检验员培训教程系列3（DOC 24）30823.docx

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1、第三部分 仪器分析法第一章 紫外分光光度法一、原理 可见光光、紫外线照照射某些物质质，主要是由由于物质分子子中价电子能能级跃迁对辐辐射的吸收，而而产生化合物物的可见紫外外吸收光谱。基基于物质对光光的选择性吸吸收的特性而而建立分光光光度法或称吸吸收光谱法的的分析方法。它它是以朗伯比耳定律律为基础。 1 朗伯比耳定律 A = lg- = EECL T式中 A为吸吸收度； TT为透光率； EE为吸收系数数，采用的表表示方法是（EE），其其物理意义为为当溶液浓度度为1%（gg/ml），液液层厚度为11cm时的吸吸收度数值； CC为100mml溶液中所所含被测物质质的重量（按按干燥品或无无水物计算），g

2、； LL为液层厚度度，cm。二、使用范围 凡具有有芳香环或共共轭双键结构构的有机化合合物，根据在在特定吸收波波长处所测得得的吸收度，可可用于药品的的鉴别、纯度度检查及含量量测定。三、仪器 可见-紫外分光光光度计。其应应用波长范围围为200400nm的紫外光光区、4000850nnm的可见光光区。主要由由辐射源（光光源）、色散散系统、检测测系统、吸收收池、数据处处理机、自动动记录器及显显示器等部件件组成。本仪器是根据相相对测量的原原理工作的，即即先选定某一一溶剂（或空空气、试样）作作为标准（空空白或称参比比）溶液，并并认为它的透透光率为1000（或吸吸收度为0），而而被测的试样样透光率（或或吸收

3、度）是是相对于标准准溶液而言，实实际上就是由由出射狭缝射射出的单色光光，分别通过过被测试样和和标准溶液，这这两个光能量量之比值，就就是在一定波波长下对于被被测试样的透透光率（或吸吸收度）。本仪器可精密测测定具有芳香香环或共轭双双键结构的有有机化合物、有有色物质或在在适当条件下下能与某些试试剂作用生成成有色物的物物质。 使用前前应校正测定定波长并按仪仪器说明书进进行操作。四、仪器的校正正 1.波波长的准确度度试验 以仪器器显示的波长长数值与单色色光的实际波波长值之间误误差表示，应应在1.0nmm范围内。 可用仪仪器中氘灯的的486.002nm与656.110nm谱线线进行校正。 2.吸吸收度的准

4、确确度试验 3.杂杂散光的试验验 4.波波长重现性试试验 5.分分辨率试验五、测定方法 1.对对照品比较法法 （1）按按各品种项下下的方法，分分别配制供试试品溶液和对对照品溶液，对对照品溶液中中所含被测成成分的量应为为供试品溶液液中被测成分分标示量的110010%，所所用溶剂也应应完全一致，在在规定的波长长测定供试品品溶液和对照照品溶液的吸吸收度后，按按下式计算含含量，即得。 （2）计计算式 A样样G对/稀释倍数数1001 含量（%）= - 100% A对对G样/稀释倍数数1001 2.吸吸收系数法 （1）按按各品种项下下的方法配制制供试品溶液液，在规定的的波长处测定定其吸收度，再再以该品种在

5、在规定条件下下的吸收系数数计算含量。用用本法测定时时，应注意仪仪器的校正和和检定。 （2）计计算式 A样 含量（%）= - 100% G样样/稀释倍数数(E)对1001 3.计计算分光光度度法 采用计计算分光光度度法应慎重。本本法有多种，使使用时均应按按各品种项下下规定的方法法进行。当吸吸收度处在吸吸收曲线的陡陡然上升或下下降的部位测测定时，波长长的微小变化化可能对测定定结果造成显显著影响，故故对照品和供供试品测试条条件应尽可能能一致。若测测定时不用对对照品，如维维生素A测定定法，则应在在测定时对仪仪器作仔细的的校正和检定定。六、注意事项 1.空空白溶液与供供试品溶液必必须澄清，不不得有浑浊。

6、如如有浑浊，应应预先过滤，并并弃去初滤液液。 2.测测定时，除另另有规定外，应应以配制供试试品溶液的同同瓶溶剂为空空白对照，采采用1cm的石英英吸收池。 3.在在规定的吸收收峰波长2nm以内测测试几个点的的吸收度，以以核对供试品品的吸收峰波波长位置是否否正确，除另另有规定外，吸吸收峰波长应应在该品种项项下规定的波波长2nm以内；否则应考虑虑该试样的真真伪、纯度以以及仪器波长长的准确度，并并以吸收度最最大的波长作作为测定波长长。 4.一一般供试品溶溶液的吸收度度读数，以在在0.300.7之间的的误差较小。 5.吸吸收池应选择择配对，否则则要引入测定定误差。在规规定波长下两两个吸收池的的透光率相差

7、差小于0.55的吸收池池作配对，在在必要的情况况时，须在最最终测量扣除除吸收池间的的误差修正值值。 6.由由于吸收池和和溶剂本身可可能有空白吸吸收，因此测测定供试品的的吸收度后应应减去空白读读数，再计算算含量。 7.仪仪器的接地必必须良好，一一切裸露的零零件对地电位位不得超过224伏（测电电笔的氖管不不得发亮）。 8.在在使用过程中中，如需开启启试样室盖时时或暂时停止止测试时，必必须及时推入入光门钮杆（使使光电管前光光门关闭），保保护光电管，以以防止光电管管受强光或长长时间照射而而损坏。 9.在在测定时或改改测其它检品品时，应用待待测溶液冲洗洗吸收池34次，用干干净绸布或擦擦镜纸擦净吸吸收池的

8、透光光面至不留斑斑痕（切忌把把透光面磨损损）。 10.取吸收池时时，应拿毛玻玻璃两面，切切忌用手拿捏捏透光面，以以免粘上油污污。使用完后后及时用测定定溶剂冲净，再再用纯化水冲冲净，用干净净绸布或擦镜镜纸擦干，晾晾干后，放入入吸收池盒中中，防尘保存存。 11.若吸收池内内外壁沾污，两两池差较大的的处理。 （1）可可用绸布缠在在扁竹条外或或用脱脂棉缠缠在细玻璃棒棒上蘸上乙醇醇，轻轻摩擦擦，再用纯化化水冲净。 （2）如如上述方法处处理不好，必必要时可用重重铬酸钾-硫硫酸洗液泡洗洗12分钟钟，用自来水水冲净，再用用纯化水冲净净。 （3）不不得用毛刷刷刷洗或硬物拭拭擦，以防止止表面光洁度度受损影响正正常

9、使用。 12.请务必注意意经常保持硅硅胶的干燥，目目的是保护光光学元件和光光电放大器系系统不致受潮潮损坏而影响响仪器的正常常工作，如发发现有的硅胶胶由蓝色变为为粉红色，应应立即更换。该该仪器干燥剂剂筒有两个：一个是装在在放大器暗盒盒上，另一个个装在单色光光器暗盒上。 13.在更换硅胶胶干燥剂时，应应关闭切断电电源。 14.在停止工作作期间，主机机试样室内应应放入袋装或或筒装硅胶干干燥剂。用防防尘罩罩住整整个仪器，并并在防尘罩内内放数袋防潮潮硅胶。 15.仪器在操作作中，狭缝的的宽度应从小小逐渐开大。若若狭缝过大，由由于进入光电电管的光能量量强度过大，将将会使放大器器输出信号达达到饱和，以以至数

10、字显示示出溢出（即即数字闪烁或或示1不变）。这这不是仪器有有故障。 16.将波长旋转转放在6255nm，铗缝缝关闭在0.02nm附近，选选择按键恢复复在停止工作作部位（即三三个键均弹出出）。 17.搬动仪器时时应搬在主体体端，不要搬搬在试样室和和光电管盒端端以及光源灯灯室部位，以以防止仪器狭狭缝或光路部部件受力而发发生变形。并并在搬动或运运输时，应将将可动部分固固定，如各旋旋钮可用胶布布贴住，狭缝缝位置开大些些，然后固定定，不要关小小狭缝，以免免运输时振动动使狭缝刀口口受损坏。 18.仪器的光栅栅、反射镜绝绝对不能擦拭拭，否则将损损坏仪器光学学表面，增加加杂散光。 19.仪器经过搬搬动请及时检

11、检查并纠正波波长精度，为为保证测定的的准确性请经经常校准波长长精度。如有有异常，应立立即报告质量量保证部，但但不得擅自调调整，并及时时做好记录。七、结果计算 A E（供供试品） = CL E（供供试品） 含量（%）= - 100% E（标标准值或对照照品）八、允许差 仪器分分析方法的误误差限度，除除另有规定外外，其相对偏偏差应在(2.033.0)%。第二章 比色色法一、原理及适用用范围 在可见见光区，除某某些物质有吸吸收外，很多多物质本身并并没有吸收，但但可在一定条条件下加入显显色试剂或经经过处理使其其显色后，根根据颜色深浅浅与浓度成正正比关系，则则可用比色法法测定含量。二、仪器 可见分分光光

12、度计（或或比色计）其其应用波长范范围为4000850nnm的可见光光区。主要由由辐射源（光光源）、色散散系统（或滤滤光片）、检检测器系统、显显示系统、记记录器及吸收收池等部件组组成。使用前前应校正测定定波长并按仪仪器说明书进进行操作。三、仪器的校正正 按照紫紫外分光光度度法项下的有有关规定及按按仪器说明书书要求进行校校正。波长的的准确度应在在3nm范围内内。四、测定方法 1.用用比色法测定定时，应取对对照品同时操操作。除另有有规定外，比比色法所用的的空白系指用用同体积的溶溶剂代替对照照品或供试品品溶液，然后后依次加入等等量的相应试试剂，并用同同样方法处理理。在规定的的波长处测定定对照品和供供试

13、品溶液的的吸收度后，按按紫外分光光光度法项下“对照品比较较法”的计算式计计算含量。 2.当当吸收度和浓浓度关系不呈呈线性时，应应取数份梯度度量的对照品品溶液，用溶溶剂补充至同同一体积，显显色后测定各各份溶液的吸吸收度，然后后以吸收度与与相应的浓度度绘制标准曲曲线，再根据据供试品的吸吸收度在标准准曲线上求出出其含量。三、注意事项 测定时时，应取对照照品平行操作作，使所用试试剂用量、反反应温度、酸酸碱度、反应应时间等完全全一致，对随随时间变化影影响显色的品品种应准确控控制读数时间间，操作时应应注意避光。第三章 高效效液相色谱法法一、原理 高效液液相色谱法是是用高压输液液泵将具有不不同极性的单单一溶

14、剂或不不同比例的混混合溶剂、缓缓冲液等流动动相，压入装装有固定相的的色谱柱，经经进样阀注入入供试品，由由流动相带入入柱内，在柱柱内各成分被被分离后，依依次进入检测测器，色谱信信号由记录仪仪或积分仪记记录。二、适用范围 高效液液相色谱法是是一种分离分分析方法，适适用于挥发性性低、热稳定定性差、分子子量大的高分分子化合物以以及离子型化化合物等的定定性、定量分分析。中国药药典主要用于于药品的含量量测定、有关关物质检查、杂杂质限度检查查和鉴别等。三、仪器 高效液液相色谱仪主主要由输液泵泵系统、进样样器系统、色色谱柱、检测测器、记录器器、显示器及及数据处理机机（或兼有组组分收集系统统）等组成。使使用时应

15、按仪仪器的说明书书进行操作。四、仪器的校正正 1.高高效液相色谱谱仪的柱箱控控温精度、基基线噪声、基基线漂移、灵灵敏度或检测测限、线性范范围的检定均均按仪器说明明书的技术要要求进行校验验，应符合规规定。 2.以以紫外-可见见光检测器、荧荧光检测器、差差示折光检测测器为检测器器的实验室通通用液相色谱谱仪的检定，所所用各种标准准物质应使用用经国家技术术监督部门批批准颁发的标标准物质。具具体校正方法法和主要技术术指标见“高效液相色色谱仪检测器器的校验”。 3.泵泵的耐压试验验 4.泵泵流量设定值值误差、流量量稳定性误差差的试验 5.柱柱恒温箱温度度设定值误差差和控温稳定定性误差的试试验 6.梯梯度准

16、确度的的试验 7.定定性定量重现现性的试验五、对仪器的一一般要求 1.色色谱柱的填充充剂和流动相相的组分应按按各品种项下下的规定。常常用的色谱柱柱填充剂有硅硅胶（正相色色谱）和化学学键合硅胶，后后者以十八烷烷基硅烷键合合硅胶（反相相色谱）最为为常用，辛基基硅烷键合硅硅胶次之，氰氰基或氨基键键合硅胶也有有使用。离子子交换填充剂剂用于离子交交换色谱；凝凝胶或玻璃微微球等填充剂剂用于分子排排阻色谱等。除除另有规定外外，柱温为室室温，检测器器为紫外吸收收检测器。 2.药药典正文中各各品种项下规规定的条件除除固定相种类类、流动相组组分、检测器器类型不得任任意改变外，其其余如色谱柱柱内径、长度度、固定相牌

17、牌号、载体粒粒度、流动相相流速、混合合流动相各组组分的比例、柱柱温、进样量量、检测器的的灵敏度等，均均可适当改变变，以适应具具体品种并达达到系统适用用性试验的要要求。 3.一一般色谱图约约于20分钟钟内记录完毕毕。六、系统适用性性试验 按各品品种项下要求求对仪器进行行适用性试验验，即用规定定的对照品对对仪器进行试试验和调整，应应达到规定的的要求，或规规定分析状态态下色谱柱的的最小理论板板数、分离度度、重复性和和拖尾因子。 1.色色谱柱的理论论板数（n） n = 5.544(tR/Wh/2)2式中 tR为为保留时间（以以分钟或长度度计，下同，但但应取相同单单位）； WWh/2为半峰峰高宽。 2.

18、分分离度（R） 除另有规规定外，分离离度应大于11.5。 2(tR2tR1) R = - W1W2式中 tR22为相邻两峰峰中后一峰的的保留时间； ttR1为相邻两两峰中前一峰峰的保留时间间； WW1及W2为此相邻两两峰的峰宽。 3.重重复性 取各品品种项下的对对照溶液，连连续进样5次次，除另有规规定外，其峰峰面积测量值值的相对标准准偏差应不大大于2.0%。也可按各各品种校正因因子测定项下下，配制相当当于80%、1100%和1120%的对对照品溶液，加加入规定量的的内标溶液，配配成3种不同同浓度的溶液液，分别进样样3次，计算算平均校正因因子，其相对对标准偏差也也应不大于22.0%。 4.拖拖尾

19、因子（TT） 除另另有规定外，TT应在0.9951.005之间。 W0.005h T = - 2d11式中 W0.05h为00.05峰高高处的峰宽； dd1为峰极大至至峰前沿之间间的距离。七、测定法 定量测测定时，可根根据供试品的的具体情况采采用峰面积法法或峰高法。测测定杂质含量量时，须采用用峰面积法。（一）内标法 加校正因因子测定供试试品中某个杂杂质或主成分分含量 1.按按各品种项下下的规定，精精密称（量）取取对照品和内内标物质，分分别配成溶液液，精密量取取各溶液，配配成校正因子子测定用的对对照溶液。取取一定量注入入液相色谱仪仪，记录色谱谱图。测量对对照品和内标标物质的峰面面积或峰高，按按下

20、式计算校校正因子： AS/CS 校正因因子（f）= - AR/CR式中 AS为为内标物质的的峰面积或峰峰高； AAR为对照品的的峰面积或峰峰高； CCS为内标物质质的浓度； CCR为对照品的的浓度。 再取各各品种项下含含有内标物质质的供试品溶溶液，注入液液相色谱仪，记记录色谱图，测测量供试品中中待测成分（或或其杂质）和和内标物质的的峰面积或峰峰高，按下式式计算含量： AX 含量（CCX）= f- AS/CS CX稀释倍数 含量（%）= 100% GXX(1干燥失失重)式中 AX为为供试品（或或其杂质）的的峰面积或峰峰高； CCX为供试品（或或其杂质）的的浓度； GGX为供试品的的称样量。 当配

21、制制校正因子测测定用的对照照溶液和含有有内标物质的的供试品溶液液使用同一份份内标物质溶溶液时，则配配制内标物质质溶液不必精精密称（量）取取。 2.内内标物质的选选择 （1）内内标物质应是是样品中不含含有的组分，否否则会使峰重重叠而无法准准确测量内标标物质的峰面面积。 （2）内内标物质的保保留时间应与与待测成分相相近，并达到到完全分离，分分离度R1.5。 （3）内内标物质必须须是纯度符合合要求的化合合物，若非纯纯品无干扰峰峰也可采用。已已知含量的较较纯物质也可可用，但需扣扣除内标物质质的重量。（二）外标法 测定供试试品中某个杂杂质或主成分分含量 1.按按各品种项下下的规定，精精密称（量）取取对照

22、品和供供试品，配制制成溶液，分分别精密取一一定量，注入入液相色谱仪仪，记录色谱谱图，测量对对照品和供试试品待测成分分的峰面积（或或峰高），按按下式计算含含量： AX 含量（CCX）= CR- AR CX稀释倍数 含量（%）= 100% GXX(1干燥失失重) 2.由由于微量注射射器不易精确确控制进样量量，当采用外外标法测定供供试品中某杂杂质或主成分分含量时，以以定量环进样样为好。（三）加校正因因子的主成分分自身对照法法（四）不加校正正因子的主成成分自身对照照法（五）面积归一一化法 由于峰峰面积归一化化法测定误差差大，因此，本本法通常只能能用于粗略考考察供试品中中的杂质含量量。除另有规规定外，一

23、般般不宜用于微微量杂质的检检查。方法是是测量各杂质质峰的面积和和色谱图上除除溶剂峰以外外的总色谱峰峰面积，计算算各峰面积占占总峰面积的的百分率，即即得。八、注意事项 1.虽虽然泵能耐压压6000PPSI的压力力，但不要使使泵处于40000PSII以上的压力力为宜。 2.安安装及拆卸色色谱柱时应注注意柱的连接接方向，千万万不能接反。否否则可能导致致柱效降低，甚甚至损坏色谱谱柱。 3.严严禁开空泵。在在无流动相通通过时不要扳扳动进样阀的的操作杆，使使用时要注意意尽可能少扳扳动，以免磨磨损内部的密密封垫圈。 4.为为了延长检测测器灯源的使使用寿命，在在色谱泵稳定定后再打开检检测器电源开开关，分析结结

24、束后立即关关闭检测器。 5.应应使用高纯度度、高质量的的溶剂和试剂剂。 6.避避免pH值超超限，pH值值应控制在22.27.5之间。ppH值偏低或或偏高都会腐腐蚀液相系统统的不锈钢材材料；破坏色色谱柱填料的的结构，使填填料失活。 7.色色谱柱温不能能超过规定要要求，柱温过过高会加速色色谱柱填料老老化，破坏其其结构。 8.使使用所有溶剂剂必须是互溶溶的。这对于于缓冲流动相相来说是非常常重要的，盐盐类的析出会会很快损坏要要维护的部件件。 9.流流动相首选甲甲醇-水系统统，如经试用用不适合时，再再选用其他溶溶剂。为保护护仪器，应尽尽可能少用含含有缓冲液的的流动相。如如果流动相中中含有缓冲剂剂，每日使

25、用用后应用不含含缓冲剂的流流动相或新鲜鲜纯化水将仪仪器管路、泵泵、进样阀、色色谱柱及检测测池等充分冲冲洗干净。 10.如果液相系系统使用未过过滤的洗脱液液、注入未过过滤的样品、系系统中滞留缓缓冲洗脱液都都能堵塞系统统或划伤泵柱柱塞。所以流流动相、样品品使用前必须须用0.455m微孔滤膜膜过滤；流动动相并先经脱脱气处理后使使用。停泵后后决不允许缓缓冲洗脱液滞滞留在系统中中，须用经过过滤后的新鲜鲜纯化水进行行清洗，并保保证将缓冲剂剂冲洗干净。 11.如果泵闭置置在2天以上上，应将甲醇醇注满液相系系统，以避免免水溶剂系统统中可能存在在微生物的繁繁殖。 12.色谱柱保存存时应使填充充剂处在润湿湿状态，

26、两端端密塞。反相相柱（如十八八烷基硅烷键键合硅胶柱）可可在甲醇中保保存；正相柱柱（如硅胶柱柱）可在正己己烷中保存等等。 13.决不能使用用盐酸溶液。一一般来说，任任何浓度的卤卤化物都会腐腐蚀未经钝化化的不锈钢材材料。 14.尽量避免使使用在电化学学过程中引起起腐蚀的金属属离子。应避避免的典型金金属离子有锰锰、铬、锌、铜铜、镍、钼、铁铁。九、允许差 含量测测定的精度，除除另有规定外外，其相对标标准偏差应不不大于2.00%。第四章 气相相色谱法一、原理 气相色色谱法的流动动相为气体，称称为载气；色色谱柱分为填填充柱和毛细细管柱两种。填填充柱内装吸吸附剂、高分分子多孔小球球或涂渍固定定液的载体；毛细

27、管柱内内壁涂渍或交交联固定液。注注入进样口的的供试品被加加热气化，并并被载气带入入色谱柱，在在柱内各成分分被分离后先先后进入检测测器，色谱信信号用记录仪仪或数据处理理器记录。二、适用范围 气相色色谱法是一种种分离分析方方法，适用于于含挥发性或或经裂解、衍衍生化等能气气化的药品及及多组分混合合物的定性、定定量分析。中中国药典主要要用于原料药药中残留溶剂剂、挥发性杂杂质的检查，制制剂中含有乙乙醇量的测定定以及具有一一定挥发性原原料药及其制制剂的含量测测定。三、仪器 气相色色谱仪主要由由气路系统、进进样系统、色色谱柱、检测测器、记录器器、显示器及及数据处理机机（或兼有组组分收集系统统）等组成。使使用

28、时应按仪仪器的说明书书进行操作。四、对仪器的一一般要求 1.除除另有规定外外，载气为氮氮气；色谱柱柱为填充柱或或毛细管柱，填填充柱的材质质为不锈钢或或玻璃，载体体用直径为00.2500.18mmm、0.1880.155mm或0.150.125mmm经酸洗并硅硅烷化处理的的硅藻土或高高分子多孔小小球；常用玻玻璃或弹性石石英毛细管柱柱的内径为00.20mmm或0.32mmm。进样口口温度应高于于柱温3050；进样量一一般不超过数数微升；柱径径越细进样量量应越少。检检测器为氢火火焰离子化检检测器，检测测温度一般高高于柱温，并并不得低于1100，以免水气气凝结，通常常为250350。 2.药药典正文中

29、各各品种项下规规定的条件，除除检测器种类类、固定液品品种及特殊指指定的色谱柱柱材料不得任任意改变外，其其余如色谱柱柱内径、长度度、载体牌号号、粒度、固固定液涂布浓浓度、载气流流速、柱温、进进样量、检测测器的灵敏度度等，均可适适当改变，以以适应具体品品种并符合系系统适用性试试验的要求。一一般色谱图约约于30分钟钟内记录完毕毕。五、系统适用性性试验 同高效效液相色谱法法项下规定。六、测定法 1. 同高效液相相色谱法项下下规定。用气气相色谱法进进行定量分析析时，应尽量量采用内标法法为宜。同时时也要注意进进样技术的熟熟练，因内标标物质与供试试品成分的蒸蒸气压不同，则则蒸气压高的的进样量也会会较多。故选

30、选择测定用内内标物质时，除除应考虑内标标峰的保留时时间应与被测测成分相近，无无杂质峰重叠叠，尚要考虑虑其蒸气压是是否近似。 2.气气相色谱法手手工进样量不不易精确控制制，特别应注注意留针时间间和室温的影影响。七、允许差 含量测测定的精度，除除另有规定外外，其相对标标准偏差应不不大于2.00%。第五章 旋光光度测定法一、定义 偏振光光透过长1ddm并每1ml中含有有旋光性物质质1g的溶液，在在一定波长与与温度下测得得的旋光度称称为比旋度。测测定比旋度（或或旋光度）可可以区别或检检查某些药品品的纯杂程度度，亦可用以以测定含量。二、原理 当一单单色光（钠光光谱的D线即即589.33nm）通过过起偏镜

31、产生生直线偏振光光向前进行，当当通过装有含含有某些光学学活性（即旋旋光性）的化化合物液体的的测定管时，偏偏振光的平面面（偏振面）就就会向左或向向右旋转一定定的角度，即即该旋光性物物质的旋光度度。其值可以以从自动示数数盘上直接读读出。 偏振光光透过长1ddm并每1mml中含有旋旋光性物质11g的溶液，在在一定波长与与温度下测得得的旋光度称称为比旋度。 对液体体供试品 = - ld 100 对固体体供试品 = lc式中 为比旋度度； DD为钠光谱的的D线； tt为测定时的的温度； ll为测定管长长度，dm； 为测得的旋旋光度； dd为液体的相相对密度； cc为每1000ml溶液中中含有被测物物质的

32、重量，gg（按干燥品品或无水物计计算）。三、测定方法 1.打打开稳压电源源开关，稍等等片刻，俟电电压表指针稳稳定地指示在在220V处处。 2.打打开旋光仪电电源开关，经经5分钟钠光光灯发光稳定定后再工作。 3.扳扳上直流开关关，若直流开开关扳上后，灯灯熄灭，则再再将直流开关关上下重复扳扳动1到2次次，使钠灯在在直流下点亮亮为正常。 4.将将测定管用供供试品所用的的溶剂冲洗334遍，缓缓缓注入适量量溶剂。 5.测测定管中若有有气泡，应先先将气泡浮在在凸颈处，通通光面两端的的雾状液滴，应应用擦镜纸揩揩干。 6.测测定管螺帽不不宜旋得过紧紧，以免产生生应力，影响响读数。 7.将将测定管放入入样品室，

33、测测定管安放时时，应注意标标记的位置和和方向，盖上上箱盖。 8.打打开示数，调调节零位手轮轮，使旋光示示值为零。 9.取取出测定管，将将空白溶液倒倒出，用供试试品溶液冲洗洗34遍，将将供试品溶液液缓缓注入测测定管，用擦擦镜纸擦净测测定管，特别别要擦净两端端的通光面，按按相同的位置置和方向正确确地放入样品品室内，盖好好箱盖。 10.示数盘将转转出该样品的的旋光度。示示数盘上红色色示值为左旋旋（），黑黑色示值为右右旋（）。 11.逐次按下复复测按钮，重重复读取旋光光度3次，取取3次的平均均值作为测定定结果。 12.如果样品超超过测量范围围，仪器在45处自动动停止，此时时取出测定管管，按一下复复测按

34、钮开关关，仪器即转转回零位。 13.钠灯在直流流供电系统出出现故障不能能使用时，仪仪器也可在钠钠灯交流供电电的情况下测测试。但仪器器的性能可能能略有降低。 14.测定完毕后后，取出测定定管，将测定定管用纯化水水洗净。应晾晾干，防尘保保存。 15.关闭“示数”开关，示数数盘复原。 16.关闭“直流”及“电源”开关。 17.关闭稳压电电源开关，关关闭总电源开开关。 18.罩好防尘罩罩，填写操作作记录。四、注意事项 1.中中国药典20000年版二二部规定，用用钠光谱的DD线（5899.3nm）测测定旋光度，除除另有规定外外，测定管长长度为1dmm（如使用其其他管长，应应进行换算），测测定温度为220

35、。 2.配配制溶液及测测定时,均应应调节温度至至200.5（或各药品品项下规定的的温度）。 3.供供试的液体或或固体物质的的溶液应不显显浑浊或含有有混悬的小粒粒。如有上述述情况时，应应预先滤过，并并弃去初滤液液。 4.每每次测定前应应以溶剂作空空白校正，测测定后，再校校正1次，以以确定在测定定时零点有无无变动，如第第2次校正时时发现零点有有变动，则应应重新测定旋旋光度。 5.测测定供试品与与空白校正，应应按相同的位位置和方向放放置测定管于于仪器样品室室，并注意测测定管内不应应有气泡，否否则影响测定定的准确度。 6.测测定管使用后后，尤其在盛盛放有机溶剂剂后,必须立立即洗净，以以免橡皮圈受受损发

36、粘。测测定管每次洗洗涤后，切不不可置烘箱中中干燥，以免免发生变形，橡橡皮圈发粘。 7.测测定管两端的的通光面，使使用时须特别别小心，避免免碰撞和触摸摸，只能以擦擦镜纸揩试，以以防磨损。应应保护其光亮亮、清洁，否否则影响测定定结果。 8.测测定管螺帽不不宜旋得过紧紧，以免产生生应力，影响响读数。 9.钠钠灯使用时间间一般勿连续续使用超过22小时，并不不宜经常开关关。当关熄钠钠灯后，如果果要继续使用用，应等钠灯灯冷后再开。 10仪仪器应放置干干燥通风处，防防止潮气侵蚀蚀，镇流器应应注意散热。搬搬动仪器应小小心轻放，避避免震动。 11.光源积灰或或损坏，可打打开机壳擦净净或更换。 12.机械部分摩摩

37、擦阻力增大大，可以打开开后门板，在在伞形齿轮、蜗蜗轮蜗杆处加加稍许钟油。 13.如果仪器发发现停转或其其它元件损坏坏的故障，应应按电原理图图详细检查。第六章 pHH值的测定法法一、原理 PHSS-2型酸度度计是用玻璃璃电极作为测测量电极，甘甘汞电极作为为参考电极，当当氢离子浓度度发生变化时时，玻璃电极极和甘汞电极极之间的电动动势也随着引引起变化，而而电势变化符符合能斯特方方程式： RT E=EEo-2.30026-pH F式中 E产产生的电极电电位 T绝对温度 EEo零电位 F法拉第常数数 RR-气体常数数 pH表示被测溶溶液pH值和内溶溶液pH值的的差值 PHSS-2型酸度度计是利用玻玻璃电

38、极和甘甘汞电极对被被测溶液中不不同酸度产生生的直流电势势，输入到一一台用参量振振荡深度负反反馈的直流放放大器，以达达到pH值指示的的目的。二、注意事项 1.应应注意玻璃电电极装到电极极夹中时应略略高于甘汞电电极，以免球球膜与试杯相相碰。 2.新新使用或久放放未用的玻璃璃电极在使用用前应放在纯纯化水内浸泡泡活化48小小时，平时也也最好浸泡在在水中，以便便下次使用时时能迅速地工工作。 3.将将甘汞电极的的颈端橡皮塞塞取下，检查查饱和氯化钾钾溶液情况，溶溶液中应有氯氯化钾结晶析析出，以确保保溶液饱和，太太少应予以添添加。使用前前应把电极弯弯管下端橡皮皮套除去。 4.按按下电源按键键，接通电源源，按下

39、pH按键，指指示灯亮后，一一般短时间测测量，只需预预热数分钟即即可，但要保保持仪表零点点稳定，必须须预热半小时时或一小时以以上。 5.本本仪器应置于于干燥环境中中，无显著振振动和强电磁磁场干扰，并并防止灰尘及及腐蚀性气体体侵入。 6.每每次使用，在在校正及测定定前后均应用用纯化水将电电极充分洗净净。 7.测测定前校正仪仪器时，应选选择与待测溶溶液pH值接近的的标准pH缓冲液，ppH值相差不不应超过3个个单位。 8.为为了使测定结结果可靠，在在测定时用标标准pH缓冲液校校正仪器后，应应再用另一种种相差约3个个单位pH的的标准缓冲液液复校之。 9.待待测溶液，校校正液与电极极的温度应相相同或相近，

40、差差异最好不超超过2。 10.仪器的电表表应避免震动动与打击，不不用或移动时时，将pH-mV分档开关关置于“0”处，以减少少摆动。 11.温度补偿器器转动时勿用用力过大，以以防止移动紧紧固螺丝的位位置，影响ppH准确度。 12.对于pH大于9的的溶液的测定定，应使用2231型锂玻玻璃电极测定定；使用有碱碱误的电极测测定时，应校校正碱误。 13.玻璃电极在在测定碱性溶溶液时，应尽尽量快速，测测定强碱溶液液后，电极性性能常不能立立即复原，可可在1moll/L盐酸溶溶液中浸泡，再再使用纯化水水冲洗，有时时甚至需在酸酸液内浸泡几几小时，才能能复原。 14.玻璃电极球球泡很薄，因因此在使用时时勿与玻璃杯

41、杯及硬物相碰碰，防止球泡泡破碎。 15.玻璃电极球球泡勿接触污污物，勿用手手去摸电极球球泡，以免玻玻璃膜沾上油油脂，影响电电极测量精度度。如发现沾沾污可用医用用棉花轻擦球球泡部分，或或用0.1mmol/L稀稀盐酸清洗之之，再用纯化化水冲洗干净净。 16.玻璃电极插插头必须防止止沾上水，保保证插头绝缘缘阻抗。 17.玻璃电极和和甘汞电极在在使用时，必必须注意内电电极与球泡之之间及内电极极和陶瓷芯之之间是否有气气泡停留，如如有则必须排排除。 18.玻璃电极球球泡有裂纹，或或老化（使用用或久放二年年以上），则则应调换新的的电极，否则则测量时反应应迟钝，甚至至造成较大的的测量误差，新新的电极（或或干放

42、一段时时间后的电极极）在使用之之前需在纯化化水内浸一昼昼夜。 19.玻璃电极在在常规情况下下只能保存、使使用一年。 20.配制标准ppH缓冲液与与溶解供试品品的纯化水,应是新沸过过的冷纯化水水,其pH值值应为5.557.0。 21.pH9的标标准缓冲液应应装在聚乙烯烯瓶中密封保保存。 22.标准缓冲液液一般可保存存23个月月 ，但发现现有混浊、发发霉或沉淀等等现象时，不不能继续使用用。 23.对弱缓冲液液（如纯化水水或注射用水水）的pH值测定，先先用邻苯二甲甲酸氢钾标准准缓冲液校正正仪器后测定定供试液,并重取供试试液再测，直直至pH值的读数数在1分钟内内改变不超过过0.05为为止；然后再再用硼砂标准准液校正仪器器，再如上法法测定，二次次pH值的读数数相差应不超超过0.1，取取二次读数的的平均值为其其pH值。 24.当发现读数数有缓慢变化化时，可以拆拆开底板用电电吹风等工具具加热读数开开关，使读数数开关干燥，但但温度不得超超过60。23