《疫球蛋白》PPT课件.ppt

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1、l第三章第三章 免疫球蛋白免疫球蛋白l1掌握抗体与免疫球蛋白的概念、免疫球蛋白的基本结构、功能区及其功能、免疫球蛋白的功能;五类免疫球蛋白的特性与功能l2熟悉免疫球蛋白的水解片断;多克隆抗体、单克隆抗体的概念l3了解免疫球蛋白的异质性内内内内 容容容容 与与与与 要要要要 求求求求 第一节第一节 抗体与免疫球蛋白的概念抗体与免疫球蛋白的概念l抗体(抗体(Ab)是机体受到抗原刺激后,由是机体受到抗原刺激后,由B细胞转化为浆细胞细胞转化为浆细胞所产生的,能与相应抗原发生特异性结合的免疫球所产生的,能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白蛋白主要存在于血清中。主要存在于血清中。l免疫球蛋白(免疫球蛋白

2、(Ig)具有相似结构及抗体活性的球蛋白。具有相似结构及抗体活性的球蛋白。l抗体都是免疫球蛋白,并非所有免疫抗体都是免疫球蛋白,并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性。球蛋白都具有抗体活性。Ab Ab 和和 Ig Ig 的关系的关系AbIg第二节第二节 免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的结构一一.基本结构基本结构 由两条相同的由两条相同的轻链轻链(L L链)链)和两条相同的和两条相同的重链(重链(H H链)链)通过链间通过链间二硫键二硫键连结形成。连结形成。u轻链和重链轻链和重链两个端:两个端:氨基端(氨基端(N N端)端)羧基端(羧基端(C C端)端)可变区(可变区(V V区)和恒定区(区)和恒定区(C

3、C区)区)C端端铰链区铰链区uV V区:氨基酸组成、排列区:氨基酸组成、排列顺序变化较大。顺序变化较大。与抗原与抗原特异性结合部位。特异性结合部位。uC C区:氨基酸数量、种类、区:氨基酸数量、种类、排列顺序比较恒定。排列顺序比较恒定。铰链区铰链区 富含脯氨酸,易发生伸富含脯氨酸,易发生伸富含脯氨酸,易发生伸富含脯氨酸,易发生伸展和一定程度的移动,便展和一定程度的移动,便展和一定程度的移动,便展和一定程度的移动,便于抗体更好地与抗原结合于抗体更好地与抗原结合于抗体更好地与抗原结合于抗体更好地与抗原结合;而且易被木瓜蛋白酶、胃而且易被木瓜蛋白酶、胃而且易被木瓜蛋白酶、胃而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白

4、酶等水解。蛋白酶等水解。蛋白酶等水解。蛋白酶等水解。C端端铰链区铰链区lIg分子中有些部位在一定条件下容易被分子中有些部位在一定条件下容易被蛋白酶水解为各种片段。蛋白酶水解为各种片段。二、水解片段二、水解片段l木瓜蛋白酶水解片段木瓜蛋白酶水解片段l胃蛋白酶水解片段胃蛋白酶水解片段木瓜蛋白木瓜蛋白木瓜蛋白木瓜蛋白酶水解酶水解酶水解酶水解FcFab裂解部位:裂解部位:裂解部位:裂解部位:铰链区二硫键铰链区二硫键铰链区二硫键铰链区二硫键N N端侧端侧端侧端侧胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解pFcF(ab)2裂解部位:裂解部位:裂解部位:裂解部位:铰链区二硫键铰链区二硫键铰链区二硫键铰

5、链区二硫键C C端侧端侧端侧端侧三、免疫球蛋白的功能区三、免疫球蛋白的功能区(结构域)结构域)L L链:链:链:链:VLVL区、区、区、区、CLCL区区区区HH链:链:链:链:VHVH区、区、区、区、CHCH1 1区区区区 CHCH2 2区区区区 CHCH3 3区区区区 CHCH4 4区区区区(IgMIgM、IgEIgE)三、免疫球蛋白的功能区三、免疫球蛋白的功能区 IgIgIgIg分分分分子子子子通通通通过过过过链链链链内内内内二二二二硫硫硫硫键键键键折折折折叠叠叠叠或或或或若若若若干干干干个个个个能能能能行行行行使使使使特特特特定定定定功功功功能能能能的的的的球球球球形形形形单单单单位位位

6、位,每每每每个个个个球球球球形形形形单单单单位位位位为为为为一一一一个个个个功能区功能区功能区功能区。L L链:链:链:链:VLVL区、区、区、区、CLCL区区区区HH链:链:链:链:VHVH区、区、区、区、CHCH1 1区区区区 CHCH2 2区区区区 CHCH3 3区区区区 CHCH4 4区区区区(IgMIgM、IgEIgE)V V V V区区区区C区区VL+VHVL+VH功能区:功能区:功能区:功能区:抗原结合部位(抗原结合部位(抗原结合部位(抗原结合部位(2 2个)个)个)个)CH3CH3功能区功能区功能区功能区:是是是是IgIg与与与与其其其其FcFc受体结合的部位受体结合的部位受体

7、结合的部位受体结合的部位(固定细胞)固定细胞)固定细胞)固定细胞)CLCL和和和和CHCH 区:区:区:区:具有同种具有同种具有同种具有同种异型抗体的遗传标记。异型抗体的遗传标记。异型抗体的遗传标记。异型抗体的遗传标记。(2 2个)个)个)个)CH2CH2区区区区:IgGIgG的补体结的补体结的补体结的补体结合点和通过胎盘的部位合点和通过胎盘的部位合点和通过胎盘的部位合点和通过胎盘的部位功能区的作用功能区的作用第三节第三节 各类免疫球蛋白的主要特性各类免疫球蛋白的主要特性一、一、IgGl 血清含量最高(血清含量最高(75%)半衰期长()半衰期长(23d)l主要抗感染抗体主要抗感染抗体(具有抗菌

8、、抗病毒、中和毒具有抗菌、抗病毒、中和毒素等素等)。l唯一能通过胎盘的唯一能通过胎盘的Igl再次应答的主要抗体再次应答的主要抗体l具有多种功能:具有多种功能:结合、凝集抗原结合、凝集抗原中和细菌毒素、中和细菌毒素、中和病毒中和病毒激活补体激活补体调理吞噬调理吞噬ADCCADCC二、二、IgMl 分子量最大的分子量最大的分子量最大的分子量最大的 IgIg(五聚体)五聚体)l在个体发育过程中最早出现的抗体(胚胎发育在个体发育过程中最早出现的抗体(胚胎发育晚期即可出现)晚期即可出现)l l是抗原刺激后出现最早的抗体,半衰期短,故是抗原刺激后出现最早的抗体,半衰期短,故是抗原刺激后出现最早的抗体,半衰

9、期短,故是抗原刺激后出现最早的抗体,半衰期短,故检测检测检测检测IgMIgM水平可用于传染病的早期诊断。水平可用于传染病的早期诊断。水平可用于传染病的早期诊断。水平可用于传染病的早期诊断。l激活补体、裂解细菌、调理吞噬等作用均比激活补体、裂解细菌、调理吞噬等作用均比IgG更有效更有效三、三、IgAl分为血清型和分泌型分为血清型和分泌型(sIgAsIgA)两种。两种。l血清型血清型IgAIgA为单体。主要存在于血清中。为单体。主要存在于血清中。lsIgAsIgA为双聚体为双聚体。主要存在于唾液、泪液、。主要存在于唾液、泪液、以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表面

10、的分泌液中。表面的分泌液中。是机体局部黏膜抗感是机体局部黏膜抗感染的重要因素。染的重要因素。四、四、IgDl l1 1、血清血清血清血清IgDIgD含量低。含量低。含量低。含量低。l l2 2、膜型、膜型、膜型、膜型IgDIgD存在于成熟存在于成熟存在于成熟存在于成熟B B细胞表面,细胞表面,细胞表面,细胞表面,为为为为BCRBCR,是,是,是,是B B细胞成熟的标志。细胞成熟的标志。细胞成熟的标志。细胞成熟的标志。五、五、IgEl血清含量最低血清含量最低l介导介导型超敏反型超敏反应。应。第四节、免疫球蛋白的生物学功能第四节、免疫球蛋白的生物学功能一、特异性结合抗原一、特异性结合抗原 识别和结

11、合特异性抗原识别和结合特异性抗原二、激活补体二、激活补体:IgM,IgG1-3;IgG4,IgA,IgE IgM,IgG1-3;IgG4,IgA,IgE 三、结合细胞表面的三、结合细胞表面的FcFc受体发挥受体发挥 调理作用、调理作用、ADCCADCC作用、介导作用、介导I I型超敏反应型超敏反应 穿过胎盘和黏膜穿过胎盘和黏膜选择性传递选择性传递IgGIgG分子结合抗原前后的构象变化分子结合抗原前后的构象变化Fab段段Fc段段C1q结结合位点合位点被屏障被屏障结合抗原之前结合抗原之前CH1CH2暴露的暴露的C1q结结合位点合位点结合抗原之后结合抗原之后IgMCH3区,区,IgGCH2区区中和作

12、用中和作用激活补体经典途径,溶解抗原靶细胞激活补体经典途径,溶解抗原靶细胞激活补体经典途径,溶解抗原靶细胞激活补体经典途径,溶解抗原靶细胞调理吞噬作用调理吞噬作用调理吞噬作用调理吞噬作用ADCC ADCC 效效 应应NKNKADCCADCC第五节第五节 抗体的制备抗体的制备一、多克隆抗体一、多克隆抗体 指由不同指由不同B B细胞克隆产生的针对细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。抗体混合物。如如:免疫血清(含多种特异性抗体)免疫血清(含多种特异性抗体)二、二、单克隆抗体单克隆抗体由单一克隆由单一克隆B B细胞产生的,只识别抗原分细胞产生的,只

13、识别抗原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。特点:具有高度均一性。特点:具有高度均一性。三、三、基因工程抗体基因工程抗体 在在DNADNA水平对水平对IgIg基因进行切割、拼接或基因进行切割、拼接或修饰,导入受体细胞表达的抗体。修饰,导入受体细胞表达的抗体。如:如:人人-鼠嵌合抗体鼠嵌合抗体 改型抗体改型抗体 l l、名词解释:抗体(、名词解释:抗体(、名词解释:抗体(、名词解释:抗体(AbAb)免疫球蛋白(免疫球蛋白(免疫球蛋白(免疫球蛋白(IgIg)IgIg超超超超变区变区变区变区IgIg可变区可变区可变区可变区l lIgIg恒定区恒定区恒定区恒定区CDR

14、CDRFabFabFcFc单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体 l l二、问答题:二、问答题:二、问答题:二、问答题:l l1 1、试述抗体分子的分子结构、功能区和酶解片断。、试述抗体分子的分子结构、功能区和酶解片断。、试述抗体分子的分子结构、功能区和酶解片断。、试述抗体分子的分子结构、功能区和酶解片断。l l2 2、简述抗体的主要生物学功能。简述抗体的主要生物学功能。简述抗体的主要生物学功能。简述抗体的主要生物学功能。l l3 3、简述五类简述五类简述五类简述五类IgIg分子的特性及功能。分子的特性及功能。分子的特性及功能。分子的特性及功能。l l4 4、抗体分子的抗体分子的抗体分子的抗体分子的FcFc受体主要有哪些?各有何作用?受体主要有哪些?各有何作用?受体主要有哪些?各有何作用?受体主要有哪些?各有何作用?肥大细胞肥大细胞I I I I型超敏反应型超敏反应型超敏反应型超敏反应

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