保健食品的抗氧化功能bbzp.docx

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1、抗氧化功功能保健健食品的的功效成成分及检检测一、概述述自由基是是指含有有未配对对的电子子的原子子、分子子或基团团,由于于自由基基中含有有未成对对电子,具具有配对对的倾向向,具有很高高的活性性。自由由基若要要稳定必必须向邻邻近的原原子或分分子夺取取电子而而使自己己的电子子成对,但但也因此此使得电电子被夺夺的那个个原子或或分子成成为新的的自由基基,引发发连锁反反应,这个过过程就是是“氧化化”。 自由基是是人体正正常的代代谢产物物,正常常情况下下人体内内自由基基是处于于不断产产生与清清除的动动态平衡衡中,人人体内存存在少量量的氧自自由基,不不但对人人体不构构成威胁胁,而且且可以促促进细胞胞增殖,刺刺

2、激白细细胞和吞吞噬细胞胞杀灭细细菌,消消除炎症症,分解解毒物。自自由基产产生过多多或清除除过慢,它它通过攻攻击生命命大分子子物质及及各种细细胞,会会造成机机体在分分子水平平、细胞胞水平及及组织器器官水平平的各种种损伤,加加速机体体的衰老老进程并并诱发各各种疾病病。常见见的癌症症、动脉脉硬化、糖糖尿病、白白内障、心心血管病病、老年年痴呆、关关节炎等等疾病都都被认为为与自由由基过多多相关。抗氧化剂剂是指能能清除自自由基或或能阻断断自由基基参与的的氧化反反应的物物质。抗抗氧化剂剂的种类类繁多,可可分为酶酶类清除除剂和非非酶类清清除剂两两大类。酶酶类抗氧氧化剂一一般为抗抗氧化酶酶, 主主要有超超氧化物

3、物歧化酶酶(SOOD)、过过氧化氢氢酶(CCAT)、谷谷胱甘肽肽过氧化化物酶(GGPX)等等。非酶酶类抗氧氧化剂一一般包括括黄酮类类、多糖糖类、维维生素CC、维生生素E、-胡萝萝卜素等等物质。它它们是能帮帮助捕获获并中和和自由基基,从而而祛除自自由基对对人体损损害的一一类物质质。国家食食品药品品监督管管理局(SFDDA)已已批准具具有抗氧氧化功能能的常用用原料有有:维生生素A、维维生素CC、维生生素E,硒硒,OPPC(低低聚原花花青素),SSOD(超超氧化物物歧化酶酶),辅辅酶Q110,DDHA,茶茶多酚,-胡罗罗卜素,牛牛磺酸,螺螺旋藻等等。随着着年龄的的增长,机机体内产产生自由由基清除除剂

4、的能能力逐渐渐下降,从从而减弱弱了对自自由基损损害的防防御能力力,使机机体组织织器官容容易受损损,加速速了机体体的衰老老,引发发一系列列的疾病病。为了了防止此此类现象象的发生生,可以以人为地地由膳食食补充抗抗氧化剂剂,从而而达到防防御疾病病、延缓缓衰老的的目的。二、主要要功效成成分介绍绍(一)酶酶类抗氧氧化剂(Enzymes antioxidant)1、超氧氧化物歧歧化酶(ssupeeroxxidee diismuutasse,SSOD)从19338年MMarnn1等人首首次从牛牛红血球球中分离离得到超超氧化物物歧化酶酶开始算算起,人人们对SSOD的的研究己己有七十十多年的的历史。119699

5、年Irrwinn Frridoovicch 和和 Jooe MMcCoord2等等重新发发现这种种蛋白,并并且发现现了它们们的生物物活性,弄弄清了它它催化过过氧阴离离子发生生歧化反反应的性性质,所所以正式式将其命命名为超超氧化物物歧化酶酶,英文文简称为为SODD3。 (1)性性质及结结构SOD是是生物体体内重要要的抗氧氧化酶,广广泛分布布于各种种生物体体内,如如动物,植植物,微微生物等等。SOOD是一一类含金金属的酶酶,按其其所含金金属辅基基不同可可分为含含铜锌(分分子中同同时含有有Cu和和Zn)、含含锰或铁铁(分子子中含有有锰或铁铁)和含含镍(分分子中含含有镍)33种44(图图1、图图2)。

6、含铜锌金金属辅基基的CuuZnn-SOOD是主主要存在在于真核核细胞的的细胞质质中或高高等植物物的叶绿绿体基质质、类囊囊体内以以及线粒粒体膜间间隙中。广广泛存在在于动物物血液、牛牛肝、猪猪肝、牛牛心、豌豌豆、麦麦叶等动动植物组组织中,是是目前应应用最广广泛的一一类酶。大大肠杆菌菌和其他他一些原原核细胞胞生物中中一部分分含有FFe-SSOD,一部分含有Mn-SOD,而另外一些两种抗氧化酶都含有。图 1 CuuZnn-SOOD结构构图图 2Mn-SODD结构图图(2)理理化及生生物学特特性SOD是是一种酸酸性蛋白白酶,对对pH、热热和蛋白白酶水解解等反应应较其他他蛋白酶酶稳定。其其酶活性性既取决决

7、于蛋白白质,还还取决于于结合到到活性部部位的金金属离子子。SOD是是生物体体内防御御氧化损损伤的一一种十分分重要的的金属酶酶,对氧氧自由基基有强烈烈清除作作用,特特别对于于超氧阴阴离子(OO2),SSOD可可将其催催化歧化化而生成成H2O2和O2,故SSOD又又称为清清除超氧氧阴离子子自由基基的特异异酶。(3)SSOD的的生理功功能及应应用作为一种种体内自自由基去去除剂SSOD能能保护DDNA、蛋蛋白质和和细胞膜膜免遭OO2-的破破坏作用用, 减减轻或延延缓甚至至治愈某某些疾病病,延缓缓因自由由基损害害生命大大分子而而引起的的衰老现现象,如如延缓皮皮肤衰老老和老年年斑的形形成等;同时SSOD还

8、还能提高高人体对对自由基基外界诱诱发因子子的抵抗抗力;增增强人体体自身的的免疫力力;清除除放疗所所诱发的的大量自自由基;消除疲疲劳等生生理功能能。SOOD在医医疗上对对治疗关关节炎和和类风湿湿性关节节炎疗效效显著。此此外,SSOD对对治疗癌癌症、缺缺血后重重灌流损损伤、肺肺气肿、白白内障、糖糖尿病、贫贫血等疾疾病均有有疗效。SOD在在食品方方面可作作为功能能性食品品的功能能因子或或食品营营养强化化剂,有有良好的的抗衰老老、抗炎炎、抗辐辐射、抗抗疲劳等等保健强强身的效效果。国国内外已已把SOOD作为为食品添添加剂应应用到多多种食品品中。同同时还可可用富含含SODD的原料料加工制制成功能能性食品品

9、,如大大蒜饮料料、刺梨梨SODD汁等。(4)生生物安全全性超氧化物物歧化酶酶(SOOD)目目前世界界范围内内大都从从动物血血液中提提取,不不但代价价昂贵,而而且动物物性SOOD有排排他性、不不易常温温保存等等缺点,同同时存在在艾滋病病等血液液病毒的的交叉感感染及其其它潜在在危险。2、过氧氧化氢酶酶(caatallasee,CAAT)(1)性性质过氧化氢氢酶存在在于细胞胞的过氧氧化物体体内,可可以催化化氧化氢氢分解成成氧气和和水,是是生物防防御体系系的关键键酶之一一。H22O2浓度越越高,分分解速度度越快5。过氧化氢氢酶是在在18111年被被过氧化化氢(HH2O2)的发发现者泰泰纳尔(LLoui

10、is JJacqquess Thhnaard)首首次发现现。19900年年,Osscarr Looew将将这种能能够降解解过氧化化氢的酶酶命名为为“Caatallasee”,即即过氧化化氢酶,并并发现这这种酶存存在于许许多植物物和动物物中。119377年,詹詹姆斯B萨萨姆纳将将来自牛牛肝中的的过氧化化氢酶结结晶,并并在次年年获得了了该酶的的相对分分子质量量。19969年年,牛的的过氧化化氢酶的的氨基酸酸序列得得以解出出。19981年年其三维维结构得得以解析析6(图33)。图 3 过氧氧化氢酶酶结构图图(2)生生物学功功能过氧化氢氢酶广泛泛存在于于能呼吸吸的生物物体内,如如植物的的叶绿体体、线粒

11、粒体、内内质网、动动物的肝肝和红细细胞中,其其酶促活活性为机机体提供供了抗氧氧化防御御机理。过氧化氢氢酶在食食品工业业中被用用于除去去用于制制造奶酪酪的牛奶奶中的过过氧化氢氢。过氧氧化氢酶酶也被用用于食品品包装,防防止食物物被氧化化。在纺纺织工业业中,过过氧化氢氢酶被用用于除去去纺织物物上的过过氧化氢氢。近年年来,过过氧化氢氢酶开始始使用在在美容业业中。一一些面部部护理中中加入了了该酶和和过氧化化氢,目目的是增增加表皮皮上层的的细胞氧氧量。3、谷胱胱甘肽过过氧化物物酶(ggluttathhionne pperooxiddasee,GPPX)(1)性性质谷胱甘肽肽过氧化化物酶为为生物体体中清除除

12、过氧化化氢和其其他有机机过氧化化物的脱脱毒酶。谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是第一个在哺乳动物体内发现的含硒酶(图4),它于1957年被Mills7首先发现, 1973年由Flohe和Rotruck两个研究小组确立了GPX与硒之间的联系。图 4谷胱甘甘肽过氧氧化物酶酶结构图图(2)生生物学功功能:谷谷胱甘肽肽过氧化化物酶(GGSH-Px)是是机体内内广泛存存在的一一种重要要的过氧氧化物分分解酶。硒硒是GSSH-PPx酶系系的组成成成分,它它能催化化GSHH变为GGSSGG,使有有毒的过过氧化物物还原成成无毒的的羟基化化合物,同同时促进进H2O2的分解解,从而而保护细细胞膜的的结构及及功能不不受过

13、氧氧化物的的干扰及及损害。(二)原原花青素素1、结构构与性质质原花青素素是由不不同数量量的儿茶茶素(ccateechiin)或或表儿茶茶素(eepiccateechiin)结结合而成成。最简简单的原原花青素素是儿茶茶素、或或表儿茶茶素、或或儿茶素素与表儿儿茶素形形成的二二聚体,此此外还有有三聚体体、四聚聚体等直直至十聚聚体。按按聚合度度的大小小,通常常将二五聚体体称为低低聚体(简简称OPPC),将将五聚体体以上的的称为高高聚体(简简称PPPC)。原花青素素是一种种有着特特殊分子子结构的的生物类类黄酮,是是目前国国际上公公认的清清除人体体内自由由基最有有效的天天然抗氧氧化剂。一一般为葡葡萄籽提提

14、取物或或法国海海岸松树树皮提取取物。原原花青素素一般为为红棕色色粉末,气气微、味味涩,溶溶于水和和大多有有机溶剂剂。2、生物物学功能能8, 9原花青素素是当今今医学界界发现的的最安全全高效的的抗氧化化剂、自自由基清清除剂和和紫外线线吸收剂剂,广泛泛应用于于保健食食品、药药品和化化妆品。其其抗氧化化能力是是维生素素E的550倍、维维生素CC的200倍,它它能有效效清除体体内多余余的自由由基,保保护人体体细胞组组织免受受自由基基的氧化化损伤,具有抗心血管疾病、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗炎、抗疲劳、改善视觉功能等药理作用,可用于治疗动脉粥样硬化、高血压、冠心病、肿瘤等疾病。(1)通通过三条条途径保保

15、护人体体的血液液循环系系统:清清除血液液中存在在的氧自自由基;帮助机机体阻止止氧自由由基的生生成;增增强血管管壁的完完整性(2)阻阻抑胶原原酶和弹弹性蛋白白酶对结结缔组织织的降解解作用,因因而有利利于保持持皮肤的的弹性,发发挥抗皮皮肤衰老老的功效效。(3)能能增强眼眼底视网网膜毛细细血管和和四肢末末梢毛细细血管的的微循环环。(4)通通过维持持血管的的健康和和改善微微循环,使使各器官官和组织织获得较较充足的的血液供供应。(5)能能增强免免疫功能能,表现现在花青青素提高高喂酒精精的小白白鼠和感感染逆转转录病毒毒的小白白鼠细胞胞介素22的免疫疫应答能能力。(6)花花青素还还可增强强维生素素C的功功效

16、,延延长维生生素C在在人体内内发生功功效的时时间。(7)花花青素在在水中的的溶解性性非常好好,口服服后吸收收好,进进入人体体内起效效快,而而且作用用时间持持久。4、安全全性:MMasqquellierr教授和和许多科科学家利利用花青青素,已已经做了了多年的的各种临临床、化化验、毒毒性和药药物动力力学的研研究。多多种动物物实验和和实验系系统研究究的结果果证明,花花青素无无毒、无无致突变变性、无无致癌性性、无致致畸胎性性、无致致敏性,因因此花青青素是安安全的。(三)类类胡萝卜卜素(CCarootennoidds)类胡萝卜卜素(CCarootennoidds)是是一类重重要的天天然色素素的总称称,普

17、遍遍存在于于动物、高高等植物物、真菌菌、藻类类中的黄黄色、橙橙红色或或红色的的色素之之中10-111。类胡萝卜卜素可分分3类:胡萝卜卜素,羟羟类化合合物,特特点是溶溶于石油油醚。多多数都具具有CHH的化学学实验式式。最常常见的有有蕃茄红红素和,-胡萝萝卜素。叶黄素,亦称胡萝卜醇,是胡萝卜素的非酸性氧衍生物。含氧基团有羟基、酮基、醚基、环氧基和类呋喃基。常见的有隐黄质、玉米黄质、叶黄素、辣椒红、辣椒玉红素、虾青素、虾红素、海胆烯酮、蒲公英黄质、新黄质、柠黄质、紫菌红素丁等。类胡萝卜素酸,胡萝卜素的羧酸衍生物,能溶于碱溶液。例如:藏花素、胭脂树橙和红酵母红素等。1、番茄茄红素(LLycoopenn

18、e)(1)性性质:番番茄红素素又称-胡萝萝卜素,属属于异戊戊二烯类类化合物物,是类类胡萝卜卜素的一一种。番番茄红素素(lycoopenne) 是一种种脂溶性性不饱和和碳氢化化合物, 是类类胡萝卜卜素的一一种, 分子式式为C440H56, 相对分分子质量量5366.855, 熔熔点1774 ( 反反式) , 与与-胡胡萝卜素素是同分分异构体体。分子子结构见见图7, 番番茄红素素难溶于于甲醇、乙乙醇, 可溶于于乙醚、石石油醚、己己烷、丙丙酮, 易溶于于氯仿、二二硫化碳碳、苯等等有机溶溶剂112。图 5 番茄茄红素分分子结构构图(2)生生物学功功能:研究发发现,番番茄红素素具有优优越的生生理功能能,

19、它不不仅具有有抗癌抑抑癌的功功效,而而且对于于预防心心血管疾疾病、动动脉硬化化等各种种成人病病、增强强人体免免疫系统统以及延延缓衰老老等都具具有重要要意义。番番茄红素素具有抗抗氧化、抑抑制突变变、降低低核酸损损伤、减减少心血血管疾病病及预防防癌症等等多种保保健功能能。 抗氧化化延缓衰衰老。番番茄红素素抗氧化化能力是是维生素素E的1100倍倍,维生生素C的的10000倍。是是自然界界最强的的延缓衰衰老的抗抗氧化剂剂。防防癌抗癌癌,辅助助抑制肿肿瘤。番番茄红素素能清除除导致细细胞癌变变的自由由基,达达到预防防的作用用。对已已形成的的肿瘤,可可促进细细胞间隙隙传输信信号,接接触抑制制、分化化诱导癌癌

20、细胞。前列腺腺保健,提提高男性性生育能能力。调节血血脂,预预防心脑脑血管疾疾病。抗辐射射,美容容美肤。 乳房房子宫保保健。番番茄红素素可促进进女性乳乳房健康康发育,减减少乳腺腺癌发生生几率。(3)生生物安全全性:番番茄红素素雌、雄雄小鼠LLD500均大于于20.0g/kg属无毒毒物质;Amees试验验、微核核试验和和精子畸畸形试验验结果均均为阴性性;大鼠鼠30天天喂养试试验结果果显示番番茄红素素30天天喂养对对大鼠各各项观察察指标未未见毒性性作用13。2、虾青青素(AAstaaxannthiin)(1)性性质及结结构:虾虾青素是是一种端端基为酮酮基类胡胡萝卜素素,化学学名称为为3,33-二二羟

21、基-4, 4-二酮基基-, -胡萝萝卜素,分分子式为为C400H53O4,又名名虾黄素素,虾黄黄质,龙龙虾壳色色素,是是一种非非维生素素A源类类胡萝卜卜素114,分子结结构见图8。虾虾青素是是从河螯螯虾外壳壳,牡蛎蛎和鲑鱼鱼中发现现的一种种红色类类胡萝卜卜素,在在体内可可与蛋白白质结合合而呈青青、蓝色色。有抗抗氧化、抗抗衰老、抗抗肿瘤、预预防心脑脑血管疾疾病作用用144。图 6 虾青青素的分分子结构构图(2)生生物学功功能:虾虾青素是是类胡萝萝卜组的的一种。也也是类胡胡萝素合合成的最最高级别别产物, -胡胡萝卜素素、叶黄黄素、角角黄素、番番茄红素素等都不不过是类类胡萝卜卜素合成成的中间间产物,

22、因因此在自自然界,虾虾青素具具有最强强的抗氧氧化性15。主要功能能有:抗癌作作用:虾虾青素对对人大肠肠癌SWW1166细胞的的增殖有有明显抑抑制作用用,对膀膀胱癌、肝肝癌、口口腔癌、肺肺癌和由由紫外线线引起的的皮肤癌癌有一定定的抑制制作用。抗氧化作用:虾青素具有超强的抗氧化作用,其抗脂肪氧化的能力比-胡萝卜素高10倍,比维生素E高550倍,是OPC的20倍,故称为超级抗氧化剂。虾青素能增强抗体反应和增强体液免疫的功能。对心血管系统有显著的保护作用。虾青素极易通过血脑屏障,故能有效地预防与年龄相关的视黄斑退化和中枢神经系统疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病和脊髓损伤)。(3)生生物安全全性:人分别别

23、服用33.6 mmg/dd、7.2mgg/d、114.4 mmg/dd剂量的的虾青素素都没有有出现不不良反应应,而且且血浆LLDL氧氧化的速速率随剂剂量增加加而减慢慢。研究究表明虾青青素无毒毒副作用用16。3、叶黄黄素(XXantthopphyllls)(1)性性质及结结构:叶叶黄素是是-胡胡萝卜素素的衍生生物, 分子式式: CC40H56O2 , 相对分分子质量量: 5568.85。它它含有二二个不同同的紫罗罗酮环: -和-紫罗酮酮环, 在各紫紫罗酮环环的第33个碳原原子上存存在一个个功能性性羟基。在在C233、C223和和C266处有有三个不不对称中中心, 因此理理论上有有8种立立体异构构

24、体117,分子结结构见图9。叶叶黄素又又名“植植物黄体体素”,在在自然界界中与玉玉米黄素素(Zeeaxaanthhin)共共同存在在。叶黄黄素与玉玉米黄素素是构成成玉米、蔬蔬菜、水水果、花花卉等植植物色素素的主要要组分,也也是构成成人眼视视网膜黄黄斑区域域的主要要色素18-19。图 7叶黄素素的分子子结构图图(2)生生物学功功能:叶黄素素能抑制制活性氧氧自由基基的活性性,阻止止活性氧氧自由基基对正常常细胞的的破坏。叶叶黄素可可通过物物理或化化学淬灭灭作用灭灭活单线线态氧,从从而保护护机体免免受伤害害,增强强机体的的免疫能能力。另另外叶黄黄素还能能改善老老年人视视力衰退退;预防防老年性性黄斑变变

25、性所导导致的盲盲眼病;保护由由日光、电电脑等所所发射的的紫外线线所导致致的对眼眼睛和视视力的伤伤害作用用;降低低白内障障的发生生率;减减轻体内内和皮肤肤退行性性老年斑斑的形成成;调节节血脂;延缓动动脉硬化化;抗癌癌作用等等作用。(3)生生物安全全性:叶黄素素雌、雄雄小鼠经经口LDD均大于于21.5mgg/kgg,根据据急性毒毒性(LLD )剂量分分级标准准,属无无毒级。遗遗传毒性性试验(Amees试验验、骨髓髓细胞微微核试验验、小鼠鼠精子畸畸形试验验)均为为阴性,表表明叶黄黄素无致致突变作作用。在在大鼠330 dd喂养试试验中未未见动物物健康状状况、血血液学、血血液生化化学和器器官组织织形态的

26、的异常变变化。(四)维维生素类类(Viitamminss)1、维生生素E(Vittamiin EE)(1)性性质及结结构:维生素素E(Vittamiin EE)是一种种脂溶性性维生素素,又称生生育酚,是最主主要的抗抗氧化剂剂之一20。化学学式:CC29H50O2;相对对分子质质量:4430.69;分子结结构见图图8;外外观:黄黄色油状状液体;密度:0.9950 g/ccm;熔点:2.5533.5 ;沸沸点:22002220 。图 8 维生生素E的的分子结结构图(2)生生物学功功能:维维生素EE能促进进性激素素分泌,使使男子精精子活力力和数量量增加;使女子子雌性激激素浓度度增高,提提高生育育能力

27、,预预防流产产,还可可用于防防治男性性不育症症、烧伤伤、冻伤伤、毛细细血管出出血、更更年期综综合症、美美容等方方面。近近来还发发现维生生素E可可抑制眼眼睛晶状状体内的的过氧化化脂反应应,使末末稍血管管扩张,改改善血液液循环,预预防近视视发生和和发展。维维生素EE可清除除自由基基,防止止油脂氧氧化和阻阻断亚硝硝胺的生生成,故故在提高高免疫能能力,预预防癌症症等方面面有重要要作用,同同时在预预防和治治疗缺血血再灌注注损伤等等疾病有有一定功功效221。(3)生生物安全全性:美美国和欧欧盟有各各自的维维生素EE安全评评价体系系。美国国采用的的是HAACCPP评价体体系,将将动物试试验中高高剂量维维生素

28、EE造成的的出血(小鼠的的出血部部位为:肠道、尿尿道、脑脑膜和眼眼眶)作作为最高高耐受剂剂量的关关键控制制点。以以5000 mgg/(kkg BBW d)为为LOAAEL(最低有有害作用用水平),并通通过安全全系数的的换算,得得出成年年人每日日维生素素E的可可耐受最最高摄入入量为110000 mgg/d。人人的NOOAELL(无明明显副作作用水平平)为5540 mg/d,通通过安全全系数换换算,成成年人每每天摄入入维生素素E的可可耐受最最高摄入入量为22703000 mgg/d。2、维生生素C(VVitaaminn C)(1)性性质及结结构:分分子式:C6H8O6;相对对分子质质量:1176.

29、12;分子结结构式见见图111;酸性性,在溶溶液中会会氧化分分解;外外观:无无色晶体体;熔点点:19901922;紫紫外吸收收最大值值:2445 nnm。维生素CC又称为为抗坏血血酸,在在自然界界中存在在还原型型抗坏血血酸和氧氧化型脱脱氢抗坏坏血酸两两种形式式。抗坏坏血酸通通过逐级级供给电电子而转转变成半半脱氢抗抗坏血酸酸和脱氢氢抗坏血血酸,在在转化的的过程中中达到清清除O22-、OH、RROO等自由由基的作作用。维维生素CC具有强强抗氧活活性,能能增强免免疫功能能、阻断断亚硝胺胺生成、增增强肝脏脏中细胞胞色素酶酶体系的的解毒功功能。人人体血液液中的维维生素CC含量水水平与肺肺炎、心心肌梗塞塞

30、等疾病病密切相相关222。图 9 维生生素C的的分子结结构图(2)生生物学功功能:维维生素CC的主要要作用是是对抗游游离基,有有助于防防癌,降降低胆固固醇,防防止坏血血病;提提高免疫疫力,预预防心脏脏病、中中风,保保护牙齿齿和牙龈龈等。另另外,坚坚持按时时服用维维生素CC还可以以使皮肤肤黑色素素沉着减减少。(3)生生物安全全性:维维生素CC的毒性性很小,但但服用过过多仍可可产生一一些不良良反应。有有报告指指出,成成人维生生素C的的每日摄入入量超过过2 gg,可引引起渗透透性腹泻泻。当每每日摄入入量小于于1g时,一一般不引引起高尿尿酸症,当当超过11g时,尿尿酸排除除明显增增加。研研究发现现,每

31、日日服用44g维生素素C,可可是尿液液中尿酸酸的排出出量增加加一倍,并并因此而而形成尿尿酸结石石增多。过过量的维维生素CC还可引引起子宫宫颈粘液液中糖蛋蛋白二硫硫键改变变,阻止止精子的的穿透,造造成不育育。妊娠娠期服用用过量的的维生素素C,可可能影响响胚胎的的发育。3、维生生素A(VVitaaminn A)(1) 性质及及结构:维生素素A1主要存存在与动动物肝脏脏、血液液和眼球球的视网网膜中,分分子式CC20H30O;熔点点:64;维生生素A22主要在在淡水鱼鱼中存在在,分子子式C220H28O;熔点:17199。维维生素AA是人体体必需的的13种种维生素素之一,是是一种脂脂溶性抗抗氧化剂剂,

32、在人人体中可可以维持持视力并并且促进进骨骼成成长223。(2)生生物学功功能:维维生素AA有一定定的抗氧氧化作用用,可以以中和有有害的游游离基;维持视视觉,维维生素AA可促进进视觉细细胞内感感光色素素的形成成;促进进生长发发育,视视黄醇也也具有相相当于类类固醇激激素的作作用,可可促进糖糖蛋白的的合成;维持上上皮结构构的完整整与健全全;加强强免疫能能力;维维生素AA有助于于维持免免疫系统统功能正正常,能能加强对对传染病病特别是是呼吸道道感染及及寄生虫虫感染的的身体抵抵抗力。(3)生生物安全全性:长长期或大大量服用用维生素素A,可可引起中中毒反应应。成人人一次用用药超过过50万万单位,或或儿童超超

33、过300万单位位,可引引起急性性中毒,表表现为头头痛、烦烦躁、多多汗、食食欲不振振等。不不论成人人还是儿儿童,连连续用药药超过66个月,皆皆可引起起慢性中中毒。三、主要要功效成成分的检检测方法法综述1、免疫疫学方法法将GPXX3抗体体包被于于96孔孔微孔板板中,制制成固相相载体,向向微孔中中依次加加入标准准品和标标本,其其中的GGPX33与连接接于固相相载体上上的抗体体结合,洗洗板之后后加入生生物素化化的GPPX3抗抗体,将将未结合合的生物物素化抗抗体洗净净后,加加入HRRP标记记的亲和和素,再再次彻底底洗涤后后加入底底物(TTMB)显色。TTMB在在过氧化化物酶的的催化下下转化成成蓝色,并并

34、在酸的的作用下下转化成成最终的的黄色。颜颜色的深深浅和样样品中的的GPXX3呈正正相关。用用酶标仪仪在4550 nnm波长长下测定定吸光度度,计算算样品中中谷胱甘甘肽过氧氧化物酶酶的浓度度。2、分光光光度法法细胞色素素C还原原法24(MccCorrd法)测定SSOD:pH 7.88,0.3 mmol/L磷酸酸钾缓冲冲液0.5 mmL(含含110-44mol/LEDDTA),610-5 mmol/L氧化化型细胞胞色素CC液0.5 mmL,00.3 mmool/LL黄嘌呤呤液0.5 mmL,11.3 mL重重蒸水,在在预保温温10mmin,最最后加入入1.77100-3u/mg.porrt的黄黄嘌

35、呤氧氧化酶00.2 mL,并并立即计计时,速速率变化化在2 minn内有效效,控制制黄嘌呤呤氧化酶酶浓度,使使其在5550 nm的的吸光度度为0.25/minn,测定定SODD活性时时,加入入0.33 mLLSODD被测液液,重蒸蒸水相应应减少到到1.00 mLL,根据据抑制程程度,计计算活性性。邻苯三酚酚自氧化化法25(简称称Marrkluund法法)测定定SODD:邻苯苯三酚发发生自氧氧化测定定:500 mmmol/L的TTriss-HCC1(ppH 88.2)缓冲液液3 mmL,预预热至225 ,加入入l0 L 50 mmool/LL的邻苯苯三酚,充充分摇匀匀,以缓缓冲液做做空白对对照,

36、每每隔半分分钟测一一次吸光光度。同同样条件件,加入入l0 L待待测SOOD液,读读取其吸吸光度。羟胺发色色法26测定SSOD:将100 mmmol/L邻苯苯三酚,110 mmmoll/LEEDTAA-Naa2,400 mmmol/L盐酸酸羟胺和和重蒸水水按1:l:4:4配制制反应液液,将990 mmg/LL氨基苯苯磺酸和和1.55mg/L NN-甲萘萘基二氨氨基乙烯烯按1:1配成成显色液液,取00.955 mLL 0.1mool/LL的Trris-HC11和0.05mmLSODD待测液液,再加加0.11mL反反应液,室室温反应应15 minn,再加加2.00 mLL显色液液,5550 nnm处

37、比色。钼酸铵比比色法测测定CAAT:过过氧化氢氢酶(CCAT)可催化化H2O2分解生生成H22O和OO2,体系系中残留留的H22O2再与钼钼酸铵作作用生成成黄色化化合物,反反应在很很短时间间即可达达到平衡衡,并至至少可稳稳定600minn,其生生成的黄黄色化合合物在4405nnm处所所呈现的的吸光度度取决于于H2O2和钼酸酸铵的浓浓度,根根据过氧氧化氢酶酶分解HH2O2的多少少间接测测定其含含量。改良比色色法测定定CATT:CAAT分解解H2O2的反应应可通过过加入醋醋酸重铬铬酸钾而而迅速中中止,剩剩余的HH2O2与醋酸酸重铬酸酸钾在加加热条件件下反应应生成铬铬酸醋酸酸钾,在在波长5570nn

38、m6610 nm进进行比色色测定铬铬酸醋酸酸钾的生生成量,可可反映HH2O2的含量量。谷胱甘肽肽过氧化化物酶测测定通常常采用二二硫代二二硝基苯苯甲酸法法,其原原理是GGSH和和二硫代代二硝基基苯甲酸酸(DTTNB)作作用生成成5-硫硫代二硝硝基苯甲甲酸阴离离子。该该离子呈呈现较稳稳定的黄黄色,在在4122 nmm测定其其吸光度度,即可可计算出出GSHH的量,以以单位时时间内GGSH减减少量来来表示GGSH-Px活活力。GGST具具有催化化GSHH与1氯氯-2,4-二二硝基苯苯结合的的能力,GGSHC6H3(NOO2)2Cl (1-巯基-2,4-二二硝基苯苯)+HHCl,在在一定时时间内,活活性

39、高低低与GSSH的减减少量呈呈线性关关系。由由于上述述反应在在非酶条条件下仍仍能进行行,故计计算酶活活力时,必必须扣除除非酶反反应所引引起的GGSH减减少量。杨万政等等27用分光光光度法法测定了了沙棘油油中类胡胡萝卜素素的含量量,检测波波长为4445 nm。张张英宣等等28采用改改进的分分光光度度法测定定了胡萝萝卜中类类胡萝卜卜素的含含量。在在5.000mgg/kgg1000mgg/kgg浓度范范围内,平平均回收收率为999.00%,相相对标准准偏差小小于5%。丁贵贵平等29建立了分光光光度法测测定保健健食品中中微囊化化-胡胡萝卜素素,采用用正交设设计确定定了提取取-胡胡萝卜素素的最佳佳条件,

40、样样品经酶酶解,用用氯仿提提取后,转转至环已已烷溶剂剂中,在在4544 nmm波长下下测吸收收值,通通过E值值计算其其含量。方方法的回回收率为为92.5%96.6%,相相对标准准偏差为为2.44%22.6%。Jaafarr Muuhammmadd ELL-Quudahh30用分光光光度法法测定了了约旦日日常膳食食中的总总类胡萝萝卜素含含量。EEffaat SSourri等31用三阶阶导数分分光光度度法同时时测定了了花色素素甙和-胡萝萝卜素,花花色素甙甙和-胡萝卜卜素的测测定波长长分别为为6255 nmm和5440 nnm,检检出限分分别为1125g/mmL和66.255 gg/mLL。分光光度

41、度法是测测定番茄茄红素的的常用方方法。番番茄红素素在不同同的有机机溶剂里里均有类类似的吸吸收峰, 最大大吸收峰峰的波长长约为4472nnm 4884nmm32, 人们们经常将将样品溶溶解在石石油醚或或正己烷烷中, 在最大大吸收波波长下用用分光光光度计测测定溶液液的吸光光度, 以此来来表征番番茄红素素的浓度度, 用摩摩尔消光光系数计计算其中中番茄红红素的含含量33-34。程杨335采用浸浸提法从从试样中中提取番番茄红素素,用苏苏丹标准品品代替番番茄红素素标准品品,通过过紫外分分光光度度法测定定试样中中番茄红红素的含含量。通通过比较较试验分分析石油油醚、乙乙烷、丙丙酮和氯氯仿4种不同同有机试试剂对

42、番番茄红素素的提取取效果,确确定最佳佳提取工工艺为:用甲醇醇洗脱试试样中的的黄色素素,用氯氯仿作为为提取溶溶剂提取取试样中中的番茄茄红素,提提取率为为4.4459 mg/g。郑郑丽丽36采用苏苏丹代替番番茄红素素做标准准品制备备标准曲曲线,在波长长4855nm处测测定番茄茄红素含含量, 回收率率99.09%,RSDD 2.0%。以苏丹红红代替番番茄红素素作为标标准品,绘绘制标准准曲线,用用以测定定番茄红红素的含含量以及及用石油油醚或者者正己烷烷为溶剂剂,在4722 nmm 比色色测定其其吸光度度,用摩尔尔消光系系数来计计算其中中番茄红红素的含含量。这这两种方方法不需需要标准准品,但但其系统统误

43、差较较大,同同时不能能排出-胡萝萝卜素等等其他类类胡萝卜卜素的干干扰。张张连富37从番茄茄红素及及-胡萝萝卜素的的紫外吸吸收光谱谱的差异异入手,以以2%二氯甲甲烷为溶溶剂,以以5022nm为检检测波长长,建立立了番茄茄红素的的测定方方法,避避免了其其他类胡胡萝卜的的干扰并并将其转转化为用用消光系系数来计计算的形形式。尚德军38利用一一种抽提提装置建建立了一一种快速速测定番番茄红素素的方法法,并与与国家标标准番茄茄红素测测定方法法GB1142115-119933进行了了比较。结结果表明明该方法法与国家家标准方方法相比比,测量量结果偏偏高。马亚军等等39建立了了葡萄籽籽提取物物中原花花青素的的硫酸

44、高高铈盐分分光光度度法,该该方法是是基于原原花青素素与Cee4+在强酸性介介质中反反应生成成无色的的Ce33+,通通过测定定黄色高高铈盐的的吸光度度,间接接测定原原花青素素的原理理。Cee4+在3319 nm波波长处具具有最大大吸收。该该方法的的线性范范围为00.122g/mL10g/mmL, RSDD为0.98%1.1%,回收率率为977.2%1002.88%, 检出限限为0.04 g/ mLL。傅武胜40建立了了含葡萄萄糖提取取物的保保健品中中原花青青素的铁铁盐催化化比色法法,并对对可能存存在的干干扰进行行了探讨讨。溶液液中原花花青素稀稀盐酸的的水解作作用和硫硫酸铁铵铵的催化化作用下下,转

45、变变为红色色的花青青素,5550nnm处比比色测定定。在226.000gg4116.00g范范围内,原原花青素素的浓度度与吸光光值ODD5500呈线性性关系,最低检出限为4g。3、荧光光法Fe2+和H2O2在酸性性介质中中(pH22.5)经Feentoon反应应产生OH,OH与与喹啉经经芳香羟羟基化反反应,羟羟基化喹喹啉在碱碱性介质质中呈现现出很强强的荧光光(ex= 3600 nmm,em = 4440 nnm ),荧光光强度的的增量与与H2O2的量成成正比。毛玉霞等41发现过氧化氢酶将H2O2分解为H2O和O2,对Fenton反应有显著的抑制作用,进而抑制芳香羟基化反应,导致体系的荧光强度降

46、低. 荧光强度的降低程度与CAT活性有良好的定量相关性。4、化学学发光法法化学发光光法442测定SSOD:在255试管管中先加加入0.6mLL pHH5.6磷酸酸盐缓冲冲液,00.1 mL 1 mmmoll/LEEDTAA-Naa2溶液,00.1 mL 1mmmol/L黄嘌嘌呤溶液液,5 mool/LL的测试试管中再再加100 LL待测样样本(对对照管中中加入110 L生理理盐水,放放入发光光仪测试试室),最最后加入入1000 LL黄嘌呤呤氧化酶酶应用液液,启动动反应。鲁米诺(llumiinoll)在一一定条件件下与HH2O2及Coo2+等金金属离子子共存时时发出强强烈的蓝蓝光,当当样品中中有

47、CAAT存在在时,基基质的HH2O2将被分分解,由由H2O2所引起起的化学学发光强强度减弱弱计算总总CATT酶活性性。5、薄层层色谱法法薄层色谱谱法测定定维生素素E只适适用于-E。试试样经皂皂化,使使维生素素E游离离,用乙乙醚抽提提出不可可皂化物物,用薄薄层层析析法分离离出-E,使使其与三三氯化铁铁溶液反反应,三三价铁被被还原为为二价铁铁,二价价铁与,-联联氮苯反反应生成成铬盐,测测定其显显色深度度,求出出-维生生素E的的含量。杨万兴等等43建立了了高效薄薄层扫描描法测定定维生素素E霜中中维生素素E含量量的方法法。以乙乙酸乙醋醋、乙醚醚、冰醋醋酸(77:3:0.22)为展展开剂, 采用用双波长长反封锯锯齿法,测测维生素素E时s=2285 nm,r=285 nm。加样回收率为98.7%,RSD为2.5%。6、毛细细管电泳泳法电泳染色色定位法法的基本本原理是是根据光光化学法法与NBBT还原原法。电电泳则采采取垂直直板聚丙丙烯酰胺胺凝胶电电泳。既既可采用用SODD活性正正染色(呈现棕棕色区带带)也可可采取SSOD活活性负染染色(呈呈现无色色透明区区带)。根根据凝胶胶上电泳泳分离的的SODD区带的的着色深深浅与面面积大小小,对样样品进行行半定量量分析,也也可制作作校正曲曲线计算算样品中中的

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