第11章弧菌属气单胞菌属和邻单胞菌属.ppt

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1、现在学习的是第1页，共66页弧菌科弧菌科弧菌属弧菌属异单胞菌属异单胞菌属发光杆菌属等发光杆菌属等共共8 8个属个属O1O1群霍乱弧菌群霍乱弧菌非非O1O1群霍乱弧菌群霍乱弧菌副溶血弧菌副溶血弧菌拟态弧菌拟态弧菌分类等等6666个种个种现在学习的是第2页，共66页弧菌属弧菌属（VibrioVibrio）的共同生物学特性）的共同生物学特性:除麦氏弧菌外，氧化酶阳性、还原硝酸盐除麦氏弧菌外，氧化酶阳性、还原硝酸盐发酵葡萄糖产酸罕见产气发酵葡萄糖产酸罕见产气对对O/129O/129敏感（近年出现抗性株）敏感（近年出现抗性株）钠离子能刺激其生长，部分菌株嗜盐钠离子能刺激其生长，部分菌株嗜盐兼性厌氧，营养

2、要求不高兼性厌氧，营养要求不高革兰阴性、弧形（短杆）菌、动力（）革兰阴性、弧形（短杆）菌、动力（）现在学习的是第3页，共66页弧菌属的致病性：弧菌属的致病性：（含盐和海水环境中自身微生物群的一部分）（含盐和海水环境中自身微生物群的一部分）肠道内感染（霍乱、胃肠炎）肠道内感染（霍乱、胃肠炎）肠道外感染（伤口感染、败血症等）肠道外感染（伤口感染、败血症等）现在学习的是第4页，共66页致病性弧菌所引起的疾病致病性弧菌所引起的疾病种 所致疾病 临床意义 标本来源O1群霍乱弧菌 霍乱 主要致病菌 粪便O139群霍乱弧菌 霍乱 主要致病菌 粪便非O1群霍乱弧菌 胃肠炎 主要致病菌 粪便、血副溶血弧菌 胃肠

3、炎 主要致病菌 粪便、伤口创伤弧菌创伤弧菌 败血症、伤口感染败血症、伤口感染 主要致病菌主要致病菌 粪便、伤口粪便、伤口少女弧菌 伤口感染 散发感染 伤口溶藻弧菌 伤口感染 散发感染 耳、伤霍利斯弧菌 胃肠炎 散发感染 粪便拟态弧菌 胃肠炎 散发感染 粪便河弧菌 胃肠炎 罕见感染 粪便麦氏弧菌 胃肠炎 罕见感染 粪便氟尼斯弧菌 胃肠炎 罕见感染辛辛那提弧菌 菌血症、脑炎 罕见感染鲨鱼弧菌 伤口感染 罕见感染现在学习的是第5页，共66页霍 乱 弧 菌Vibrio choleraeVibrio cholerae O1 and O139 O1 and O139 O1 and O139 O1 and

4、O139 霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的病霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的病原菌，为我国法定传染病（甲类），俗称原菌，为我国法定传染病（甲类），俗称2 2号病。（号病。（1 1号病为鼠疫）。号病为鼠疫）。现在学习的是第6页，共66页 血清学分群（型）在流行病学上有价值血清学分群（型）在流行病学上有价值 抗原抗原H 抗原：共同抗原，特异性低O 抗原（A、B、C)：是分群和分型的基础。1.依据O抗原不同分155个血清群（O1群、O139群、非O1群霍乱弧菌）2.O1群有三个血清型 AB构成小川型（Ogawa)AC构成稻叶型（Inaba）ABC构成彦岛型(Hikojima）3.每个血清型根据表型不同分

5、成 古典和El-Tor两个生物型。现在学习的是第7页，共66页生物分型：O1群霍乱弧菌噬菌体分型：古典生物型El-Tor生物型第IV组噬菌体 古典生物型 第V组噬菌体 El-Tor生物型 现在学习的是第8页，共66页霍乱的流行史1 1817-1923 817-1923 共共6 6次次 印度恒河三角洲印度恒河三角洲 古典生物型古典生物型1961 1961 第第7 7次次 印度尼西亚印度尼西亚 EltorEltor生物型生物型1992.10 1992.10 孟加拉湾的印度、孟加拉孟加拉湾的印度、孟加拉 O O139139现在学习的是第9页，共66页O139O139群霍乱弧菌在亚洲的流行群霍乱弧菌在

6、亚洲的流行(1992.10-1994.11)(1992.10-1994.11)霍乱的流行史现在学习的是第10页，共66页临床意义 (致病因素致病因素)进入小肠，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有荚膜穿过小肠黏膜表面黏液层黏附于小肠黏膜上皮细胞刷状缘的微绒毛上大量繁殖1.1.侵袭力侵袭力现在学习的是第11页，共66页霍乱弧菌肠毒素（霍乱弧菌肠毒素（CE,cholera enterotoxinCE,cholera enterotoxin）A1:活性亚单位 21812A2:连接亚单位 5000B：结合亚单位MW：80000-90000临床意义 (致病因素致病因素)2.2.霍乱肠毒素霍乱肠毒素现在学习

7、的是第12页，共66页演示演示发病机制临床意义现在学习的是第13页，共66页霍乱弧菌在小肠黏膜部位的致病机制霍乱弧菌在小肠黏膜部位的致病机制发病机理发病机理临床意义现在学习的是第14页，共66页感染途径临床意义现在学习的是第15页，共66页感染途径临床意义现在学习的是第16页，共66页感染途径临床意义现在学习的是第17页，共66页感染途径感染途径临床意义现在学习的是第18页，共66页感染途径临床意义现在学习的是第19页，共66页演示演示感染途径感染途径临床意义现在学习的是第20页，共66页霍乱弧菌的致病过程霍乱弧菌的致病过程引起的疾病引起的疾病临床意义现在学习的是第21页，共66页霍乱弧菌的致

8、病霍乱弧菌的致病（严重时液体丢失量达（严重时液体丢失量达5005001000ml/h1000ml/h）临床表现临床表现临床意义剧烈上吐下泻，严重脱水、酸中毒、痉挛、尿闭、休克、死亡。现在学习的是第22页，共66页临床分期临床意义1.前驱期 无明显前驱症状，或轻度腹鸣、腹胀和不适。现在学习的是第23页，共66页临床分期临床分期临床意义2.吐泻期 持续23天，因剧烈吐泻造成大量水分和电解质丧失。现在学习的是第24页，共66页临床分期临床分期临床意义3 3.脱水虚脱期脱水虚脱期 脱水貌，洗衣工手；脱水貌，洗衣工手；循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰；循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰；水电解质平衡紊乱导致肌肉痉

9、挛。水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。4 4.恢复期恢复期 各种症状趋于缓解，但可出现发热各种症状趋于缓解，但可出现发热现在学习的是第25页，共66页霍乱弧菌的革兰染色结果霍乱弧菌的革兰染色结果生物学特性(纯培养革兰染色纯培养革兰染色)描述：描述：革兰阴性，革兰阴性，弯曲弧形弯曲弧形或逗点状，或逗点状，粪便标本粪便标本中可首尾中可首尾相接鱼群相接鱼群样平行排样平行排列列现在学习的是第26页，共66页鱼群样排列现在学习的是第27页，共66页霍乱弧菌形态（电镜）现在学习的是第28页，共66页霍乱弧菌的扫描电镜图霍乱弧菌的扫描电镜图（金属镀膜）（金属镀膜）生物学特性 (纯培养扫描电镜纯培养扫描电镜)描述

10、：描述：弯曲弧弯曲弧形或逗形或逗点状点状现在学习的是第29页，共66页霍乱患者小肠黏膜上皮局霍乱患者小肠黏膜上皮局部平切电镜图部平切电镜图霍乱弧菌扫描电镜图霍乱弧菌扫描电镜图（金属镀膜）（金属镀膜）生物学特性(电镜电镜)现在学习的是第30页，共66页霍乱弧菌的糖原颗粒霍乱弧菌的糖原颗粒（*）超薄切片，105 000 生物学特性(电镜电镜)现在学习的是第31页，共66页霍乱弧菌的运动模式图霍乱弧菌的运动模式图生物学特性：(米泔水样便米泔水样便)描述：描述：穿梭或穿梭或流星样流星样动力动力现在学习的是第32页，共66页霍乱弧菌的鞭毛霍乱弧菌的鞭毛生物学特性 (电镜电镜)现在学习的是第33页，共66

11、页霍乱弧菌的鞭毛染色霍乱弧菌的鞭毛染色生物学特性(特殊染色特殊染色10,000)10,000)现在学习的是第34页，共66页生物学特性 (培养特性培养条件培养特性培养条件)需氧或兼性厌氧，营养要求不高需氧或兼性厌氧，营养要求不高最适生长温度最适生长温度3737最适最适pH8.2pH8.29.0 Max:10.2(9.0 Max:10.2(耐碱怕酸耐碱怕酸)EltorEltor生物型在血平板上可形成生物型在血平板上可形成-溶血（有变异）溶血（有变异）现在学习的是第35页，共66页 初次分离用初次分离用pHpH8.58.5碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水，经经4 46 6小时液体小时液体表面大量繁殖，形成

12、菌膜。表面大量繁殖，形成菌膜。现在学习的是第36页，共66页生物学特性 (培养特性选择鉴别性平板培养特性选择鉴别性平板)TCBSTCBS（硫代硫酸盐硫代硫酸盐-枸橼酸盐枸橼酸盐-胆盐胆盐-蔗糖琼脂平板）蔗糖琼脂平板）霍乱弧菌在霍乱弧菌在TCBSTCBS琼脂平板上形成琼脂平板上形成发酵蔗糖的较大的黄色菌落发酵蔗糖的较大的黄色菌落现在学习的是第37页，共66页生物学特性生物学特性 (培养特性选择鉴别性平板培养特性选择鉴别性平板)含亚碲酸钾的培养基：含亚碲酸钾的培养基：4 4号琼脂号琼脂 庆大霉素琼脂庆大霉素琼脂霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还原成霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还

13、原成原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落现在学习的是第38页，共66页生物学特性 (重要的生化反应重要的生化反应)霍乱弧菌副溶血弧菌拟态弧菌麦氏弧菌麦氏弧菌氧化酶 硝酸盐还原 现在学习的是第39页，共66页生物学特性 (重要的生化反应重要的生化反应)除霍乱和拟态弧菌外，其余弧菌在不含盐的培养基除霍乱和拟态弧菌外，其余弧菌在不含盐的培养基上不生长上不生长霍乱弧菌拟态弧菌副溶血弧菌耐盐试验(%NaCl)0%6%7%10%现在学习的是第40页，共66页n氧化酶、吲哚、枸橼酸盐利用、明胶实验（）n赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶（）、精氨酸双水解（）、动力（）n发酵葡萄糖、麦芽糖、

14、蔗糖蔗糖、甘露醇，乳糖（v）生物学特性生物学特性（重要的生化反应）现在学习的是第41页，共66页生物学特性(生物型的区分：根据生化反应分型生物型的区分：根据生化反应分型)现在学习的是第42页，共66页生物学性状 (血清型：根据抗原分型血清型：根据抗原分型)现在学习的是第43页，共66页生物学性状 (抵抗力抵抗力)河水中：20天 蔬菜水果上：1周 冰内：4天耐碱怕酸：胃酸中存活4分钟 pH10.2仍能生长对庆大霉素耐药：用于制作选择性培养基多粘菌素B(50u/ml)：Eltro biotype耐药，Classic biotype敏感，可作为分型依据对热、干燥、日光和常用消毒剂敏感，10012mi

15、n即可杀死现在学习的是第44页，共66页标标本的的采采集集微生物学检验患者的米泔水样便、呕吐物、尸检肠内容物或携带有病原菌的海产品和污染的水源等现在学习的是第45页，共66页检验方法（1 1）直接镜检：直接镜检：取标本涂片取标本涂片2 2张，乙醇或甲醇固定，张，乙醇或甲醇固定，革兰染色，油镜观察。革兰染色，油镜观察。微生物学检验现在学习的是第46页，共66页（2）动力和制动试验：动力和制动试验：水样便，悬滴（压滴）、高倍镜、水样便，悬滴（压滴）、高倍镜、暗视野观察动力：穿梭似流星状。同法制备另一标本，暗视野观察动力：穿梭似流星状。同法制备另一标本，加入加入1滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清（效价

16、滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清（效价1:64）；可见运动活泼的细菌运动停止并发生凝集，）；可见运动活泼的细菌运动停止并发生凝集，为制动试验阳性。为制动试验阳性。（3）玻片凝集：玻片凝集：O1和和O139抗体抗体（4）分离培养分离培养：常用碱性蛋白胨水、选择性平板（：常用碱性蛋白胨水、选择性平板（TCBS等）等），菌落特征和蔗糖发酵菌落，进一步鉴定。，菌落特征和蔗糖发酵菌落，进一步鉴定。现在学习的是第47页，共66页检验方法l l）初步鉴定：与初步鉴定：与0101群和群和O139O139群抗血清群抗血清(多价和单多价和单 价）凝集试验，菌落和菌体形态、氧化酶试验等价）凝集试验，菌落和菌体形态、氧

17、化酶试验等 作出初步报告。作出初步报告。2 2）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血清学）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血清学 分群及分型、生物型。分群及分型、生物型。微生物学检验现在学习的是第48页，共66页检验方法1.初筛试验初筛试验初筛试验初筛试验(1)(1)霍乱红试验霍乱红试验(2)(2)O/129O/129敏感试验敏感试验(3)(3)黏丝试验黏丝试验（4 4）耐盐试验耐盐试验 微生物学检验现在学习的是第49页，共66页n n2.生物分型试验生物分型试验 a.羊红细胞溶血试验羊红细胞溶血试验 b.鸡红细胞凝集试验鸡红细胞凝集试验 c.VP试验试验 d.多粘菌素多粘菌素B敏感试验

18、敏感试验 e.第第IV和和V组霍乱弧菌噬菌体裂解试验组霍乱弧菌噬菌体裂解试验现在学习的是第50页，共66页 n3.鉴别试验鉴别试验 n霍乱弧菌霍乱弧菌与与拟态弧菌拟态弧菌鉴别：蔗糖发酵鉴别：蔗糖发酵 （）（）（）（）n霍乱弧菌霍乱弧菌和气单胞菌和邻单胞菌和气单胞菌和邻单胞菌鉴别：黏丝试验鉴别：黏丝试验 （）（）（）（）现在学习的是第51页，共66页副溶血弧菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus)现在学习的是第52页，共66页临床意义临床意义n人食入污染的海产品发病（食物中毒、急性腹泻）、伤口感染、菌血症。n致病因子：TDH、TRH和菌毛现在学习的是第53页，共66页生物学

19、特性生物学特性（形态特征）（形态特征）革兰阴性直或微弯杆菌，极端单鞭毛，无荚膜副溶血弧菌革兰染色现在学习的是第54页，共66页生物学特性生物学特性（培养特征）（培养特征）n需氧或兼性厌氧n营养要求不高，嗜盐（无盐不生长嗜盐（无盐不生长,最适盐浓度最适盐浓度3.5%）n最适最适pH7.78.0，最适温度，最适温度3037nTCBSTCBS上形成绿色菌落上形成绿色菌落副溶血弧菌在TCBS上菌落现在学习的是第55页，共66页生物学特性生物学特性（培养特征）（培养特征）n从腹泻患者中分离到的副溶血弧菌从腹泻患者中分离到的副溶血弧菌95%以以上在我妻培养基（上在我妻培养基（人血人血培养基）上可产生培养基

20、）上可产生-溶血现象，称为溶血现象，称为神奈川现象神奈川现象（Kanagawa phenomenon,KP）n在在SS平平板板上上形形成成扁扁平平，无无色色半半透透明明，蜡蜡滴滴状的菌落，不易刮下，有辛辣味。状的菌落，不易刮下，有辛辣味。现在学习的是第56页，共66页生物学特性生物学特性（生化特征）（生化特征）n氧化酶氧化酶 +n蔗糖发酵蔗糖发酵 -n葡萄糖发酵葡萄糖发酵 +NaCl生长试验生长试验n0%NaCl -n3%NaCl +n7%NaCl +n10%NaCl -n脲酶脲酶 +/-(临床分离菌株常阳性）现在学习的是第57页，共66页标本3.5%NaCl碱性蛋白胨水培养基TCBS分离培养

21、可疑菌落（绿色）纯培养菌种鉴定毒素测定微生物学检验程序现在学习的是第58页，共66页鉴定特征n革兰阴性弧菌或杆菌，动力（）n氧化酶（），临床分离株脲酶常（）nTCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验n神奈川现象(+)n各种生化试验nTDH和TRH的检测：毒素和基因检测现在学习的是第59页，共66页气单胞菌属和邻单胞菌属气单胞菌属和邻单胞菌属Aeromonas and Plesiomonas现在学习的是第60页，共66页分类根据分子遗传学研究：n气单胞菌属独立成气单胞菌科n邻单胞菌属（仅一个种：类志贺邻单胞菌）并入肠杆菌科现在学习的是第61页，共66页临床意义（气单胞菌：肠道致病菌）n n致病物质 溶

22、血毒素 细胞毒素n n所致疾病n n肠内感染肠内感染 主要表现为腹泻（亲水气单胞菌）主要表现为腹泻（亲水气单胞菌）n n肠外感染肠外感染 败血症、伤口及软组织感染（亲败血症、伤口及软组织感染（亲 水气单胞菌和水气单胞菌和威隆气单胞菌）气单胞菌）现在学习的是第62页，共66页临床意义（邻单胞菌属）n所致疾病：肠道内感染：胃肠炎（水样泻或痢疾样腹泻）肠道外感染：菌血症等（免疫力低下人群发生）n病史：进食生水或海产品现在学习的是第63页，共66页气单胞菌属的描述气单胞菌属的描述n革兰阴性直或球杆菌，大多为极端单鞭毛；n生长温度范围广（045）；n氧化酶（）、触酶（）、硝酸盐还原（）、发酵葡萄糖产酸、

23、有的产气、产生多种胞外酶；n对O129耐药；n主要存在于水生系统（更易生活于盐水和淡水交界处，海洋环境中偶见）。现在学习的是第64页，共66页邻单胞菌属的描述邻单胞菌属的描述n革兰阴性杆菌，极端25根鞭毛（侧鞭毛）；n生长温度范围广（845）；n氧化酶（）、触酶（）、硝酸盐还原（）、发酵葡萄糖产酸不产气；n可耐受的NaCl浓度为05；n大多数菌株对O129敏感；n主要存在于水生系统（淡水和蒸汽水中比海水环境更易存在）。现在学习的是第65页，共66页对人致病的弧菌、气单胞菌和邻单胞菌的特征 特征 霍乱和拟态弧菌 其他弧菌 气单胞菌 邻单胞菌生长 0NaCl +-+6%NaCl +-对O/129敏感性 10ug +/-+/-150ug +-+氨苄青霉素 +/-+-（10ug)敏感性葡萄糖产气 -+/-黏丝试验 +-现在学习的是第66页，共66页