实验诊断学之肝功能常用的实验室检查教学内容.ppt

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1、实验诊断学之肝功能常用的实验室检查1.1.物质代谢是肝脏最重要的功能。糖、蛋 白质、脂类三大物质代谢都在肝细胞中进行。包括肝糖原的合成和分解，糖异生，氨基酸的脱氨基和脱羧基；血浆中决大部分蛋白质的合成，非必需氨基酸的合成；脂肪酸的合成及氧化，酮体的合成，胆固醇的合成及代谢生成胆酸。此外还参与维生素的储存、运输、活化。2.肝脏对体内的非营养物质进行生物转化。内源性如激素、神经递质和其他胺类等对机体有强烈生物学活性的物质，以及氨、胆红素等对机体有毒性的物质。外源性物质如药物，肠道细菌产生的胺、酚、吲哚等也在肝脏中进行转化。肝细胞通过氧化、还原、水解、结合反应将它们降解，或使其溶解度增高，从胆汁或尿

2、液排出体外。肝功能试验肝功能试验 肝脏通过肝细胞众多酶系统和胆道系统来完成其强大的物质代谢、生物转化和分泌排泄功能。当肝细胞或胆道受到不同程度损伤时，物质代谢产物、生物转化的前体，分泌排泄物，以及肝细胞酶在血液中的含量就会出现相应的变化。通过实验室检测血液中相关物质浓度和成分，来了解肝脏某一方面的功能状态。一一.反映蛋白质代谢功能反映蛋白质代谢功能 绝大多数血浆蛋白由肝脏合成，如白蛋白，脂蛋白，凝血因子，转运蛋白等，当肝细胞受损时，这些蛋白质合成减少，其中白蛋白表现最明显；B细胞合成球蛋白相对增多，血浆蛋白组分发生改变。凝血因子合成减少，有出血倾向。尿素合成减少，血氨含量升高，氨中毒症状。1.

3、1.血清总蛋白（血清总蛋白（血清总蛋白（血清总蛋白（STPSTP）和白蛋白（和白蛋白（和白蛋白（和白蛋白（A A）球蛋白（球蛋白（球蛋白（球蛋白（GG）白球比值（白球比值（白球比值（白球比值（A/GA/G）1 1）血血清清总总蛋蛋白白(STPSTP serum serum total total protein)protein)是是血血清清中中所所含含各各种种蛋蛋白白的的总总称称，包包括括白白蛋蛋白白和和球球蛋蛋白白，测测定用定用双缩脲法双缩脲法。2 2）白白蛋蛋白白(ALBALB albulin)albulin)为为血血液液中中的的主主要要蛋蛋白白质质由由肝肝脏脏合合成成，白白蛋蛋白白主主要

4、要维维持持血血浆浆渗渗透透压压，代代谢谢物物质质转转运运，供供能能作作用用，测测定定用用溴溴甲甲酚酚绿绿法法。总总蛋蛋白白和和白蛋白含量是反映肝功能的重要指标。白蛋白含量是反映肝功能的重要指标。3 3）球球蛋蛋白白(GLOGLO globulin)globulin)为为血血清清中中总总蛋蛋白白减减去去白白蛋蛋白白以以外外的的蛋蛋白白质质(TP-A=GTP-A=G)，主主要要为为免免疫疫球球蛋蛋白白和和补体，与机体的免疫状态有关，补体，与机体的免疫状态有关，4 4）A/GA/G比值比值 1 1，如，如1 1称白球比倒置。称白球比倒置。双缩脲法测定 TP原 理:两分子尿素加热脱氨缩合成为双缩脲与碱

5、性铜溶液中铜离子形成紫红色化合物，称双缩脲反应，碱性铜溶液称双缩脲试剂。加热加热NHNH3 3 +紫红色紫红色络合物络合物一个双缩脲分子含一个双缩脲分子含2有个肽键，蛋白质分子有个肽键，蛋白质分子中有许多肽键，因而可有双缩脲样反应。中有许多肽键，因而可有双缩脲样反应。血清A测定 （BCG法：溴甲酚绿法）原原 理：理：A A具具有有与与阴阴离离子子染染料料结结合合的的性性质质，在在PH4.2PH4.2环环境境中中带带正正电电荷荷的的白白蛋蛋白白（PI PI 4.74.7）与与阴阴离离子子染染料料溴溴甲甲酚酚绿绿结结合，由黄色变为蓝绿色。合，由黄色变为蓝绿色。+PH4.2蓝绿色络合物参 考 值 T

6、P 60-80 g/LA 40-50 g/LG 20-30 g/L A/G 1.5-2.5 :1临床意义：肝脏具有较强的储备代偿功能，只有当肝细胞病变达到一定程度时才会出现血清蛋白的改变。急性或局灶性肝损伤时多正常，因此用于了解慢性肝损伤程度。除肝损伤外，其他系统疾病也会导致血清蛋白的成分变化。1.STP和A降低：常见于肝脏疾病有亚急性重症肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，肝癌。STP60 g/L 或A80 g/L或 G35 g/L时，称为高蛋白血症或高球蛋白血症。慢性肝脏疾病如自身免疫性肝炎，慢性活动性肝炎，酒精性肝炎，肝硬化等，晚期STP降低。M球蛋白血症见于浆细胞病中的骨髓瘤，巨球蛋白血症，

7、浆细胞白血病等。自身免疫性疾病如SLE，类风湿关节炎等。慢性炎症和感染如结核病，疟疾，血吸虫病等。3.G浓度降低 见于应用免疫抑制剂，先天性低球蛋白血症。4.A/G降低或倒置 A/G比值 1.5-2.5 :1，如1称白球比倒置。主要见于较严重的肝细胞损伤如肝硬化，肝癌等，也见于M蛋白血症如骨髓瘤。2.血清蛋白电泳血清蛋白电泳原理和方法：在碱性条件下（PH8.6），血清蛋白质带负电荷，在电场中会由阴极向阳极移动。由于各种蛋白质分子量大小不等，所带负电荷量不等，因此在同一电场中移动的速度就不同，白蛋白分子量较小，负电荷相对较多，移动速度最快，球蛋白移动速度较慢，电泳后从阳极开始，依次为、1-G、2

8、-G、-G及-G五个区带，可以将血清蛋白不同组分分开。正常血清蛋白电泳示意图一一般般采采用用醋醋酸酸纤纤维维素素薄薄膜膜电电泳泳，阴阴极极点点样样，电电泳泳结结束束后后进进行行染染色色，常常用用丽丽春春红红，氨氨基基黑黑。然然后后用用光光密密度计扫描得到其相对含量曲线图。度计扫描得到其相对含量曲线图。参考值：参考值：白蛋白：白蛋白：62-71%1球蛋白：球蛋白：3-4%2球蛋白：球蛋白：6-10%球蛋白：球蛋白：7-11%球蛋白：球蛋白：9-18%临床意义：形成特征性电泳图。1.肝脏疾病 急性及轻症肝炎时电泳图谱多无异常，在慢性活动性肝炎，肝硬化，肝癌时，白蛋白减少，1，2，球蛋白也有减少倾向

9、，球蛋白合成增加。2.M蛋白血症 见于骨髓瘤，巨球蛋白血症表现为白蛋白稍低，单克隆或多克隆球蛋白明显升高，形成M蛋白区带。3.肾病综合征，由于血脂升高，可见2和球蛋白增高，白蛋白和球蛋白降低。几种常见疾病的电泳示意图单克隆单克隆 球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症多克隆多克隆 球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症低低 球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症球蛋白血症 球蛋白球蛋白 LDL&VLDL C3 C反应蛋白反应蛋白 转铁蛋白转铁蛋白 2球蛋白球蛋白 2巨球蛋白巨球蛋白转甲视蛋白质转甲视蛋白质III血浆铜蓝蛋白血浆铜蓝蛋白结合珠蛋白结合珠蛋白(为为主要成分主要成分)3.血清前白蛋白测定

10、（血清前白蛋白测定（PA）PA(prealbulin)是一种载体蛋白，分子量比白蛋白小，由肝细胞合成，在精细电泳图谱上位于白蛋白前方看到一条染色很浅的区带。一般采用免疫比浊法测定。PA+相应的抗PA抗体复合物（形成一定浊度）临床意义：降低见于营养不良，慢性感染和恶性肿瘤等消耗性疾病。对肝炎，肝硬化，肝癌等的早期肝细胞损伤有一定的参考价值，比白蛋白能早期反映肝脏损害情况。4.血浆凝血因子测定血浆凝血因子测定体内绝大多数凝血因子由肝细胞合成，当肝细胞严重受损时，凝血因子合成减少，有出血倾向。凝血因子相关检测试验会出现不同程度的异常，与肝细胞受损程度有一定的相关性。一般采用PT或APTT来检测。时间

11、延长或比值增大提示肝细胞损伤。5.血氨测定血氨测定氨基酸脱氨基反应，肠道细菌对尿素和未吸收的氨基酸、蛋白质的分解都产生氨，在肝脏通过鸟氨酸循环生成尿素而解毒。当肝细胞严重受损伤失代偿时，血氨水平明显升高，表现出肝性脑病症状。临床意义：升高常见于严重肝病如肝硬化，肝癌，重症肝炎。二二.反映脂类代谢功能反映脂类代谢功能1.1.血清胆固醇和胆固醇酯测定血清胆固醇和胆固醇酯测定 决决大大部部分分内内源源性性胆胆固固醇醇由由肝肝细细胞胞合合成成，合合成成后后部部分分胆胆固固醇醇经经LCATLCAT酯酯化化成成胆胆固固醇醇酯酯。当当肝肝细细胞胞受受损损时时，胆固醇和胆固醇和LCATLCAT合成减少，胆固醇

12、酯含量也减少。合成减少，胆固醇酯含量也减少。临床意义：临床意义：1.1.肝肝细细胞胞严严重重损损伤伤时时如如肝肝硬硬化化，重重症症肝肝炎炎胆胆固固醇醇和和胆胆固醇酯合成减少。固醇酯合成减少。2.2.胆胆汁汁淤淤积积时时胆胆汁汁反反流流入入血血，且且胆胆固固醇醇合合成成增增加加，血血中中总总胆胆固固醇醇增增加加。由由于于以以游游离离胆胆固固醇醇增增加加为为主主，胆胆固醇酯与游离胆固醇的比值降低固醇酯与游离胆固醇的比值降低。2.阻塞性脂蛋白X测定 LP-X是一种异常的低密度脂蛋白，当胆汁淤积时，胆汁中的磷脂反流入血后形成的。临床意义：胆汁淤积性黄疸时升高。肝外胆管阻塞造成的淤积程度较重，LP-X含

13、量很高，可2000mg/L，鉴别肝内外梗阻有一定价值。三三.反映胆红素代谢排泌功能反映胆红素代谢排泌功能胆红素是在网状内皮系统中，主要由衰老RBC的血红素分解后形成生成后在血液中与白蛋白结合运输，此时尚未与其它配体结合，称为非结合胆红素（间接胆红素）非极性分子非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与葡萄糖醛酸结合称为结合胆红素（直接胆红素）极性分子结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成尿胆原一部分尿胆原被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取，其中一部分进入血循环从肾脏排出残留肠腔的尿胆原氧化后，以粪胆素排出因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障

14、碍，可导致血中胆红素升高1.血清胆红素测定血清胆红素测定包 括 总 胆 红 素（STB），结 合 胆 红 素（CB）和非结合胆红素（UCB）。一般采用加溶剂的重氮反应。重氮反应原理重氮反应原理1 1 1 1）直接反应）直接反应）直接反应）直接反应结合胆红素结合胆红素结合胆红素结合胆红素+重氮试剂重氮试剂重氮试剂重氮试剂碱性溶液碱性溶液碱性溶液碱性溶液偶氮胆红素偶氮胆红素偶氮胆红素偶氮胆红素（紫红色）（紫红色）（紫红色）（紫红色）2 2 2 2）间接反应）间接反应）间接反应）间接反应非结合胆红素非结合胆红素非结合胆红素非结合胆红素+重氮试剂重氮试剂重氮试剂重氮试剂咖啡因或咖啡因或咖啡因或咖啡因或

15、甲醇甲醇甲醇甲醇偶氮胆红素偶氮胆红素偶氮胆红素偶氮胆红素参考值：总胆红素（STB）1.7-17.1umol/L结合胆红素（CB）0-6.8umol/L非结合胆红素（UCB）1.7-10.2umol/L临床意义：1.根据总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度 STB 17.134.2 mol/L 隐性黄疸 34.2171 mol/L 轻度黄疸 171342mol/L 中度黄疸 342 mol/L 重度黄疸2.根据黄疸程度判断黄疸原因 （总胆红素水平）完全阻塞性黄疸 342 umol/L不完全阻塞性黄疸 171-342 umol/L肝性黄疸 17.1-171 umol/L溶血性黄疸 85.5 umol/

16、L3.根据结合胆红素与总胆红素得比值，协助鉴别黄疸类型 CBSTB 50 淤积性黄疸 CBSTB 20-50 肝细胞性黄疸 CBSTB 20 溶血性黄疸4.结合胆红素还有助于早期发现处于隐性黄疸肝胆疾病。2.尿胆红素和尿胆原测定尿胆红素和尿胆原测定非结合胆红素为脂溶性非极性物质，不能透过肾小球滤过膜，溶血性黄疸尿胆红素为阴性；结合胆红素是水溶性极性物质，可以通过肾小球滤过膜从尿中排出，肝细胞性和梗阻性黄疸尿胆红素为阳性。尿胆原在溶血性黄疸和肝细胞性黄疸时浓度升高。CBCBUCBUCBCB/STBCB/STB尿胆红素尿胆红素尿胆原尿胆原溶血性溶血性轻轻 重重 0.2 0.5 0.5强阳性强阳性减

17、少减少四四.反映胆酸的代谢反映胆酸的代谢胆汁酸(BA bile acid)是在肝脏中以胆固醇为原料合成的，是胆汁的主要成分，以胆盐的形式存在。从结构上分为游离胆酸和结合胆酸，从来源上分为初级胆酸和次级胆酸。主要功能是促进脂类和脂溶性维生素的吸收，维持胆汁中胆固醇的溶解状态利于排出。95的胆酸经肠肝循环被肝细胞摄取再利用，极少量进入血循环，因此是反映肝细胞损伤和胆汁淤积较敏感的指标。临床意义：1.急性肝炎，慢性活动性肝炎，酒精性肝炎，肝硬化，肝癌等肝细胞损伤后胆酸释放入血升高。2.见于胆汁淤积造成的反流入血。五.血清酶及同工酶检测肝脏强大的物质代谢，生物转化和分泌排泄功能依赖其丰富的酶反应系统，

18、是人体含酶类最多的器官。这些酶具有一定的组织特异性，当肝细胞损伤或胆管系统受刺激时，某些酶在血液中的含量升高。通过测定它们来了解肝脏的功能状态。同工酶是指催化同一化学反应，但分子结构，理化性质及免疫反应都不同的一组酶，可以存在于不同组织，或同一细胞的不同亚结构内，它们可以提高酶学检测的组织特异性。1.血清转氨酶及其同工酶测定 氨基转移酶简称转氨酶，目前用于肝功能检查的有两种：丙氨酸氨基转移酶（ALT）也称谷丙转氨酶（GPT），天冬氨酸氨基转移酶（AST）也称谷草转氨酶（GOT）。1.ALT催化丙氨酸与-酮戊二酸的氨基转移反应，生成丙酮酸和谷氨酸。2.AST催化天冬氨酸与-酮戊二酸的氨基转移反应

19、，生成草酰乙酸和谷氨酸。3.ALT主要分布在肝细胞胞浆内，细胞损伤时释放入血。其次是骨骼肌，肾脏，心肌组织。指示肝细胞损伤的特异性较强。4.AST主要分布在心肌，其次是肝脏，骨骼肌和肾脏组织。绝大部分AST存在于线粒体内，细胞严重受损时才明显升高。器官特异性和敏感性不如ALT。参考值：ALT 040 U/L AST 040 U/L ALT/AST1临床意义：1.急性病毒性肝炎 早期和急性期ALT和AST均明显升高，可达正常上限的几十倍。以ALT升高更显著，ALT/AST1。恢复期不能降至正常或再升高，提示可能转为慢性。重症肝炎时，若黄疸进行性加重，酶活性反而降低，表现为“胆酶分离”现象，说明肝

20、细胞严重坏死，预后不良。2.慢性病毒性肝炎 转氨酶轻度升高（100-200U/L）或正常，ALT/AST1。若 AST较ALT升高显著，即ALT/AST1，提示慢性肝炎进入活动期可能。3.酒精性肝病，药物性肝炎，脂肪肝，肝癌等转氨酶一般轻度升高。酒精性肝病AST升高显著，ALT/AST1。4.肝硬化 转氨酶活性取决于肝细胞坏死程度，早期升高明显，晚期活性可正常。5.肝内、外胆汁淤积 转氨酶一般正常或轻度升高。6.AST对急性心肌梗死有较高诊断价值，一般68小时后升高，可达正常值的410倍。7.其他疾病 如皮肌炎，肺梗死，肾梗死等转氨酶一般轻度升高，50200U/L。AST同工酶测定肝细胞中存在

21、两种AST同工酶，存在于胞浆的组分称为上清夜AST（ASTs），含量少。存在于线粒体中的组分称ASTm，含量多。两者的变化可反映肝细胞坏死的程度。临床意义：轻、中度急性肝炎时，AST升高幅度较小，以ASTs为主。重症肝炎，暴发性肝炎，酒精性肝病时升高幅度大，以ASTm为主。2.碱性磷酸酶及其同工酶测定碱性磷酸酶（ALP）在碱性条件下水解磷酸酯。主要分布在肝脏，骨骼，也存在于肾脏，小肠和胎盘组织中，常用于肝脏和骨骼疾病的检查指标。胆道疾病时由于ALP的合成增加而排泄减少，血清中浓度升高有助于诊断。参考值：成人 40110U/L临床意义：1.肝胆系统疾病 各种肝内、外胆管阻塞如泥沙样结石、癌栓、华

22、支睾吸虫，胰头癌、胆道蛔虫等，以及病毒性、药物性胆汁淤积，原发性胆汁性肝硬化等肝内胆汁淤积ALP显著升高。肝实质细胞损伤如肝炎，肝硬化等，ALP轻度升高。2.黄疸的鉴别 胆汁淤积性ALP明显升高，肝细胞性ALP轻度升高，溶血性ALP正常。3.骨骼疾病 如纤维性骨炎，佝偻病，骨软化症，骨肉瘤，骨转移癌，甲状旁腺机能亢进等ALP升高较明显。4.妊娠中晚期及生长发育期儿童ALP轻度升高。碱性磷酸酶同工酶测定磷酸酶同工酶有6种，根据来源不同分为：ALP2肝型，ALP3骨型，ALP4胎盘型，ALP5小肠型，ALP1是细胞膜组分和ALP2的复合物，ALP6是IgG和ALP2的复合物。参考值：正常人血清中以

23、ALP2为主，占总ALP的90，还有少量ALP3；发育中的儿童ALP3增多，占60以上。妊娠中晚期ALP4增多，占4065。临床意义：1.胆汁淤积性黄疸时，ALP1产生明显增多，导致ALP1 ALP2。2.急性肝炎主要是肝细胞损伤时，ALP2明显升高，ALP1轻度升高，使得ALP1ALP2。3.80以上的肝硬化患者，ALP5明显升高，可达总ALP的40以上。3.-谷氨酰基转移酶测定-谷氨酰基转移酶（GGT或-GT）主要是催化谷胱甘肽上的-谷氨酰基转移到另一底物上，参与氨基酸转运和谷胱甘肽的代谢。血清中的GGT主要来自于肝胆系统。当肝内合成增加或胆汁排出障碍时，血液中GGT升高。参考值：正常人5

24、0U/L临床意义：1.胆道梗阻性疾病 各种原因导致的肝内、外胆汁淤积，肝癌往往造成压迫性胆道梗阻，且癌细胞也合成GGT，均可使GGT明显升高。2.急性肝炎时，GGT中等程度升高，慢性肝炎，肝硬化时GGT大多正常。3.酒精性肝损伤时，ALT和AST仅轻度升高时，GGT则出现明显升高。4.脂肪肝，胰腺炎，胰腺肿瘤等GGT可轻度升高。4.乳酸脱氢酶及其同工酶测定乳酸脱氢酶（LD）是参与糖酵解的酶，广泛存在于机体的各个组织中，正常情况下血清中的LD主要来自心肌，占70以上，来源于肝脏的约占5。因此对肝脏疾病诊断的特异性较差。红细胞中含有大量LD，溶血时对检测结果影响较大。急性肝炎，肝硬化，胆汁淤积，慢

25、性活动性肝炎等LD均升高。根据H亚基（心型）和M亚基（肌型）组合不同，乳酸脱氢酶同工酶分为5种。其中LD1和LD2主要来自心肌，LD3来自肺、脾脏，LD4和LD5主要来自肝脏，其次为骨骼肌。同工酶检测具有组织定位作用，特异性大大增加。在急性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，原发性 肝 癌 等 肝 细 胞 损 伤 时，LD5升 高，且LD5LD4；在胆道梗阻未累及肝细胞时，LD4LD5；恶性肿瘤肝转移时，LD4和LD5同时升高。5.-L-岩藻糖苷酶测定-L-岩藻糖苷酶（AFU）是一种酸性水解酶，存在于组织细胞的溶酶体中。血清中有一定含量。肝癌细胞能合成大量的AFU，血清中浓度明显升高。可配合其他肿瘤

26、标志物诊断肝脏占位性病变的良恶性。6.谷氨酸脱氢酶测定谷氨酸脱氢酶（GDH）是仅存在于线粒体中，肝细胞含量最高，主要分布在小叶中央区细胞线粒体中。其在血清中含量升高对肝实质损伤有一定的定位意义。急、慢性肝炎，肝硬化，酒精性肝炎累导致肝小叶中央区坏死，导致GDH不同程度的升高。肝癌，阻塞性黄疸一般不累及小叶中央区细胞坏死，GDH正常。7.5 核苷酸酶5 核苷酸酶（5-NT）是碱性的磷酸酯酶，肝细胞合成，由胆道系统排泌，参与核酸的分解代谢。与碱性磷酸酶类似，升高与胆道梗阻，肝内占位性病变有很高的相关性。六.肝脏纤维化的检测指标肝纤维化是多种病因如慢性肝炎，酒精中毒，胆汁淤积，药物，血吸虫病等引起的

27、肝脏结缔组织增生的结果，同时伴有肝细胞变性坏死，假小叶和再生结节形成，最终发展为晚期肝硬化。1.单胺氧化酶测定单胺氧化酶（MAO）主要存在于肝细胞线粒体中，参与生物转化作用中的单胺氧化反应。结缔组织增生时，血清中MAO含量升高。临床意义：主要用来观察肝纤维化的程度。慢性肝炎时MAO升高，表示肝纤维化进展。中晚期肝硬化大多升高。2.脯氨酸羟化酶测定脯氨酸羟化酶（PH）是胶原纤维合成酶，当肝纤维化时，肝脏胶原结缔组织增生，血清中PH升高。临床意义：各种病因引起的进行性肝纤维化，PH活性明显升高。原发性肝癌多伴有肝硬化也见升高。3.型前胶原氨基末端肽测定肝纤维化进展时，肝脏结缔组织合成增加，首先合成

28、的前胶原被肽酶分解，生成型胶原和型前胶原氨基末端肽（P P），部分进入血中，使血清中含量升高。急性肝炎时，血清P P升高，转为慢性后不降低或持续升高，提示慢性活动性肝炎伴进展性肝纤维化，是反映肝纤维化的较早期指标。4.型胶原(C)及其分解片段(7S和NC1)C是构成细胞基底膜的主要成分，血清中的氨基末端7S、羧基末端 NC1和 C是基膜降解的产物，肝结缔组织增生时，C降解酶活性也增加，是肝纤维化的较早期表现。结果对早期肝纤维化诊断优于PP。干扰素治疗丙肝的疗效与血清C水平有关，可作预测。此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢