝酸根后，与对氨基苯磺酸生成重氮盐，再与-萘胺结合生成玫瑰红色的偶氮染料，在520nm波长处有吸收峰,并且在一定范围内其颜色的深浅与溶液中硝态氮含量成正比，可以用分光光度法进行测定。三、仪器试剂1、仪器及用品 分光光度计，研钵，容量瓶

2、，比色管（50ml），试管,移液管，烧杯，三角瓶（100ml).2、试剂 （1）硝酸盐标准溶液：取恒重硝酸钠0。6071g溶于一升水中，配成100g/ml硝态氮溶液储存于冰箱中(0C5C）备用。 (2)20%冰醋酸溶液（V/V）：取20ml分析纯冰醋酸加80ml水。 （3）混合粉剂:含硫酸钡100g,萘胺2g，锌粉2g，对氨基苯磺酸4g，硫酸锰10g，柠檬酸75g。3、实验材料：植物叶柄四、实验步骤1、标准曲线的绘制 将硝酸盐标准溶液稀释成0g/ml，4g/ml ， 8g/ml，12g/ml，16g/ml,20g/ml浓度的硝态氮溶液各10ml，摇匀后分别吸取2ml转入到50ml比色管中，加冰

3、醋酸溶液18ml，再加0.4g混合粉剂,剧烈摇动1分钟，静置10分钟，用双层滤纸过滤于洁净的试管中,以蒸馏水作对照,测定其520nm波长处的吸光光度值，以浓度为横坐标，标准样品的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线或做出回归曲线。2、植物组织中硝态氮的提取 称取待测的植物功能叶柄0.5g左右，剪成12mm的碎片，置于干燥的100ml三角瓶中,加入蒸馏水20ml,加塞进行激烈振荡13分钟，放置10分钟。澄清后,取上部清液2ml,按标准曲线的步骤进行显色和必比色，测定植物样品的吸光度值.五、数据处理 叶柄:0。533g编号浓度g/ml吸光度值平均吸光度100000340。0530.0520。0510。05

4、2280.0910。0930。0910.0914120.1390。1380.1400.1395160.1820。1820。1820.1826200.2290。2250.2270。227白菜0.0830。0840。0840。084将y=0.084代入上式得：x=7.25植物组织中硝态氮含量：cV=7。2540=290g/g六、思考题1、通过你的实验你认为本实验的主要误差来源有哪些？1）剧烈晃动因摇动的人不一样，所以可能产生一些误差2）过滤时更换滤纸可能造成一定误差3）植物剪得不够碎2、在配置标准溶液时应注意哪些问题？ 加液时间要大概相等,摇晃尽量让一个人去做,烧杯、试管、移液管要及时清洗干净,过滤时应保证正常。