粘膜疫苗与活载体疫苗课件.ppt

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1、粘膜疫苗与活载体疫苗第1页，此课件共28页哦粘膜免疫系统的组成粘膜免疫系统的组成1 有结构的组织：称为有结构的组织：称为黏膜滤泡黏膜滤泡，主要是肠相关淋巴组织和支气，主要是肠相关淋巴组织和支气管相关淋巴组织。他们是免疫应答的管相关淋巴组织。他们是免疫应答的传入淋巴区传入淋巴区，抗原由此进入，抗原由此进入MIS（粘（粘膜免疫系统），被抗原提呈捕获、处理和提呈给膜免疫系统），被抗原提呈捕获、处理和提呈给T、B细胞，引发免疫应细胞，引发免疫应答。答。2 弥散淋巴组织弥散淋巴组织：广泛的分布黏膜固有层中，它们是免疫应答的：广泛的分布黏膜固有层中，它们是免疫应答的传出淋巴区传出淋巴区，浆细胞和致敏淋巴细

2、胞通过归巢机制迁至弥散淋巴组织，浆细胞和致敏淋巴细胞通过归巢机制迁至弥散淋巴组织，抗体和致敏淋巴细胞在此发挥功能。抗体和致敏淋巴细胞在此发挥功能。第2页，此课件共28页哦粘膜免疫系统存在着功能性分离的位点粘膜免疫系统存在着功能性分离的位点诱导位点诱导位点(inductive site)：首次接触抗原：首次接触抗原/疫苗诱导起始反应的位点，疫苗诱导起始反应的位点，肠相关淋巴组织肠相关淋巴组织(GALT),支气管相关淋巴组织支气管相关淋巴组织(BALT)、鼻淋巴组织、鼻淋巴组织(NALT)、眼结膜相关淋巴组织等。、眼结膜相关淋巴组织等。效应位点效应位点(effector site)：摄取抗原诱导：

3、摄取抗原诱导B细胞和细胞和T细胞反应，引起细胞反应，引起免疫保护的位点，免疫保护的位点，肠道、呼吸道和生殖道等肠道、呼吸道和生殖道等粘粘膜的固有层、部分腺体膜的固有层、部分腺体(乳腺、乳腺、汗腺及禽哈德氏腺汗腺及禽哈德氏腺)和上皮间淋巴细胞和上皮间淋巴细胞(IEL)。第3页，此课件共28页哦粘膜免疫粘膜免疫 粘膜免疫系统存在着粘膜免疫系统存在着功能性分离的位点功能性分离的位点：诱导位点诱导位点(inductive site)：首次接触抗原：首次接触抗原/疫苗诱导起始反应的位点，疫苗诱导起始反应的位点，肠相关淋巴组织肠相关淋巴组织(GALT),支气管相关淋巴组织支气管相关淋巴组织(BALT)、鼻

4、淋巴组织、鼻淋巴组织(NALT)、眼结膜相关淋巴组织等。、眼结膜相关淋巴组织等。效应位点效应位点(effector site)：摄取抗原诱导：摄取抗原诱导B细胞和细胞和T细胞反应，引起免细胞反应，引起免疫保护的位点，疫保护的位点，肠道、呼吸道和生殖道等肠道、呼吸道和生殖道等粘粘膜的固有层、部分腺体膜的固有层、部分腺体(乳腺、乳腺、汗腺及禽哈德氏腺汗腺及禽哈德氏腺)和上皮间淋巴细胞和上皮间淋巴细胞(IEL)。第4页，此课件共28页哦肠道集合淋巴结肠道集合淋巴结(PP)对抗原的摄取对抗原的摄取 从功能上和形态学上，肠道集合淋巴结分为三个区从功能上和形态学上，肠道集合淋巴结分为三个区:(1)弯隆区弯

5、隆区(dome region)，由含微皱褶细胞，由含微皱褶细胞(M细胞细胞)、滤泡相关上皮、滤泡相关上皮(FAE)和淋巴细胞的上皮层覆盖和淋巴细胞的上皮层覆盖;M细胞主要用于抗原转运到诱导位点细胞主要用于抗原转运到诱导位点。(2)B细胞滤泡，常含一个或多个生发中心细胞滤泡，常含一个或多个生发中心;(3)T细胞依赖区细胞依赖区(TDA)，富含，富含T细胞。细胞。第5页，此课件共28页哦肠道集合淋巴结引发的肠道集合淋巴结引发的IgA抗体反应抗体反应 (1)正常的抗原递呈正常的抗原递呈;(2)在在Th细胞的辅助下，肠道集合淋巴结中细胞的辅助下，肠道集合淋巴结中B细胞对抗原刺激发生反应，细胞对抗原刺激

6、发生反应，进行扩增，形成记忆细胞，进行扩增，形成记忆细胞，散布到粘膜效应位点散布到粘膜效应位点如大、小肠的弥散性固有如大、小肠的弥散性固有层。层。（3）当归巢）当归巢 至些效应位点，至些效应位点，B细胞进行克隆扩增细胞进行克隆扩增，一旦再接触到相同，一旦再接触到相同抗原，在抗原，在Th细胞和其分泌的细胞因子的辅助下，分化为分泌细胞和其分泌的细胞因子的辅助下，分化为分泌IgA的浆细胞的浆细胞;（4）B细胞和细胞和Th 细胞经过这种诱导，细胞经过这种诱导，其子代迁移至效应位点如胃肠道其子代迁移至效应位点如胃肠道的固有层继续发育，的固有层继续发育，这些过程构成了这些过程构成了粘膜共有的免疫系统粘膜共

7、有的免疫系统 第6页，此课件共28页哦肠道集合淋巴结引发的肠道集合淋巴结引发的IgA抗体反应抗体反应第7页，此课件共28页哦怎样针对粘膜免疫诱导位点抗原递呈和激活怎样针对粘膜免疫诱导位点抗原递呈和激活B,T细胞细胞亚群最佳？亚群最佳？必须弄清病原体的致病机理以及宿主如何反应来保护自己，才能设计最佳必须弄清病原体的致病机理以及宿主如何反应来保护自己，才能设计最佳方案方案：(1)目前选择使用的大量疫苗主要是特异性针对目前选择使用的大量疫苗主要是特异性针对肠道集合淋巴结肠道集合淋巴结 包包括口服混合有括口服混合有粘粘膜佐剂、微胶囊或活载体释放系统的抗原膜佐剂、微胶囊或活载体释放系统的抗原;(2)病原

8、体是病原体是胞内感染胞内感染，在设计疫苗时，更多地考虑刺激，在设计疫苗时，更多地考虑刺激CD4+Th1细胞细胞和和CD8+T细胞，引发细胞免疫反应。细胞，引发细胞免疫反应。（3）病原体经病原体经细胞外机制细胞外机制引起疾病，应考虑疫苗的免疫程序来优化引起疾病，应考虑疫苗的免疫程序来优化CD4+Th2细胞，引发体液免疫细胞，引发体液免疫;第8页，此课件共28页哦新的粘膜免疫佐剂新的粘膜免疫佐剂 神经肽神经肽免疫系统有其自身的调节途径：免疫系统有其自身的调节途径：经细胞间相互作用和释放细胞因子经细胞间相互作用和释放细胞因子来控制来控制B细胞和细胞和T细胞反应细胞反应。肠神经系统肠神经系统(ente

9、ric nervous system,ENS)影响着胃肠道免疫系影响着胃肠道免疫系统的调节统的调节ENS渗透到胃肠道的每个部位，波及广泛的区域，影响着粘膜免疫的诱导和渗透到胃肠道的每个部位，波及广泛的区域，影响着粘膜免疫的诱导和效应功能，涉及免疫应答的效应功能，涉及免疫应答的神经调制质神经调制质(neuro modulator)达达18种种以上。以上。第9页，此课件共28页哦新的粘膜免疫佐剂新的粘膜免疫佐剂 神经肽神经肽P物质物质能刺激产生能刺激产生Ig细胞的发育，体内排空细胞的发育，体内排空P物质则降低产生物质则降低产生Ig细胞的数目细胞的数目。含含P物质的神经纤维的密度和分布在哺乳动物种间

10、变化很大，进一步研究需要确物质的神经纤维的密度和分布在哺乳动物种间变化很大，进一步研究需要确定这种神经纤维定这种神经纤维是否直接影响固有层浆细胞或是否直接影响固有层浆细胞或 T细胞。细胞。血管活性肠肽血管活性肠肽(VIP)：淋巴细胞表达：淋巴细胞表达 VIP 受体，受体，含含VIP神经纤维可渗透到神经纤维可渗透到肠道集合淋巴结的肠道集合淋巴结的T细胞区细胞区。与。与P物质发挥的刺激作用相反物质发挥的刺激作用相反，VIP通过降通过降低低IL-2而而IgA产生的减少。产生的减少。P物质和物质和VIP如何互相调节粘膜免疫反应提供进一步的研究。如何互相调节粘膜免疫反应提供进一步的研究。第10页，此课件

11、共28页哦怎样针对粘膜免疫诱导位点抗原递呈和激活怎样针对粘膜免疫诱导位点抗原递呈和激活B,T细胞细胞亚群最佳？亚群最佳？将疫苗导向粘膜诱导位点，沿着将疫苗导向粘膜诱导位点，沿着Th细胞途径驱动免疫反应，提供长期的免细胞途径驱动免疫反应，提供长期的免疫保护疫保护(1)可溶性蛋白质可溶性蛋白质可特异性与肠道集合淋巴结的可特异性与肠道集合淋巴结的m细胞反应，但不能刺激细胞反应，但不能刺激S-IgA 抗体到保护水平，需要多次投放疫苗。抗体到保护水平，需要多次投放疫苗。(2)微胶囊微胶囊代表了一种有效的抗原释放的代表了一种有效的抗原释放的时控机制时控机制。单个剂量口服接。单个剂量口服接种的微胶囊疫苗会表

12、现免疫记忆反应。种的微胶囊疫苗会表现免疫记忆反应。（1）（）（2）只有）只有10被吸收被吸收，将，将 CT-B,LT-B 连接到抗原上，连接到抗原上，导向肠道集导向肠道集合淋巴结合淋巴结 M 细胞，细胞，促进其吸收。促进其吸收。（3）应用活载体释放系统应用活载体释放系统是一种可行的办法。是一种可行的办法。第11页，此课件共28页哦活载体疫苗活载体疫苗构建活载体疫苗的细菌载体构建活载体疫苗的细菌载体构建活载体疫苗的病毒载体构建活载体疫苗的病毒载体第12页，此课件共28页哦构建活载体疫苗的细菌载体构建活载体疫苗的细菌载体减毒减毒沙门氏菌、卡介苗、减毒肠致病性大肠杆菌、减毒弧菌、减毒耶尔沙门氏菌、卡

13、介苗、减毒肠致病性大肠杆菌、减毒弧菌、减毒耶尔森氏菌森氏菌共栖菌的细菌共栖菌的细菌包括革兰氏阳性菌格氏链球菌、木糖葡萄球菌、乳球菌、包括革兰氏阳性菌格氏链球菌、木糖葡萄球菌、乳球菌、乳酸杆菌等也可代替减毒病原菌作为载体；乳酸杆菌等也可代替减毒病原菌作为载体；单核细胞增生李斯特菌单核细胞增生李斯特菌最近也被认为是一种潜在的疫苗载体最近也被认为是一种潜在的疫苗载体第13页，此课件共28页哦 释放粘膜疫苗的活载体沙门氏菌释放粘膜疫苗的活载体沙门氏菌(1)该菌能运送抗原至肠道的淋巴组织，并引起分泌该菌能运送抗原至肠道的淋巴组织，并引起分泌IgA免疫反应，分泌性免疫反应，分泌性IgA浸润所有的粘膜表面以

14、及外分泌腺体的分泌物。浸润所有的粘膜表面以及外分泌腺体的分泌物。(2)伤寒沙门氏菌在伤寒沙门氏菌在动物动物寄主肠道中定居，并在肠道淋巴组织、肝和脾中寄主肠道中定居，并在肠道淋巴组织、肝和脾中增殖。各种沙门氏菌突变后，它们仍能在肠道淋巴组织中定居。这些特征使增殖。各种沙门氏菌突变后，它们仍能在肠道淋巴组织中定居。这些特征使减毒沙门氏菌可能作为减毒沙门氏菌可能作为表达各种定居因子、毒性抗原基因表达各种定居因子、毒性抗原基因的载体，来递呈的载体，来递呈这些抗原这些抗原到到肠道淋巴组织。肠道淋巴组织。第14页，此课件共28页哦 释放粘膜疫苗的活载体沙门氏菌释放粘膜疫苗的活载体沙门氏菌(1)营养缺陷质粒

15、补救系统营养缺陷质粒补救系统:该系统的寄主是某该系统的寄主是某 一营养代谢物的染色体突一营养代谢物的染色体突变株，而转移质粒则带有与寄主突变互补的非同源基因。变株，而转移质粒则带有与寄主突变互补的非同源基因。(2)整合表达系统整合表达系统:即将外源基因整合到载体的染色体中。即将外源基因整合到载体的染色体中。(3)细胞表面表达系统细胞表面表达系统:即将外源基因产物表达到载体细胞表面，有利于与免即将外源基因产物表达到载体细胞表面，有利于与免疫系统接触疫系统接触,(4)鞭毛表达系统鞭毛表达系统:与鞭毛蛋白融合在一起的抗原蛋白也将存在与细胞表面，与鞭毛蛋白融合在一起的抗原蛋白也将存在与细胞表面，同样有

16、利于与宿主的免疫系统接触。同样有利于与宿主的免疫系统接触。目前目前还没有证据显示：还没有证据显示：一个表达位点一个表达位点 比另一个表达位点更有确定比另一个表达位点更有确定 的优的优点，应答的类型主要是依赖于抗原的性质。点，应答的类型主要是依赖于抗原的性质。第15页，此课件共28页哦 释放粘膜疫苗的活载体沙门氏菌释放粘膜疫苗的活载体沙门氏菌沙门氏菌是通过肠细胞或沙门氏菌是通过肠细胞或m细胞侵袭至宿主体内，使它们易于接近免疫效细胞侵袭至宿主体内，使它们易于接近免疫效应细胞或抗原提呈细胞，或直接刺激粘膜免疫系统应细胞或抗原提呈细胞，或直接刺激粘膜免疫系统检查沙门氏菌表达系统诱导的肠道集合淋巴结的检

17、查沙门氏菌表达系统诱导的肠道集合淋巴结的Th反应比较困难，通反应比较困难，通过检查脾脏细胞的反应来证明粘过检查脾脏细胞的反应来证明粘膜反应。膜反应。表达硕大利什曼原虫表达硕大利什曼原虫 gp63表面蛋白质的致弱的沙门氏菌诱导的表面蛋白质的致弱的沙门氏菌诱导的Th1样反样反应应可通过从抗原刺激的脾脏细胞的培养上清液中可通过从抗原刺激的脾脏细胞的培养上清液中IFN-r和和IL-2的产生和的产生和IL-4的缺的缺乏来实现乏来实现。确定确定IgA诱导位点诱导位点(如肠道集合淋巴结如肠道集合淋巴结)和效应位点和效应位点(如胃肠道固如胃肠道固有层有层)中中抗原特异的抗原特异的Th1和和Th2细胞的特性细胞

18、的特性已成为当前研究的一个热点已成为当前研究的一个热点第16页，此课件共28页哦卡介苗卡介苗与牛分枝杆菌相近的分枝杆菌和丁酸分枝杆菌作为完全佐剂的关键成分与牛分枝杆菌相近的分枝杆菌和丁酸分枝杆菌作为完全佐剂的关键成分已使用多年已使用多年。优点优点:(1)并发症少并发症少;(2)它和脊髓灰质炎疫苗是它和脊髓灰质炎疫苗是WHO组织所推荐的、出生时预防接种的两种组织所推荐的、出生时预防接种的两种疫苗，本身就是最强的非特异免疫刺激剂疫苗，本身就是最强的非特异免疫刺激剂;能应用与能应用与HIV阳性的新生儿阳性的新生儿;(3)单次免疫接种即能诱导长期的单次免疫接种即能诱导长期的(5-50年年)细胞介导的免

19、疫力，使机体产生细胞介导的免疫力，使机体产生对对AIDS、肝炎甚至恶性肿瘤等、肝炎甚至恶性肿瘤等20余种疾病的保护性免疫余种疾病的保护性免疫;(4)价廉、热稳定性强，适宜在基层推广使用价廉、热稳定性强，适宜在基层推广使用第17页，此课件共28页哦卡介苗卡介苗将外源基因导将外源基因导入入卡介苗中的技术很成熟卡介苗中的技术很成熟利用分枝杆菌噬菌体利用分枝杆菌噬菌体构建新的杂交穿梭载体，能象大肠杆菌的质粒一样起构建新的杂交穿梭载体，能象大肠杆菌的质粒一样起作用作用。表面表达的抗原表面表达的抗原最有利于抗原的递呈以产生最佳免疫应答，尤其是提供免疫最有利于抗原的递呈以产生最佳免疫应答，尤其是提供免疫保护

20、方面。保护方面。讫现在所做的工作为止，根据诱导的免疫应答还很难说一种途径比另一种途讫现在所做的工作为止，根据诱导的免疫应答还很难说一种途径比另一种途径更好。径更好。象沙门氏菌一样象沙门氏菌一样，应答更取决于抗原的类型而不是其免疫的方法。，应答更取决于抗原的类型而不是其免疫的方法。第18页，此课件共28页哦共栖菌共栖菌许多许多G+菌表面蛋白是通过普通菌表面蛋白是通过普通6肽结构连在细菌表面肽结构连在细菌表面LPXTGX，用，用M6蛋白以蛋白以融合蛋白的形式递呈不同的抗原融合蛋白的形式递呈不同的抗原构建载体。构建载体。共栖菌：共栖菌：（1）格氏链球菌格氏链球菌（2）木糖链球菌）木糖链球菌（3）乳球

21、菌乳球菌/乳酸杆菌乳酸杆菌 第19页，此课件共28页哦目前用于表达外源病毒蛋白的载体病毒包括：目前用于表达外源病毒蛋白的载体病毒包括：痘病毒痘病毒(痘苗病毒和宿主特异性痘病毒痘苗病毒和宿主特异性痘病毒)、腺病毒、腺病毒、疱疹病毒、疱疹病毒、小小RNA病毒等病毒等构建活载体疫苗的病毒载体构建活载体疫苗的病毒载体第20页，此课件共28页哦痘苗病毒具有宿主范围广、增殖滴度高、稳定性好、基因组容痘苗病毒具有宿主范围广、增殖滴度高、稳定性好、基因组容量大、含多个非必需区基因等特，因此，有利于进行基因工程操作，量大、含多个非必需区基因等特，因此，有利于进行基因工程操作，易于构建和分离重组病毒，适于插人多个

22、外源基因易于构建和分离重组病毒，适于插人多个外源基因(可达可达0kb)，对插入，对插入的外源基因有较高的表达水平。的外源基因有较高的表达水平。禽类痘病毒，由于用该病毒接种哺乳动物后，可以引起顿挫型感染，禽类痘病毒，由于用该病毒接种哺乳动物后，可以引起顿挫型感染，可以持续表达外源基因，并且不影响再次接种，日渐引起人们的关注。马可以持续表达外源基因，并且不影响再次接种，日渐引起人们的关注。马立克氏病毒立克氏病毒 gB基因的鸡痘活载体疫苗免疫效果极佳，免疫鸡用强毒攻基因的鸡痘活载体疫苗免疫效果极佳，免疫鸡用强毒攻击击100%不发病，用超强毒株击不发病，用超强毒株击90%不发病。不发病。病毒感染的广谱

23、性病毒感染的广谱性，使，使其它其它痘苗病毒活载体疫苗痘苗病毒活载体疫苗的应用受到限制。的应用受到限制。痘病毒痘病毒 第21页，此课件共28页哦腺病毒载体对外源基因的容量较小，但它具有独特的优点腺病毒载体对外源基因的容量较小，但它具有独特的优点:腺病毒比较安全。腺病毒比较安全。腺病毒的靶细胞范围广，不仅能感染复制分裂细胞，而且能感染非腺病毒的靶细胞范围广，不仅能感染复制分裂细胞，而且能感染非复制分裂细胞。复制分裂细胞。腺病毒容易制备，对热不敏感，在适合的培养系统中呈高滴度增腺病毒容易制备，对热不敏感，在适合的培养系统中呈高滴度增殖。殖。腺病毒可以在肠道及呼吸道繁殖，能诱导粘膜免疫，能制成药囊经腺

24、病毒可以在肠道及呼吸道繁殖，能诱导粘膜免疫，能制成药囊经口服途径接种以预防消化道及呼吸道感染。口服途径接种以预防消化道及呼吸道感染。(5)Ad2,Ad5等启动子较强，能高水平表达外源基因，特别是换以等启动子较强，能高水平表达外源基因，特别是换以更强的启动子。更强的启动子。腺病毒腺病毒 第22页，此课件共28页哦大多数腺病毒载体就是以大多数腺病毒载体就是以Ad2和和Ad5为基础构建的。重组腺病毒为基础构建的。重组腺病毒最大包装量约为野生型的最大包装量约为野生型的105%，即外源基因的容量为，即外源基因的容量为20kb。要插入大片段的外源基因就必须要插入大片段的外源基因就必须缺失一段腺病毒基因组缺

25、失一段腺病毒基因组。一般缺。一般缺失位点有三处，即失位点有三处，即El,E3以及以及E4与反向末端重复之间的区域。与反向末端重复之间的区域。E3区可去除约区可去除约2.2Kb构建成有复制能力的非缺陷型载体，允许插入的外构建成有复制能力的非缺陷型载体，允许插入的外源基因的最大长度为源基因的最大长度为4.0Kb。一般不需要加基因表达调控元件，利用腺病毒。一般不需要加基因表达调控元件，利用腺病毒本身的调节元件本身的调节元件E3启动子在感染早期有效表达。启动子在感染早期有效表达。腺病毒腺病毒 第23页，此课件共28页哦缺失缺失E1区的人腺病毒必须在特殊的工程细胞中或非缺失的腺病毒辅助区的人腺病毒必须在

26、特殊的工程细胞中或非缺失的腺病毒辅助下才能复制增殖，因此称为病毒缺陷型载体。下才能复制增殖，因此称为病毒缺陷型载体。“第一代腺病毒载体第一代腺病毒载体”(应包括应包括E3或或El+E3同时缺失同时缺失)目前应用最目前应用最为广泛，由于为广泛，由于缺失复制必须区缺失复制必须区，腺病毒只能在表达，腺病毒只能在表达El基因产物的细胞中复制。基因产物的细胞中复制。E1区可被去除区可被去除5.5Kb，外源基因的插人容量可达，外源基因的插人容量可达7.5Kb。常规的构建。常规的构建方法是在方法是在E1区插入一个表达盒，其中包括启动子，外源基因和区插入一个表达盒，其中包括启动子，外源基因和polyA序列。序

27、列。腺病毒腺病毒 第24页，此课件共28页哦 几乎所有的哺乳动物都存在疱疹病毒，某些疤疹病毒对畜牧业构几乎所有的哺乳动物都存在疱疹病毒，某些疤疹病毒对畜牧业构成严重的危害，如成严重的危害，如伪狂犬病毒伪狂犬病毒。疱疱疹病毒的基因组较大，约疹病毒的基因组较大，约150kb左右，预计含有约左右，预计含有约70个编码基因，个编码基因，其中至少有其中至少有20%的基因是非必需基因，可容纳多个外源基因的插的基因是非必需基因，可容纳多个外源基因的插入。入。许多许多疱疱疹病毒经疹病毒经粘粘膜途径感染，构建的载体活疫苗可经膜途径感染，构建的载体活疫苗可经粘粘膜途径提呈膜途径提呈抗原，诱导特异性抗原，诱导特异性

28、粘粘膜免疫。膜免疫。疱疱疹病毒活载体主要有单纯疤疹病毒、伪狂犬病毒、火鸡疤疹病毒、疹病毒活载体主要有单纯疤疹病毒、伪狂犬病毒、火鸡疤疹病毒、牛疤疹病毒牛疤疹病毒I型、马疤疹病毒型、马疤疹病毒I型和传染性喉气管炎病毒等型和传染性喉气管炎病毒等疱疹病毒疱疹病毒第25页，此课件共28页哦 几乎所有的哺乳动物都存在疱疹病毒，某些疤疹病毒对畜牧业构成严重几乎所有的哺乳动物都存在疱疹病毒，某些疤疹病毒对畜牧业构成严重的危害，如的危害，如伪狂犬病毒伪狂犬病毒。疱疱疹病毒的基因组较大，约疹病毒的基因组较大，约150kb左右，预计含有约左右，预计含有约70个编码基因，其中个编码基因，其中至少有至少有20%的基因

29、是非必需基因，可容纳多个外源基因的插的基因是非必需基因，可容纳多个外源基因的插入。入。许多许多疱疱疹病毒经疹病毒经粘粘膜途径感染，构建的载体活疫苗可经膜途径感染，构建的载体活疫苗可经粘粘膜途径提呈抗膜途径提呈抗原，诱导特异性原，诱导特异性粘粘膜免疫。膜免疫。疱疱疹病毒活载体主要有单纯疤疹病毒、伪狂犬病毒、疹病毒活载体主要有单纯疤疹病毒、伪狂犬病毒、火鸡火鸡疱疱疹病毒疹病毒、牛牛疱疱疹病毒疹病毒I型、马型、马疱疱疹病毒疹病毒I型和传染性喉气管炎病毒等型和传染性喉气管炎病毒等疱疹病毒疱疹病毒第26页，此课件共28页哦 火鸡疱疹病毒活载体，是禽病毒基因工程研究中比较活跃的领域。火鸡疱疹病毒活载体，是

30、禽病毒基因工程研究中比较活跃的领域。用该载体表达新城疫病毒的用该载体表达新城疫病毒的F和和HN基因，由此构建的重组病毒接种鸡后，基因，由此构建的重组病毒接种鸡后，免疫鸡可抵抗新城疫病毒和马立克氏病毒强毒的攻击。免疫鸡可抵抗新城疫病毒和马立克氏病毒强毒的攻击。用该载体表达马立克氏病毒的用该载体表达马立克氏病毒的gB基因，解决马立克氏弱毒苗不能冻基因，解决马立克氏弱毒苗不能冻干带来不便。干带来不便。用伪狂犬病载体表达猪瘟病毒的用伪狂犬病载体表达猪瘟病毒的El基因，免疫猪后既可预防伪狂基因，免疫猪后既可预防伪狂犬病又可预防猪瘟。犬病又可预防猪瘟。疱疹病毒疱疹病毒第27页，此课件共28页哦小小RNA病

31、毒科中的脊髓灰质炎病毒病毒科中的脊髓灰质炎病毒(PV)Sabin疫苗株在实际应用中疫苗株在实际应用中证明安全、可口服，并且易增殖，感染滴度高。证明安全、可口服，并且易增殖，感染滴度高。可以将可以将Pi区中的部分氨基酸缺失掉，代之以外源性病毒保护性抗原区中的部分氨基酸缺失掉，代之以外源性病毒保护性抗原决定族，形成嵌合病毒粒子。决定族，形成嵌合病毒粒子。脊髓灰质炎病毒作为载体与前面所述的病毒活载体有所不同，前述载体脊髓灰质炎病毒作为载体与前面所述的病毒活载体有所不同，前述载体系将外源性保护性抗原分泌到载体病毒粒子以外，而系将外源性保护性抗原分泌到载体病毒粒子以外，而脊髓灰质炎病毒载体表达的脊髓灰质炎病毒载体表达的外源性病毒蛋白则以嵌合的形式存在于载体病毒颗粒的表面。外源性病毒蛋白则以嵌合的形式存在于载体病毒颗粒的表面。小小RNA病毒病毒第28页，此课件共28页哦