细胞线粒体膜电位检测实验服务.pdf

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1、细胞线粒体膜电位检测实验服务细胞线粒体膜电位检测实验服务一、实验原理、实验原理 JC-1 是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1 在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在，分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1 浓度低或膜电位水平低时，主要以单体形式存在，激发波长为 527nm，呈绿色荧光；当 JC-1 浓度升高或线粒体膜电位水平较高时，形成聚合物，发出红色的荧光，激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1 从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光，根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。【晶莱生物】

2、大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（MMP）的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA 断裂）出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转.二、实验流程、实验流程1.细胞培养；2.用适当的方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性依照组合阳性对照组，收集细胞；63.用 PBS 洗涤细胞三次，收集不多于110 的细胞；4.取 100 L 10Incubation Buffer 加 900 L 灭菌去离子水稀释成1IncubationBuffer，混匀并预热至 37；5.吸取 500 L 1Incubation Buffer，加入1 L JC-1，涡旋混匀配成 JC-1 工作液；6.取 500 L JC-1 工作液将细胞均匀悬浮，37，5%CO2的培养箱中孵育 1520min。7.室温离心（2000rpm,5min）收集细胞，用 1Incubation Buffer洗两次；8.吸取 500 L 10Incubation Buffer重新悬浮细胞；9.流式细胞仪检测，分析。三、服务说明、服务说明1.客户提供：细胞株(冻存株或培养好的细胞)，相关药品或 MMP 检测试剂盒（可代购）2 公司提供：实验步骤、结果图、数据结果和分析报告3 实验周期：1-2 周，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。