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1、九章节维生素测定 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望教学目的与要求掌握维生素、维生素、维生素的测定方法和原理;熟悉维生素的生理功能;了解维生素测定的意义;了解其它维生素的测定方法和原理。教学内容概述脂溶性维生素的测定水溶性维生素的测定第一节第一节 概概 述述 维生素是维持人体正常生命活动所必需的一维生素是维持人体正常生命活动所必需的一类天然有机化合物。类天然有机化合物。其种类很多,目前已确认的有其种类很多,目前已确认的有3030余种,其中余种,其中被认
2、为对维持人体健康和促进发育至关重要的被认为对维持人体健康和促进发育至关重要的有有2020余种。余种。这些维生素结构复杂,理化性质及生理功能这些维生素结构复杂,理化性质及生理功能各异,有的属于醇类,有的属于胺类,有的属各异,有的属于醇类,有的属于胺类,有的属于酯类,还有的属于酚或醌类化台物于酯类,还有的属于酚或醌类化台物。第二节第二节 脂溶性脂溶性V V的测定的测定 一、一、高效液相色谱法测定食物中高效液相色谱法测定食物中V VA A、V VE E (GB/T 5009.822003GB/T 5009.822003中第一法)中第一法)二、比色法测定二、比色法测定VAVA的含量的含量(GB/T 5
3、009.822003GB/T 5009.822003中第二法)中第二法)原理:原理:在氯仿溶液中,在氯仿溶液中,V VA A与三氯化锑可与三氯化锑可生成蓝色可溶性络合物,在生成蓝色可溶性络合物,在 620 nm 620 nm 波长波长处有最大吸收峰,其吸光度与处有最大吸收峰,其吸光度与V VA A的含量在的含量在一定的范围内成正比,故可比色测定。一定的范围内成正比,故可比色测定。适用范围及特点适用范围及特点本法适用于维生素本法适用于维生素A A含量较高的各种样品含量较高的各种样品(高高于于 510 g 510 g g)g),对低含量样品,因受其他,对低含量样品,因受其他脂溶性物质的干扰不易比色
4、测定:脂溶性物质的干扰不易比色测定:该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定性差。比色测定必须在性差。比色测定必须在 ,否则蓝色,否则蓝色会迅速消退,将造成极大误差。会迅速消退,将造成极大误差。6 6秒钟内完成秒钟内完成注意:注意:1.1.维生素维生素A A见光易分解,整个实验应在暗处进见光易分解,整个实验应在暗处进行,防止阳光照射,或采用棕色玻璃避光。行,防止阳光照射,或采用棕色玻璃避光。2.2.三氯化锑腐蚀性强,不能沾在手上,三氯三氯化锑腐蚀性强,不能沾在手上,三氯化锑遇水生成白色沉淀因此用过的仪器化锑遇水生成白色沉淀因此用过的仪器要先用稀盐酸浸泡后再清
5、洗。要先用稀盐酸浸泡后再清洗。三、三、胡萝卜素的测定胡萝卜素的测定 (GB/T 5009.832003 GB/T 5009.832003)第一方法是第一方法是HPLCHPLC;第二方法为纸层析法。第二方法为纸层析法。四、维生素四、维生素D D的测定的测定 分析方法中较好的是比色法和高效分析方法中较好的是比色法和高效液相色谱法。液相色谱法。三氯化锑比色法三氯化锑比色法 液相色谱法液相色谱法第三节第三节 水溶性维生素的测定水溶性维生素的测定 一、维生素一、维生素B Bl l的测定的测定GB/T 5009.842003GB/T 5009.842003中唯一的方法中唯一的方法是荧光计法是荧光计法二、维
6、生素二、维生素B B 2 2的测定的测定GB/T 5009.852003GB/T 5009.852003中中第一法为荧光法;第一法为荧光法;第二法为微生物法。第二法为微生物法。三、维生素三、维生素C C的测定的测定2 2,66二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法2 2,44二硝基苯肼比色法二硝基苯肼比色法 GB/T 5009.862003 GB/T 5009.862003 蔬菜、水果及其制蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸含量测定方法第二法品中总抗坏血酸含量测定方法第二法荧光法荧光法GB/T 5009.862003 GB/T 5009.862003 第一法第一法习 题1、对于某一特定的维生素,在选择分析方法时应考虑哪些因素?、大多数维生素定量方法中,维生素必须先从食品中提取出来,通常使用哪些方法提取维生素?对于一水溶性维生素和一脂溶性维生素,分别给出一个适当的提取方法。有两种普通的AOAC法测定维生素C的含量,辨别这两种方法,然后比较这两种方法所涉及的原理。