SC∕T 7206.1-2007 牡蛎单孢子虫病诊断规程 第1部分：组织印片的细胞学诊断法(水产).pdf

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1、ICS 65.020.30 B 41 中华人民共和国水产行业标准SC/T 7206.1一2007牡师单抱子虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法Dia伊osticProtocols for Haplosporidiosis of Oyster.一Part 1:Cytological Method with Tissue Imprints 2007-06-14发布2007-09-01实施中华人民共和国农业部发布SCIT 7206.1-2007 前-E SC/T 7206(牡妨单抱子虫病诊断规程分为三个部分:一一第1部分:组织印片的细胞学诊断法;一一第2部分:组织病理学诊断法;一一第3部分:

2、原位杂交诊断法。本部分为SC/T7206的第1部分。本部分由中华人民共和国农业部提出。本部分由全国水产标准化技术委员会归口。本部分起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站、深圳出入境检验检疫局。本部分主要起草人:杨冰、黄健、陈爱平、江育林、王崇明、王秀华、魏琦、如j莉。I SC/T 7206.1-2007 牡蜻单抱子虫病诊断规程第1部分:组织即片的细胞学诊断法1范固SCIT 7206的本部分规定了牡蜻单袍子虫病组织印片的细胞学诊断法的原理、试剂与材料、仪器设备、操作步骤和结果判定。本部分适用于现场或基层实验室对由尼氏单抱子虫(Ha.阳如ridiumnelsoni)和沿岸

3、单袍子虫(H.cos.阳le)所引起的患病牡蜘及其他贝类个体进行单抱子虫病的普查和初步诊断。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。SC/T 7205.1-27牡霸包纳米虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法3 原理3.1 牡蠕单殖子虫及其病理学特征单袍子虫病由单袍子虫的两个种引起:尼氏单抱子虫(HaPlos阳时diumnelS01li，或Minchin皿ne

4、lsoni)和沿岸单抱子虫(Ha向如创tmm血le.或Minchiniacostalis).尼氏单袍子虫通常称为MSX(Multinucleate sphere X).沿岸单袍子虫通常称为SS(Se田ide0电anism)。单抱子虫感染牡妨血细胞、结缔组织和消化腺上皮。镜检组织切片可见寄生虫的多核原虫。通常在外套膜和鲍上皮还伴随有褐红色变，其于包子期主要在稚贝中流行，偶见于成贝肝管上皮内。尼氏单袍子虫的袍子发生于消化道上皮细胞中，引起消化道上皮的渐进性溃烂，在结缔组织中无抱子形成，并且抱子形成期与任何显著的季节性死亡高峰元关:沿岸单抱子虫的袍子发生于结缔组织中。在北半球尼氏单抱子虫的感染发生于

5、夏季，从五月中旬到十月末均有发生，死亡高峰在八、丸月份。3.2 技术原理通过光镜观察经吉姆萨氏染液染色后的组织印片中单抱子虫各翔的形态，从而初步诊断被检样品是否感染单抱子虫。4试剂和材料见SC/T7205.1-2007(牡扬包纳米虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法)中4的规定。5 仪栅设备见SC/T7205.1-2007(牡霸包纳米虫病诊断规程第1部分组织印片的细胞学诊断法)中5的规定。6 操作步黯6.1 印片制作6.1.1 样品的采集按SC/T7205.1-27(牡扬包纳米虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊SC/T 7206.1-2007 断法)附录B执行。6.1.2 取牡妨

6、稚贝做样品进行尼氏单泡子虫病检测。6.1.3 沿着牡肠纵向剖面切取消化腺和想作为样本，用吸水纸吸去多余的液体，并将消化腺、鲍和外套膜的切口面在载玻片上进行印迹，印片自然干燥后在甲醇中固定2min-3 min。空气干燥。6.2 染色按照SC/T7205.1-2007(牡筋包纳米虫病诊断规程第1部分组织印片的细胞学诊断法)中6.2的规定执行。7 结果判定7.1 感染部位沿岸单抱子虫主要感染鲍、触手和结缔组织，尼氏单抱子虫感染消化腺上皮细胞。7.2镜检单抱子虫为多核原虫，核嗜酸性，胞质为嗜碱性，尼氏单袍子虫原虫大小为4m-30阳丑，沿岸单袍子虫大小为2阳-15m。7.3 当诊断结果可疑时，补充组织病理学或原位杂交诊断法进行确诊。2