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1、梯度稀释涂平板制单菌落梯度稀释涂平板制单菌落主主讲:刘保平(副教授)刘保平(副教授)单位:位:东北北农业大学大学 生命学生命学院院年月:年月:2014年年9月月 地点:地点:中国中国 哈哈尔滨梯度梯度稀释稀释涂涂平板平板分离微生物分离微生物画线分离画线分离梯度梯度稀释稀释倒倒平板平板改进的十倍梯度改进的十倍梯度稀释稀释涂涂平板制单菌落平板制单菌落菌液稀释过程菌液稀释过程菌液浓度菌液浓度=30003000(活菌细胞(活菌细胞/ml/ml)管管1 1中平均有中平均有300300活菌细胞活菌细胞容积容积V=1.5V=1.5毫升毫升无菌水无菌水管管2 2中平均有中平均有3030活菌细胞活菌细胞菌液稀释
2、过程图解菌液稀释过程图解初始菌液未知浓度菌悬液十倍梯度稀释无菌水10-1 M010-2 M010-3 M010-4 M010-5 M010-6M010-7 M010-8 M0菌液接入平板-8-8菌液菌液浓度度=M010-1 M010-2 M010-3 M010-4 M010-5 M010-6M010-7 M010-8 M0-8-8-7-7-7-7-6-6-6-6-5-5-5-5初始菌液-5-5-5-5-6-6-6-6-7-7-7-7-8-8-8-8-5-5-5-5-6-6-6-6-7-7-7-7-8-8-8-8倒置培养 经常观察-5-5-5-5-6-6-6-6-7-7-7-7-8-8-8-80
3、00012128111011105107111121M02=10(1+2+1+2)4107=1.5108M03=10(8+11+10+11)4106=1.0108M01=10(0+0+0+0)4108=0 ()M04=10(121+111+107+105)4105=1.1108M02=10(1+2+1+2)4107=1.5108M03=10(8+11+10+11)4106=1.0108M04=10(121+111+107+105)4105=1.1108M0=(M02+M03+M04)3 =(1.5+1.0+1.1)3108 =1.2108 10接入平板的菌液是0.1ml,对应的浓度就要乘以10M0=(M02+M03+M04)3 =(1.5+1.0+1.1)3108 =1.2108(单位?)(CFU/ml)初始菌液CFU=Colony Form Unit其他如:菌丝片段、芽孢、孢子囊、单细胞胞+如上可能性如上可能性单菌落,菌落,单位位统称称为菌落形成菌落形成单位,英文名称位,英文名称为:Colony Form Unit,简称称为CFU改进的十倍梯度改进的十倍梯度稀释稀释涂涂平板制单菌落平板制单菌落菌液稀释过程菌液稀释过程CFU概念概念涂布平板及培养涂布平板及培养数据处理数据处理1、分离纯化微生物、分离纯化微生物2、测定活菌数浓度、测定活菌数浓度