温度和pH对酶活.ppt

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1、温度和温度和pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响 实验目的实验目的 1、了解温度对酶活性的影响；2、了解pH对酶活性的影响 实验原理实验原理 酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为高。大多数动物酶的最适温度为 37374040。酶对温度的稳定性与其存在酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100100，其活性并无明显改变，但，其活性并无明显改变，但在在100100的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但的溶液中却很快地完全

2、失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活不能使酶失活。淀淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。在。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。酶的活力受环境酶的活力受环境pHpH的影响极为显著。不同酶的最适的影响极为显著。不同酶的最适pHpH值不同。值不同。本实验观察本实验观察pHpH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pHpH约为约为6.86.8。1 1、0.2%0.2%淀粉的淀粉的0.3%0.3%氯化钠溶液氯化钠溶

3、液 2 2、淀粉酶或稀释、淀粉酶或稀释5050100100倍的唾液倍的唾液 用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释半分钟后使其流入量筒并稀释50-10050-100倍，倍，(稀释倍数可根据各人唾稀释倍数可根据各人唾液淀粉酶活性调整液淀粉酶活性调整)混匀备用。混匀备用。3 3、碘化钾、碘化钾-碘溶液碘溶液 实验试剂实验试剂1、试管及试管架 2、恒温水浴 3、冰浴 4、沸水浴实验器材实验器材 实验操作实验操作 摇匀后，将摇匀后，将 1 1号、号、3 3号两试管号两试管放入放入3737恒温水浴中，恒温水浴中，2 2号试管

4、放号试管放入冰水中。入冰水中。10min10min后取出，将后取出，将2 2号号管内液体分为两半，用碘化钾管内液体分为两半，用碘化钾-碘溶碘溶液来检验液来检验1 1、2 2、3 3管内淀粉被唾液管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。将二号管剩下的一半溶液放入果。将二号管剩下的一半溶液放入3737水浴中继续保温水浴中继续保温10min10min后，再后，再用碘液实验，结果如何用碘液实验，结果如何?管号管号淀粉溶液淀粉溶液（ml）淀粉酶淀粉酶（ml）煮沸的淀煮沸的淀粉酶粉酶（ml）11.5121.5131.51 取取 3支试管，编号后按下表加入试剂支试管，编

5、号后按下表加入试剂:1、温度对酶活性的影响、温度对酶活性的影响1.取取1个淀粉琼脂培养基，分个淀粉琼脂培养基，分3个区域并编号；个区域并编号；2.用剪刀将滤纸剪成相同大小直径用剪刀将滤纸剪成相同大小直径1cm以内的滤纸片以内的滤纸片3片；片；3.将滤纸片分别蘸取将滤纸片分别蘸取 盐酸溶液、蒸馏水、氢氧化钠盐酸溶液、蒸馏水、氢氧化钠 溶溶 液，放置于液，放置于淀粉培养基淀粉培养基3个区域个区域4.将淀粉培养基放置于将淀粉培养基放置于37 恒温箱培养十分钟恒温箱培养十分钟5.取出淀粉培养基，加入碘液。检测不同取出淀粉培养基，加入碘液。检测不同pH下淀粉酶下淀粉酶 活性。活性。2、pH对酶活性的影响对酶活性的影响 注意事项注意事项 1 1加入酶液后，要充分摇匀，保证酶液与全部加入酶液后，要充分摇匀，保证酶液与全部淀粉液接触反应，得到理想的颜色梯度变化。淀粉液接触反应，得到理想的颜色梯度变化。2 2酶和淀粉溶液混合之前要预热或预冷。酶和淀粉溶液混合之前要预热或预冷。