药物分析杂环类药物的分析讲稿.ppt

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1、关于药物分析杂环类药物的分析第一页，讲稿共五十一页哦第一节第一节 吡啶类药物的分析吡啶类药物的分析 （一）典型药物的结构（一）典型药物的结构异烟肼异烟肼尼可刹米尼可刹米一、基本结构与主要化学性质一、基本结构与主要化学性质硝苯地平硝苯地平第二页，讲稿共五十一页哦（二）主要的化学性质（二）主要的化学性质 1.弱碱性弱碱性 母核母核吡啶环吡啶环上的氮原子显弱碱性上的氮原子显弱碱性 2.还原性还原性 酰肼基酰肼基具有较强的还原性具有较强的还原性 3.吡啶环的特性吡啶环的特性 可发生开环反应可发生开环反应第三页，讲稿共五十一页哦（一）吡啶环的开环反应（一）吡啶环的开环反应 本反应适用于吡啶环的本反应适用

2、于吡啶环的、位为无取代基的位为无取代基的异烟肼和尼可刹米。异烟肼和尼可刹米。1.1.戊烯二醛反应戊烯二醛反应 尼可刹米尼可刹米与溴化氰、苯胺反应生成黄与溴化氰、苯胺反应生成黄色至黄棕色戊烯二醛衍生物。色至黄棕色戊烯二醛衍生物。二、鉴二、鉴 别别 试试 验验2.2.二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应 异烟肼异烟肼与与2,4-二硝基氯苯反应，二硝基氯苯反应，在碱性溶液中显紫红色。在碱性溶液中显紫红色。第四页，讲稿共五十一页哦1.1.还原反应还原反应(银镜反应银镜反应)异烟肼加水溶解后，加氨制硝酸银试液，即有异烟肼加水溶解后，加氨制硝酸银试液，即有黑色浑浊出现，并生成氮和金属银，可在管壁上黑色浑浊出现，并

3、生成氮和金属银，可在管壁上产生银镜。产生银镜。+AgNO3 +H2O4Ag +N2（二）酰肼基团的反应（二）酰肼基团的反应第五页，讲稿共五十一页哦（三）形成沉淀的反应（三）形成沉淀的反应 本类药物具有吡啶环结构，可与重金属盐类（如本类药物具有吡啶环结构，可与重金属盐类（如氯化汞、硫酸铜、碘化铋钾）及苦味酸等试剂形成沉氯化汞、硫酸铜、碘化铋钾）及苦味酸等试剂形成沉淀。淀。（四）分解产物的反应（四）分解产物的反应 尼可刹米与氢氧化钠试液加热，即有二乙胺臭味尼可刹米与氢氧化钠试液加热，即有二乙胺臭味逸出，能使湿润的逸出，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色红色石蕊试纸变蓝色。2.2.缩合反应缩合反应 异烟肼

4、具有未被取代的酰肼基，与芳异烟肼具有未被取代的酰肼基，与芳醛缩合形成腙，析出醛缩合形成腙，析出黄色黄色结晶，可测定其熔点结晶，可测定其熔点（m.p228m.p228231231）。）。最常用的芳醛为香草醛，其次是最常用的芳醛为香草醛，其次是对二甲氨基苯甲醛、水杨醛等。对二甲氨基苯甲醛、水杨醛等。第六页，讲稿共五十一页哦1、对比最大吸收或最小吸收波长、对比最大吸收或最小吸收波长 按药品质量标准将供试品用规定溶剂配成一定浓度的供试液，按药品质量标准将供试品用规定溶剂配成一定浓度的供试液，在规定波长区域内测定最大吸收波长在规定波长区域内测定最大吸收波长max （或最小吸收波长或最小吸收波长 min）

5、。与药品质量标准中指明的最大吸收波长（或最小吸收波长）。与药品质量标准中指明的最大吸收波长（或最小吸收波长）对比，如果相同可认为是同一药物。对比，如果相同可认为是同一药物。2、对比百分吸收系数、对比百分吸收系数 按药品质量标准将供试品用规定溶剂配成一定浓度的溶按药品质量标准将供试品用规定溶剂配成一定浓度的溶液，在规定波长下测定吸收度，计算出百分吸收系数并进行液，在规定波长下测定吸收度，计算出百分吸收系数并进行比较。比较。（五）紫外吸收光谱特征（五）紫外吸收光谱特征第七页，讲稿共五十一页哦三、有关物质检查三、有关物质检查（一）异烟肼中游离肼的检查（一）异烟肼中游离肼的检查 异烟肼是一种不稳定的药

6、物，其中的游离肼是异烟肼是一种不稳定的药物，其中的游离肼是由制备时原料引入，或贮存过程中降解而产生。而肼由制备时原料引入，或贮存过程中降解而产生。而肼又是一种诱变剂和致癌物质，因此国内外药典多数规又是一种诱变剂和致癌物质，因此国内外药典多数规定了异烟肼原料药及其制剂中游离肼的限量检查。常定了异烟肼原料药及其制剂中游离肼的限量检查。常用的方法有薄层色谱法，比浊法和差示分光光度法。用的方法有薄层色谱法，比浊法和差示分光光度法。1、薄层色谱法、薄层色谱法 中国药典对异烟肼原料和注射用异烟肼中的游离中国药典对异烟肼原料和注射用异烟肼中的游离肼检查，均采用薄层色谱法。肼检查，均采用薄层色谱法。第八页，讲

7、稿共五十一页哦 2、比浊法、比浊法 JP（14）采用的检查方法。采用的检查方法。3、差示分光光度法、差示分光光度法（二）尼可刹米中有关物质检查（二）尼可刹米中有关物质检查 Ch.P2000Ch.P2000采用采用TLCTLC高低浓度对照法进行检查高低浓度对照法进行检查（三）硝苯地平中有关物质检查（三）硝苯地平中有关物质检查 硝苯地平遇光极不稳定，可发生光化学歧化作用降硝苯地平遇光极不稳定，可发生光化学歧化作用降解为硝苯吡啶衍生物及亚硝基吡啶衍生物，解为硝苯吡啶衍生物及亚硝基吡啶衍生物，Ch.P采用采用HPLC法进行检查。法进行检查。第九页，讲稿共五十一页哦（喹核碱）（喹核碱）（喹啉环）（喹啉环

8、）H2SO42H2O 本类药物具吡啶与苯环稠合而成的喹啉杂环，本类最本类药物具吡啶与苯环稠合而成的喹啉杂环，本类最常见的典型药物有硫酸奎宁、硫酸奎尼丁、盐酸环丙沙星、常见的典型药物有硫酸奎宁、硫酸奎尼丁、盐酸环丙沙星、喜树碱等。喜树碱等。第二节第二节 喹啉类药物分析喹啉类药物分析硫酸奎宁硫酸奎宁（quinine sulfate)一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质（一）典型药物结构（一）典型药物结构第十页，讲稿共五十一页哦硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁（quinidine sulfate)H2SO42H2O第十一页，讲稿共五十一页哦盐酸环丙沙星盐酸环丙沙星 HCl H2O第十二页，讲稿共五十一页

9、哦（二）主要化学性质（二）主要化学性质1 1、碱性：喹啉环上的、碱性：喹啉环上的N N具有碱性。具有碱性。2 2、旋光性、旋光性3 3、荧光特性、荧光特性第十三页，讲稿共五十一页哦二、鉴二、鉴 别别 试试 验验（一）（一）绿奎宁反应绿奎宁反应 奎宁和奎尼丁互为异构体，结构中均有奎宁和奎尼丁互为异构体，结构中均有6 6位含氧位含氧喹啉衍生物，可以发生绿奎宁反应，即奎宁盐经氯喹啉衍生物，可以发生绿奎宁反应，即奎宁盐经氯水（或溴水）的氯（溴）化反应，再加氨水处理，水（或溴水）的氯（溴）化反应，再加氨水处理，生成翠绿色的二醌基吲胺的胺盐。生成翠绿色的二醌基吲胺的胺盐。（二）光谱特征（二）光谱特征1.1

10、.紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征2.2.荧光光谱特征荧光光谱特征3.3.红外光谱特征红外光谱特征（三）无机酸盐（三）无机酸盐第十四页，讲稿共五十一页哦三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查（一）（一）硫酸奎宁中特殊杂质检查硫酸奎宁中特殊杂质检查检查项目主要有：检查项目主要有：1.酸度酸度2.氯仿乙醇中不溶物氯仿乙醇中不溶物3.其他金鸡纳碱其他金鸡纳碱 TLC高低浓度对比法高低浓度对比法检查检查第十五页，讲稿共五十一页哦（二）盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查（二）盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查 检查项目主要有：检查项目主要有：1.酸度酸度 2.溶液的澄清度与颜色溶液的澄清度与颜色 3.有关物质有关物质 H

11、PLC法中法中归一化归一化法检查法检查第十六页，讲稿共五十一页哦第三节第三节 托烷类药物托烷类药物 托烷类药物大多数是由莨菪烷衍生的氨基醇与托烷类药物大多数是由莨菪烷衍生的氨基醇与不同的有机酸缩合成酯的生物碱，常见的有颠茄生不同的有机酸缩合成酯的生物碱，常见的有颠茄生物碱和古柯生物碱，根据其结构特征均属于杂环类物碱和古柯生物碱，根据其结构特征均属于杂环类药物。现以最常用的典型药物硫酸阿托品和氢溴酸药物。现以最常用的典型药物硫酸阿托品和氢溴酸东莨菪碱为例，就其鉴别和杂质检查的有关问题进东莨菪碱为例，就其鉴别和杂质检查的有关问题进行讨论。行讨论。第十七页，讲稿共五十一页哦.HBr.3H2O氢溴酸东

12、莨菪碱氢溴酸东莨菪碱2.H2SO4.H2O硫酸阿托品硫酸阿托品一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质典典型型药药物物结结构构（一）（一）第十八页，讲稿共五十一页哦（二）主要化学性质（二）主要化学性质1.1.水解性水解性 本类药物具有酯的结构，易水解。本类药物具有酯的结构，易水解。如阿托品水解后生成莨菪醇与莨菪酸。如阿托品水解后生成莨菪醇与莨菪酸。2.2.碱碱 性性 阿托品和东莨菪碱的五元脂环上有叔阿托品和东莨菪碱的五元脂环上有叔 氮原子，具有较强的碱性。氮原子，具有较强的碱性。3.旋光性旋光性 阿托品和东莨菪碱均具有不对称碳原阿托品和东莨菪碱均具有不对称碳原 子而呈左旋体，比旋度子而呈左

13、旋体，比旋度2427。阿托品为莨菪碱的消旋体。阿托品为莨菪碱的消旋体。第十九页，讲稿共五十一页哦二、鉴二、鉴 别别 试试 验验（一）托烷生物碱一般鉴别试验（一）托烷生物碱一般鉴别试验（Vitaili反应）反应）（二）氧化反应（二）氧化反应 本类药物水解后生成的莨菪酸，可与硫酸和本类药物水解后生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲酸，同时有类似苦杏仁的臭味。苯甲酸，同时有类似苦杏仁的臭味。（三）沉淀反应（三）沉淀反应 与生物碱沉淀试剂生成沉淀。与生物碱沉淀试剂生成沉淀。（四）硫酸盐与溴化物反应（四）硫酸盐与溴化物反应 该反

14、应为阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱等托烷该反应为阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱等托烷类生物碱均显莨菪酸结构的特征反应，与发烟硝酸类生物碱均显莨菪酸结构的特征反应，与发烟硝酸加热处理得黄色三硝基衍生物，遇醇制氢氧化钾即加热处理得黄色三硝基衍生物，遇醇制氢氧化钾即显深紫色。显深紫色。第二十页，讲稿共五十一页哦（五）色谱法（五）色谱法 目前常用的薄层色谱吸附剂多为硅胶，目前常用的薄层色谱吸附剂多为硅胶，生物碱类药生物碱类药物必须以游离碱的形式才能顺利迁移物必须以游离碱的形式才能顺利迁移（展开）（展开）。若是以若是以盐的形式存在，则在硅胶薄层板上吸附太牢，致使色盐的形式存在，则在硅胶薄层板上吸附太牢，致使色斑

15、严重斑严重拖尾拖尾。这是含氮生物碱药物色谱分离鉴别的关。这是含氮生物碱药物色谱分离鉴别的关键问题，为使生物碱呈游离状态分离鉴别，键问题，为使生物碱呈游离状态分离鉴别，常采用两常采用两种方法种方法：1、在展开剂中加入少量的碱性试剂在展开剂中加入少量的碱性试剂 如浓氨水、二乙胺、如浓氨水、二乙胺、有机脂烃胺类，以便中和与碱结合的酸和硅胶的弱酸性，使生物碱有机脂烃胺类，以便中和与碱结合的酸和硅胶的弱酸性，使生物碱游离。游离。2、硅胶薄层板用碱处理硅胶薄层板用碱处理 即取硅胶适量，加入一定量的氢氧即取硅胶适量，加入一定量的氢氧化钠溶液搅拌均匀，铺制成碱性薄层板。化钠溶液搅拌均匀，铺制成碱性薄层板。第二

16、十一页，讲稿共五十一页哦三、氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查三、氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查 氢溴酸东莨菪碱是从茄科植物颠茄、白曼陀氢溴酸东莨菪碱是从茄科植物颠茄、白曼陀罗、莨菪等提取得到的莨菪碱的氢溴酸盐。根据罗、莨菪等提取得到的莨菪碱的氢溴酸盐。根据其生产工艺，本品在生产和贮藏过程中可能引入其生产工艺，本品在生产和贮藏过程中可能引入的特殊杂质主要有：的特殊杂质主要有：1.1.酸度酸度2.2.其他生物碱其他生物碱3.3.易氧化物易氧化物第二十二页，讲稿共五十一页哦第四节第四节 吩噻嗪类药物的分析吩噻嗪类药物的分析一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质（一）结构特点与典型药物（一）结构特点与

17、典型药物 吩噻嗪药物为苯并噻嗪的衍生物，其分子结构吩噻嗪药物为苯并噻嗪的衍生物，其分子结构中均具有共同的硫氮杂蒽母核，基本结构为：中均具有共同的硫氮杂蒽母核，基本结构为：第二十三页，讲稿共五十一页哦 本本类药物结构上的差异，主要表现在母核类药物结构上的差异，主要表现在母核2 2位上的位上的R R2取代基和取代基和N10N10位上的位上的R1取代基的不同。取代基的不同。R R2 2基团通常为基团通常为HH、ClCl、CFCF3 3、COCHCOCH3 3、SCHSCH2 2CHCH3 3等，等，R R1 1基团则为具有基团则为具有2 23 3个碳链的二甲或二乙胺基，或为含氮杂环如哌嗪和个碳链的二

18、甲或二乙胺基，或为含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物等。哌啶的衍生物等。.HCl.HCl盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪第二十四页，讲稿共五十一页哦（二）主要化学性质（二）主要化学性质1 1、具有紫外和红外吸收光谱特征、具有紫外和红外吸收光谱特征 本类药物的紫外特征吸收，主要由母核三环的本类药物的紫外特征吸收，主要由母核三环的系统系统所产生。所产生。一般具有三个峰值一般具有三个峰值，即在，即在204204209nm209nm（205nm205nm附附近）、近）、250250265nm265nm（254nm254nm）附近、和附近、和300300325nm325nm（300nm300nm附近）

19、附近）。最强峰多在。最强峰多在250250265nm265nm（为为2.5102.510-4-4310310-4-4）；）；本类药物母核中本类药物母核中S S为二价，易氧化，其氧化产物为为二价，易氧化，其氧化产物为亚砜亚砜 和砜和砜 ,它们具有四个吸收峰，它们具有四个吸收峰，与未氧化的吩噻嗪类母核的吸收峰不同。与未氧化的吩噻嗪类母核的吸收峰不同。（S O S O）（S S ）00第二十五页，讲稿共五十一页哦2 2、易氧化呈色、易氧化呈色 本类药物硫氮杂蒽母核中本类药物硫氮杂蒽母核中二价二价S S易氧化，其母易氧化，其母核易被氧化成亚砜、砜而呈色。核易被氧化成亚砜、砜而呈色。3 3、与金属离子络

20、合呈色、与金属离子络合呈色 未被氧化的二价未被氧化的二价S S能与金属钯离子形成有色配位能与金属钯离子形成有色配位化合物。其氧化产物亚砜、砜则无此反应。化合物。其氧化产物亚砜、砜则无此反应。第二十六页，讲稿共五十一页哦（一）紫外特征吸收和红外吸收光谱（一）紫外特征吸收和红外吸收光谱（二）显色反应（二）显色反应 1 1、氧化剂氧化显色、氧化剂氧化显色 2 2、与钯离子络合显色、与钯离子络合显色 吩噻嗪类药物分子结构中的未被氧化的二价吩噻嗪类药物分子结构中的未被氧化的二价S S能与能与金属钯离子络合形成有色络合物。金属钯离子络合形成有色络合物。（三）分解产物的反应（三）分解产物的反应二、鉴二、鉴

21、别别 试试 验验第二十七页，讲稿共五十一页哦（一）盐酸异丙嗪的杂质来源与检查（一）盐酸异丙嗪的杂质来源与检查1.1.合成工艺合成工艺2.2.杂质的来源杂质的来源 合成过程中由于一些副反应产生合成过程中由于一些副反应产生 的中间体、异构体。的中间体、异构体。3.3.检查方法检查方法 TLC TLC法法（二）盐酸硫利达嗪中有关物质检查（二）盐酸硫利达嗪中有关物质检查 TLCTLC法检查法检查三、特三、特 殊殊 杂杂 质质 检检 查查第二十八页，讲稿共五十一页哦第五节第五节 苯并二氮杂卓类药物苯并二氮杂卓类药物一、结构特征与典型药物的结构一、结构特征与典型药物的结构 苯并二氮杂卓类药物为含氮杂原子、

22、六元和七元环苯并二氮杂卓类药物为含氮杂原子、六元和七元环双并合而成的有机化合物，其中双并合而成的有机化合物，其中1,4-1,4-苯并二氮杂卓类药苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用最广泛的镇静剂。中国药典收载有氯物是目前临床应用最广泛的镇静剂。中国药典收载有氯氮卓（利眠宁），并将安定和硝基安定更名为地西泮和氮卓（利眠宁），并将安定和硝基安定更名为地西泮和硝西泮。硝西泮。第二十九页，讲稿共五十一页哦地西泮地西泮氯氮卓氯氮卓阿普唑仑阿普唑仑第三十页，讲稿共五十一页哦（一）化学鉴别（一）化学鉴别 1 1、沉淀反应、沉淀反应 2 2、水解后重氮化、水解后重氮化-偶合反应偶合反应 氯氮卓和奥沙西泮加盐酸溶液

23、氯氮卓和奥沙西泮加盐酸溶液 加热煮沸水解加热煮沸水解 后，水解产物可有此反应。后，水解产物可有此反应。而地西泮水解后则无此反应。而地西泮水解后则无此反应。3 3、硫酸、硫酸-荧光反应荧光反应 4 4、分解产物的反应、分解产物的反应 5 5、氯化铜焰色反应、氯化铜焰色反应二、鉴二、鉴 别别 试试 验验（1 21 2）（二）紫外和红外吸收光谱（二）紫外和红外吸收光谱（三）薄层色谱法（三）薄层色谱法第三十一页，讲稿共五十一页哦（一）有关物质检查（一）有关物质检查1.1.地西泮中有关物质的检查地西泮中有关物质的检查2.2.氯氮卓中有关物质的检查氯氮卓中有关物质的检查3.3.氯氮卓中有关物质的反相高效液

24、相色谱法检查氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法检查三、特三、特 殊殊 杂杂 质质 检检 查查（二）降解产物的检查（二）降解产物的检查 地西泮注射液采用地西泮注射液采用 HPLC法检查法检查第三十二页，讲稿共五十一页哦第六节第六节 含含 量量 测测 定定本章五类药物常用含量测定方法主要有六种本章五类药物常用含量测定方法主要有六种一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法 非水溶液滴定法，非水溶液滴定法，是国内外药典采用较多的含是国内外药典采用较多的含测方法，特别是对弱碱类药物及其盐的含测。测方法，特别是对弱碱类药物及其盐的含测。弱弱碱及其盐在水溶液中用标准酸液直接进行滴定没有明碱及其盐在水溶液中用标

25、准酸液直接进行滴定没有明显的滴定突跃，滴定终点难于掌握。若采用非水酸性显的滴定突跃，滴定终点难于掌握。若采用非水酸性溶剂作为滴定介质，则可显著提高弱碱性药物的相对溶剂作为滴定介质，则可显著提高弱碱性药物的相对碱度，使滴定突跃增大，滴定反应顺利完成。碱度，使滴定突跃增大，滴定反应顺利完成。第三十三页，讲稿共五十一页哦 除少数药物以游离碱的形式供分析外，绝大多除少数药物以游离碱的形式供分析外，绝大多数为盐类（数为盐类（HCl盐与盐与H2SO4盐）。这些盐类的滴定过程，盐）。这些盐类的滴定过程，实际上是一个置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱实际上是一个置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱

26、的酸。结合的较弱的酸。反应原理可用下列通式表示：反应原理可用下列通式表示：BH+A-+HClO4BH+ClO4-+HA基本原理：基本原理：由于被置换出来的由于被置换出来的HAHA的酸性强弱不同，因此对滴的酸性强弱不同，因此对滴定反应的影响也不同。当定反应的影响也不同。当HAHA酸性较强时，反应不能酸性较强时，反应不能定量完成，必须采取措施除去或降低反应产生的定量完成，必须采取措施除去或降低反应产生的HAHA的酸性，使反应顺利完成。因此，必须根据不同情的酸性，使反应顺利完成。因此，必须根据不同情况采用相应的测定条件。况采用相应的测定条件。第三十四页，讲稿共五十一页哦二、铈二、铈 量量 法法 本法

27、是氧化还原法，硝苯地平与吩噻嗪类药物本法是氧化还原法，硝苯地平与吩噻嗪类药物可采用本法进行测定。由于这些药物具有还原性，可采用本法进行测定。由于这些药物具有还原性，在酸性介质中可以用硫酸铈滴定液直接滴定。前者在酸性介质中可以用硫酸铈滴定液直接滴定。前者用邻二氮沸指示剂，后者不加指示剂而是利用药物用邻二氮沸指示剂，后者不加指示剂而是利用药物自身的颜色变化指示终点。自身的颜色变化指示终点。（一）（一）硝苯地平的测定硝苯地平的测定 详见详见P193（二）（二）吩噻嗪类药物的测定吩噻嗪类药物的测定 滴定开始时，药物先失去一个电子形成一种红色自滴定开始时，药物先失去一个电子形成一种红色自由离子，到终点时

28、吩噻嗪类药物均失去两个电子，红色由离子，到终点时吩噻嗪类药物均失去两个电子，红色消失而指示终点。也可采用电位法或永停滴定法指示终消失而指示终点。也可采用电位法或永停滴定法指示终点。点。第三十五页，讲稿共五十一页哦三、比色法三、比色法（一）酸性染料比色法（一）酸性染料比色法 本法是在适当的本法是在适当的pH介质中利用酸性染料（如介质中利用酸性染料（如磺酸酞类）与碱性药物定量结合呈色，采用比色磺酸酞类）与碱性药物定量结合呈色，采用比色法测定其含量。酸性染料是指具有酸性基团的酸法测定其含量。酸性染料是指具有酸性基团的酸碱指示剂碱指示剂(磺酸酞类磺酸酞类)，如溴酚蓝、溴麝香草酚蓝、，如溴酚蓝、溴麝香草

29、酚蓝、溴甲酚绿、溴甲酚紫等。本法具有一定的专属性溴甲酚绿、溴甲酚紫等。本法具有一定的专属性和准确度，样品需用量少，灵敏度高，适用于样和准确度，样品需用量少，灵敏度高，适用于样品量少、小剂量药物及其制剂或体内碱性药物的品量少、小剂量药物及其制剂或体内碱性药物的测定。测定。第三十六页，讲稿共五十一页哦1 1、基本原理、基本原理 在适当的在适当的pH介质中，介质中，碱性药物（碱性药物（B B）可与氢离子可与氢离子结合成结合成阳离子（阳离子（BHBH+），一些酸性染料在此条件下解一些酸性染料在此条件下解离为离为阴离子（阴离子（InIn-），与上述阳离子定量地结合生成与上述阳离子定量地结合生成有有色的配

30、位化合物（色的配位化合物（BHBH+InIn-），即离子对，可以被某即离子对，可以被某些有机溶剂定量提取，在一定波长处测定该溶液些有机溶剂定量提取，在一定波长处测定该溶液（有色离子对）的吸收度，即可求得碱性药物的（有色离子对）的吸收度，即可求得碱性药物的含量。含量。第三十七页，讲稿共五十一页哦即：水相（一定即：水相（一定pH条件下）：条件下）：B+H+BH+生物碱盐阳离子生物碱盐阳离子HInH+In-酸性染料阴离子酸性染料阴离子BH+In-（BH+In-）水相水相离子对（有色）离子对（有色）（BH+In-）有机相有机相有机相有机相：BHBH+InIn-被有机溶剂提取，使有机相呈色。被有机溶剂提

31、取，使有机相呈色。剩余的酸性染料留于水相。剩余的酸性染料留于水相。比色测定：比色测定：定量分离出该呈色有机提取液，脱水定量分离出该呈色有机提取液，脱水后，测定其吸收度，求出有机碱的含量。后，测定其吸收度，求出有机碱的含量。第三十八页，讲稿共五十一页哦（1）水相最适）水相最适pH值的选择值的选择2.影响因素影响因素 水相水相pHpH值的大小极为重要。只有选择合适的值的大小极为重要。只有选择合适的pHpH才才能使有机碱性药物变成能使有机碱性药物变成阳离子（阳离子（BHBH+），），同一条件下，同一条件下，酸性染料才能电离出足够的酸性染料才能电离出足够的阴离子（阴离子（InIn），），阴阳离阴阳离子

32、才能定量生成子才能定量生成有色离子对有色离子对（BHBH+InIn-），并完全溶，并完全溶于有机溶剂中而过量的酸性染料完全保留在水相于有机溶剂中而过量的酸性染料完全保留在水相中，最后才能保证定量的测定中，最后才能保证定量的测定 。第三十九页，讲稿共五十一页哦 如水相如水相pHpH值过低（值过低（H H+），抑制了抑制了HInHIn离解成离解成InIn-，使使InIn-浓度减少。影响离子对的形成；浓度减少。影响离子对的形成；如水相如水相pHpH值过值过高高，使有机碱药物游离，离子对浓度也减少，此时有机，使有机碱药物游离，离子对浓度也减少，此时有机相萃取的不是离子对而是有机碱本身。故所选相萃取的不

33、是离子对而是有机碱本身。故所选pHpH应使有应使有机碱全部以机碱全部以BHBH+形式存在，酸性染料大部分以形式存在，酸性染料大部分以InIn-形式形式存在，以便于二者的定量结合。存在，以便于二者的定量结合。一般是以有机溶剂提取一般是以有机溶剂提取液的吸收度最大，空白值最低时的液的吸收度最大，空白值最低时的pHpH值最好。值最好。第四十页，讲稿共五十一页哦（3）有机溶剂的选择有机溶剂的选择（2）酸性染料及其浓度的选择酸性染料及其浓度的选择（4）水分的影响水分的影响 有机相中应严防混入水分。否则，微量的水分可有机相中应严防混入水分。否则，微量的水分可使有机相（如氯仿层）发生使有机相（如氯仿层）发生

34、混浊混浊，影响比色，同时，影响比色，同时由于带入了水相中的过量染料，而影响测定结果。由于带入了水相中的过量染料，而影响测定结果。有机溶剂中混入的水分，可以经过加入脱水剂（如有机溶剂中混入的水分，可以经过加入脱水剂（如无水硫酸钠）或经滤纸滤过除去。无水硫酸钠）或经滤纸滤过除去。3、应用实例应用实例 阿托品注射液的含量测定。氢溴酸东莨菪碱片也阿托品注射液的含量测定。氢溴酸东莨菪碱片也用本法测定，具体见用本法测定，具体见p195.p195.第四十一页，讲稿共五十一页哦（二）钯离子比色法（二）钯离子比色法 1.基本原理基本原理 在适当在适当pHpH值溶液中，利用吩噻嗪类药物可与金属钯值溶液中，利用吩噻

35、嗪类药物可与金属钯离子形成有色络合物，借以进行比色测定。离子形成有色络合物，借以进行比色测定。本法优点可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪药物的测本法优点可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪药物的测定。因为定。因为PdPd2+2+只与被氧化的硫共阶，当硫原子已被氧化只与被氧化的硫共阶，当硫原子已被氧化为亚砜或砜时，则不与为亚砜或砜时，则不与PdPd2+2+络合呈色。络合呈色。缺点是：样品浓度高时，络合物的溶解度较低，可缺点是：样品浓度高时，络合物的溶解度较低，可能会导致络合物析出。能会导致络合物析出。2.测定方法测定方法第四十二页，讲稿共五十一页哦四、紫外分光光度法四、紫外分光光度法 本章五类药物的制剂或

36、片剂均匀度与溶出度的测本章五类药物的制剂或片剂均匀度与溶出度的测定均采用本法，测定原理是基于药物据有紫外特征定均采用本法，测定原理是基于药物据有紫外特征吸收光谱，在其最大吸收波长处测定吸收度，利用吸收光谱，在其最大吸收波长处测定吸收度，利用百分吸收系数计算；或与对照品溶液同时测定，计百分吸收系数计算；或与对照品溶液同时测定，计算含量。算含量。（一）直接分光光度法（一）直接分光光度法1 1、盐酸异丙嗪、盐酸异丙嗪片片的测定的测定 取本品取本品1010片，除去糖衣后，片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸异丙精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸异丙嗪嗪12.5mg12.5

37、mg），置），置200ml200ml量瓶中，加盐酸溶液（量瓶中，加盐酸溶液（9 9 10001000）适量，振摇）适量，振摇1515分钟使盐酸异丙嗪分钟使盐酸异丙嗪第四十三页，讲稿共五十一页哦（二）萃取后分光光度法（二）萃取后分光光度法（三）萃取双波长分光光度法（三）萃取双波长分光光度法（四）二阶导数分光光度法（四）二阶导数分光光度法溶解，滤过，取续滤液溶解，滤过，取续滤液10ml,10ml,置置100ml100ml量瓶中，再量瓶中，再用盐酸溶液（用盐酸溶液（9 10009 1000）稀释至刻度，摇匀，在）稀释至刻度，摇匀，在249nm249nm波长处测定吸收度，按波长处测定吸收度，按C C1

38、717H H2020N N2 2SHClSHCl的吸收系的吸收系数（数（）为）为910910计算，即得。计算，即得。2 2、盐酸异丙嗪、盐酸异丙嗪注射液注射液的测定的测定 抗氧剂抗氧剂VitCVitC对测定有干对测定有干扰。测定波长改在扰。测定波长改在299nm299nm处。处。3 3、奥沙西泮的测定、奥沙西泮的测定 E 1%1cm第四十四页，讲稿共五十一页哦五、气相色谱法五、气相色谱法 气相色谱法是一种有效地分离技术，它具有分气相色谱法是一种有效地分离技术，它具有分离效果好、灵敏度高、选择性好、用量少和分析速离效果好、灵敏度高、选择性好、用量少和分析速度快等特点，特别适合组分比较复杂的供试品

39、中微度快等特点，特别适合组分比较复杂的供试品中微量有机药物及其代谢物的分离测定。由于绝大数药量有机药物及其代谢物的分离测定。由于绝大数药物极性大，不易气化，或对热不稳定，因此该法在物极性大，不易气化，或对热不稳定，因此该法在药物分析中的应用不如药物分析中的应用不如HPLCHPLC法多法多（一）硫酸阿托品片剂的含量测定（一）硫酸阿托品片剂的含量测定 USP(24)USP(24)方法，色谱条件：玻璃填充柱，担体为硅烷方法，色谱条件：玻璃填充柱，担体为硅烷化硅藻土，固定液为化硅藻土，固定液为3 3OVOV1717，载气为氮气，流速，载气为氮气，流速25ml/min25ml/min，检测器为，检测器为

40、FIDFID。后马托品为内标。后马托品为内标。（二）人血浆中硝苯地平的（二）人血浆中硝苯地平的GC法测定及药代动力学研究法测定及药代动力学研究第四十五页，讲稿共五十一页哦六、高效液相色谱法六、高效液相色谱法 高效液相色谱法，在本类药物的含量测定中应用越来越高效液相色谱法，在本类药物的含量测定中应用越来越广泛，其中广泛，其中8080以上是采用反相以上是采用反相HPLCHPLC法，利用本法可十分法，利用本法可十分有效地分离和测定本类药物及分解产物。有效地分离和测定本类药物及分解产物。USP(24)收载的收载的药物有数十个品种采用本法测定。本章药物仅有地西泮药物有数十个品种采用本法测定。本章药物仅有

41、地西泮注射液在注射液在Ch.P(2000)Ch.P(2000)中是采用本法进行测定。中是采用本法进行测定。（一）反相（一）反相HPLC法法 反相反相HPLC法，是指流动相的极性大于固定相极性的法，是指流动相的极性大于固定相极性的色谱方法。色谱方法。第四十六页，讲稿共五十一页哦 在本法中常采用化学键合相作为固定相，即在硅在本法中常采用化学键合相作为固定相，即在硅胶表面，如键合为十八烷基时，则形成常用的胶表面，如键合为十八烷基时，则形成常用的十八十八烷基硅烷化键合硅胶（烷基硅烷化键合硅胶（ODS）。在硅胶表面引入硅在硅胶表面引入硅烷基形成的固定相极性很弱，而流动相多采用水甲烷基形成的固定相极性很弱

42、，而流动相多采用水甲醇或水乙腈等大极性系统。在反相醇或水乙腈等大极性系统。在反相HPLC中，极性大中，极性大的组分在分离时先流出柱子，极性弱的组分后流出柱的组分在分离时先流出柱子，极性弱的组分后流出柱子，适合于共存组分极性差异大的样品的测定。子，适合于共存组分极性差异大的样品的测定。第四十七页，讲稿共五十一页哦 用化学键合固定相分离碱性杂环类药物时，由于在硅胶表面的硅用化学键合固定相分离碱性杂环类药物时，由于在硅胶表面的硅醇基受空间位阻的影响，仅有一部分的硅醇基可与硅烷化试剂作用，醇基受空间位阻的影响，仅有一部分的硅醇基可与硅烷化试剂作用，因此这些裸露的硅醇基于碱性药物发生吸附或离子交换作用，

43、而使碱因此这些裸露的硅醇基于碱性药物发生吸附或离子交换作用，而使碱性药物的脱位色谱峰产生拖尾，通常在流动相中加入碱性试剂，分离性药物的脱位色谱峰产生拖尾，通常在流动相中加入碱性试剂，分离效能下降，保留时间过长，甚至不能被洗脱。效能下降，保留时间过长，甚至不能被洗脱。通常是在流动相中加通常是在流动相中加入碱性试剂（扫尾剂），使流动相的入碱性试剂（扫尾剂），使流动相的pH位于位于78左右，左右，使碱使碱性药物的电离受到抑制，以非电离形式存在，增加脂溶性改性药物的电离受到抑制，以非电离形式存在，增加脂溶性改善分离效能。目前常用的碱性试剂有二乙胺、三乙胺等。但善分离效能。目前常用的碱性试剂有二乙胺、三

44、乙胺等。但应注意流动相的应注意流动相的pH值不能太高，否则可造成化学键合相固值不能太高，否则可造成化学键合相固定相的水解。一般化学键合固定相要求流动相的定相的水解。一般化学键合固定相要求流动相的pH范围是范围是28。第四十八页，讲稿共五十一页哦1.地西泮注射液的反相地西泮注射液的反相HPLC法法2.高效液相法测定硫酸阿托品片的含量高效液相法测定硫酸阿托品片的含量（二）离子对高效液相色谱法（二）离子对高效液相色谱法 离子对色谱法，是离子对提取于色谱技术与相结合的产物，离子对色谱法，是离子对提取于色谱技术与相结合的产物，可用于分析呈离解状态的药物，如有机碱类或有机酸类药物。可用于分析呈离解状态的药

45、物，如有机碱类或有机酸类药物。离子对色谱法是将待测组分的反离子加入到流动相中，与呈离离子对色谱法是将待测组分的反离子加入到流动相中，与呈离解状态药物作用，生成可逆的离子对化合物。解状态药物作用，生成可逆的离子对化合物。分离测定杂环类分离测定杂环类药物中吡啶类、喹啉类等药物时，主要是采用烷基磺酸盐或其他药物中吡啶类、喹啉类等药物时，主要是采用烷基磺酸盐或其他盐类作为离子对试剂（如戊烷磺酸钠与庚烷磺酸钠）。影响离子盐类作为离子对试剂（如戊烷磺酸钠与庚烷磺酸钠）。影响离子对形成的条件如溶液的对形成的条件如溶液的pH、反离子的种类、流动相等流动相一般、反离子的种类、流动相等流动相一般呈酸性，以利于有机碱离解。呈酸性，以利于有机碱离解。第四十九页，讲稿共五十一页哦本本 章章 小小 结结1 1、掌握本章药物的分类及其代表药物。、掌握本章药物的分类及其代表药物。2 2、掌握鉴别试验中酰肼基团的反应。、掌握鉴别试验中酰肼基团的反应。3 3、掌握异烟肼中游离肼的检查、掌握异烟肼中游离肼的检查 。4 4、掌握苯并吩噻嗪类药物的鉴别反应（、掌握苯并吩噻嗪类药物的鉴别反应（UVUV特征、特征、显色反应）。显色反应）。第五十页，讲稿共五十一页哦感感谢谢大大家家观观看看第五十一页，讲稿共五十一页哦