第七节放线杆菌.pptx

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1、第七节放线杆菌 放线杆菌属是一类革兰氏阴性的杆状、球杆状或纤细丝状多形性的细菌。生长发育时均带有钻性，除极少数种(伴放线杆菌)外，所有动物都是自然宿主。在临床.几较重要的种有7种，即猪胸膜肺炎放线杆菌、李尼尔氏放线杆菌、马驹放线杆菌、猪放线杆菌、英膜放线杆菌、罗氏放线杆菌和精液放线杆菌(图9一7)。该类细菌为球形、卵圆形或杆状。以杆状为主，大小在0.41m。偶尔也见长丝状，特别是在含葡萄糖和麦芽糖的培养基上培养，菌休最长者可达6m。多以单个或成对排列，很少形成链状。不形成芽抱，无运动性，除荚膜放线杆菌和胸膜肺炎放线杆菌外，绝大多数放线杆菌不形成荚膜。兼性厌氧，有机化能营养，发酵型代谢口最适培养

2、温度为37，最适pH值为7.5。除猪放线杆菌能产生黄色素外，其他放线杆菌一般不产生色素。能利用葡萄糖和果糖，在24h内产酸不产气。不能发酵卫矛醇、肌醇和菊糖。MR试验阴性，不产生能基质，能还原硝酸盐。一、猪胸膜肺炎放线杆菌 猪胸膜肺炎放线杆菌又名猪胸膜肺炎嗜血杆菌或副溶血嗜血杆菌,后经DNA杂交试验证实该菌与林氏放线杆菌有很高的同源性，故而将其列入放线杆菌属中。它是引起猪放线杆菌胸膜肺炎的病原菌。该病以伴有胸膜炎的出血性坏死性肺炎为特征，主要侵害25月龄、体重30 6 0k g的猪，以具高度传染性，常呈急性或最急性经过，发病率、死亡率均在50%以上，是集约化猪场常见的甫要猪病之一。1.生物学性

3、状 胸膜肺炎放线杆菌分为2种生物型。光学显微镜下，生物型为小杆菌，具有多形性。培养时需要加人V因子(辅酶，NAD)。不能在麦康凯培养基上生长，在含5%绵羊血琼脂平板上于37培养1824h后，可见光滑、湿润、圆形的针尖大小的菌落，在巧克力琼脂平板上的菌落稍大些。生物型菌比生物型菌大，并且具有两极浓染性，生长不需要V因子，能在麦康凯培养基上生长。在绵羊血平板上，胸膜肺炎放线杆菌可产生稳定的乒溶血。该菌兼性厌氧，革兰氏染色阴性，不形成芽抱。该菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露糖、甘露醉、蔗糖、木糖和果糖产酸，尿素酶试验、硝酸盐还原试验和CAMP试验均为阳性，硫化氢试验、V-P试验和MR试验均为阴性。目前该

4、菌有14个血清型。生物型中含有12个血清型(1-12型)，其中5型又分为5a和5b两个亚型.生物型中含有2个血清型(13型和14型)，其致病性比生物I型要弱。胸膜肺炎放线杆菌的主要毒力因子包括英膜多糖(CP),脂多据(LPB)、外膜蛋白(OMP)、细胞毒素(Apx)、转铁结合蛋白（TBP）,酶蛋白等。细胞毒素是本菌最重要的致病因子，不同血清型的菌株可产生3种细胞毒素:Apx,Apx,APX。人工感染或自然感染均可产生有效的免疫应答。感染后10-14d可检出血清抗体，抗体水平在感染后4-6周达到高峰。该菌抵抗力弱，对常用消毒剂敏感,60C5-20min即可杀死，但对结晶紫和杆菌肚有一定的抵抗力。

5、2.微生物学诊断 直接镜检 取病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物做涂片，革兰氏染色后镇检，可见革兰氏阴性两极着色的球杆菌。分离 培养该菌确诊需取上述病料接种巧克力琼脂或绵羊血琼脂，置5%CO,37过夜培养。如有溶血小菌落生长，应进一步做CAMP试验，检测其脉酶活性及甘露醇发酵能力。对血清型的确定，可进一步做琼脂扩散试验或直接凝集试验鉴定分离株的血清型。防治 该病的治疗一般首选青霉索。免疫防治可用本地血清型的分离株，制成灭活苗就地使用.同时通过时结群血清抗体检测，淘汰阳性猪，建立净化猪群。二、林氏放线杆菌 林氏放线杆菌也称为李氏放线杆菌或李尼尔氏放线杆菌。本菌是由李尼尔(Lig-nieres

6、)和斯匹兹(Spits)于1902年首次从患类似放线杆菌病的牛分离得到，主要引起牛、绵羊和猪颈部软组织、内脏和皮肤感染，发生肉芽肿和化脓。也是引起牛“木舌病”的病原菌之一。1.生物学性状 本菌通常呈短杆状或球杆状，大小为1.5mX 0.4m，但由于培养基的不同，其形态也有所不同。在含葡萄糖和麦芽糖的培养基上墙养，多呈长杆状或丝状;在含有血液或血清的培养基上培养，多呈短杆状或球杆状，在肉汤培养基上培养，多呈链状或丝状。无运动性，无鞭毛、芽抱和英膜。在肉芽肿和慢性化脓病灶中，可长成灰白色小颖粒，无显著放射状菌丝。革兰氏染色阴性，无抗酸性，石炭酸复红染色呈两极着色。该菌为需氧和兼性厌氧，最适培养温度

7、为37,最适pH值为7.6。对营养要求高，在含有5%血液或10%血清的培养基中才能生长。该菌不溶血。在麦康凯培养基上生长，不需要V因子。氧化酶和磷酸酶试验阳性，产生硫化氢，能基质、脲酶试验阳性，甲基红试验为阴性。抗原结构复杂，有耐热抗原和不耐热抗原之分。耐热抗原又称菌体抗原，根据其结构可将林氏放线杆菌分为6个抗原型。耐热抗原又称表面抗原，是菌体周围的一些黏性物质。该菌的环境抵抗力弱，60 15min以及常用消毒剂、日光、干燥等均可杀死本菌。此外，该菌对四环家、链霉索、氯霉素及磺破类药物敏感。2.微生物学诊断 直接检查 取脓汁或脓肿内容物，用灭菌生理盐水冲洗数次，挑取灰白色小颗粒，置于载玻片上，于高倍镜下观察。可见小颗粒表面有棍棒状凸起，并呈放射状排列。加1-2滴15%KOH溶液于颗粒上，另取一盖玻片用力压碎颗粒，若颗粒已钙化可先加稀盐酸溶解后再压。压碎后经革兰氏染色，可见集聚在一起的细菌，并呈放射状排列，短杆状，无菌丝，革兰氏阴性。牛放线杆菌颗粒中的菌体呈丝状，具分支，革兰氏阳性。分离培养 无菌采取脓汁、脓肿、淋巴结或其他病变组织内的小颗粒，置于已灭菌的乳钵中磨碎，接种血琼脂平板和肉汤培养基，经3724-48h培养后，观察菌落和生长情况，并进行生化试验，与牛放线杆菌做鉴别。