《氨基酸和肽》PPT课件.ppt

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1、请做好请做好上课准备上课准备第一章第一章 蛋白质化学蛋白质化学 Chapter 1 protein蛋白质protein的生物学意义1.1.生物化学反应需酶(生物化学反应需酶(生物化学反应需酶(生物化学反应需酶(proteinprotein)来催化)来催化)来催化)来催化2.2.小分子物质运输需小分子物质运输需小分子物质运输需小分子物质运输需proteinprotein协助协助协助协助3.3.肌肉收缩(运动)肌球蛋白和肌动蛋白的相对滑动肌肉收缩(运动)肌球蛋白和肌动蛋白的相对滑动肌肉收缩(运动)肌球蛋白和肌动蛋白的相对滑动肌肉收缩(运动)肌球蛋白和肌动蛋白的相对滑动4.4.干扰素(干扰素(干扰素

2、(干扰素(proteinprotein)和高度专一的抗体()和高度专一的抗体()和高度专一的抗体()和高度专一的抗体(proteinprotein)架)架)架)架构防御体系构防御体系构防御体系构防御体系5.5.遗传信息的控制遗传信息的控制遗传信息的控制遗传信息的控制6.6.细胞膜的通透性细胞膜的通透性细胞膜的通透性细胞膜的通透性7.7.高等动物的记忆、识别机构等高等动物的记忆、识别机构等高等动物的记忆、识别机构等高等动物的记忆、识别机构等蛋白质的元素组成50-55%碳碳6-8%氢氢20-23%氧氧15-18%氮氮0-4%硫硫微量微量P、Fe、Zn、Cu、Mo、I等等氮含量平均值为氮含量平均值为

3、16%洗涤剂专用脂肪酶洗涤剂专用脂肪酶洗涤剂专用脂肪酶洗涤剂专用脂肪酶蛋白质的氨基酸组成蛋白质的构件分子(基本组成单位):氨基酸蛋白质的构件分子(基本组成单位):氨基酸氨基酸:含有氨基的羧酸氨基酸:含有氨基的羧酸蛋白质由蛋白质由20种氨基酸组成种氨基酸组成19种种-氨基酸氨基酸1种种-亚氨基酸(亚氨基酸(Pro)OOHHC CNN组成蛋白质的基本单位是组成蛋白质的基本单位是氨基酸(氨基酸(amino acidamino acid)。如将天然的蛋白质完全水解,如将天然的蛋白质完全水解,最后都可得到约最后都可得到约2020种不同的氨基酸。种不同的氨基酸。这些氨基酸中,大部分属于这些氨基酸中,大部分

4、属于L-L-氨基酸氨基酸。其中,其中,脯氨酸脯氨酸属于属于L-L-亚氨基酸,亚氨基酸,而而甘氨酸甘氨酸则属于则属于-氨基酸。氨基酸。一、氨基酸结构和分类一、氨基酸结构和分类1、氨基酸的结构通式、氨基酸的结构通式除脯氨酸除脯氨酸除脯氨酸除脯氨酸 Pro Pro 外(甘氨酸外(甘氨酸外(甘氨酸外(甘氨酸 Gly Gly 的的的的R R基为基为基为基为HH),),),),其他均具有如下结构通式。其他均具有如下结构通式。其他均具有如下结构通式。其他均具有如下结构通式。-氨基酸的通式氨基酸的通式可变部分可变部分不变部分不变部分 氨基酸的结构特点氨基酸的结构特点 都是都是都是都是-氨基酸,氨基酸,氨基酸,

5、氨基酸,-C-C上连有上连有上连有上连有1 1个个个个-NHNH2 2 和和和和1 1个个个个-COOH-COOH;pHpH中性,氨基酸为中性,氨基酸为中性,氨基酸为中性,氨基酸为兼性离子兼性离子兼性离子兼性离子,即即即即-NH-NH3 3和和和和-COO-COO ;R R OONH3NH3R R 氨基酸的结构特点氨基酸的结构特点 除了除了除了除了GlyGly,C C 为手性为手性为手性为手性C C原子,原子,原子,原子,IleIle(异亮)和(异亮)和(异亮)和(异亮)和ThrThr(苏)(苏)(苏)(苏)有有有有2 2个手性个手性个手性个手性C;C;-C-C都为不对称碳原子,氨基酸具有旋光

6、性,表示为左都为不对称碳原子,氨基酸具有旋光性,表示为左都为不对称碳原子,氨基酸具有旋光性,表示为左都为不对称碳原子,氨基酸具有旋光性,表示为左(-)(-)右右右右(+)(+);R R 每一种氨基酸都有每一种氨基酸都有每一种氨基酸都有每一种氨基酸都有D-D-型和型和型和型和L-L-型两种立体异构体,型两种立体异构体,型两种立体异构体,型两种立体异构体,将羧基写在将羧基写在将羧基写在将羧基写在-C-C上端时,氨基在右边为上端时,氨基在右边为上端时,氨基在右边为上端时,氨基在右边为D-D-型,型,型,型,氨基在左边为氨基在左边为氨基在左边为氨基在左边为L-L-型;型;型;型;构成蛋白质中的氨基酸,

7、即构成蛋白质中的氨基酸,即构成蛋白质中的氨基酸,即构成蛋白质中的氨基酸,即 20 20种(实种(实种(实种(实1919)都为)都为)都为)都为L-L-型;型;型;型;手手 性性-氨基酸的分子构型氨基酸的分子构型一氨基一羧基氨基酸又称中性氨基酸,一氨基一羧基氨基酸又称中性氨基酸,一氨基二羧基氨基酸又称酸性氨基酸一氨基二羧基氨基酸又称酸性氨基酸(Glu(Glu、Asp)Asp),二氨基一羧基氨基酸又称碱性氨基酸二氨基一羧基氨基酸又称碱性氨基酸(Arg(Arg、LysLys、His)His)。脯氨酸和羟脯氨酸是亚氨酸,因存在于天然蛋白,习惯上脯氨酸和羟脯氨酸是亚氨酸,因存在于天然蛋白,习惯上也列入氨

8、基酸。也列入氨基酸。蛋白质中存在的氨基酸皆为蛋白质中存在的氨基酸皆为L-L-型,但在微生物体内及抗菌型,但在微生物体内及抗菌素中亦有素中亦有D-D-型氨基酸存在型氨基酸存在(自由或肽结合形式自由或肽结合形式)。2、20 种氨基酸的结构种氨基酸的结构 甘氨酸甘氨酸 Glycine 中性中性脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸无手性无手性侧链小侧链小占位小占位小易添进易添进 中性中性脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸甘氨酸甘氨酸 Glycine 丙氨酸丙氨酸 Alanine1 1手性手性 C C饱和脂链饱和脂链高度疏水高度疏水维持结构维持结构 OOHHC CNN 甘氨酸甘氨酸 Glycine 丙氨酸丙氨酸 Alanin

9、e缬氨酸缬氨酸 Valine 中性中性脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸 甘氨酸甘氨酸 Glycine 丙氨酸丙氨酸 Alanine缬氨酸缬氨酸 Valine亮氨酸亮氨酸 Leucine 中性中性脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸 甘氨酸甘氨酸 Glycine 丙氨酸丙氨酸 Alanine缬氨酸缬氨酸 Valine亮氨酸亮氨酸 Leucine异亮氨酸异亮氨酸 Ileucine中性中性脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸2 2手性手性 C C 饱和脂链饱和脂链高度疏水高度疏水 维持结构维持结构 中性脂肪族氨基酸甘氨酸甘氨酸 Glycine 丙氨酸丙氨酸 Alanine缬氨酸缬氨酸 Valine亮氨酸亮氨酸 Leucine异亮氨

10、酸异亮氨酸 Ileucine1 甘氨酸甘氨酸 Glycine 丙氨酸丙氨酸 Alanine缬氨酸缬氨酸 Valine亮氨酸亮氨酸 Leucine异亮氨酸异亮氨酸 Ileucine脯氨酸脯氨酸 Proline 亚氨基酸亚氨基酸手性手性 C C 吡咯烷环吡咯烷环亚氨酸亚氨酸 引入转折引入转折 甲硫氨酸甲硫氨酸 Methionine含硫氨基酸含硫氨基酸手性手性 C C含有含有 S S疏水性疏水性可极化可极化 甲硫氨酸甲硫氨酸 Methionine半胱氨酸半胱氨酸 Cysteine含硫氨基酸含硫氨基酸手性手性 C C含含SHSH高活性高活性稳结构稳结构 含硫氨基酸甲硫氨酸甲硫氨酸 Methionine

11、半胱氨酸半胱氨酸 Cysteine 苯丙氨酸苯丙氨酸Phenylalanine 芳香族氨基酸芳香族氨基酸1 1手性手性 C C芳香侧链芳香侧链含有苯基含有苯基紫外吸收紫外吸收 芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯丙氨酸苯丙氨酸Phenylalanine酪氨酸酪氨酸Tyrosine1 1手性手性 C C 芳香侧链芳香侧链含有酚基含有酚基极性基团极性基团 紫外吸收紫外吸收 芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯丙氨酸苯丙氨酸 Phenylalanine酪氨酸酪氨酸 Tyrosine色氨酸色氨酸 Trytophan1 1手性手性 C C 芳香侧链芳香侧链含吲哚基含吲哚基极性基团极性基团 紫外吸收紫外吸收 芳香族氨基酸苯丙

12、氨酸苯丙氨酸 Phenylalanine酪氨酸酪氨酸 Tyrosine色氨酸色氨酸 Trytophan赖氨酸赖氨酸 Lysine 碱性氨基酸碱性氨基酸手性手性 C C双氨基双氨基-NH-NH2 2带正电带正电 赖氨酸赖氨酸 Lysine精氨酸精氨酸 Arginine 碱性氨基酸碱性氨基酸手性手性 C C含胍基含胍基碱性强碱性强带正电带正电 碱性氨基酸碱性氨基酸赖氨酸赖氨酸 Lysine精氨酸精氨酸 Arginine组氨酸组氨酸 Histidine手性手性 C C咪唑环咪唑环离子化离子化带正电带正电 碱性氨基酸赖氨酸赖氨酸 Lysine精氨酸精氨酸 Arginine组氨酸组氨酸 Histidin

13、e 天冬氨酸天冬氨酸 Aspartate 酸性氨基酸酸性氨基酸手性手性 C C双羧基双羧基-COOH-COOH带负电带负电 天冬氨酸天冬氨酸 Aspartate 谷氨酸谷氨酸 Glutamate 酸性氨基酸酸性氨基酸手性手性 C C 双羧基双羧基-COOH -COOH 带正电带正电 酸性氨基酸天冬氨酸天冬氨酸 Aspartate 谷氨酸谷氨酸 Glutamate 丝氨酸丝氨酸 Serine 含羟基氨基酸含羟基氨基酸手性手性 C C含含-OH-OH不带电不带电 丝氨酸丝氨酸 Serine 苏氨酸苏氨酸 Threonine 含羟基氨基酸含羟基氨基酸含羟基氨基酸丝氨酸丝氨酸 Serine 苏氨酸苏氨

14、酸 Threonine 天冬酰胺天冬酰胺 Asparagine 含酰胺氨基酸含酰胺氨基酸手性手性 C C酰胺基酰胺基不带电不带电极性强极性强在表面在表面 天冬酰胺天冬酰胺 Asparagine谷酰胺谷酰胺 Glutamine 含酰胺氨基酸含酰胺氨基酸含酰胺基氨基酸天冬酰胺天冬酰胺 Asparagine谷酰胺谷酰胺 Glutamine(1 1)侧链)侧链R R基的化学结构基的化学结构脂肪族,芳香族,含脂肪族,芳香族,含S S,醇类,碱性,酸性,含酰胺基,醇类,碱性,酸性,含酰胺基 (2 2)侧链)侧链R R基的极性基的极性非极性,极性不带电,极性带正电,极性带负电非极性,极性不带电,极性带正电,

15、极性带负电(3 3)是否构成蛋白质)是否构成蛋白质常见蛋白质氨基酸,不常见蛋白质氨基酸,非蛋白质氨基酸常见蛋白质氨基酸,不常见蛋白质氨基酸,非蛋白质氨基酸(4 4)营养学角度)营养学角度 必需氨基酸,非必需氨基酸必需氨基酸,非必需氨基酸3、氨基酸的分类、氨基酸的分类 必需氨基酸和非必需氨基酸必需氨基酸(必需氨基酸(必需氨基酸(必需氨基酸(essential amino acidessential amino acid):人体(或其它脊椎动物)所:人体(或其它脊椎动物)所:人体(或其它脊椎动物)所:人体(或其它脊椎动物)所必不可少,而机体内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸。必不可少,而机体

16、内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸。必不可少,而机体内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸。必不可少,而机体内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸。必需氨基酸共有必需氨基酸共有必需氨基酸共有必需氨基酸共有+2+2种:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸种:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸种:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸种:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。组氨酸和精(蛋氨酸)、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。组氨酸和精(蛋氨酸)、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。组氨酸和精(蛋氨酸)、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。组氨酸和精氨

17、酸合成效率较低,尤其对于婴儿。氨酸合成效率较低,尤其对于婴儿。氨酸合成效率较低,尤其对于婴儿。氨酸合成效率较低,尤其对于婴儿。非必需氨基酸(非必需氨基酸(非必需氨基酸(非必需氨基酸(nonessential amino acidnonessential amino acid):):):):可在动物体内合成,作可在动物体内合成,作可在动物体内合成,作可在动物体内合成,作为营养源不需要从外部补充的氨基酸。为营养源不需要从外部补充的氨基酸。为营养源不需要从外部补充的氨基酸。为营养源不需要从外部补充的氨基酸。二、氨基酸的理化性质二、氨基酸的理化性质1.-氨基酸为无色晶体,熔点极高,氨基酸为无色晶体,熔

18、点极高,一般在一般在200以上以上2.味道随不同氨基酸而异味道随不同氨基酸而异3.溶解度差别较大溶解度差别较大除甘氨酸外,均含有一个手性除甘氨酸外,均含有一个手性除甘氨酸外,均含有一个手性除甘氨酸外,均含有一个手性 -碳原子,碳原子,碳原子,碳原子,因此都具有旋光性。因此都具有旋光性。因此都具有旋光性。因此都具有旋光性。表示为左表示为左表示为左表示为左(-)(-)右右右右(+)(+)比旋光度是氨基酸的重要物理常数之一,比旋光度是氨基酸的重要物理常数之一,比旋光度是氨基酸的重要物理常数之一,比旋光度是氨基酸的重要物理常数之一,是鉴别各种氨基酸的重要依据。是鉴别各种氨基酸的重要依据。是鉴别各种氨基

19、酸的重要依据。是鉴别各种氨基酸的重要依据。4、氨基酸的旋光性、氨基酸的旋光性5、氨基酸的光吸收、氨基酸的光吸收构成蛋白质的构成蛋白质的构成蛋白质的构成蛋白质的20202020种氨基酸在可见光区都没有光吸收,种氨基酸在可见光区都没有光吸收,种氨基酸在可见光区都没有光吸收,种氨基酸在可见光区都没有光吸收,但在远紫外区但在远紫外区但在远紫外区但在远紫外区(220nm)(220nm)(220nm)(pI阴离子阴离子pH=pI兼性离子兼性离子 +OH-+H+pHpI阳离子阳离子+H+加加 酸酸H+H+H+总电荷总电荷“+”H H4 4N N+加加 碱碱H2O H3NCOOOH-OH-OH-总电荷总电荷“

20、”氨基酸的等电点氨基酸的等电点当当当当溶溶溶溶液液液液浓浓浓浓度度度度为为为为某某某某一一一一pHpHpHpH值值值值时时时时,氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸分分分分子子子子中中中中所所所所含含含含的的的的-NH-NH-NH-NH3 3 3 3+和和和和-COO-COO-COO-COO-数数数数目目目目正正正正好好好好相相相相等等等等,净净净净电电电电荷荷荷荷为为为为0 0 0 0,这这这这一一一一pHpHpHpH值即为氨基酸的等电点,简称值即为氨基酸的等电点,简称值即为氨基酸的等电点,简称值即为氨基酸的等电点,简称pIpIpIpI 。在在在在等等等等电电电电点点点点时时时时,氨氨氨氨基基基基酸酸酸

21、酸既既既既不不不不向向向向正正正正极极极极也也也也不不不不向向向向负负负负极极极极移移移移动,即氨基酸处于动,即氨基酸处于动,即氨基酸处于动,即氨基酸处于两性离子状态两性离子状态两性离子状态两性离子状态。侧侧侧侧链链链链不不不不含含含含离离离离解解解解基基基基团团团团的的的的中中中中性性性性氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸,其其其其等等等等电电电电点点点点是是是是它它它它的的的的p p p pK K K K1 1 1 1和和和和p p p pK K K K2 2 2 2的算术平均值:的算术平均值:的算术平均值:的算术平均值:p p p pI I I I=(p=(p=(p=(pK K K K1 1 1

22、1+p+p+p+pK K K K2 2 2 2)/2)/2)/2)/2 同同同同样样样样,对对对对于于于于侧侧侧侧链链链链含含含含有有有有可可可可解解解解离离离离基基基基团团团团的的的的氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸,其其其其p p p pI I I I值值值值也决定于两性离子两边的也决定于两性离子两边的也决定于两性离子两边的也决定于两性离子两边的p p p pK K K K值的算术平均值。值的算术平均值。值的算术平均值。值的算术平均值。酸性氨基酸:酸性氨基酸:酸性氨基酸:酸性氨基酸:p p p pI I I I=(p=(p=(p=(pK K K K1 1 1 1+p+p+p+pK K K KR-C

23、OOR-COOR-COOR-COO-)/2)/2)/2)/2 硷性氨基酸:硷性氨基酸:硷性氨基酸:硷性氨基酸:p p p pI I I I=(p=(p=(p=(pK K K K2 2 2 2+p+p+p+pK K K KR-NH2 R-NH2 R-NH2 R-NH2)/2)/2)/2)/2 酸性溶液酸性溶液 晶体状态晶体状态 碱性溶液碱性溶液 或水溶液中或水溶液中 即即等电点(等电点(pIpI)pI 等电点时的等电点时的等电点时的等电点时的pHpHpHpH不同氨基酸等电点不同氨基酸等电点不同氨基酸等电点不同氨基酸等电点(pI)不同不同不同不同提问:提问:为什么?为什么?为什么?为什么?答案答案

24、答案答案:-R-R-R-R 有电性区别。中性氨基酸有电性区别。中性氨基酸有电性区别。中性氨基酸有电性区别。中性氨基酸pIpIpIpI一般为一般为一般为一般为提问:提问:为什么偏酸性?为什么偏酸性?为什么偏酸性?为什么偏酸性?答案答案答案答案:-COOH-COOH-COOH-COOH解离程度略大于解离程度略大于解离程度略大于解离程度略大于-NH-NH-NH-NH2 2 2 2的得电子能力的得电子能力的得电子能力的得电子能力 提问:提问:酸性氨基酸的酸性氨基酸的酸性氨基酸的酸性氨基酸的pIpIpIpI(更偏酸、更偏碱更偏酸、更偏碱)?)?l l答案答案答案答案:更酸更酸(3.0 3.0 3.0 3

25、.0 左左左左 右右右右)l l碱碱碱碱 性性性性 氨氨氨氨 基基基基 酸酸酸酸pIpIpIpI 更更更更 碱(碱(碱(碱(7.610.7)(7.610.7)(7.610.7)(7.610.7)(只只只只 有有有有 三三三三 种)种)种)种)提问:提问:大大大大 多多多多 数数数数 氨氨氨氨 基基基基 酸酸酸酸 在在在在 中中中中 性(性(性(性(pH=7pH=7pH=7pH=7)时,时,时,时,带带带带 电?电?电?电?负负提问:提问:等电点时的氨基酸特点是?等电点时的氨基酸特点是?等电点时的氨基酸特点是?等电点时的氨基酸特点是?答案答案答案答案:两性离子,溶解度最小,容易沉淀。两性离子,溶

26、解度最小,容易沉淀。两性离子,溶解度最小,容易沉淀。两性离子,溶解度最小,容易沉淀。提问:提问:为什么?为什么?为什么?为什么?答案答案答案答案:同性排斥力小,凝结沉淀同性排斥力小,凝结沉淀同性排斥力小,凝结沉淀同性排斥力小,凝结沉淀其它:吸光性其它:吸光性其它:吸光性其它:吸光性w含含苯环氨基酸苯环氨基酸大大键键吸收紫外光吸收紫外光,蛋白质故具紫外吸光性,蛋白质故具紫外吸光性w实验室利用紫外分光光度仪在实验室利用紫外分光光度仪在280nm280nm处测定蛋白质含量;处测定蛋白质含量;三、几种重要的不常见氨基酸三、几种重要的不常见氨基酸 在在在在少少少少数数数数蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质中中中中

27、分分分分离离离离出出出出一一一一些些些些不不不不常常常常见见见见的的的的氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸,通通通通常称为常称为常称为常称为不常见蛋白质氨基酸不常见蛋白质氨基酸不常见蛋白质氨基酸不常见蛋白质氨基酸。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸衍生而来的。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸衍生而来的。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸衍生而来的。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸衍生而来的。其其其其中中中中重重重重要要要要的的的的有有有有4-4-4-4-羟羟羟羟基基基基脯脯脯脯氨氨氨氨酸酸酸酸、5-5-5-5-羟羟羟羟基基基基赖赖赖赖氨氨氨氨酸酸酸酸、N-N-N-N-甲甲甲甲基基基基赖氨酸赖氨酸赖氨酸赖氨酸

28、和和和和3,5-3,5-3,5-3,5-二碘酪氨酸二碘酪氨酸二碘酪氨酸二碘酪氨酸等。等。等。等。不常见蛋白质氨基酸的结构不常见蛋白质氨基酸的结构四、氨基酸的化学性质氨基酸的化学性质1 1-氨基参与的反应氨基参与的反应茚三酮反应茚三酮反应DNFBDNFB反应反应DNS-CIDNS-CI反应反应PITCPITC反应反应-氨基和茚三酮反应氨基和茚三酮反应用途用途:根据根据570nm下的颜色强度来计算氨基酸下的颜色强度来计算氨基酸 和蛋白质的浓度。和蛋白质的浓度。茚三酮茚三酮-氨基酸(弱酸条件下)氨基酸(弱酸条件下)还原茚三酮还原茚三酮 NHNH3 3COCO2 2RCHORCHO茚三酮茚三酮NHNH

29、3 3还原茚三酮(弱酸条件下)还原茚三酮(弱酸条件下)紫色化合物(紫色化合物(570 nm570 nm)茚三酮茚三酮ProPro还原茚三酮(弱酸条件下)还原茚三酮(弱酸条件下)亮黄色化合物(亮黄色化合物(440 nm440 nm)可见分光光度计一般用钨灯,一般用钨灯,测定波长范围测定波长范围3201000 nm 玻璃比色皿玻璃比色皿用途用途:根据根据570nm颜色强度计算氨基酸和颜色强度计算氨基酸和 蛋白质浓度。蛋白质浓度。法医学上用于采集犯罪现场的指纹。法医学上用于采集犯罪现场的指纹。用途:用途:Sanger试剂,鉴定蛋白质和多肽的试剂,鉴定蛋白质和多肽的N-末端末端 氨基酸残基。氨基酸残基

30、。-氨基和氨基和2,4-2,4-二硝基氟苯反应二硝基氟苯反应(DNFB)(DNFB)ProProDNFBDNFB(碱性条件下)(碱性条件下)DNP-Pro DNP-Pro(黄色)(黄色)酸水解酸水解 DNP-aa+DNP-aa+各种游离的各种游离的aa aa 纸层析、薄层层析、纸层析、薄层层析、HPLCHPLC 分析鉴定分析鉴定用途用途:用于保护氨基以及肽链的氨基端测定等用于保护氨基以及肽链的氨基端测定等。-氨基和丹磺酰氯反应氨基和丹磺酰氯反应(DNS-CI)N GlyAlaSer C DNS-CI DNSGlyAlaSer C 水解水解 DNSGly +Ala +Ser DNS-AA在紫外光

31、激发后发黄色荧光在紫外光激发后发黄色荧光 用途:用途:Edman反应,反应,蛋白质或多肽氨基酸序列测定蛋白质或多肽氨基酸序列测定。-氨基和苯异硫氰酸酯反应氨基和苯异硫氰酸酯反应(PITC)aaPITC(弱碱下)(弱碱下)PTC-aa(黄色)(黄色)酸和硝基甲烷中环化酸和硝基甲烷中环化 PTH-aa 层析层析 分析鉴定分析鉴定五五、肽、肽肽键(酰胺键)肽键(酰胺键)肽键(酰胺键)肽键(酰胺键)方向方向方向方向从从从从N N C C编码编码编码编码N NC C肽键的形成N NC C读法:读法:丝氨酰丝氨酰缬氨酰缬氨酰酪氨酰酪氨酰天冬氨酰天冬氨酰谷氨酰胺谷氨酰胺六六、天然活性肽、天然活性肽谷胱甘肽谷

32、胱甘肽GSH/GSSG催产素和加压素催产素和加压素胰岛素胰岛素阿斯巴甜阿斯巴甜谷胱甘肽GSH/GSSG 还原型还原型/氧化型氧化型三肽,含巯基三肽,含巯基抗氧化,除自由基抗氧化,除自由基整合解毒整合解毒GSH&GSSG/还原型还原型&氧化型氧化型催产素使子宫和乳腺平滑肌收缩,具催产催产素使子宫和乳腺平滑肌收缩,具催产和促乳腺排乳作用。和促乳腺排乳作用。加压素也称抗利尿激素,调节水代谢。加压素也称抗利尿激素,调节水代谢。促进血管平滑肌收缩,升高血压,促进血管平滑肌收缩,升高血压,减少排尿。减少排尿。胰岛素胰岛素由胰岛素由胰岛素由胰岛素由A A、B B两个肽链组成。两个肽链组成。两个肽链组成。两个

33、肽链组成。人胰岛素的人胰岛素的人胰岛素的人胰岛素的A A链有链有链有链有1111种种种种2121个氨基酸,个氨基酸,个氨基酸,个氨基酸,B B链有链有链有链有1515种种种种3030个氨基酸,个氨基酸,个氨基酸,个氨基酸,共共共共1616种种种种5151个氨基酸组成。个氨基酸组成。个氨基酸组成。个氨基酸组成。2 2个链间二硫键:个链间二硫键:个链间二硫键:个链间二硫键:A7-B7A7-B7、A20-B19A20-B19;1 1个链内二硫键:个链内二硫键:个链内二硫键:个链内二硫键:A A链中链中链中链中A6-A11A6-A11。调节糖代谢调节糖代谢调节糖代谢调节糖代谢 ,降低血糖,降低血糖,降

34、低血糖,降低血糖链链间间二二硫硫键键链链内内二二硫硫键键A A链和链和链和链和B B链链链链分别用黄色和蓝色显示分别用黄色和蓝色显示分别用黄色和蓝色显示分别用黄色和蓝色显示 两条肽链卷曲方式,二硫键用球棍模型两条肽链卷曲方式,二硫键用球棍模型两条肽链卷曲方式,二硫键用球棍模型两条肽链卷曲方式,二硫键用球棍模型 “球球球球”表示原子,表示原子,表示原子,表示原子,“棍棍棍棍”表示化学表示化学表示化学表示化学键键键键C C、N N和和和和OO分别用黄、蓝和红显示分别用黄、蓝和红显示分别用黄、蓝和红显示分别用黄、蓝和红显示球棍模型球棍模型球棍模型球棍模型条带模型条带模型条带模型条带模型六、氨基酸的氨基酸的分离分析分离分析分配柱层析分配柱层析:支持剂具亲水性的不溶性物质,支持剂具亲水性的不溶性物质,如纤维素、淀粉、硅胶等。如纤维素、淀粉、硅胶等。滤纸层析滤纸层析:薄层层析薄层层析:离子交换层析离子交换层析:阴离子交换树脂阴离子交换树脂-N(CH-N(CH3 3)3 3OHOH,阳离子交换树脂阳离子交换树脂-SO-SO3 3H H电泳电泳:

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