选修一生物2.1微生物的实验室培养学案(人教版).docx

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1、选修一生物2.1微生物的实验室培养学案(人教版)微生物的试验室培育典型教案分析 微生物的试验室培育典型教案分析 培育基:人们根据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的养分基质,是进行微生物培育的物质基础。 培育基根据物理性质可分为液体培育基半固体培育基和固体培育基。在液体培育基中加入凝固剂琼脂(是从红藻中提取的一种多糖,在配制培育基中用作凝固剂)后,制成琼脂固体培育基。微生物在固体培育基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。依据菌落的特征可以推断是哪一种菌。液体培育基应用于工业或生活生产,固体培育基应用于微生物的分别和鉴定,半固体培育基则常用于视察微生物的运动及菌种保藏等。 根据成分培育

2、基可分为人工合成培育基和自然培育基。合成培育基是用成分已知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分别鉴定。自然培育基是用化学成分不明的自然物质配制而成,常用于实际工业生产。 根据培育基的用途,可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基。选择培育基是指在培育基中加入某种化学物质,以抑制不须要的微生物生长,促进所须要的微生物的生长。鉴别培育基是依据微生物的特点,在培育基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同类别的微生物。 培育基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源(生长因子)等。 碳源:能为微生物的代谢供应碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉

3、饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 氮源:能为微生物的代谢供应氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。 培育基还要满意微生物生长对PH、特别养分物质以及氧气的要求。例如,培育乳酸杆菌时须要在培育基中添加维生素,培育霉菌时须将培育基的pH调至酸性,培育细菌是须要将pH调至中性或微碱性,培育厌氧型微生物是则须要供应无氧的条件 无菌技术获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵,要留意以下几个方面: 对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。 将用于微生物培育的器皿

4、、接种用具和培育基等器具进行灭菌。 为避开四周环境中微生物的污染,试验操作应在酒精灯火焰旁边进行。 试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触。 无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 答:无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。 消毒与灭菌的区分 消毒指运用较为温柔的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。 灭菌则是指运用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有

5、灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 灭菌方法: 接种环、接种针、试管口等运用灼烧灭菌法; 玻璃器皿、金属用具等运用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱; 培育基、无菌水等运用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。 表面灭菌和空气灭菌等运用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。 比较项理化因素的作用强度歼灭微生物的数量芽孢和孢子能否被歼灭消毒较为温柔部分生活状态的微生物不能灭菌剧烈全部微生物能 制作牛肉膏蛋白胨固体培育基 (1)方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 (2)倒平板操作的步骤: 将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培育基的锥形瓶,左手拔出棉塞。 右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过

6、火焰。 用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基(约1020mL)倒入培育皿,左手马上盖上培育皿的皿盖。 等待平板冷却凝固,大约需510min。然后,将平板倒过来放置,使培育皿盖在下、皿底在上。 倒平板操作的探讨 1.培育基灭菌后,须要冷却到50左右时,才能用来倒平板。你用什么方法来估计培育基的温度? 提示:可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 2.为什么须要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 答:平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,将平板

7、倒置,既可以防止培育基表面的水分过度地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染。 4.在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培育微生物吗?为什么? 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物。 纯化大肠杆菌 (1)微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。 (2)平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。在数次划线后培育,可以分别到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 (3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,

8、然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。 (4)用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种。 (5)平板划线法操作步骤: 将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞。 将试管口通过火焰。将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。 将试管通过火焰,并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。留意不要划破培育皿。灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端起先往其次区域内划

9、线。重复以上操作,在三、四、五区域内划线。留意不要将最终一区的划线与第一区相连。将平板倒置放入培育箱中培育。 平板划线操作的探讨 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍旧须要灼烧接种环吗?为什么? 答:操作的第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在的微生物污染培育物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种干脆来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目渐渐削减,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能刚好杀死接种环上残留的菌种,避开细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环

10、之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 3.在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端起先划线? 答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端起先,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 (6)涂布平板操作的步骤: 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液,滴加到培育基表面。 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却810s。 用涂布器将菌液匀称地涂布在培育基表面。 涂布平板操作的探讨 涂布平板的全部操作都应在火焰旁边进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,

11、想一想,第2步应如何进行无菌操作? 提示:应从操作的各个细微环节保证“无菌”。例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周;等等。 菌种的保存 (1)对于频繁运用的菌种,可以采纳临时保藏的方法。 临时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培育基上,在合适的温度下培育。当菌落长成后,将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月,都要重新将菌种从旧的培育基上转移到簇新的培育基上。 缺点:这种方法保存的时间不长,菌种简单被污染或产生变异。 (2)对于须要长期保存的菌种,可以采纳甘油管藏的方法。 在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后灭菌。将1mL培育的菌液转移到甘油瓶

12、中,与甘油充分混匀后,放在20的冷冻箱中保存。 疑难解答 (1)生物的养分 养分是指生物摄取、利用养分物质的过程。养分物质是指维持机体生命活动,保证发育、生殖所需的外源物质。 人及动物的养分物质:水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。 植物的养分物质:矿质元素、水、二氧化碳等三类。 微生物的养分物质:水、无机盐、碳源、氮源及特别养分物质五类。 (2)确定培育基制作是否合格的方法 将未接种的培育基在恒温箱中保温12天,无菌落生长,说明培育基的制备是胜利的,否则须要重新制备。 微生物的试验室培育导学案及练习题 一、学习目标:1.了解有关培育基的基础学问2.驾驭无菌操作技术3.了解纯化大肠杆菌

13、的基础学问二、学习重点、难点:了解有关培育基的基础学问;驾驭无菌操作技术三、学法指导:小组沟通合作一对一检查通关四、自主学习一基础学问1.培育基(1)培育基的种类包括培育基和培育基等。(2)培育基的化学成分一般都含有、四类养分成分,(3)在供应上述几种主要养分物质的基础上,培育基还须要满意微生物生长对、以及等的要求。例如:培育乳酸杆菌时须要在培育基中添加;培育霉菌时须要将培育基的PH调至;培育细菌时须要将培育基的PH调至;培育厌氧微生物时须要供应无氧的条件2.无菌技术(1)获得纯净培育物的关键是。避开杂菌污染的方法主要包括以下四个内容:(2)消毒是指灭菌是指(3)试验室常用的消毒方法是,此外,

14、人们也常运用化学药剂进行消毒,如用、等。常用的灭菌方法有、,此外,试验室里还用或进行消毒。二试验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培育基(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的方法步骤:倒平板(2)倒平板的过程培育基灭菌后,须要冷却到50左右,才能用来倒平板。你用什么方法来估计培育基的温度? 为什么须要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 在倒平板的过程中,假如不当心瘵培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培育微生物吗?为什么? 2.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法中最常用的是和。平板划线法是指。稀释涂布平板法是指。(2)平板划线的操作步骤如下:为什么在操作的第一步以及每

15、次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍旧须要灼烧接种环吗?为什么? 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 在作其次次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端起先划线? (3)系列稀释操作步骤:(4)涂布平板操作步骤: 选修一生物2.3分解纤维素的微生物的分别学案(人教版)课题3分解纤维素的微生物的分别问题导学一、刚果红染色法活动与探究11刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理是什么?2常用的刚果红染色法有哪几种?它们在加入刚果红的时间上有什么不同?3探讨在刚果红培育基上出现透亮圈,是否说明肯定是由纤维素分解菌形成的?迁移与应用1在含纤维素的培育基中加入刚果红溶液,菌落四

16、周出现明显透亮圈的是()。A分解尿素的细菌B硝化细菌C分解纤维素的细菌D乳酸菌1刚果红染色法鉴别纤维素分解菌的原理菌落四周有透亮圈说明纤维素被分解说明有纤维素酶说明有纤维素分解菌2两种刚果红染色法的比较染色法优点缺点先培育微生物,再加入刚果红颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作烦琐,刚果红会使菌落之间发生混杂倒平板时就加入刚果红操作简便,不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透亮圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透亮圈,与纤维素分解菌不易区分二、分别纤维素分解菌的试验设计活动与探究21用流程图表示本试验的操作流程。2本试验与课题2中的试验在试验流程上有哪些异同?3将滤纸埋在土壤中有

17、什么作用?你认为滤纸应当埋进土壤多深?4阅读教材第29页旁栏中的纤维素分解菌选择培育基的成分回答下列问题。(1)旁栏中的配方是液体培育基还是固体培育基?为什么?(2)这个培育基对微生物是否具有选择作用?假如有,是如何进行选择的?5阅读教材第30页中的“课题延长”部分,回答以下2个问题。(1)分别纯化纤维素分解菌后,如何通过试验对其进一步确定?(2)如何测定样品中有无纤维素酶?迁移与应用2分解纤维素的微生物的分别试验过程中操作有误的是()。A经选择培育后干脆将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上B选择培育这一步可省略,但纤维素分解菌的浓度会削减C经稀释培育后,用刚果红染色法来鉴定能产生纤维素酶的

18、菌落D比照组可用等量的培育液涂布到不含纤维素的培育基上1选择培育(1)详细操作称取土样20g加入装有30mL选择培育基的锥形瓶锥形瓶固定在摇床上30振荡培育12d培育液变混浊(2)设置比照将(1)过程中的选择培育基改为不含纤维素的培育基,如牛肉膏蛋白胨基础培育基,其余过程均与(1)过程相同。2筛选过程中用到的两种培育基(1)名称:纤维素分解菌的选择培育基;纤维素分解菌的鉴别培育基。(2)区分纤维素分解菌的选择培育基为液体培育基,利用液体培育基能使养分成分充分消耗,以增加纤维素分解菌的浓度。纤维素分解菌的鉴别培育基为固体培育基,因为要在培育基上形成我们肉眼可见的菌落。在上述选择培育基中能以纤维素

19、作为碳源和能源的微生物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长;而在上述鉴别培育基中,绝大多数微生物都可以正常生长。答案:课前预习导学一、1(1)葡萄糖多糖纤维素酶(2)纤维素含量木材作物秸秆2纤维素酶复合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶3(1)刚果红染色法颜色反应(2)红色复合物纤维素酶透亮圈产生透亮圈预习沟通1:(1)提示:纤维素主要存在于植物细胞的细胞壁中,是植物细胞壁的主要组成成分,细胞壁更加达,纤维素的含量越多。纤维素的性质比较稳定,由纤维素构成的细胞壁具有支持和爱护作用。(2)提示:自然界中的纤维素主要被土壤中的微生物分解利用。其余的一部分被草食动物取食利用(实质上也离不开微生物的分

20、解作用),一部分作为能源被人类燃烧利用。二、1选择培育分解菌透亮圈3(2)选择培育基12混浊4刚果红预习沟通2:(1)提示:对需选择的微生物有利并起“浓缩”作用。(2)提示:属于选择培育基。(3)提示:在选择培育的条件下,可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速繁殖,而那些不适应这种养分条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。三、1发酵产纤维素酶液体固体2葡萄糖课堂合作探究活动与探究1:1提示:(1)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但不与水解后的纤维二糖及葡萄糖发生这种反应。(2)纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落四周形成透亮圈。2提示:一种是先培育微生物,

21、再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。3提示:不肯定。产生淀粉酶的微生物也产生模糊透亮圈。迁移与应用1:C解析:分解纤维素的细菌能将纤维素分解,刚果红纤维素复合物就无法形成,培育基中会出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈。活动与探究2:1提示:土壤取样选择培育梯度稀释avs4al(将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上)选择产生透亮圈的菌落。2提示:课题2是将土壤样品制成的菌悬液干脆涂布在以尿素为唯一氮源的选择培育基上,干脆分别得到菌落。本课题通过选择培育,使纤维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在鉴别培育基上。其他步骤基本相同。3提示:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,

22、事实上是人工设置纤维素分解菌生存的相宜环境。一般应将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。4(1)提示:是液体培育基,因为配方中无凝固剂。(2)提示:有选择作用,本配方中的唯一碳源是纤维素粉,所以只有能分解纤维素的微生物才可以大量繁殖。5(1)提示:进行发酵产生纤维素酶的试验。(2)提示:对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定,留意设置比照试验。迁移与应用2:A当堂检测1下列关于纤维素酶的说法,错误的是()。A纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种组分B纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖答案:D解析:纤维素酶是一种复合酶,包括

23、C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,C1酶和Cx酶能把纤维素分解为纤维二糖,而葡萄糖苷酶能把纤维二糖进一步分解为葡萄糖。2在加入刚果红的纤维素分解菌培育基中会出现透亮圈,产生的透亮圈是()。A刚果红与纤维素形成的复合物B刚果红与纤维二糖形成的复合物C纤维素分解后形成的葡萄糖导致的D以纤维素分解菌为中心形成的答案:D解析:当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红纤维素复合物就无法形成,培育基中会出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈。3鉴定纤维素分解菌时,可以运用刚果红对其染色,常用的刚果红染色法有两种,一种是先培育微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。两种染色法的结果是()。A均会出现透

24、亮圈B均不会出现透亮圈C方法一出现透亮圈,方法二不出现透亮圈D方法一不出现透亮圈,方法二出现透亮圈答案:A解析:两种刚果红染色法虽然程序不同,但最终都会使培育基中出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈。4在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上之前一般先进行选择培育,其主要目的是()。A完全除去其他微生物B没有意义,去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度D使纤维素分解菌充分长大答案:C解析:选择培育在选择培育基中进行,能使纤维素分解菌快速增殖从而增加其浓度,而其他不能分解纤维素的微生物的增殖却受到抑制。5通过分别分解纤维素的微生物试验,对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选,这只是分别提纯的第一步

25、。对分别的菌种作进一步鉴定,还须要进行()。A发酵产纤维素酶的试验B提取纤维二糖的试验C浓缩纤维素分解菌的试验D提取葡萄糖的试验答案:A解析:对纤维素分解菌的鉴定,常用的方法是对分别的菌种进行发酵产纤维素酶的试验。绘制分别分解纤维素的微生物的试验流程图。选修一生物3.1菊花的组织培育学案(人教版) 课题1菊花的组织培育1说出植物组织培育的基本原理。2学习植物组织培育的基本技术。3进行菊花或其他植物的组织培育。一、植物组织培育的基本原理植物细胞具有_。即植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于_状态时,在肯定的_、_和其他外界条件的作用下,表现出可以发育成_的实力。二、植物组织培育的基本过

26、程1在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上都会出现_的差异,形成这些差异的过程叫做_。2过程离体的植物细胞、组织、器官(脱分化)组织()丛芽或根等(生长)完整的植物体思索:马铃薯长期种植,产量会降低而且易感染病毒,要想提高马铃薯的产量,培育无病毒的马铃薯应当怎么办?三、影响植物组织培育的因素1材料的选择植物材料的选择干脆关系到试验的成败。植物的种类、材料的_和_等都会影响试验结果。菊花的组织培育,一般选择_的茎上部新萌生的侧枝。2培育基植物组织培育须要相宜的培育基,常用的是_培育基,其主要成分包括:_,如N、P、K、Ca、Mg、S;_,如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co

27、;_,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及_等;还经常须要添加_。3植物激素植物激素中_和_是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。培育基中添加的植物激素的_、_以及_等,都会影响试验结果。以生长素和细胞分裂素为例。运用依次试验结果先运用生长素,后运用细胞分裂素有利于细胞_,但细胞不_先运用细胞分裂素,后运用生长素细胞_同时运用_频率提高 生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时有利于_的分化,抑制_的形成比值低时有利于_的分化,抑制_的形成比值适中促进_形成4.其他影响因素pH、温度、光照等条件是重要因素,不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行菊花的组织培育时,一般将pH限制在_左右,温度限

28、制在_,每日用日光灯照耀_h。四、试验操作1制备MS固体培育基(1)配制各种母液。(2)配制培育基。(3)灭菌将分装好的培育基连同其他器械一起进行_。2外植体消毒菊花茎段用水冲洗、加洗衣粉用软刷进行刷洗、用流水冲洗,吸干水分。外植体要用体积分数为70%的酒精_,然后用无菌水清洗,吸干表面的水分,再用质量分数为0.1%的氯化汞_,最终用_清洗。3接种全部的接种操作都必需在_旁进行,并且每次运用器械后,都须要用_。4培育接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培育,培育期间应定期_。5移栽6栽培 答案:一、全能性离体养分物质激素完整的植株二、1.稳定性细胞分化2愈伤再分化思索:长期进行无性繁殖的植物,只有根

29、尖和茎尖中几乎无病毒,因此可利用植物组织培育获得无病毒的马铃薯植株。三、1.年龄保存时间的长短未开花植株2MS大量元素微量元素有机物蔗糖植物激素3生长素细胞分裂素浓度运用的先后依次用量的比例分裂分化既分裂也分化分化根芽芽根愈伤组织45.8182212四、1.高压蒸汽灭菌2消毒消毒无菌水3酒精灯火焰灼烧灭菌4消毒1.细胞分化与植物细胞的全能性多细胞生物体,一般是由一个受精卵通过细胞的增殖和分化发育而成的。细胞分裂只能繁殖出很多含有相同遗传物质的细胞,只有经过细胞分化才能形成不同的组织,进一步形成各种器官、系统,从而完成生物的个体发育过程。当细胞分化起先时,受遗传因素和环境因素的调整,不同细胞的不

30、同基因会在特定的时间、空间被激活,活化一段时间后有些基因的活动停止,而有些基因还在接着活动,从而产生了特定的蛋白质(即基因有选择性的表达),进而产生了不同的组织,也就是在个体发育中相同细胞的后代,在形态、结构和生理功能上发生了稳定性差异细胞分化,这是发生在生物体一生中的一种长久改变,当然胚胎时期达到最大限度。一般来说,分化了的细胞将始终保持分化后的状态,直到死亡。由于体细胞大多是通过有丝分裂繁殖而来的,一般已经分化的细胞仍有一套和受精卵相同的染色体,含有与本物种相同的DNA分子。因此,已分化的细胞具有发育成完整新个体的潜能,即全能性。在合适的条件下,有些分化的细胞具有复原分裂、重新分化发育成完

31、整新个体的实力。植物细胞的全能性比较强,动物细胞的全能性受到了限制,特殊是一些高度特化的动物细胞,很难用它培育成一个新个体,但它的细胞核中仍有保持物种遗传性的全部遗传物质,保持着全能性,例如已取得胜利的克隆羊多利就是一例。2.愈伤组织愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形态态的薄壁细胞。它简单与根尖、茎尖的分生组织发生混淆。可以通过下表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同。组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生组织受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细胞组织愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体相同点都通过有丝分裂进行细胞增殖3.污染

32、的预防污染就是指在组织培育过程中,培育容器内滋生菌斑,使培育材料不能正常生长发育,从而导致培育失败的现象。植物组织培育不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培育所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培育条件的要求较高,对无菌操作的要求特别严格。污染有两种类型,一种是细菌污染一般是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。另一种是真菌污染可能是由植物材料灭菌不当造成的。可以通过以下措施做好预防。(1)防止外植体带菌。选择好外植体采集时期和采集部位。外植体采集以春秋为宜,优先选择地上部分作为外植体,阴雨天勿采,晴天下午采,采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。在室内或无

33、菌条件下进行预培育。外植体严格消毒。做消毒效果试验,多次消毒和交替消毒。(2)保证培育基及接种器具彻底灭菌。分装时,注射器勿与瓶接触,培育基勿粘瓶口。检查封口膜是否有破损。扎瓶口要位置适当、松紧相宜。保证灭菌时间和高压锅内温度。接种工具运用前彻底灭菌。工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。(3)操作人员严格遵守无菌操作规程。如肯定要规范着装,操作过程中不说话等。(4)保证接种与培育环境清洁。污染瓶经高压灭菌后再清洁。接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照耀或用臭氧灭菌和消毒。定期对培育室消毒、防止高温。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果,又要考虑到植物的耐受力。不同药剂、不同植物材

34、料,甚至不同器官要区分对待。消毒用过的有毒药品应收集后统一交给有关专业部门处理,以免引起环境污染。一旦发觉培育材料被污染,特殊是真菌性污染,肯定不要打开培育瓶。应先将全部被污染的培育瓶统一放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌后,再打开培育瓶进行清洗。题型一细胞的全能性下列实例中能体现细胞全能性的是()。用培育基培育的胡萝卜单个细胞培育成了可育的植株植物用种子进行繁殖用单个烟草组织培育出了可育的完整植株ABCD解析:和都属于已分化的细胞经过培育形成可育的植株,体现了细胞的全能性。植物用种子繁殖后代,事实上是由一个受精卵,通过细胞的增殖和分化发育成新个体,是由未经分化的细胞(受精卵)发育成新个体的过程,因此不

35、能体现细胞全能性。答案:B题型二植物细胞表达全能性的条件植物细胞表现出全能性的必要条件是()。A赐予相宜的养分和外界条件B导入其他植物细胞的基因C脱离母体后的具有完整细胞核的细胞或组织,赐予相宜的养分和外界条件D将成熟筛管细胞的细胞核移植到去核卵细胞中解析:在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织、器官,这是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。当植物细胞脱离母体后,在肯定的养分物质、激素和其他相宜的外界条件的作用下,植物细胞就可以表现出全能性。答案:C反思领悟:植物细胞表达全能性的条件:一是离体的组织或细胞;二是须要肯定的激素、养分及其他相宜条件;三是具有完整细胞核的

36、细胞。题型三植物组织培育的过程及影响因素(2022安徽理综)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代,导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下:外植体愈伤组织芽根植株请回答下列问题。(1)微型繁殖培育无病毒草莓时,一般选取_作为外植体,其依据是_。(2)在过程中,常用的MS培育基主要成分包括大量元素、微量元素和_,在配制好的培育基中,经常须要添加_,有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后25d,若发觉外植体边缘局部污染,缘由可能是_。(3)在过程中,愈伤组织在诱导生根的培育基中未形成根,但分化出了芽,其缘由可能是_。解析:(1)植

37、物组织培育时常采纳根尖或茎尖部位,缘由是该部位含病毒极少,甚至无病毒。(2)MS培育基的成分包括大量元素、微量元素和有机物,在配制好的培育基中,常须要添加生长素和细胞分裂素等植物激素。植物组织培育也应留意无菌操作。(3)生长素用量比细胞分裂素用量的比值低时,有利于芽的分化,比值高时,有利于根的分化。答案:(1)茎尖(或根尖)茎尖(或根尖)病毒极少,甚至无病毒(2)有机物植物激素外植体消毒不彻底(3)培育基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低1下列关于细胞分化的叙述,错误的是()。A细胞分化是一种长久性的改变,它发生在生物体的整个生命过程中B细胞分化在胚胎时期达到最大限度C随着细胞

38、分化的进行,细胞中的遗传物质种类会发生改变D高度分化的动物细胞的细胞核保持着全能性2下列有关植物组织培育的叙述,错误的是()。A植物组织培育的原理是细胞的全能性B主要包括脱分化和再分化两个阶段C外植体形成愈伤组织的过程须要阳光D植物组织培育的过程中要求无菌操作3下列关于愈伤组织形成过程的正确叙述是()。A愈伤组织的形成是离体的植物细胞分化的结果B愈伤组织的形成是离体的植物细胞分裂的结果C愈伤组织的形成是离体的动物细胞分化的结果D愈伤组织的形成是离体的动物细胞分裂的结果4下列关于接种时应留意的事项,全部正确的是()。接种室要消毒无菌操作接种时可以谈话外植体如茎段、茎尖可随机放入培育基接种时要防止

39、交叉污染接种完立即盖好瓶口ABCD5在离体的植物组织、器官或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,须要下列哪些条件?()消毒灭菌肯定浓度的植物激素相宜的温度足够的光照足够的养料ABCD 答案:1C细胞分化不会使遗传物质种类发生改变,它的实质是遗传物质在时间和空间上有选择性地表达。2C植物组织培育是指离体的植物细胞、组织或器官在无菌操作下经脱分化和再分化形成完整植物体的过程,其原理是植物细胞的全能性。在脱分化形成愈伤组织的过程中,恒温箱的门应当关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。3B愈伤组织只存在于植物细胞;离体的植物组织细胞,在培育了一段时间以后,会通过细胞分裂形成愈伤组织。4D整个接种过程必需在无菌条件下进行,不能谈话,防止呼吸产生污染,因此操作过程应禁止谈话,并戴口罩;接种的外植体放入培育基时留意将形态学下端插入,而且分布匀称,不能随机放入,以保证必要的养分和光照条件。5D离体的植物相关结构在形成愈伤组织的过程中不须要光照,因为该过程无法进行光合作用,其养分物质来自培育基。 第24页 共24页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页第 24 页 共 24 页

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