毒理学基础复习范本1405.doc

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1、毒理学基础复习资料Evaluation Warning: The document was created with Spire.Doc for .NET.第一章 绪论毒理学基础 第5版，供预防医学类专业用 人民卫生出版社 主编：王心如（一）概念毒理学（TToxiicollogyy）：研究究外源性性化学物物质对生生物机体体的损害害作用的的学科(传统定定义) 。现代毒理学学(moddernn Tooxiccoloogy )：研究所所有外源源因素（如如化学、物物理和生生物因素素）对生生物系统统（liivinng ssysttemss）的损损害作用用、生物物学机制制(bioologgic mecch

2、annismms)、安安全性评评价(saffty evaaluaatioon)与与危险性性分析(rissk aanallysiis)的的科学。（二）研究究内容毒理学两个个基本功功能：检检测理化化因素产产生的有有害作用用的性质质（危害害性鉴定定功能）评价在特殊殊暴露条条件下出出现毒性性的可能能性（危危险度评评价功能能）三大研究领领域：描描述毒理理学(desscriiptiive toxxicoologgy)机制毒理学学(mecchannisttic toxxicoologgy)管理毒理学学(reggulaatorry ttoxiicollogyy)第二章 毒毒理学基基本概念念毒物(pooisoo

3、n)：是指在在一定条条件下，以以较小剂剂量进入入机体就就能干扰扰正常的的生化过过程或生生理功能能，引起起暂时的的或永久久性的病病理改变变，甚至至危及生生命的化化学物质质。毒性（tooxiccityy）：指化化学物质质引起有有害作用用的固有有能力。剂剂量相同同时，对对机体损损害能力力越大的的化学物物质，毒毒性越高高。相对对于同一一损害指指标，需需要剂量量越小的的化学物物质，其其毒性越越大。中毒(pooisooninng)：是指生生物体受受到毒物物作用而而引起功功能性或或器质性性改变后后出现的的疾病状状态。毒效应（ttoxiic eeffeect）：又称称为毒作作用，是是化学物物质对机机体所致致的

4、不良良或有害害的生物物学改变变。 毒毒效应是是化学物物质或代代谢产物物在作用用部位达达到一定定数量并并停留一一定时间间，与组组织大分分子成分分互相作作用的结结果。当当改变暴暴露条件件时，毒毒效应会会相应改改变。毒性是一种种能力，中中毒是一一种状态态，毒效效应是一一种表现现。损害作用（advversse eeffeect）：指影影响机体体行为的的生物化化学改变变，功能能紊乱或或病理损损害，或或者降低低对外界界环境应应激的反反应能力力。非损害作用用（nonn-addverrse efffectt）：机体体发生的的生物学学变化应应在机体体适应代代偿能力力范围之之内，机机体对其其他外界界不利因因素影响

5、响的易感感性也不不应增高高。选择毒性（sellecttivee tooxiccityy）：一种种化学物物质只对对某种生生物产生生损害作作用，而而对其他他种类生生物无害害；或只只对机体体内某一一组织器器官发挥挥毒性，而而对其他他组织器器官不具具毒作用用。选择性毒性性产生的的原因：（1）物种种和细胞胞学差异异 （细菌菌、青霉霉素）（2）不同同组织器器官对化化学物质质亲和力力的差异异（百草草枯、肺肺） （3）不同同生物或或组织器器官对化化学物质质生物转转化过程程的差异异（ 磺胺类类药物的的发明）（4）不同同组织器器官对化化学物质质所致损损害的修修复能力力的差异异（肝、肾肾再生能能力强，脑脑、神经经再

6、生能能力弱）靶器官 (tarrgett orrgann)：外源化化学物可可以直接接发挥毒毒作用的的器官就就称为该该物质的的靶器官官。特点： 一种毒物可可以有几几个靶器器官，不不同的毒毒物可以以作用于于同一个个或同几几个靶器器官。 在同一靶器器官产生生相同毒毒效应的的化学物物质，其其作用机机制可能能不同。 生物学标志志（bioomarrkerr）: 又称称生物学学标记或或生物学学标志物物，是针针对通过过生物学学屏障并并进人组组织或体体液的化化学物及及其代谢谢产物，以以及它们们引起的的生物学学效应而而采用的的检测指指标。通常把生物物学标志志分为暴暴露标志志、效应标标志和易感性性标志。量反应（ggr

7、added ressponnse），属于于计量资资料，有有强度和和性质的的差别，可可用某种种测量数数值表示示。质反应（qquanntall reespoonsee），属属于计数数资料，没没有强度度的差别别，不能能以具体体的数值值表示，而而只能以以“阴性或或阳性”、“有或无无”来表示示。剂量效应应关系（ doose-efffectt reelattionnshiip ），现现称剂量量-量反应应关系（graadedd doose-ressponnse rellatiionsshipp）：表示示化学物物质的剂剂量与个个体中发发生的量量反应强强度之间间的关系系。剂量-反应应关系（dosse-rresp

8、ponsse rrelaatioonshhip ），现现称剂量量-质反应应关系（quaantaal ddosee-reespoonsee reelattionnshiip）表示示化学物物质的剂剂量与某某一群体体中质反反应发生生率之间间的关系系。剂量-量反反应关系系和剂量量-质反应应关系统统称为剂剂量-反应关关系，是是毒理学学的重要要概念。化化学物质质的剂量量越大，所所致的量量反应强强度应该该越大，或或出现的的质反应应发生率率应该越越高。剂剂量-反应关关系是受受试物与与机体损损伤之间间存在因因果关系系的证据据。实验研究（微微观）：用实验验为人类类提供剂剂量效效应（反反应）关关系等资资料，结结合人

9、群群接触水水平对化化学物质质进行安安全性评评价。 * 体体内实验验 * 体体外实验验 毒毒理学研研究方法法的优缺缺点 研究方法流行病学研研究 受控的临床床研究 毒理学体内内试验 毒理学体外外试验 优点 真实的暴露露条件在各化学物物之间发发生相互互作用测定在人群群的作用用表示全部的的人敏感感性 规定的限定定暴露条条件在人群中测测定反应应对某组人群群(如哮喘喘)的研究究是有力力的能测定效应应的强度度 易于控制暴暴露条件件能测定多种种效应能评价宿主主持征的的作用(如：性性别、年年龄、遗遗传特征征等和其其他调控控因素饮饮食等)能评价机制制 影响因素少少，易于于控制可进行某些些深入的的研究(如：机机制，

10、代代谢)人力物力花花费较少少 缺点耗资、耗时时多(多为回顾顾性)，无健健康保护护难以确定暴暴露，有有混杂暴暴露问题题可检测的危危险性增增加必需需达到22倍以上上测定指标较较粗(发病率率，死亡亡率) 耗资多较低浓度和和较短时时间的暴暴露限于较少量量的人群群(一般50)限于暂时、微微小、可可逆的效效应一般不适于于研究最最敏感的的人群动物暴露与与人暴露露相关的的不确定定性受控的饲养养条件与与人的实实际情况况不一致致暴露的浓度度和时间间的模式式显著地地不同于于人群的的暴露 不能全面反反映毒作作用，不不能作为为毒性评评价和危危险性评评价的最最后依据据难以观察慢慢性毒作作用 半数致死剂剂量（meddian

11、n leethaal ddosee，LD550）： 化学物物质引起起一半受受试对象象出现死死亡所需需要的剂剂量，又又称致死死中量。LD50是评价化学物质急性毒性大小最重要的参数，也是对不同化学物质进行急性毒性分级的基础标准。化学物质的急性毒性越大，其LD50的数值越小。毒作用带（toxxic efffectt zoone）：是表表示化学学物质毒毒性和毒毒作用特特点的重重要参数数之一，分分为急性性毒作用用带与慢慢性毒作作用带。 急性毒作用用带（acuute toxxic efffectt zoone, Zaac）：为半半数致死死剂量与与急性阈阈剂量的的比值，表表示为：Zacc=LDD50/Lim

12、mac Zacc值小，说说明化学学物质从从产生轻轻微损害害到导致致急性死死亡的剂剂量范围围窄，引引起死亡亡的危险险性大；反之，则则说明引引起死亡亡的危险险性小。慢性毒作用用带（chrroniic ttoxiic eeffeect zonne,ZZch）：为急急性阈剂剂量与慢慢性阈剂剂量的比比值，表表示为：Zchh= LLimaac /Limmch Zchh值大，说说明Limmac 与Limmch之间的的剂量范范围大，由由极轻微微的毒效效应到较较为明显显的中毒毒表现之之间发生生发展的的过程较较为隐匿匿，易被被忽视，故故发生慢慢性中毒毒的危险险性大；反之，则则说明发发生慢性性中毒的的危险性性小。

13、第三章 外源毒毒物在体体内的生生物转运运与生物物转化1、 生物转运（biotransport）：是指在ADME这四个过程中，外源毒物的吸收、分布和排泄过程，即都是外源毒物穿透生物膜的过程，且其本身的结构与性质不发生变化。2、 ADME过过程吸收收 (AAbsoorpttionn) 、分分布 (Disstriibuttionn) 、代代谢 (Mettaboolissm)、排泄(Exxcreetioon3、 生物转化（biotransformation）： 是指外源毒物的代谢变化过程，即外源化学物形成新的衍生物的过程，所形成的产物结构与性质均发生了改变，所以又称为代谢转化。4、 外源毒物对对机体的

14、的毒性作作用， 一般取取决于两两个因素素：毒物物的固有有毒性和和剂量、毒毒物到达达靶器官官的数量量以及在在靶器官官存留的的时间 。5、 剂量包括外外剂量、内内剂量和和靶剂量量；靶剂剂量指到到达靶组组织的可可与特定定器官或或细胞交交互作用用的外源源毒物和和（或）其其代谢产产物的剂剂量，对对于外源源毒物所所致损害害作用的的性质和和强度起起决定性性作用。 6、 毒物动力学学 (ttoxiicokkineeticcs) ：是指研研究外源源毒物的的数量在在ADMME过程程中随时时间变化化的动态态规律。7、 外源化学物物通过生生物膜的的方式：被动转转运（简简单扩散散、滤过过）、特特殊转运运（主动动转运。易

15、易化扩散散、膜动动转运）（主要出选择题）被动转运(passsivve ttrannspoort)：外源毒毒物顺浓浓度差通通过生物物膜的过过程简单扩散（simple diffusion) ：毒物由生物膜浓度较高的一侧向浓度较低的一侧扩散，当两侧浓度达到动态平衡时，扩散即终止 滤过(fiiltrratiion)：外源化化学物通通过生物物膜上亲亲水性孔孔道的过过程；依依靠生物物膜两侧侧的渗透透压梯度度和流体体静压的的作用 。（egg:肾小小球、毛毛细管）特殊转运(speeciaal ttrannspoort)：外源化化学物借借助于载载体或特特殊转运运系统而而发生的的跨膜运运动。主动转运(acttiv

16、ee trranssporrt) ：外源化化学物在在载体的的参与下下，逆浓浓度梯度度通过生生物膜的的转运过过程 。易化扩散（facilitated diffusion）：外源毒物，利用载体顺浓度梯度转运的过程，所以又称为载体扩散；膜动转运（cytosis transport）：胞饮和吞噬：液体或固体外源毒物被伸出的生物膜包围，然后将被包围的液滴或较大颗粒并入细胞内，达到转运的目的，前者称为胞饮，后者称为吞噬，总称为胞吞作用； 8、 胃肠道吸收收 胃肠道道是外源源化学物物的主要要吸收途途径之一一； 外源化化合物的的吸收可可发生于于整个胃胃肠道，但但主要在在小肠； 吸收方方式：主主要是通通过简单单

17、扩散，还还可以通通过主动动转运系系统、滤滤过、胞胞饮或吞吞噬9、 肝脏的首过过消除（firrst passs eelimminaatioon）：是指指经胃肠肠道吸收收的外源源化学物物通过门门静脉首首先到达达肝脏，进进行生物物转化后后，再进进入体循循环，这这种现象象称为首首过消除除。10、 经呼吸道吸吸收：肺肺是主要要器官；肺泡解解剖生理理特点；外源毒毒物经肺肺吸收迅迅速，仅仅次于静静脉注射射；不经经过肝脏脏的生物物转化，直直接进入入体循环环而分布布全身； 11、 气溶胶毒物物经肺吸吸收的影影响因素素 ：粒子大大小、水水溶性粒子大小a) 气溶胶的直直径5 m者多数数沉积于于鼻咽部部；b) 2m5

18、5m沉降于于气管、支支气管； c) 0.522 m的粒子子可吸入入肺泡；d) 而0.11 m则由于于其布朗朗运动而而随呼气气而呼出出； 水溶性：溶溶解度大大的易在在上呼吸吸道吸收收， 溶解度度低的气气溶胶易易到达肺肺泡被吸吸收12、 在毒理学中中, 有意义义的颗粒粒直径为为0.11100 mm 13、 蓄积作用（acccumuulattionn）：外源源化学物物以相对对较高的的浓度富富集于某某些组织织器官的的 现象称称为蓄积积。（CO、铅） (1) 物质蓄蓄积（DDT存于脂脂肪，毒毒性在神神经）(2) 功功能蓄积积（百草草枯存于于肺，引引起肺水水肿） 14、 排泄的主要要途径：经肾脏脏随尿液液

19、排出；粪便排排出； 经呼吸吸道随同同呼出气气体排出出；其他他途径。15、 经肾脏随尿尿液排泄泄： ：主要排泄机机理 肾小球球滤过 肾小球简单单扩散 (脂水分分配系数数高的物物质，肾肾小管重重吸收) 肾小管主动动转运 其中简单扩扩散和主主动转运运更为重重要 16、 肠肝循环(entterooheppatiic ccircculaatioon) 是指部部分外源源化学物物在生物物转化过过程中形形成结合合物，并并以结合合物的形形式排出出在胆汁汁中；肠肠内存在在的肠菌菌群以及及葡萄糖糖苷酸酶酶，可将将部分结结合物水水解，则则使外源源化学物物又重新新被吸收收的过程程。毒理学意义义：排泄泄速度减减慢、延延长

20、生物物半减期期、毒作作用持续续时间延延长17、 生物转运的的毒理学学意义 1.吸收与与毒性：进入体体内毒物物的量； 吸收途途径；吸吸收部位位；2.分布与与毒性：器官组组织中毒毒物的量量； 毒物不不均匀分分布，浓浓集点可可能就是是靶器官官； 蓄积作作用对急急性中毒毒有保护护作用，但但又是慢慢性中毒毒的一个个重要条条件。33.排泄与与毒性：肾脏排排泄；肠肠肝循环环18、 代谢解毒：外源化化学物经经过生物物转化以以后成为为低毒或或无毒的的代谢物物的过程程19、 代谢活化：一些外外源化学学物经过过生物转转化后，毒毒性非但但没有减减弱，反反而明显显增强，甚甚至产生生致突变变、致癌癌和致畸畸作用的的现象第

21、四章 毒性机机制(Mecchannismms oof TToxiicitty)1、 毒性机制涉涉及多个个层次和和步骤 ：毒物从从接触部部位进入入血液循循环毒物从从血液循循环进入入靶部位位增毒与与解毒作作用毒物引引起的靶靶分子结结构改变变或功能能紊乱超超过修复复能力或或修复本本身障碍碍时，即即产生毒毒性效应应。2、 增毒（tooxiccatiion)或代谢谢活化：外源化化学物在在体内经经生物转转化为终终毒物的的过程称称为增毒毒。 3、 亲电子剂（electrophiles)：是含有一个缺电子原子的分子；易与含电子的亲核物共享电子对而发生反应；亲电子剂的形成与多种化学物的增毒作用有关：4、 自由基

22、（ffreee raadiccalss)：是指在在其外层层轨道中中含有一一个或多多个不成成对电子子的分子子或分子子片段; 自由基基通过接接受或失失去一个个电子，或或由化合合物的共共价键发发生均裂裂而形成成。 特点：化学性性质十分分活泼 反应性性极高，半半减期极极短，作作用半径径短。5、 解毒（deetoxxicaatioon)：消除终终毒物或或阻止终终毒物生生成的生生物转化化过程； 在某些些情况下下，解毒毒可能与与中毒竞竞争同一一外源化化学物。6、 终毒物：是是指与生生物靶分分子（如如受体、酶酶、 DDNA、微微丝蛋白白、脂质质等）反反应或引引起机体体生物学学微环境境改变、导导致机体体结构和和

23、功能紊紊乱并表表现出毒毒物毒性性的物质质。 第五章 毒性作用的的影响因因素化学物因素素：1、 化学结构取取代基的的影响：取代基基的影响响、异构构体和立立体构型型 、同系系物的碳碳原子数数和结构构的影响响、分子子饱和度度2、 化合物的联联合作用用（ joointt acctioon ）：两种种或两种种以上毒毒物同时时或先后后作用于于机体时时产生的的交互毒毒性作用用。有五种类型型：相加加作用、独独立作用用、协同同作用、加加强作用用、拮抗抗作用第六章 外外源性化化学物质质的一般般毒性作作用第一节 急急性毒作作用一、概述（一）急性性毒性的的概念急性毒性（acuute toxxiciity）: 指机机体

24、（实实验动物物或人）一一次接触触或24小时内内多次接接触外源源化合物物后在短短期（最最长到14天）内内所产生生的毒性性效应，包包括一般般行为、外外观改变变、大体体形态变变化以及及死亡效效应。（二）急性性毒性试试验的目目的1、测试和和求出毒毒物的致致死剂量量以及其其他的急急性毒性性参数，通通常以LD550为最主主要的参参数，并并根据LD550值进行行急性毒毒性分级级。2、通过观观察动物物的中毒毒表现、毒毒作用强强度和死死亡情况况，初步步评价毒毒物对机机体的毒毒效应特特征、靶靶器官、剂剂量反反应（效效应）关关系和对对人体产产生损害害的危险险性。3、为后续续的重复复剂量、亚亚慢性和和慢性毒毒性试验验

25、研究以以及其他他毒理试试验提供供接触剂剂量和观观察指标标选择的的依据。4、为毒理理学机制制研究提提供线索索。二、急性毒毒性试验验方法的的要点（二）急性性毒性试试验设计计原则（1）经口口(胃肠道道、灌胃胃)染毒： 空腹 灌胃后后2-33 h复食 灌胃的的体积不不超过体体重的1-2：小小鼠为 0.1- 0.55ml/10gg较合适 ；大鼠鼠通常用用0.55-1.0mll/1000g；家兔兔为10mml/22kg体重，狗狗不超过过50mml/110kgg 。（2）经呼呼吸道接接触 吸入接接触分为为两种方方式 静式吸吸入 动式吸吸入挥发性化学学物质的的浓度：C=（ad）/L10000110000 C：

26、设计化化学物质质浓度，mg/m3；a:依设计计应该加加入化学学物质的的体积，ml；d:受试化化学物质质的比重重，g/mml；L:染毒柜柜体积，L。（3）经皮皮肤染毒毒 研究究外源化化学物经经皮肤吸吸收应当当尽量选选择皮肤肤解 剖、生生理与人人类较近近似的动动物为对对象，目目前多选选用家兔兔和豚鼠鼠 。 但由于于研究化化学物经经皮肤吸吸收的毒毒性(求经皮LD550) 所需的的实验动动物较多多，使用用家兔、豚豚鼠不够够经济，也也常用大大鼠代替替。经皮肤染毒毒程序 给予受受试物前前24h，确定定受试部部位 机械或或化学脱脱毛 面积10%15%体表面面积 检查去去毛部位位有无异异常现象象 单位体体重相

27、同同容积染染毒，接接触时间间与人实实际接触触该化学学物的时时间相仿仿（4）注射射染毒 对注射射药品或或需作比比较毒性性观察的的药品进进行毒性性试验以以及某些些毒作用用机制和毒毒代谢动动力学研研究中采采用。第二节 局局部刺激激试验蓄积作用(acccumuulattionn)：外源化化学物连连续反复复地进入入机体，且且吸收速速度或总总量超过过代谢转转化排出出的速度度或总量量，化学学物质可可能在体体内逐渐渐增加并并贮留，这这种现象象称为化化学物质质的蓄积积作用。物质蓄积（matteriial acccumuulattionn）：反复复多次接接触化学学毒，可可以用分分析方法法测出体体内物质质的原型型或

28、其代代谢产物物。功能蓄积（funnctiionaal aaccuumullatiion）或损损伤蓄积积（）：长期接接触某些些化学毒毒物后，机机体内虽虽不能测测出其原原型或代代谢产物物，却出出现了慢慢性毒性性作用。第三节 短期、亚慢慢性和慢慢性毒性性作用短期重复剂剂量毒性性作用：实验动动物或人人连续接接触外源源性化学学物1430天所产产生的中中毒效应应。亚慢性毒性性作用：实验动动物或人人连续较较长时间间（相当当生命周周期的1/110）接触触外源性性化学物物所产生生的中毒毒效应。慢性毒性作作用:实验动动物或人人连续较较长时间间(接近生生命周期期)接触外外源性化化学物所所产生的的中毒效效应。亚慢性毒

29、性性试验的的目的 剂量-反应应（效应应）关系系 NOOAELL和LOAAEL，安全全限量参参考值。 了解毒性作作用的性性质、特特点、靶靶器官，为为慢性毒毒性试验验观察指指标提供供选择依依据。 了解毒性作作用的可可逆性及及毒性机机制 确定不同动动物对受受试物的的毒效应应差异，为为将研究究结果外外推到人人提供依依据。亚慢性毒性性的研究究方法1、实验动动物的选选择 亚慢性性毒性作作用研究究一般要要求选择择两种实实验动物物，一种种为啮齿齿类，另另一种为为非啮齿齿类，如如大鼠和和狗，以以便全面面了解受受试物的的毒性特特征。 由于亚亚慢性毒毒性试验验期较长长，所以以被选择择动物的的体重(年龄)应较小小，如

30、小小鼠应为为15g左右大大鼠1000g左右。急性毒性性试验常常用 大鼠、小小鼠、狗狗亚慢性、慢慢性毒性性试验常常用 大鼠、狗狗皮肤刺激激试验和和致敏试试验常用用 兔 豚鼠眼刺激试试验常用用 兔遗传毒理理学试验验多用 小鼠致畸试验验常用 大鼠、小小鼠和兔兔致癌试验验常用 大鼠和和小鼠迟发性神神经毒性性试验常常用 母鸡2.染毒方方式与染染毒期限限 尽量选择和和人类接接触途径径相似的的方式。 与预期进行行的慢性性毒性作作用研究究的接触触途径相相一致。 口、呼吸道道、皮、静静脉（药药物）。染毒方式 经口染毒 经口染毒途途径：灌灌胃法、喂喂饲法、胶胶囊法 大小鼠建议议灌胃，犬犬胶囊法法或灌胃胃法。 受试

31、物掺入入饲料的的最大量量有严格格的规定定，30天试验验不得超超过10gg/1000g饲料，亚亚慢性90天试验验不得超超过8g/1000g饲料，慢慢性试验验不得超超过5g/1000g饲料，否否则会影影响动物物的营养养状况，从从而影响响生长发发育 亚慢性毒性性试验每每日染毒毒的时间间应保持持一致，一一般在每每日上午午进行，给给药后喂喂食 经呼吸道染染毒 通常每日22-6hh。 工业毒物可可以缩短短至1h，环境境污染物物可延长长至8h。 经皮染毒 每天6h，每每周对染染毒部位位脱毛一一次。 经静脉注射射染毒 长期操作实实施困难难，必要要时可用用腹腔替替代。观察指指标 系统尸解和和病理组组织学检检查脏

32、器系数 (称脏/体比值)：是指某某个脏器器的湿重重与单位位体重的的比值，通通常以1000g体重计计。如肝/体比：即(全肝湿湿重/体重)1100。 此指标的意意义是实实验动物物在不同同年龄期期，其各各脏器与与体重之之间重量量比值有有一定规规律，若若受试化化学物使使某个脏脏器受到到损害，则则此比值值就会发发生改变变，可以以增大或或缩小。慢性毒性作作用染毒途途径和期期限a)染毒途途径 染毒途径和和人类实实际接触触相似的的途径 实际工作多多经口染染毒，一一般每周周5-6天。 长期呼吸道道染毒需需动式吸吸入染毒毒b)染毒期期限 根据实验要要求和动动物物种种。 工业毒物66个月或或更长，环环境毒物物、食品

33、品要求1-2年。工工业毒物物的试验验通常每每日吸入入46小时；环境污污染物一一般要求求每日吸吸入8小时或或更长。 观察致癌时时，最好好接近预预期寿命命，终生生染毒。观察指指标 检查项目 一般性指标标 实验室检查查 病理学检查查（最客客观） 其他特异性性指标 以亚慢性毒毒性实验验所提供供的毒效效应和靶靶器官为为基础，优优先其筛筛选出来来的敏感感或特异异性指标标。 为研究毒性性的迟发发性、可可逆性，高高剂量组组和对照照组停止止染毒后后继续观观察1-2月。慢性毒毒性试验验的注意意事项1、重视实实验项目目管理：项目管管理需要要选择具具有丰富富长期毒毒性实验验经验的的专业化化人才对对项目的的设计和和实施

34、全全面管理理。参加加实验人人员必须须经过专专业培训训的人员员，尤其其是对每每天灌胃胃或静脉脉给药等等风险较较大的操操作，应应排除一一切出现现操作失失误的可可能性。2、合理的的实验设设计：剂剂量设计计是长期期重复毒毒性试验验成败的的关键。剂剂量设置置应能得得到如下下结果：足够高高的剂量量以能观观察到受受试物的的毒性作作用，动动物死亡亡率不能能超过10%，如果果是阴性性结果，剂剂量设计计必须达达到技术术规范的的要求，否否则，应应该谨慎慎做出结结论。3、实验动动物环境境的要求求：实验验动物的的饲养和和实验环环境标准准化十分分重要。正正规的毒毒理学实实验一般般要求在在经GLP认证的的科研单单位进行行。

35、4、检测条条件的控控制：仪仪器设备备、试剂剂的选购购、安装装、保管管、维护护、校正正，到检检测方法法、样品品处理等等的标准准操作规规程（SOP）制定定，经常常性的室室间和室室内质控控，操作作人员的的培训等等均要纳纳入科学学的管理理之中。第七章 致突变作用用1、 突变(muutattionn) 是指遗遗传结构构本身的的变化及及其引起起的变异异。2、 致突变作用用或诱变变作用(muttageenessis) 广义概概念是外外来因素素，特别别是化学学因子引引起细胞胞核中的的遗传物物质发生生改变的的能力，而而且此种种改变可可随同细细胞分裂裂过程而而传递。简简单地说说，突变变的发生生及其过过程即为为致突

36、变变作用。 3、 诱发突变的的类型基因突变（genne mmutaatioon）a) 碱基置换(bassepaiir ssubsstittutiion)b) 移码突变 (frrameeshiift muttatiion) 染色体畸变变（chrromoosomme aaberrrattionn）c) 染色单体型型畸变(chrromaatidd-tyype abeerraatioon)d) 染色体型畸畸变(chrromoosomme aaberrrattionn) 染色体数目目改变e) 非整倍体和和多倍体体 (aaneuuplooidyy annd ppolyyloiid)4、 DNA损伤伤与突变

37、变a) 碱基损伤烷化剂(aalkyylattingg aggentt)是对DNA和蛋白白质都有有强烈烷烷化作用用的物质质。烷化作用指指烷化剂剂提供甲甲基或乙乙基等烷烷基与DNA共价结结合的过过程。鸟嘌呤的OO-6位被烷烷化常引引起碱基基错配，由由原来 的G：C转换为A：T（上图图），并并常诱发发肿瘤。 鸟嘌呤的的N-7位发生生烷化后后可导致致鸟嘌呤呤从 DNNA链上脱脱落，称称为脱嘌嘌呤作用用，致使使在该位位 点上出出现空缺缺，形成成AP位点；偶然在在复制时时，随机机配一个个碱基，导导致转换换或颠换换；多功功能烷化化剂，导导致染色色体或染染色单体体断裂。b) DNA链受受损1. 二聚聚体的形形

38、成：当当细胞或或机体受受到紫外外线刺激激，会使使DNA发生化化学变化化，其主主要产生生环丁烷烷嘧啶二二聚体和和(4-6)光产物物。可阻阻止DNA的复制制，并引引起细胞胞死亡。 2. DNNA加合物物（DNAA addduccts）形成成：活性性化学物物与细胞胞大分子子之间通通过共价价键形成成的稳定定复合物物，很难难用一般般的化学学或生物物学方法法使其解解离。3. DNNA-蛋白质质交联物物(DNNA-PProtteinn crrossslinnks，DPCC)形成 ：它是致致突变物物对生物物大分子子物质的的一种重重要的遗遗传损害害，也是是一种稳稳定的共共价结合合物。5、 细胞分裂过过程的改改变

39、与突突变a) 非整倍体和和多倍体体6、 观察项目的的选择：1观察的的效应终终点类型型i.基因突突变和染染色体畸畸变的检检测可直直接反映映外源毒毒物的致致突变性性，是评评价外源源毒物致致突变性性唯一可可靠的方方法。还还有许多多试验所所观察到到的现象象并不反反映基因因突变、染染色体畸畸变和染染色体分分离异常常，而仅仅反映致致突变过过程中发发生的其其他事件件。因此此，将试试验观察察到的现现象所反反映的各各种事件件统称为为遗传学学终点(geenettic enddpoiint)。 遗传学终点点分为44类： DNA原始始损伤(形成加加合物，断断裂，交交联)；基因突突变； 染色体体畸变；染色体体组畸变变。

40、2成套的的观察项项目关于遗传毒毒理学成成套观察察项目中中哪些试试验可入入选的原原则有：选择的遗遗传毒性性试验应应包括4种类型型的遗传传学终点点。通常的实实验材料料有病毒毒、细菌菌、真菌菌、培养养的哺乳乳细胞、植植物、昆昆虫及哺哺乳动物物等。体内试验验与体外外试验配配合。应包括生生殖细胞胞和体细细胞。通常，对于于一种受受试物应应当先用用原核细细胞或体体细胞的的体外试试验按遗遗传学终终点合理理配套进进行试验验，并对对有阳性性结果的的遗传学学终点验验证其在在体内的的真实性性，再行行选用生生殖细胞胞致突变变试验进进行遗传传危害的的评价。 7、 常用的致突突变试验验 ：(一)细菌回回复突变变试验(Amm

41、es试验) 细菌回复突突变试验验是利用用突变体体的测试试菌株，观观察受试试物能否否纠正或或补偿突突变体所所携带的的突变改改变，判判断其致致突变性性。常用用的菌株株有鼠伤伤寒沙门门氏菌(Saalmoonellla typphimmuriium)和大肠肠杆菌(E. Cooli)。(二)微核核试验: 微核(Miicroonuccleuus ，MN)的产生生与染色色体损伤伤有关微核是指指位于生生物细胞胞的细胞胞质中独独立于主主核，直直径小于于主核12O13，完全全与主核核分开的的圆形或或椭圆形形的微小小核。 它可以以是整条条染色体体，也可可以是染染色体断断片，染染色性与与主核一一致，其其中部分分微核具

42、具有DNA复制能能力。微微核是由由于外界界损害因因素使染染色体发发生断裂裂，细胞胞进入下下一次分分裂时，染染色体不不能随有有丝分裂裂进入子子细胞，而而导致染染色体丢丢失或断断裂，从从而形成成一个或或数个小小核。 微核试验验(Miicroonuccleuus ttestt，MNTT)是观察察受试物物能否产产生微核核的试验验。其主主要可检检出DNA断裂剂剂和非整整倍体诱诱变剂。 8、 致突变试验验的质量量控制：设立阴阴性对照照和阳性性对照；盲法观观察；资资料的统统计学分分析；试试验结果果的重现现性； 第八章 外源化学物物致癌作作用1、 化学致癌过过程：引引发阶段段，促进进阶段、恶恶性进展展阶段。引

43、发阶段的的主要特特征M ：不可逆；M 所引发的的“干细胞”在形态态学上无无法识别别；M 需要通过细细胞分裂裂“固定突突变”；M 剂量-反应应关系良良好，但但很难测测定的阈阈值，无无可测定定的最大大反应； M 存在自发启启动的引引发作用用(内源性)； M 对外源性化化学物质质和其他他化学因因素敏感感； M 引发剂的强强度以经经一定的的促长阶阶段后发发生的癌癌前病变变来定量量。促长阶段的的主要特特征 M 可逆(基因因表达、细细胞水平平)； M 促长剂的的有效性性仅出现现在引发发作用之之后 ；M 促长细胞群群（proomotted celll ppopuulattionn) 的存在在取决于于促长剂剂

44、的持续续存在；M 内源性促长长剂可起起“自发”促长作作用；M 剂量-反应应显示有有可测定定的阈值值，有可可测定的的最大效效应； M 对饮食和激激素等因因素敏感感； M 以能否有效效的扩大大引发细细胞群来来确定促促长剂的的相对强强度。进展阶段的的主要特特征 M 不可逆； M 核型不稳性性性导致致细胞基基因组结结构的形形态学改改变； M 有可测定的的和/或形态态学可描描述的细细胞基因因组的改改变；M 进展的早期期阶段，已已改变的的细胞对对环境因因素敏感感；M 可见良性和和/或恶性性肿瘤； M 促进展剂可可使已促促长的细细胞进入入该阶段段； M 可以发生自自发的进进展作用用。2、化学致致癌作用用机制

45、两两种学说说： 体细胞突变变致癌学学说（一）DNNA加合物物、蛋白白质加合合物、DPC：（二二）DNA修复与与致癌过过程：（三）癌基基因、原原癌基因因和抑癌癌基因： 非突变致癌癌学说：（四）基基因表达达调控异异常与肿肿瘤的发发生3、（一）DNA加合物物：许多多致癌物物是亲电电剂与生生物大分分子（如如 DNNA）结合形成加加合物造成 DNNA损伤部部分细胞胞恶性转转化肿瘤； DNA加合合物在化化学致癌癌作用过过程中起起到关键键作用，是是引起肿肿瘤的直直接原因因之一。（二）DNNA修复与与化学致致癌：正正确修复复：受损损的DNA完全回回复原有有的结构构与功能能，不发发生突变变； 错误修复：经修复复的DNA部分仍仍可能在在结构和和功能上上存在缺缺陷，细细胞虽 能生存存，但出出现突变变。 （三）癌基基因、原原癌基因因及抑癌癌基因：（四）基因因调控异异常：表表观遗传传学调控控失调；细胞异异常增生生；免疫疫抑制；内分泌泌激素失失衡；过过氧化酶酶体增殖殖剂激活活受体4、5、IARRC将化化学物对对人类致致癌性资资料(流行病病学调查查和病例例报告)和对实实验动物物致癌性性资料分分为四级级（20002