应用正交设计法筛选天麻钩藤饮优化处方研究_临床医学论文_10456.doc

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2、研究,筛选出天麻钩藤饮优化处方,再应用正交设计观察优化处方不同配伍剂量的降压效果,找出最正确剂量配比。结果:天麻钩藤饮及其优化处方均有明显的降压作用(P0.05)。结论:天麻钩藤饮及其优化处方均有明显的降压作用,天麻钩藤饮优化处方的最正确配伍剂量为天麻6g、钩藤15g、石决明18g、桑寄生9g、川牛膝9g。 【关键词】 高血压 肝阳上亢证 大 鼠 天麻钩藤饮 正交试验天麻钩藤饮出自清代胡光慈?杂病证治新义?一书,是具有平肝潜阳成效的经典古方,临床应用证实该方对高血压病肝阳上亢证患者血压明显改善。但其原方共有11味中药,并且每味中药没有剂量记载,多数临床及动物实验都是按照各自临床经验进行,没有统

3、一标准,使实验难以重复。笔者采用正交试验设计法,以高血压肝阳上亢证大鼠血压为评价指标,对天麻钩藤饮进行优化处方及寻找其最正确剂量配比,并探索其配伍规律,现报道如下。1 天麻钩藤饮优化处方筛选1.1 优化处方筛选方案 天麻钩藤饮由11味中药组成,将每一味中药作为一个因素,每个因素设“有和“无两个水平(即有此药和无此药),选择L12(211)正交表设计配方,共得12个配方。根据中医理论结合笔者临床经验,选取天麻钩藤饮正交1方、正交2方与天麻钩藤饮原方进行降压作用比拟研究。1.2 实验动物 清洁级SD大鼠90只,雌雄各半,体质重180220g,湖南长沙市开福区东创实验动物技术效劳部提供。动物许可证号

4、:scxk(湘)2006?0001。1.3 药物制备 附子汤(造模用),制附子20g,煎煮90min,浓缩至200ml(含生药0.10g/ml);天麻钩藤饮原方:天麻10g,钩藤15g(后下),石决明20g(先煎),山栀、黄芩各6g,川牛膝10g,杜仲、益母草、夜交藤、茯苓各12g,桑寄生9g,水煎取200ml(含生药0.67g/ml);天麻钩藤饮正交1方:天麻10g,钩藤15g(后下),石决明20g(先煎),川牛膝10g,桑寄生9g,水煎取200ml(含生药0.36g/ml);天麻钩藤饮正交2方:天麻10g,钩藤15g(后下),杜仲12g,山栀、黄芩各6g,水煎取200ml(含生药0.25g

5、/ml)。以上药材均由南宁市一心药业提供。卡多普利(江苏常州制药厂生产),磨粉后双蒸水溶解配制成200ml(0.16mg/ml)。1.4 仪 器 ALC?NIBP无创尾动脉血压测定仪(上海奥尔科特生物科技)1.5 肝阳上亢证高血压模型 按文献方法1,2,采用钳夹左肾动脉加灌服附子汤制作大鼠肝阳上亢证高血压模型。钳夹左肾动脉以血管结扎后有血液回流,并结合顾德官等3报道的标准及国外较多采用的血压标准4:手术后凡血压比术前增高20mmHg(大于正常血压 3 个标准差值)且高于 150mmHg者确定为高血压大鼠模型成功。术后2周加灌服附子汤4周,制备肝阳上亢证高血压大鼠模型。根据形为学改变,包括外观毛

6、色光泽度降低、双眼结膜颜色加深变红、性情易激惹、饮水量增加及旋转时间缩短等,确定为模型成功。造模时间共6周。1.6 分组与给药 将90只大鼠,随机分为六组,每组15只。正常组给予蒸馏水灌胃8周;其余五组造模后,模型组给予蒸馏水灌胃;卡多普利组按3.31mg/(kgd),给予卡多普利溶液灌胃;天麻钩藤饮组按13.4g/(kgd),给予天麻钩藤饮溶液灌胃;天麻钩藤饮正交1方组按7.2g/(kgd),给予天麻钩藤饮正交1方溶液灌胃;天麻钩藤饮正交2方按5g/(kgd),给予天麻钩藤饮正交2方溶液灌胃。以上剂量均按动物体外表积系数折算,相当60kg成人临床剂量的5.36倍。灌胃容量均为每次20ml/(

7、kgd),从第7周开始每天上午8时给药,1天1次,连续给药2周。分笼饲养,正常饮食,自由饮水。1.7 实验结果 与模型组比拟,第8周末各用药组血压均有降低(P0.05);与卡托普利组比拟,天麻钩藤饮组及天麻钩藤饮正交2方降压疗效不及卡托普利(P0.05),见表1。表1 各组大鼠血压动态变化比拟与造模前比拟,*P0.05;与第2周末比拟,P0.05;与第6周末比拟,P0.05;与模型组比拟,#P0.05,#P0.01;与卡托普利组比拟,P0.05 ! 2 天麻钩藤饮优化处方最正确剂量筛选2.1 优化处方不同剂量配比方案 根据以上试验结果,选择降压效果最优的天麻钩藤饮正交1方中4 味药物构成4个因

8、素。天麻以6g为1水平、9g为2水平、12g为3水平、15g为4水平;钩藤以12g为1水平、15g为2水平;石决明以18g为1水平、24g为2水平;桑寄生以9g为1水平、12g为2水平;川牛膝以9g为1水平、12g为2水平。采用L8(4124)混合水平正交表设计,共得8个处方,见表2。表2 天麻钩藤饮优化配方的混合水平正交设计2.2 药物制备 附子汤同实验一。天麻钩藤饮正交1方8个处方均煎煮40min,浓缩至200ml液体,各方含生药量:1方0.27g/ml,2方0.35g/ml,3方0.315g/ml,4方0.35g/ml,5方0.34g/ml,6方0.33g/ml,7方0.36g/ml,8

9、方0.35g/ml。2.3 造模及检测方法同优化处方筛选实验2.4 分组与给药 取40只清洁级SD健康大鼠,雌雄各半,体质重20020 g,随机分为八组,每组5只。每只大鼠灌胃容量均为每次20ml/(kgd),从第7周开始每天上午8时给药,1天1次,连续给药2周。分笼饲养,正常饮食,自由饮水。2.5 实验结果 第8周末各组血压均有降低(P0.05)。 为观察各因素即处方中各药味的作用是否存在显著性差异,采用每组血压降压差值直观分析法进行分析, 见表3, 4。表3 天麻钩藤饮优化处方的最正确剂量筛选表4 天麻钩藤饮优化处方降压作用的方差分析结果显示,在对大鼠血压的影响中,各因素即处方中各药味的作

10、用存在显著性差异,天麻降压效果最为明显,为主药,钩藤次之,为辅药。天麻随着药量的增大对大鼠的血压影响不理想,故应该取最小剂量;钩藤随着剂量的增加,对大鼠的血压影响明显,故应当取最大剂量;石决明、桑寄生和川牛膝随着药量的增大对大鼠的血压影响不明显,考虑经济因素,在临床及科研应用中取低剂量。因此,天麻钩藤饮优化处方最正确剂量配比为:天麻6g、钩藤15g、石决明18g、桑寄生9g、川牛膝9g。3 讨 论正交设计应用于中药复方研究,有利于分析中药复方配伍的主次关系,发现中药复方最正确配伍,筛选中药复方,指导临床合理用药。本实验在相关的中医理论和临床经验指导下,对中药复方天麻钩藤饮进行两次正交试验设计,

11、从而找出其最正确的组方(药物配伍和剂量),为指导临床应用和中药复方的二次开发奠定根底。实验结果说明,方中天麻平肝熄风,为君药;石决明、钩藤平肝潜阳,为臣药;桑寄生补益肝肾,为佐药;川牛膝引血下行,为使药。诸药配伍,平肝熄风、滋阴潜阳作用更为突出。药理研究证实5,天麻及天麻密环菌菌丝具有降血压、减慢心率、舒张外周血管、增加心脑血管血流的作用;钩藤及其生物碱能抑制细胞外Ca2+经电位依赖性Ca2+通道的内流,抑制细胞内Ca2+释放,此作用与经典钙拮抗剂相似;桑寄生能舒张冠状血管,增加冠脉血流,起到降压作用,另外还有利尿镇静作用,可协同降压;川牛膝苯提取物有显著降压及利尿作用。本实验结果显示,天麻钩

12、藤饮的优化处方以天麻6g、钩藤15g、石决明18g、桑寄生9g、川牛膝9g为最正确剂量配比。【参考文献】 1 肖 纯,金益强,胡随瑜,等.潜阳方对高血压肝阳上亢证大鼠模型的实验研究.湖南中医学院学报,1999,19(2)8?102 尹时华,金延安,化长林.建立肾性高血压大鼠实验模型的一种新方法.咸宁医院学学报,1999,13(1):15?173 顾德官.实验性高血压大鼠的血压观察.上海第二医学院学报,1985,2:1024 德H.G.沃格尔,美W.H.沃格尔编著,杜冠华等译.药理学实验指南.北京:科学出版社,2001.1025 黄泰康.现代本草纲药(上卷).北京:中国医药科技出版社,2001.1080 !网络收集,如果侵犯了您的利益,请立刻和我联系,我将第一时间内做出处理!另外,如果有需要购置着,不方便在豆丁购置的,请和我联系,支持支付宝,T*B交易,八折优惠。如果实在是需要的,免费给你一篇也没有关系,赠人玫瑰手留余香嘛。

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