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1、第七章第七章 细菌学各论细菌学各论第一节第一节 球菌属球菌属 第二节第二节 肠杆菌科肠杆菌科 第三节第三节 芽孢杆菌属芽孢杆菌属第四节第四节 梭菌属梭菌属 第五节第五节 其他病原菌其他病原菌第一节第一节 球菌属球菌属一、葡萄球菌1.形态结构2.培养特性3.生化特性4.抵抗力5.分类6.致病性7.微生物学诊断1 形态及染色特征形态及染色特征典型的葡萄球菌为圆形，直径典型的葡萄球菌为圆形，直径，排列成葡萄串，排列成葡萄串状），但在脓汁中或生长在液体培养基中的球菌状），但在脓汁中或生长在液体培养基中的球菌常呈双球或短链排列。用青霉素可诱导成常呈双球或短链排列。用青霉素可诱导成L型。型。葡萄串状，无规

2、则排列，无芽胞，无荚膜葡萄串状，无规则排列，无芽胞，无荚膜（有些有荚膜或粘液层），无鞭毛，不运（有些有荚膜或粘液层），无鞭毛，不运动。动。G+，但衰老、死亡或被白细胞吞噬以及耐青霉素但衰老、死亡或被白细胞吞噬以及耐青霉素的菌株呈阴性。的菌株呈阴性。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(SEM x23,000)葡萄球菌葡萄球菌2 培养特性培养特性需氧或兼性厌氧，触酶阳性，氧化酶阴性，无运需氧或兼性厌氧，触酶阳性，氧化酶阴性，无运动力。动力。可在普通培养基、血琼脂等生长，不在麦康凯可在普通培养基、血琼脂等生长，不在麦康凯（Mac-Conkey）培养基生长。最活温度）培养基生长。最活温度35-40。最适。最

3、适。致病性菌株多能产生脂溶性的黄色或柠檬色素致病性菌株多能产生脂溶性的黄色或柠檬色素，不着染培养基。不着染培养基。能耐受高浓度氯化钠能耐受高浓度氯化钠(5-10%);-却浦漫培养基却浦漫培养基生长表现生长表现1普通平板：湿润，隆起的圆形菌落，直径普通平板：湿润，隆起的圆形菌落，直径12mm，有时达，有时达4-5mm。菌落颜色依菌株而异，。菌落颜色依菌株而异，初为灰白色，继而为金黄色，白色柠檬色。初为灰白色，继而为金黄色，白色柠檬色。色素的形成依培养条件而异，通常在色素的形成依培养条件而异，通常在22或在固体培养或在固体培养基中含有糖、牛乳或血清等，产生色素较多；有基中含有糖、牛乳或血清等，产生

4、色素较多；有O2及及CO2 环境下易形成色素环境下易形成色素。2血平板：菌落较大，明显血平板：菌落较大，明显溶血，溶血菌株多为溶血，溶血菌株多为致病菌。致病菌。3普通肉汤：均匀沉浊，管底有絮状沉淀，培养普通肉汤：均匀沉浊，管底有絮状沉淀，培养23天后，产生菌环，管底形成多量粘稠沉淀。天后，产生菌环，管底形成多量粘稠沉淀。金黄色葡萄球菌平板菌落照片金黄色葡萄球菌平板菌落照片3.生化特征生化特征生化反应并不恒定，常因菌株及培养条件生化反应并不恒定，常因菌株及培养条件而异。而异。多数分解：乳糖，葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，多数分解：乳糖，葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，产酸不产气产酸不产气。致病菌株多分解：甘露醇，

5、硝酸盐还原阳致病菌株多分解：甘露醇，硝酸盐还原阳性，靛基质，接触酶。性，靛基质，接触酶。致病菌株血浆凝固酶试验阳性。致病菌株血浆凝固酶试验阳性。4.抵抗力在无芽孢类细菌中抵抗力最强的一在无芽孢类细菌中抵抗力最强的一 种种.80,30-60min;干燥脓汁存活干燥脓汁存活2-6m;常用消毒剂常用消毒剂:3-5%石炭酸石炭酸,70%乙醇乙醇,1-3%龙胆紫龙胆紫,新洁尔灭新洁尔灭对青霉素一般耐药对青霉素一般耐药,磺胺类药物的敏感性也磺胺类药物的敏感性也较低较低.5.分类分类1过过去去按按色色素素分分：金金色色葡葡萄萄球球菌菌、白白色色葡葡萄萄球球菌菌、柠柠檬檬色葡萄球菌。色葡萄球菌。2伯杰手册（伯

6、杰手册（1974）8版，将该属分为版，将该属分为3个种：个种：金色萄球菌、表皮萄球菌、腐生萄球菌。金色萄球菌、表皮萄球菌、腐生萄球菌。3伯伯杰杰手手册册 9版版（1986）将将该该属属分分为为20多多个个种种，有有：金金色色葡葡萄萄球球菌菌、表表皮皮葡葡萄萄球球菌菌、中中间间葡葡萄萄球球菌菌、猪猪葡葡萄萄球球菌菌、山山羊羊葡葡萄萄球球菌菌、鸡鸡葡葡萄萄球球菌菌、海海豚豚葡葡萄萄球球菌菌、金金色葡萄球菌。色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌（）表皮葡萄球菌（）腐生葡萄球菌（）性状金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素菌落色素金黄色白色白色或柠檬色发酵甘露醇发酵甘露醇 +-凝固酶凝固酶 +-溶素溶

7、素 +-耐热核酸酶耐热核酸酶 +-致病性致病性 +-分类色素、生化反应（致病性葡萄球菌的鉴别）6.致病性及毒力因子致病性及毒力因子 金色葡萄球菌致病性强,常引起两类疾病化脓性疾病化脓性疾病毒素性疾病毒素性疾病，被葡萄球菌污染的食物或饲料引起人或动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。葡萄球菌的某些细胞壁结构具有毒力因子的作用，最主要的毒力因子还是毒素及酶最主要的毒力因子还是毒素及酶。溶血素溶血素(Alphatoxin）肠毒素（肠毒素（Enterotoxin）凝固酶凝固酶(Coagulase)耐热核酸酶耐热核酸酶 Heat stable nuclease 葡萄球菌激酶葡萄球菌激酶(Stap

8、hylokinase，Sak)毒素休克综合征毒素毒素休克综合征毒素1(Toxicshocksyndrometoxin1,TSST-1)溶血素溶血素(hemolysin)毒素：引起牛羊的坏疽性乳腺炎，还可以导致白毒素：引起牛羊的坏疽性乳腺炎，还可以导致白C崩解，作用于平滑肌细胞的血管壁细胞，引起平崩解，作用于平滑肌细胞的血管壁细胞，引起平滑肌收缩，麻痹，坏死。它是不耐热的蛋白质对滑肌收缩，麻痹，坏死。它是不耐热的蛋白质对哺乳动物红哺乳动物红C有溶解作用。人源菌株多产生有溶解作用。人源菌株多产生a毒素。毒素。毒素：引起绵羊、牛红毒素：引起绵羊、牛红C溶解，兔、鸡、马红溶解，兔、鸡、马红C不溶解，与

9、乳腺炎有关，具有热冷溶血现象（不溶解，与乳腺炎有关，具有热冷溶血现象（37不溶血，移至不溶血，移至4时溶血）。动物分离株多产生时溶血）。动物分离株多产生毒素。毒素。毒素：引起多种动物红毒素：引起多种动物红C溶解。溶解。型：培养时型：培养时CO2浓度增加时出现溶血现象，引起浓度增加时出现溶血现象，引起各种动物红各种动物红C溶解。溶解。肠毒素（肠毒素（Enterotoxin）引致人类食物中毒，刺激呕吐中枢，表现呕吐，并引致人类食物中毒，刺激呕吐中枢，表现呕吐，并腹泻。除猫崽及幼猴外，大多数动物对此毒素有很腹泻。除猫崽及幼猴外，大多数动物对此毒素有很强的抵抗力。强的抵抗力。结构相似的一组蛋白质，分子

10、量结构相似的一组蛋白质，分子量26 00034 000，耐热抗酸，能经受耐热抗酸，能经受 10030min或胃蛋白酶的水解。或胃蛋白酶的水解。根据抗原性的差异可将其分为根据抗原性的差异可将其分为A、B、C1-C3、D、E 7个型，个型，AD两型最为常见。两型最为常见。葡萄球菌激酶葡萄球菌激酶(Staphylokinase，Sak)毒素休克综合征毒素毒素休克综合征毒素1(Toxic shock syndrome toxin1,TSST-1)Sak是由金黄色葡萄球菌分泌的一种纤溶酶原激活剂，是由金黄色葡萄球菌分泌的一种纤溶酶原激活剂，可用于急性心肌梗塞可用于急性心肌梗塞(AMl)和血栓塞病人的溶栓

11、治疗。和血栓塞病人的溶栓治疗。Sak是一个单链蛋白，不含二硫键。是一个单链蛋白，不含二硫键。TSST-1旧名肠毒素旧名肠毒素 F和致热性外毒素和致热性外毒素C，是分子量，是分子量为为 22 000的蛋白质，是一种超抗原，引致人类变态的蛋白质，是一种超抗原，引致人类变态反应，发生毒素休克综合征。反应，发生毒素休克综合征。已证实从牛分离的菌株能与人分离株产生同样的已证实从牛分离的菌株能与人分离株产生同样的TSST-1，而绵羊和山羊分离株的，而绵羊和山羊分离株的TSST-1分子量及抗分子量及抗原性均相似，但等电点不同。原性均相似，但等电点不同。TSST-1在动物的致病在动物的致病作用尚不清楚。作用尚

12、不清楚。凝固酶凝固酶(Coagulase)能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固，有助于致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀菌物质的作用，同时也便感染局限化。检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标，致病株多数为凝固酶阳性，非致病株则为阴性。分泌于菌体外，称游离凝固酶游离凝固酶(free coagulase)，类似凝血酶原的作用，结合在菌体表面，称结合凝固酶结合凝固酶(bond coagulase)，或凝聚因子凝聚因子(clumpingfactor)，可使血浆纤维蛋白与菌体交联，引起菌体凝集。凝固酶耐热，经10030min或高压灭菌作用仅降低少量活性；具有抗原性

13、，易被蛋白酶分解破坏。耐热核酸酶（耐热核酸酶（Heat stable nuclease）100作用15min不失去活性，由致病菌株产生。感染部位的组织细胞和白细胞崩解时释放出核酸，使渗出液粘性增加，此酶能迅速分解核酸，利于病菌扩散。目前也将该酶的检测作为鉴定致病菌株目前也将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标之一。的重要指标之一。7.微生物学诊断微生物学诊断1.确定是不是葡萄球菌;病料固体培养基G+,葡萄串状球菌葡萄串状球菌脓汁，血液等脓汁，血液等2.确定是否具有致病性确定是否具有致病性:固体培养基上产生的色素为金黄色固体培养基上产生的色素为金黄色;血平板上产生血平板上产生溶血溶血血血浆浆凝固

14、凝固酶酶试验试验阳性阳性厌厌氧条件下氧条件下发发酵甘露醇酵甘露醇动动物物试验试验阳性阳性家兔皮下接种家兔皮下接种1ml，24h肉汤培养物，可引起肉汤培养物，可引起局部皮肤溃疡坏死；静脉接种，局部皮肤溃疡坏死；静脉接种，于接种后于接种后2448h死亡，剖检可见脏器有大小死亡，剖检可见脏器有大小不等脓肿。不等脓肿。毒素的检查：毒素的检查：发生食物中毒时发生食物中毒时将呕吐物离心取上清将呕吐物离心取上清10030min破坏其它毒素破坏其它毒素注入幼猫静注入幼猫静脉或腹腔脉或腹腔15min2h内出现急性肠炎症状，内出现急性肠炎症状，表明有肠毒素存在。表明有肠毒素存在。八、免疫防治八、免疫防治1加强饲养

15、管理，避免创伤。加强饲养管理，避免创伤。2无好的疫苗，感染病愈后，不产生免疫力，可再次感染。无好的疫苗，感染病愈后，不产生免疫力，可再次感染。3抗生素治疗抗生素治疗表皮葡萄球菌：引起仔猪渗出性皮炎。表皮葡萄球菌：引起仔猪渗出性皮炎。腐生性葡萄球菌：引起尿道感染。腐生性葡萄球菌：引起尿道感染。二二 链球菌链球菌(Streptococcus)分类分类形态与染色形态与染色培养特性培养特性生理生化特性生理生化特性致病性致病性抵抗力抵抗力微生物学诊断微生物学诊断1.分类分类1按溶血能力分：按溶血能力分：型溶血链球菌：菌落周围形成不透明的草绿色型溶血链球菌：菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未溶解，

16、血红蛋白变为绿色，这溶血环，红细胞未溶解，血红蛋白变为绿色，这种细菌致病力不强，多为条件性致病菌。种细菌致病力不强，多为条件性致病菌。型溶血链球菌：菌落周围形成完全透明的溶血型溶血链球菌：菌落周围形成完全透明的溶血环，红环，红C完全溶解，致病力强，引起各种疾病。完全溶解，致病力强，引起各种疾病。型溶血链球菌：无溶血现象，非致病菌。型溶血链球菌：无溶血现象，非致病菌。分类分类根据溶血现象分类溶血现象名称类别致病性草绿色溶血溶血甲型溶血性链球菌多为条件致病菌完全溶血溶血乙型溶血性链球菌致病力强不溶血溶血丙型链球菌无致病性2 形态及染色特征形态及染色特征链球菌呈圆形或卵圆形，直径小于，常排链球菌呈圆

17、形或卵圆形，直径小于，常排列成链状或成双。肉汤内对数生长期的链列成链状或成双。肉汤内对数生长期的链球菌，常呈长链排列。球菌，常呈长链排列。一般致病性链球菌的链较长，非致病性菌一般致病性链球菌的链较长，非致病性菌株较短。株较短。革兰氏阳性。老龄的培养物或被吞噬细胞革兰氏阳性。老龄的培养物或被吞噬细胞吞噬的细菌呈现阴性。吞噬的细菌呈现阴性。除个别除个别D群自外，均无鞭毛。群自外，均无鞭毛。A群等的一些群等的一些菌株有菌毛。菌株有菌毛。A、BC群等多数有荚膜。群等多数有荚膜。链球菌链球菌链球菌链球菌链球菌链球菌链球菌链球菌引起血引起血液和心液和心内膜炎内膜炎链球菌链球菌咽炎和皮肤感染的链球菌咽炎和皮

18、肤感染的链球菌3 培养特性培养特性致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。液、血清、葡萄糖等。大大多多数数为为兼兼性性厌厌氧氧菌菌，少少数数为为厌厌氧氧菌菌。最最适适生生长长温温度度37，。，。在在血血液液琼琼脂脂平平板板上上长长成成直直径径，灰灰白白色色，表表面面光光滑滑，边边缘缘整整齐齐的的小小菌菌落落。血血清清肉肉汤汤中中生生长长，初初是是均均匀匀浑浑浊浊，后后因因细细菌形成长链呈颗粒状沉淀管底，上清透明。菌形成长链呈颗粒状沉淀管底，上清透明。多多数数致致病病菌菌株株具具有有溶溶血血能能力力，溶溶血血环环的的

19、大大小小和和类类型型因因菌菌株株而而异异。B、D群群的的一一些些菌菌株株可可产产生生橙橙红红或或黄黄色色色色素素。3.15%NaCl中中不不生生长长（葡葡萄萄球球菌菌生生长长）、40%胆胆汁汁中中可可生长。生长。化脓性链球菌化脓性链球菌Streptococcus pyogenes4 生化特征生化特征本属细菌都能发酵葡萄糖、蔗糖，对其他糖的利本属细菌都能发酵葡萄糖、蔗糖，对其他糖的利用能力则因不同菌种而异，利用生化特性可作菌用能力则因不同菌种而异，利用生化特性可作菌种鉴定的依据之一种鉴定的依据之一。5 毒素和酶毒素和酶致病性链球菌产生多种毒素和酶，引起多种动物发致病性链球菌产生多种毒素和酶，引起

20、多种动物发病。病。1溶血素：有溶解红溶血素：有溶解红C，杀死白，杀死白C和神经和神经C，毒害，毒害心肌作用，分为对氧敏感和对氧稳定即心肌作用，分为对氧敏感和对氧稳定即O和和S两种。两种。溶血素溶血素O（Steptolysin O SLO）：为蛋白质，）：为蛋白质，对氧敏感，耐热，遇对氧敏感，耐热，遇O2发生氧化失去溶血力，遇发生氧化失去溶血力，遇还原剂可恢复溶血作用还原剂可恢复溶血作用，抗原性强。，抗原性强。溶血素溶血素S（SLS）：含糖的小分子肽，对氧稳定，）：含糖的小分子肽，对氧稳定，对热和酸敏感，无抗原性。对热和酸敏感，无抗原性。2致热外毒素（旧称红疹毒素）：致热外毒素（旧称红疹毒素）：

21、A群产群产生的一种外毒素，皮内注射引起局部或全生的一种外毒素，皮内注射引起局部或全身红疹，有抗原性。身红疹，有抗原性。3DNA酶酶4溶纤维蛋白酶溶纤维蛋白酶5细胞壁上的脂磷壁酸：使细菌吸附于粘细胞壁上的脂磷壁酸：使细菌吸附于粘膜上皮上，其荚膜成分、膜上皮上，其荚膜成分、M蛋白具有抗吞蛋白具有抗吞噬作用。噬作用。6 抵抗力及免疫性抵抗力及免疫性 抵抵抗抗力力 本本属属细细菌菌的的抵抵抗抗力力不不强强，对对热热较较敏敏感感，煮煮沸沸可可很很快快被被杀杀死死，常常用用浓浓度度的的各各种种消消毒毒药药均均能能杀杀死。对青霉素、磺胺类药物敏感死。对青霉素、磺胺类药物敏感。免免疫疫性性 链链球球菌菌的的抗

22、抗原原结结构构比比较较复复杂杂，机机体体感感染染后后有有多多种种抗抗体体产产生生，已已知知抗抗M蛋蛋白白的的抗抗体体具具有有保保护护作作用用，M蛋蛋白白有有多多种种抗抗原原型型，各各型型间间缺缺乏乏有有效效的的交交叉叉保保护护。我我国国研研制制的的猪猪、羊羊链链球球菌菌疫疫苗苗有有较较好好的的免免疫疫效果。效果。7 微生物学诊断微生物学诊断1.取材、涂片、染色、镜检。取材、涂片、染色、镜检。2.分离培养：分离培养：血平板；血平板；血清肉汤。血清肉汤。3.生化试验生化试验4.动物致病性试验：小白鼠腹腔注射动物致病性试验：小白鼠腹腔注射0.20.5ml 24h肉汤培养物，肉汤培养物，24h48h死

23、死亡。亡。5.分群定型：必须作血清学试验。分群定型：必须作血清学试验。微生物学检查法微生物学检查法标本标本直接涂片镜检直接涂片镜检革兰阳性链球菌革兰阳性链球菌分离培养分离培养脓汁，血液，咽喉拭子脓汁，血液，咽喉拭子与金葡菌的鉴别与金葡菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别血清学检查血清学检查抗抗“O”试验（试验（ASO test）：链球菌侵入体内产：链球菌侵入体内产生生SLO，刺激机体产生相应抗体，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中，当两者中和后，在加入和后，在加入SLO 乳胶试剂，因乳胶试剂，因 血清中血清中ASO量量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生很多，未被中和掉的抗体与

24、乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。原理：原理：中和试验中和试验方法：间接凝集方法：间接凝集结果：效价大于结果：效价大于400单位单位意义：意义：风湿热及其活动性的辅助诊断风湿热及其活动性的辅助诊断8 几种重要的链球菌几种重要的链球菌 1无乳链球菌，停乳链球菌，乳房链球菌。无乳链球菌，停乳链球菌，乳房链球菌。都是引起牛，山羊，绵羊乳房炎的病原体，凡是有乳牛的地方，都是引起牛，山羊，绵羊乳房炎的病原体，凡是有乳牛的地方，就有本菌存在。就有本菌存在。CAMP试验试验Christie,Atkins,Much-peterson）在血平板上先接种一条金色

25、葡萄球菌的划线，与此线垂直接种乳在血平板上先接种一条金色葡萄球菌的划线，与此线垂直接种乳汁或分离培养物（但不接触），原来不溶血或溶血不明显的无乳汁或分离培养物（但不接触），原来不溶血或溶血不明显的无乳链球菌在有金色葡萄球菌产物存在时，产生明显链球菌在有金色葡萄球菌产物存在时，产生明显型溶血。此实型溶血。此实验可以区分无乳链球菌与其它链球菌。验可以区分无乳链球菌与其它链球菌。CAMP试试验验不不是是特特异异的的，C、F、G群群中中有有些些链链球球菌菌也也可可产产生生CAMP 现象。猪放线杆菌也有现象。猪放线杆菌也有CAMP现象。现象。原原因因：无无乳乳链链球球菌菌产产生生CAMP因因子子，这这种

26、种因因子子可可接接合合于于被被葡葡萄萄球球菌菌神经磷脂酶神经磷脂酶C改变了的红细胞膜上，引起红改变了的红细胞膜上，引起红C大量溶解。大量溶解。2马链球菌兽疫亚种（旧称兽疫链球菌）马链球菌兽疫亚种（旧称兽疫链球菌）引起马的创伤感染，败血症、子宫炎、流引起马的创伤感染，败血症、子宫炎、流产；产；牛乳房炎、子宫炎。牛乳房炎、子宫炎。猪：败血症，关节炎，流产；猪：败血症，关节炎，流产；羊：败血症，心肌炎，腹膜为，肺炎。羊：败血症，心肌炎，腹膜为，肺炎。鸡：败血症。鸡：败血症。3马链球菌马亚种（旧称马腺疫链球菌）马链球菌马亚种（旧称马腺疫链球菌）引起马的腺疫，存在于马下颌淋巴结的脓引起马的腺疫，存在于马下颌淋巴结的脓灶，鼻液及脓汁中，主要侵害灶，鼻液及脓汁中，主要侵害0.55岁的马。岁的马。4肺炎链球菌：肺炎链球菌：引起人的大叶性肺炎或脑膜炎，引起动物引起人的大叶性肺炎或脑膜炎，引起动物的败血症或肺炎。的败血症或肺炎。形态：排列为双球状，菌体呈卵圆形，矛形态：排列为双球状，菌体呈卵圆形，矛头状或爪子仁状，有明显荚膜。头状或爪子仁状，有明显荚膜。