用相差显微镜观察口腔上皮细胞精.ppt

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1、用相差显微镜观察口腔上皮细胞第1页，本讲稿共17页实验目的实验目的 1了解相差显微镜观察活细胞的基本原理。了解相差显微镜观察活细胞的基本原理。2了解相差显微镜的特殊组件和位置。了解相差显微镜的特殊组件和位置。3掌握调节相差显微镜的基本步骤。掌握调节相差显微镜的基本步骤。第2页，本讲稿共17页实验原理实验原理 人的眼睛能感知光强弱（振幅）和颜色（波长）的变化，人的眼睛能感知光强弱（振幅）和颜色（波长）的变化，但不能感知光相位的变化但不能感知光相位的变化。活细胞大多数高度透明，光波通过时不被吸收，其振幅活细胞大多数高度透明，光波通过时不被吸收，其振幅和波长基本不变，即光强弱和颜色改很少，人眼睛几乎

2、和波长基本不变，即光强弱和颜色改很少，人眼睛几乎感觉不到。感觉不到。相差显微镜可将光相位的变化转变为振幅的变化，从而相差显微镜可将光相位的变化转变为振幅的变化，从而使看不清的活细胞结构成为可见使看不清的活细胞结构成为可见。第3页，本讲稿共17页第4页，本讲稿共17页相差显微镜原理及结构相差显微镜原理及结构第5页，本讲稿共17页相差显微镜的部件相差显微镜的部件 第6页，本讲稿共17页环状光阑环状光阑 环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光，只环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光，只留下环形透光窄缝的光阑。它能使来自反光镜的直留下环形透光窄缝的光阑。它能使来自反光镜的直射光只能从环状部分通过

3、，形成一个空心圆筒状的射光只能从环状部分通过，形成一个空心圆筒状的光柱，经聚光柱，经聚 光器并照射到标本以后，就产生两部分光器并照射到标本以后，就产生两部分光，一部分是直射光，另一部分是经过标本后产生光，一部分是直射光，另一部分是经过标本后产生的衍射光，这两部分光经物镜内相板的作用而改变的衍射光，这两部分光经物镜内相板的作用而改变了光的相位和振幅。了光的相位和振幅。在相差聚光器下面装有一个转盘，盘上镶有宽狭不在相差聚光器下面装有一个转盘，盘上镶有宽狭不同的环状光阑，在不同光阑边上刻有同的环状光阑，在不同光阑边上刻有10、20，40等字样，这表示当用不同放大倍数的物镜时，等字样，这表示当用不同放

4、大倍数的物镜时，必须配合相应的环状光阑。必须配合相应的环状光阑。第7页，本讲稿共17页第8页，本讲稿共17页麦克奥迪麦克奥迪BA200 显微镜显微镜第9页，本讲稿共17页第10页，本讲稿共17页第11页，本讲稿共17页相差显微镜的使用相差显微镜的使用第12页，本讲稿共17页相差显微镜实验方法和步骤相差显微镜实验方法和步骤安放相差装置取下原有聚光器和物镜，分别安上相差聚光器和相安放相差装置取下原有聚光器和物镜，分别安上相差聚光器和相差物镜，并将转盘转到差物镜，并将转盘转到“0”标记的位置。用标记的位置。用10相差物镜调光。相差物镜调光。调节光源。调节光源。合轴调节取下原有目镜，换上合轴调整望远镜

5、。上下移动望远镜合轴调节取下原有目镜，换上合轴调整望远镜。上下移动望远镜筒，至能看清物镜中的相板环为止。筒，至能看清物镜中的相板环为止。放回目镜取下合轴调整望远镜，放回目镜即可进行观察。更换不同放回目镜取下合轴调整望远镜，放回目镜即可进行观察。更换不同放大倍数的相差物镜时，每次都要按上述方法重新调节。放大倍数的相差物镜时，每次都要按上述方法重新调节。第13页，本讲稿共17页材料与试剂材料与试剂（一）仪器（一）仪器 相差显微镜。相差显微镜。（二）材料（二）材料 口腔上皮细胞，载玻片，盖玻片，牙签，滤口腔上皮细胞，载玻片，盖玻片，牙签，滤 纸条和指甲油。纸条和指甲油。（三）试剂（三）试剂 生理盐水

6、。生理盐水。第14页，本讲稿共17页实验步骤实验步骤 1.样品制备样品制备 在一张清洁无痕的载玻片上滴一小滴生理盐在一张清洁无痕的载玻片上滴一小滴生理盐水，用牙签刮自己的口腔粘膜少许与生理水，用牙签刮自己的口腔粘膜少许与生理盐水混匀，盖上清洁的盖玻片，用滤纸条盐水混匀，盖上清洁的盖玻片，用滤纸条吸掉盖片周围多余的水分。吸掉盖片周围多余的水分。第15页，本讲稿共17页相差显微镜观察相差显微镜观察2.将将10 x相差物镜旋入光路。相差物镜旋入光路。3.将相应于将相应于10 x相差物镜的相差聚光器的环状光阑移入光路中，完相差物镜的相差聚光器的环状光阑移入光路中，完全打开聚光孔径光阑。全打开聚光孔径光阑。4.将样品置于载物台上，用聚焦螺旋聚焦样品。将样品置于载物台上，用聚焦螺旋聚焦样品。5.用柯勒照明法调节聚光器用柯勒照明法调节聚光器 6.观察物镜后焦面，调节仪器使聚光器中环状光阑的像和相差物镜中相板观察物镜后焦面，调节仪器使聚光器中环状光阑的像和相差物镜中相板的圆环互相吻合，这一步是调好相差像最重要的步骤。的圆环互相吻合，这一步是调好相差像最重要的步骤。第16页，本讲稿共17页实验报告实验报告 简述利用相差显微镜观察口腔上皮细胞的过简述利用相差显微镜观察口腔上皮细胞的过程，并绘出细胞的主要形态。程，并绘出细胞的主要形态。第17页，本讲稿共17页