17 2 高效液相色谱.ppt

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1、17 高效液相色谱高效液相色谱提要提要提要提要 返回返回返回返回主要内容主要内容1 1 概述概述 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型 4 4 应用应用提要提要提要提要 返回返回返回返回1 1 概述概述一、一、HPLC与经典与经典LC的比较的比较 高速高速 HPLC只需数分钟只需数分钟;而经典而经典LC完成完成一次分析需时数小时。一次分析需时数小时。高效高效 HPLC柱效很高柱效很高;可以在数分钟内可以在数分钟内完成数百种物质的分离。完成数百种物质的分离。灵敏度高灵敏度高 检测器灵敏度极高：检测器灵敏度极高：UV10-9g,荧光检测器荧光检测器

2、10-11g。提要提要提要提要 返回返回返回返回1 1 概述概述二、二、HPLC与与GC的比较的比较 分析对象及范围分析对象及范围：GC分析只限于分析只限于气体和低沸点气体和低沸点的的稳定稳定化合物化合物，占有机物总数的，占有机物总数的20%；HPLC可以分析可以分析高沸点、高分子量高沸点、高分子量的的稳定或不稳定稳定或不稳定化合物，这类物质占化合物，这类物质占有机物总数的有机物总数的80%。提要提要提要提要 返回返回返回返回1 1 概述概述二、二、HPLC与与GC的比较的比较流动相的选择流动相的选择：GC采用的采用的流动相流动相中为有限的几种中为有限的几种“惰性惰性”气体，气体，对组分作用小

3、对组分作用小；HPLC采用的采用的流动相流动相为液体或各种为液体或各种液体的混合，液体的混合，可与组分作用可与组分作用，并与固，并与固定相对组分的作用产生竞争，可通过定相对组分的作用产生竞争，可通过溶剂来控制和改进分离。溶剂来控制和改进分离。提要提要提要提要 返回返回返回返回1 1 概述概述二、二、HPLC与与GC的比较的比较操作温度：操作温度：GC需高温；需高温；HPLC通常在室温下进通常在室温下进行。行。提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪 仪器结构示意见仪器结构示意见下图下图，分为，分为4个主个主要部分：要部分：高压输液系统高压输液系统，进样系统进样系

4、统，分离系统分离系统和和检测系统检测系统。此外还配有此外还配有辅助装置辅助装置：如：如梯度淋梯度淋洗洗，自动进样自动进样及及数据处理数据处理等。等。提要提要提要提要 返回返回返回返回22 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪一、高压输液系统一、高压输液系统 它是高效液相色谱仪最重要的部它是高效液相色谱仪最重要的部件，一般由件，一般由储液罐储液罐、高压输液泵高压输液泵、过过滤器滤器、压力脉动阻力器压力脉动阻力器等组成，其中等组成，其中高压输液泵是核心部件高压输液泵是核心部件。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高

5、效液相色谱仪高效液相色谱仪一、高压输液系统一、高压输液系统1、贮液罐贮液罐2、高压泵高压泵3、梯度洗脱装置梯度洗脱装置22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪1、贮液罐、贮液罐 贮液罐为不锈钢、玻璃或氟塑料制贮液罐为不锈钢、玻璃或氟塑料制成的容器，容量为成的容器，容量为0.52 L，用来贮存，用来贮存足够数量、符合要求的流动相。足够数量、符合要求的流动相。溶剂使用前，必须先脱气。溶剂使用前，必须先脱气。脱气方法：低压脱气、超声脱气、脱气方法：低压脱气、超声脱气、吹氦气脱气等。吹氦气脱气等。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相

6、色谱仪2、高压泵、高压泵高压输液泵是高效液相色谱仪中关键高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部件之一，是流动相的部件之一，是流动相的动力源动力源。要求要求：流量稳定、输出压力高、流量：流量稳定、输出压力高、流量范围宽、耐酸碱和缓冲液的腐蚀、压范围宽、耐酸碱和缓冲液的腐蚀、压力变动小、空间小、易于清洗和更换力变动小、空间小、易于清洗和更换溶剂、具有梯度洗脱功能。溶剂、具有梯度洗脱功能。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪2、高压泵、高压泵类型：类型：恒压泵、恒流泵两大类，多使恒压泵、恒流泵两大类，多使用恒流泵。用恒流泵。往复柱塞泵往复柱塞泵是目前使用最广泛的一

7、种是目前使用最广泛的一种恒流泵；由偏心轮带动活塞往复移动，恒流泵；由偏心轮带动活塞往复移动，恒流输出，并通过改变电机转速调节恒流输出，并通过改变电机转速调节流量。流量。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪22播放播放播放播放提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪3、梯度洗脱装置、梯度洗脱装置 梯度洗脱就是在分离过程中使两种梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例，从而使序连续改变它们之间的比例，从而使流动相的强度、极性、流动相的强度、极性、pH

8、值或离子强值或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分析时间的目的。缩短分析时间的目的。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪3、梯度洗脱装置、梯度洗脱装置 1）低压梯度）低压梯度（外梯度）装置，流（外梯度）装置，流动相在常温常压下混合，用高压泵压动相在常温常压下混合，用高压泵压至柱系统，仅需一台泵即可。至柱系统，仅需一台泵即可。2）高压梯度）高压梯度（内梯度）装置，先（内梯度）装置，先将两种溶剂分别用泵增压后，再由泵将两种溶剂分别用泵增压后，再由泵按程序压入混合室，混合，再注入色按程序压入混合室，混合，再注入色谱柱。谱

9、柱。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪二、进样系统二、进样系统进样系统包括进样口、注射器和进样进样系统包括进样口、注射器和进样阀等，它的作用是把分析试样有效地阀等，它的作用是把分析试样有效地送入色谱柱上进行分离。送入色谱柱上进行分离。要求：重复性好、死体积小、保证柱要求：重复性好、死体积小、保证柱中心进样、流量波动小、便于实现自中心进样、流量波动小、便于实现自动化动化22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪1、进样器进样、进样器进样 优点：优点：可柱头进样，减小死体积，可柱头进样，减小死体积，充分发挥柱的效能，简单便

10、宜。充分发挥柱的效能，简单便宜。缺点：缺点：是高压进样时漏液会产生是高压进样时漏液会产生误差，隔垫使用次数有限，进样量小，误差，隔垫使用次数有限，进样量小，重复性差。重复性差。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪2、六通阀六通阀进样进样 目前，广泛采用六通进样阀，它目前，广泛采用六通进样阀，它可以可以承受很高的压力承受很高的压力，由于进样量是，由于进样量是由进样定量管决定的，因此，可以由进样定量管决定的，因此，可以获获得好的重复性得好的重复性，更换不同体积的进样，更换不同体积的进样定量管，可调整进样量。定量管，可调整进样量。22提要提要提要提要 返回返回

11、返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪三、色谱分离系统三、色谱分离系统 色谱柱包括色谱柱包括柱管柱管和和固定相固定相两部分两部分 固定相的要求固定相的要求：柱效高、选择性好、：柱效高、选择性好、分析速率快分析速率快 粒度一般为粒度一般为2，5，7，10m，理，理论塔板数每米塔板数每米16万万5万万22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪四、检测系统四、检测系统 在液相色谱中，有两种基本类在液相色谱中，有两种基本类型的检测器。一类是型的检测器。一类是通用型检测器通用型检测器，它

12、仅对被分离组分的物理或化学特它仅对被分离组分的物理或化学特性有响应。另一类是性有响应。另一类是选择性检测器选择性检测器，它对试样和洗脱液总的物理或化学它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应。性质有响应。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪1）紫外检测器：应用最广，对大部分）紫外检测器：应用最广，对大部分有机化合物有响应。有机化合物有响应。特点：灵敏度高；线形范围高；特点：灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小（流通池可做的很小（1mm 10mm，容积容积 8L）；对流动相的流速和温度）；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；变化不敏感；波

13、长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。可用于梯度洗脱。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪22提要提要提要提要 返回返回返回返回22 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪2）二极管阵列检测器）二极管阵列检测器提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪3）荧光检测器）荧光检测器灵敏度高，选择灵敏度高，选择性好，可用于梯性好，可用于梯度洗脱。度洗脱。22提要提要提要提要 返回返回返回返回 2 2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪4 4）电化学检测器电化学检测器电

14、导检测器电导检测器安培检测器安培检测器22提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型一、一、HPLC的固定相和流动相的固定相和流动相二、二、液固吸附色谱法液固吸附色谱法三、三、液液分配色谱液液分配色谱四、四、化学键合相色谱法化学键合相色谱法五、五、离子交换色谱离子交换色谱六、六、凝胶色谱法凝胶色谱法提要提要提要提要 返回返回返回返回33 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型一、一、HPLC的的固定相固定相和和流动相流动相1.固定相固定相 高效液相色谱固定相以承受高效液相色谱固定相以承受高压高压能力来分类能力来分类，可分为：，可分为：刚性固体

15、刚性固体和和硬硬胶胶 固定相按固定相按孔隙深度分类孔隙深度分类可分为：可分为：表面多孔型表面多孔型和和全多孔型全多孔型固定相固定相提要提要提要提要 返回返回返回返回33 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型一、一、HPLC的的固定相固定相和和流动相流动相1.固定相固定相 刚性固体以二氧化硅为基质刚性固体以二氧化硅为基质，可，可承受承受7.0 1081.0 109Pa的高压，可的高压，可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。是目前是目前最广泛使用最广泛使用的一种固定相。的一种固定相。提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相

16、色谱法的类型一、一、HPLC的固定相和流动相的固定相和流动相1.固定相固定相 硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中，它由聚苯乙烯与二乙烯苯基色谱中，它由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为交联而成。可承受压力上限为3.5 108 Pa。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型 表面多孔型表面多孔型担体的基体是实心玻担体的基体是实心玻璃球，在玻璃球外面覆盖一层多孔活璃球，在玻璃球外面覆盖一层多孔活性材料，如硅胶、氧化硅、离子交换性材料，如硅胶、氧化硅、离子交换剂、分子筛、聚酰胺等。其多孔层剂、分子筛、聚酰胺等

17、。其多孔层厚厚度小度小、孔浅孔浅，相对死体积小相对死体积小，出峰迅，出峰迅速、柱效亦高；颗粒较大，渗透性好，速、柱效亦高；颗粒较大，渗透性好，装柱容易，梯度淋洗时能迅速达到平装柱容易，梯度淋洗时能迅速达到平衡，较衡，较适合做常规分析适合做常规分析。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型全多孔型固定相全多孔型固定相由直径为由直径为10m 的硅的硅胶微粒凝聚而成。胶微粒凝聚而成。由于颗粒很细（由于颗粒很细（510 m），孔仍然），孔仍然较浅，传质速率快，易实现高效、高较浅，传质速率快，易实现高效、高速。特别速。特别适合复杂混合物分离及痕量适合复杂混

18、合物分离及痕量分析。分析。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型一、一、HPLC的固定相和流动相的固定相和流动相2.流动相流动相 要求是：要求是：C1）不与固定相发生不可逆化学反应）不与固定相发生不可逆化学反应C2）对待测样品有足够的溶解度）对待测样品有足够的溶解度C3）与所用检测器匹配）与所用检测器匹配C4）粘度尽可能的小）粘度尽可能的小C5）纯度高）纯度高33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型二、液固吸附色谱法二、液固吸附色谱法1、原理原理2、固定相固定相3、流动相流动相 33提要提要提要提

19、要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型二、液固吸附色谱法二、液固吸附色谱法1、原理、原理 溶质分子和流动相分子在具有表面溶质分子和流动相分子在具有表面活性的活性的吸附中心吸附中心上进行竞争，这种作上进行竞争，这种作用还存在于不同溶质分子间，以及同用还存在于不同溶质分子间，以及同一溶质分子中不同官能团之间。由于一溶质分子中不同官能团之间。由于这些竞争作用，形成了这些竞争作用，形成了不同溶质在吸不同溶质在吸附剂表面的吸附、解吸平衡附剂表面的吸附、解吸平衡，这就是，这就是液固色谱法的选择性吸附分离原理。液固色谱法的选择性吸附分离原理。33提要提要提要提要 返回返回返回

20、返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型二、液固吸附色谱法二、液固吸附色谱法1、原理、原理 吸附竞争的过程可表示为：吸附竞争的过程可表示为：吸附达到平衡时，平衡系数为：吸附达到平衡时，平衡系数为：33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型二、液固吸附色谱法二、液固吸附色谱法2、固定相、固定相 液固色谱固定相可分为液固色谱固定相可分为极性极性和和非非极性极性两大类型。极性吸附剂包括两大类型。极性吸附剂包括硅胶、硅胶、氧化铝、氧化镁、硅酸镁、分子筛及氧化铝、氧化镁、硅酸镁、分子筛及聚酰胺聚酰胺等。非极性吸附剂最常见的是等。非极性吸附剂最常

21、见的是活性炭活性炭。至于今液固色谱法应用最广。至于今液固色谱法应用最广泛的是极性固定相硅胶。泛的是极性固定相硅胶。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型二、液固吸附色谱法二、液固吸附色谱法3、流动相、流动相 选择原则是：选择原则是：极性大的试样选极性极性大的试样选极性强的洗脱剂强的洗脱剂 在液固色谱法中，常用水对硅胶固在液固色谱法中，常用水对硅胶固定相进行定相进行减活减活处理，此时流动相中水的处理，此时流动相中水的饱和度应小于饱和度应小于25%，若水含量过高，大，若水含量过高，大量水附着在硅胶上会使液固色谱过程转量水附着在硅胶上会使液固色谱过程

22、转变成液液色谱过程而影响分离效果。变成液液色谱过程而影响分离效果。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型三、液液分配色谱三、液液分配色谱1、原理原理2、固定相固定相3、流动相流动相 33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型三、液液分配色谱三、液液分配色谱1、原理、原理 用涂渍在基体上的固定液作固定用涂渍在基体上的固定液作固定相，以不同极性溶剂作流动相，组分相，以不同极性溶剂作流动相，组分分子依据它们在固定液与流动相中的分子依据它们在固定液与流动相中的溶解度溶解度,即溶质分子在固定相和流动相即溶质分

23、子在固定相和流动相间的分配系数大小来进行分离的色谱间的分配系数大小来进行分离的色谱方法。方法。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型三、液液分配色谱三、液液分配色谱2、固定相、固定相 用常用的固定液有下列几种用常用的固定液有下列几种:，氧二丙腈（氧二丙腈（ODPN）聚乙二醇（聚乙二醇（PEG）十八烷（十八烷（ODS）角鲨烷固定液角鲨烷固定液33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型三、液液分配色谱三、液液分配色谱3、流动相、流动相 为防止固定液的流失，可采用为防止固定液的流失，可采用以下措施：以下措

24、施：选择选择对固定相的溶解度尽可能小对固定相的溶解度尽可能小的溶剂作流动相。的溶剂作流动相。流动相进入色谱柱前，流动相进入色谱柱前，预先用固预先用固定液饱和定液饱和，这种被固定液饱和的流动，这种被固定液饱和的流动相再流经色谱柱时就不会溶解固定液相再流经色谱柱时就不会溶解固定液了。了。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型三、液液分配色谱三、液液分配色谱3、流动相、流动相 为防止固定液的流失，可采用为防止固定液的流失，可采用以下措施：以下措施：使流动相保持使流动相保持低流速经过固定相低流速经过固定相，并保持并保持色谱柱温恒定色谱柱温恒定。进样时若

25、溶解样品的溶剂对固定液进样时若溶解样品的溶剂对固定液有较大的溶解度，应避免过大的进样有较大的溶解度，应避免过大的进样量。量。33提要提要提要提要 返回返回返回返回33 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型（一）（一）正相液液分配色谱正相液液分配色谱中，使用的流中，使用的流动相与液固色谱中使用极性吸附剂时所动相与液固色谱中使用极性吸附剂时所用的流动相类似。此时流动相主体为已用的流动相类似。此时流动相主体为已烷、庚烷，可加入烷、庚烷，可加入20%的极性改性剂，的极性改性剂，如一氯丁烷、氯仿、二氯甲烷、异丙醚、如一氯丁烷、氯仿、二氯甲烷、异丙醚、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、甲醇、乙乙酸乙酯

26、、四氢呋喃、乙醇、甲醇、乙腈、等，这样溶质的容量因子会随改性腈、等，这样溶质的容量因子会随改性剂的加入而减小，表明混合溶剂的洗脱剂的加入而减小，表明混合溶剂的洗脱强度明显增强。强度明显增强。提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型（二）（二）反相液液分配色谱反相液液分配色谱中，使用的中，使用的流动相与液固色谱中使用非极性吸附剂流动相与液固色谱中使用非极性吸附剂时所用的流动相类似。此时流动相主体时所用的流动相类似。此时流动相主体为水，可加入为水，可加入20%的极性改性剂，如的极性改性剂，如二甲基亚砜、乙二醇、甲醇、丙酮、对二甲基亚砜、乙二醇、甲醇、丙酮

27、、对二氧六环、乙醇、四氢呋喃、异丙醇等，二氧六环、乙醇、四氢呋喃、异丙醇等，溶质在混合溶剂中的容量因子会随改性溶质在混合溶剂中的容量因子会随改性剂的加入而减小，表明混合溶剂的洗脱剂的加入而减小，表明混合溶剂的洗脱强度明显增强。强度明显增强。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型四、化学键合相色谱法四、化学键合相色谱法1、化学键合相、化学键合相 化学键合固定相是通过化学反应将化学键合固定相是通过化学反应将有机分子键合在载体表面所形成的柱有机分子键合在载体表面所形成的柱填充剂，填充剂，具有稳定、流失小、适于梯具有稳定、流失小、适于梯度淋洗等特点度淋

28、洗等特点。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型四、化学键合相色谱法四、化学键合相色谱法1、化学键合相、化学键合相 ODS(C18)键合相键合相硅胶硅胶十八烷基十八烷基氯硅烷氯硅烷非极性非极性使用使用pH范围：范围：2-833提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型1）正相键合相色谱法）正相键合相色谱法 在正相色谱法中，在正相色谱法中，共价结合到载共价结合到载体上的基团都是极性基团体上的基团都是极性基团，如胺基、，如胺基、氰基、二醇基等。流动相溶剂是与吸氰基、二醇基等。流动相溶剂是与吸附色谱中的流动相

29、很相似的非极性溶附色谱中的流动相很相似的非极性溶剂，如庚烷、已烷及异辛烷等。由于剂，如庚烷、已烷及异辛烷等。由于固定相是极性，因此流动溶剂的极性固定相是极性，因此流动溶剂的极性越强，洗脱能力也越强，即极性大的越强，洗脱能力也越强，即极性大的溶剂是强溶剂。溶剂是强溶剂。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型1）反相键合相色谱法）反相键合相色谱法 在反相色谱法中，在反相色谱法中，一般采用非极一般采用非极性键合固定相性键合固定相，如硅胶，如硅胶-C18H37（简称（简称ODS或或C18）、硅胶）、硅胶-苯基等，用强极苯基等，用强极性的溶剂为流动相，如

30、甲醇性的溶剂为流动相，如甲醇/水，乙腈水，乙腈/水，水和无机盐的缓冲液等。流动相水，水和无机盐的缓冲液等。流动相的极性比固定相的极性强。的极性比固定相的极性强。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型五、离子交换色谱五、离子交换色谱 离子交换色谱是以离子交换色谱是以离子交换树脂离子交换树脂作作为固定相，树脂上具有为固定相，树脂上具有固定离子基团固定离子基团及及可交换的离子基团可交换的离子基团，根据组分离子，根据组分离子对树脂亲和力不同而得到分离。对树脂亲和力不同而得到分离。按结合的基团不同，离子交换树按结合的基团不同，离子交换树脂可分为脂可分为阳

31、离子交换树脂阳离子交换树脂和和阴离子交阴离子交换树脂换树脂。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型五、离子交换色谱五、离子交换色谱1、原理、原理 阳离子交换树脂阳离子交换树脂阳离子交换树脂阳离子交换树脂强酸性强酸性强酸性强酸性弱酸性弱酸性弱酸性弱酸性阴离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂强碱性强碱性强碱性强碱性弱碱性弱碱性弱碱性弱碱性33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型五、离子交换色谱五、离子交换色谱2、固定相、固定相 以交联共聚的苯乙烯以交联共聚的苯乙烯-二乙烯苯为二乙烯苯

32、为基质，同时也出现了许多其他交联高基质，同时也出现了许多其他交联高聚物基质的固定相。聚物基质的固定相。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型五、离子交换色谱五、离子交换色谱3、流动相、流动相 一般一般用水的缓冲液作流动相用水的缓冲液作流动相。可以。可以通过控制通过控制PH、改变缓冲液类型、加入、改变缓冲液类型、加入有机溶剂、加入配位剂来改变交换剂有机溶剂、加入配位剂来改变交换剂的选择性。的选择性。33提要提要提要提要 返回返回返回返回 3 3 高效液相色谱法的类型高效液相色谱法的类型六、凝胶色谱法六、凝胶色谱法相对分子质量差别相对分子质量差别大于大于10的化合物的化合物才可以分离才可以分离33提要提要提要提要 返回返回返回返回 4 4 应用应用