单向免疫琼脂扩散精.ppt

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1、单向免疫琼脂扩散第1页，本讲稿共15页第2页，本讲稿共15页第3页，本讲稿共15页2%离子琼脂；PBS（pH7.2，0.01M）；标准已知阳性血清；稀释的待测血清标本（浓度分别为1/30、51/40、1/50）；免疫琼扩阳性血清；已知标准琼扩抗原，诊断抗原；湿盒（容器内加湿纱布或泡沫塑料）；打孔器（孔径3mm）；打孔模板；微量加样器；第4页，本讲稿共15页第5页，本讲稿共15页10mm10mm3mm第6页，本讲稿共15页第7页，本讲稿共15页第8页，本讲稿共15页血浆血浆 的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质

2、和体内产生的废物等。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分，呈淡黄色液体（因物等。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分，呈淡黄色液体（因含有胆红素）。血浆的化学成分中，水分占含有胆红素）。血浆的化学成分中，水分占9092，溶质以血浆蛋白为主。血浆，溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的总称，用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。蛋白是多种蛋白质的总称，用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。血浆蛋白质的功能有：维持血浆胶体渗透压；组成血液缓冲体系，参与维持血液酸血浆蛋白质的功能有：维持血浆胶体渗透压；组成血液缓冲体系，参与维持血液酸碱平衡；运输营

3、养和代谢物质，血浆蛋白质为亲水胶体，许多难溶于水的物质与其碱平衡；运输营养和代谢物质，血浆蛋白质为亲水胶体，许多难溶于水的物质与其结合变为易溶于水的物质；营养功能，血浆蛋白分解产生的氨基酸，可用于合成组结合变为易溶于水的物质；营养功能，血浆蛋白分解产生的氨基酸，可用于合成组织蛋白质或氧化分解供应能量；参与凝血和免疫作用。血浆的无机盐主要以离子状织蛋白质或氧化分解供应能量；参与凝血和免疫作用。血浆的无机盐主要以离子状态存在，正负离子总量相等，保持电中性。这些离子在维持血浆晶体渗透压、酸碱态存在，正负离子总量相等，保持电中性。这些离子在维持血浆晶体渗透压、酸碱平衡、以及神经平衡、以及神经-肌肉的正

4、常兴奋性等方面起着重要作用。血浆的各种化学成分常在肌肉的正常兴奋性等方面起着重要作用。血浆的各种化学成分常在一定范围内不断地变动，其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等的浓度最易受营养一定范围内不断地变动，其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等的浓度最易受营养状况和机体活动情况的影响，而无机盐浓度的变动范围较小。血浆的理化特性相对状况和机体活动情况的影响，而无机盐浓度的变动范围较小。血浆的理化特性相对恒定是内环境稳态的首要表现。恒定是内环境稳态的首要表现。第9页，本讲稿共15页血清血清:是指血液中既不含血细胞（血清不含红细胞和白细胞）也不含凝固因子凝固因子的成分；也就是除去纤维蛋白原的血浆 血液凝固析

5、出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。人体的血液由有形成分和无形成分组成，白

6、血球、红血球、血小板是有形成分，血清是血液中的无形成分。用显微镜可以观察到血液中的白血球、红血球、血小板等有形成分，血清为去除纤维蛋白原后的无形成分，颜色微黄，透亮。血清的基本成分是水，水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分，也溶有人体代谢产物。血清中有抗体，这是被称作免疫球蛋白的蛋白质。第10页，本讲稿共15页抗毒血清：因制作时是将蛇毒、病原菌产的毒等小量多次地注射到免子、马血管内，因制作时是将蛇毒、病原菌产的毒等小量多次地注射到免子、马血管内，每日慢慢加大注射量，一定时间后，因该动物体内产生抗体，经检测，每日慢慢加大注射量，一定时间后，因该动物体内产生抗体，经检测，达到一定效价

7、后，就可以抽血。血液分离血清后再经提纯，就成了抗毒达到一定效价后，就可以抽血。血液分离血清后再经提纯，就成了抗毒血清。血清。如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备，用来治疗相应如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备，用来治疗相应毒素反应。毒素反应。该生物制剂是异种血清，对人会有过敏反应，注射前均要做皮试。阴性该生物制剂是异种血清，对人会有过敏反应，注射前均要做皮试。阴性可注射，阳性必需作脱敏疗法才行。可注射，阳性必需作脱敏疗法才行。第11页，本讲稿共15页破伤风抗毒素是一种免疫马血清，对人体是一种异性蛋白，具有抗原性（过敏反应），因此在用药前先作过敏试验。试验结果为阴性可直

8、接注射破伤风抗毒素，试验结果为阳性者，则应进行脱敏注射，即小剂量分4-5次注射破伤风抗毒素。在用过破伤风抗毒素超过一周者，如再使用，还须重作皮肤试验。抗血清或抗体仍能产生可观察到的标准免疫反应时的稀释度。如抗血清的效价为1:1000，即抗血清稀释1000倍时仍能产生可观察到的免疫反应。效价 第12页，本讲稿共15页指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间，以其与抗指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间，以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果，称为抗体效价。原反应的多少来表示其免疫效果，称为抗体效价。抗体效价测定 抗体效价测定是根据大分子颗粒抗原于其相应的抗体相结合，在适量的电解质存在及一定的温度下，经过一定时间可出现肉眼可见的凝集团块，医学称为凝集反应，一般均以标准抗原测定免疫血清或患者血清中抗体的效价。第13页，本讲稿共15页第14页，本讲稿共15页第15页，本讲稿共15页