TCHO测定.ppt

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1、目目 录录血清总胆固醇血清总胆固醇(TCHO)测定测定 目目 录录v熟悉CHOD-PAP法（酶法）测定血清总胆固醇（TCHO或TC）的原理和方法；v能够正确、独立、熟练地操作所用仪器；v能够对实验结果进行合理分析。实验目的实验目的目目 录录实验原理实验原理CHEH2OTCHOO2 H2O24-AAP酚醌亚胺H2O (Trinder反应)C H OR C O O H4-胆甾烯酮H2O2lCHOD-PAP法（酶法）是目前临床实验室测定血清TCHO的常规方法；l血清中总胆固醇(TCHO、TC)是血脂检验单的指标之一；l血清中总胆固醇包括游离胆固醇（FC,30%）和胆固醇酯（CE,70%）两部分，血清

2、中胆固醇酯经胆固醇酯酶（CEH）水解后生成FC，其与原血清中已经存在的FC一起，经胆固醇氧化酶(COD)氧化，所产生的H2O2的与4-氨基安替比林（4-AAP）、酚氧化缩合成红色醌亚胺。醌亚胺在520nm处有最大吸收峰，反应产生的颜色深浅与总胆固醇含量成正比。（红色）（红色）其反其反应式应式如下如下:目目 录录v分光光度计；分光光度计；vTCHO测定试剂；测定试剂；v2ml刻度吸管；刻度吸管；v20l微量加样器；微量加样器；v人血清；人血清；v37水浴箱等。水浴箱等。实验用品实验用品目目 录录实验过程实验过程2 2、按、按表表加加量量加入物加入物空白管空白管（B）标准管标准管（S）测定管测定管

3、（T）工作液工作液 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml蒸馏水蒸馏水 20 l -标准液标准液 -20 l -血清血清 -20 l 3、混匀，置混匀，置3737水浴水浴1010分钟，以空白管调零，分钟，以空白管调零，520nm520nm波长比色测波长比色测定定A AT T、A AS S值。按表加量值。按表加量1、标本要求：采血前、标本要求：采血前24小时禁食高脂，空腹采血，并尽快分离血清防止溶血小时禁食高脂，空腹采血，并尽快分离血清防止溶血 目目 录录计算计算 血清血清TCHO（mmol/L）=5.17正常参考值正常参考值 2.33 5.69mmol/L 目目 录录实验结果与分析实验结果与

4、分析1、实验结果、实验结果2、实验分析、实验分析各种因素（年龄、性别、遗传因素、生活方式等）各种因素（年龄、性别、遗传因素、生活方式等）引起胆固醇代谢紊乱，使血液中胆固醇水平增高或引起胆固醇代谢紊乱，使血液中胆固醇水平增高或降低。降低。病理性胆固醇病理性胆固醇：见于糖尿病、动脉粥样硬化、肾：见于糖尿病、动脉粥样硬化、肾病综合征、甲状腺功能减退、肝胆疾病等。高胆固病综合征、甲状腺功能减退、肝胆疾病等。高胆固醇血症与醇血症与AS的发生率呈正相关。的发生率呈正相关。病理性病理性胆固醇胆固醇：见于甲亢、营养不良、慢性消：见于甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病、贫血、肝硬化等。耗性疾病、贫血、肝硬化等。3、临床意义、临床意义目目 录录v注意安全：注意安全：试剂有毒！试剂有毒！v正确使用玻璃移液管和微量移液器；正确使用玻璃移液管和微量移液器；v严格按照表规定量加入；严格按照表规定量加入；v正确使用分光光度计；正确使用分光光度计；v手拿比色皿的手拿比色皿的毛面毛面，试剂不超，试剂不超过比色皿容积的过比色皿容积的2/3。实验注意事项实验注意事项