气相色谱方法验证(共22页).doc

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1、精选优质文档-倾情为你奉上方 案第1版 顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证药业有限公司 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 1 页 生效日期： 编写人： 日 期： 审阅人： 日 期： 批准人： 日 期： QA经理最初方案批准： 总经理：日 期：质量检验部经理：日 期：质量保证部经理：日 期：最终方案批准： 总经理：日 期：质量检验部经理：日 期：质量保证部经理：日 期： 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页

2、： 第 2 页目 录名 称 页 数1 目的32 范围33 仪器与试剂及色谱条件34 验证实验内容45 最终报告20 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： MVP- 017版本号： 第1版共21页： 第 3 页一、目 的1. 验证顶空气相色谱法能否准确、精密的测定一定浓度范围内的原料药中溶剂A和溶剂B的含量。2. 验证顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量是否具有良好的选择性。3. 验证方法在环境、条件发生一定变化时，能否有一定的耐受性。二、范 围适用于药业有限公司原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证，包括：空白试验、精密度、定量限、线

3、性范围、准确度、耐受性等。三、仪器与试剂及色谱条件仪器与试剂GC HP6890N（FID）Column：DB-1301（30m0.32mmI.D.1m）Oven：90Inlet：150Detector: 200Column Pressure:4.8psiColumn flow rate: 0.8ml/minSplit rate: 1:25Sampler Condition: 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 4 页Agilent 7694 Head-space SamplerEquilibration

4、 temperature: 80Equilibration time: 45minTransfer-line temperature: 105Carrier gas: 25ml/minPressurisation time: 0.5minInjection time: 0.20min移液管：25 ml，10ml，2ml 吸量管：2ml 胶头滴管 分析天平 顶空瓶（22ml），容量瓶：50ml微量注射器：25l试剂：DMF（AR）、溶剂B（AR）、溶剂A（AR）、原料药（批号 ）无残溶的原料药四、验证实验内容1. 空白试验（1）DMF用称液管移取2mlDMF于22ml顶空瓶中，加盖，作色谱处理。

5、可接受标准：在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰验证结果：结论：操作者： 核对者： 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 5 页（2）空白取无残留溶媒（在水相结晶，不用溶媒处理）的普青_g于22ml顶空瓶中，用移液管加入2mlDMF，加盖，摇匀，作色谱分析。可接受标准： 在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰。验证结果：结论：操作者： 核对者：2. 精密度2.1 系统适应性溶液配制贮备液：向50ml容量瓶中精确加入溶剂B0.05g，溶剂A0.5g，用DMF定容。标准溶液A：称取贮备液1.2800g于50ml容量

6、瓶中，用DMF溶液定容。精密称1.0g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml标准溶液A,加盖作色谱处理，各重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。可接受标准： RSD5验证结果： 1.贮备液配制：称取溶剂B g,溶剂A g，用DMF定容至50ml。 2.标准溶液A:称取贮备液 g于50 ml容量瓶中,用DMF溶液定容. 3.称取无残留的原料药 , , , ,于22ml顶空瓶中，加入2 ml标准溶液A,加盖作色谱处理。 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 6 页标准溶液A色谱数据表瓶号溶剂A峰面积

7、溶剂B峰面积1.2.3.4.平均RSD结论：操作者: 核对者:3. 线性范围：3.1 线性标准溶液配制：贮备液a:用移液管移取10ml贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。1标准液：用吸量管移取1.25ml贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成1贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22 ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含500ppm溶剂A及50ppm溶剂B）。2标准液：用移液管移取25ml1贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成2贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含250ppm溶剂A及25ppm溶

8、剂B）。3标准液：用移液管移取25ml2贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成3贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含125ppm溶剂A及12.5ppm溶剂B）。 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 7 页4标准液：用移液管移取25ml3贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成4贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含62.5ppm溶剂A及6.25ppm溶剂B）。5标准液：用移液管移取

9、25ml4贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成5贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含31.3ppm溶剂A及3.13ppm溶剂B）。分别取1、2、3、4、5线性标准液，加盖作色谱处理。按照线性标准液15的浓度与其对应的溶剂B及溶剂A的峰面积，作线性回归得到溶剂B和溶剂A的工作曲线。可接受标准：0.99线性范围数据表序号溶剂A浓度溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂B峰面积12345 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第8页溶剂A线性回归结果：a b r

10、工作曲线： y 溶剂B线性回归结果：a b r工作曲线： y 结论：操作者： 核对者：4. 定量限3#贮备液逐级稀释，作色谱分析，按照色谱峰的信噪比为1：10时的浓度作为溶剂A和溶剂B的定量限。结论：溶剂B的定量限： 溶剂A的定量限：操作者： 核对者： 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 9 页5. 准确度5.1 系统适用性 a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，各重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。可接受标准： RSD5 瓶

11、号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1.2.3.4.平均RSD结论：5.2 准确度称取1.0g普鲁卡因青毒素产品，测出其溶剂B和溶剂A的残留量，然后加入一定量的标准溶液，加入三次, ,计算其回收率，可接受标准：回收率应在90110之间。验证结果：5.2.1溶剂B回收率 称取原料药产品 g于22ml顶空瓶中，加入2mlDMF溶液作色谱处理，根据工作曲线计算出该批产品中的溶剂B和溶剂A的含量。称量溶剂B峰面积溶剂A峰面积溶剂B含量溶剂A含量 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第10 页称取原料药产品1.0g 于22ml

12、顶空瓶中，加入2mlDMF及10l,20l,25l的贮备液a，加盖作色谱处理，根据工作曲线计算溶剂B和溶剂A的含量。 称样量（g）贮备液a（l）溶剂B峰面积溶剂B含量丁醇峰面积丁醇含量溶剂B回收率： 溶剂A回收率：结论:操作者： 核对者： 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 11 页6. 中间精密度对同一样品进行三次平行测定，连续测定三天（三天均用同一个标准品和检品），由不同人测定。可接受标准：当天测定结果的RSD 溶剂B20；溶剂A15 大与天之间的测定结果RSD： 溶剂B30；溶剂A20 6.1 系

13、统适用性（第一天）溶液配制： a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。C:分别称原料药 批 g, g, g于22 ml顶空瓶中,加入2mlDMF,混匀,加盖作色普处理,根据工作曲线计算出该批产品中溶剂A和溶剂B含量.可接受标准： RSD5标准号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234RSD 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第12 页名称溶剂B峰面积溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂A浓度样1样2样3RSD结

14、论： 操作人： 核对者：6.2 系统适用性（第二天）溶液配制： a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。C:分别称原料药 批 g, g, g于22 ml顶空瓶中,加入2mlDMF,混匀,加盖作色普处理,根据工作曲线计算出该批产品中溶剂A和溶剂B含量.可接受标准： RSD5标准号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234RSD 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第13 页名称溶剂B峰面积溶剂B浓度溶剂A峰

15、面积溶剂A浓度样1样2样3RSD结论： 操作人： 核对人： 6.3 系统适用性（第三天）溶液配制： a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。C:分别称原料药 批 g, g, g于22 ml顶空瓶中,加入2mlDMF,混匀,加盖作色普处理,根据工作曲线计算出该批产品中溶剂A和溶剂B含量.可接受标准： RSD5标准号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234RSD 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第14

16、页名称溶剂B峰面积溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂A浓度样1样2样3RSD结论： 操作人： 核对人： 三天验证结果统计时间溶剂A含量（）溶剂B含量（）第一天第二天第三天RSD结论：操作人： 核对人：7. 耐受性对比如下条件的测量结果： a不同柱温的耐受性 b不同流速的耐受性可接受标准： RSD5 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第15 页7.1 使用不同柱温的耐受性7.1.1 第一种柱温 T = 88系统精密度a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作

17、色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论：操作人： 核对人：7.1.2 第二种柱温 T90 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 16 页系统精密度 a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论：操作人： 核对人：7.1.3 第三种柱温 T92系统精密度a：称取贮备液 g于50ml容量

18、瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第17 页序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论：操作人： 核对人：7.1.4 对比分析7.1.5结论：7.2 不同流速的耐受性7.2.1 第一种流速0.7ml/min系统精密度a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。 有 限

19、 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第18 页系统精密度序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论：操作人： 核对人：7.2.2 第二种流速0.8ml/min系统精密度a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 19 页序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论

20、：操作人： 核对人：7.2.3 第三种流速0.9ml/min系统精密度a：称取贮备液 g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，共重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 20 页系统精密度序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论：操作人： 核对人：7.2.4对比分析：7.2.5结论：五. 最终报告 有 限 公 司方 法 验 证名 称： 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号： 版本号： 第1版共21页： 第 21 页续前页:专心-专注-专业