第二节二动物细胞工程精选文档.ppt

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1、第二节二动物细胞工程本讲稿第一页，共十一页1 1、培养基、培养基状态：状态：成分成分液体液体（即培养液）（即培养液）葡萄糖葡萄糖氨基酸氨基酸无机盐无机盐维生素维生素动物血清动物血清等等植物组织培养植物组织培养 的培养基的培养基固体（琼脂）固体（琼脂）蔗糖蔗糖有机添加剂有机添加剂矿质元素矿质元素维生素维生素植物激素植物激素等等（一）动物细胞培养（一）动物细胞培养本讲稿第二页，共十一页2、过程：、过程：动物胚胎或出生不久幼龄动物胚胎或出生不久幼龄动物的组织、器官动物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代左右细胞代左右细胞原代培养原代培养4050代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞

2、株无限传代无限传代细胞系细胞系遗传物质遗传物质未改变未改变使组织分散成使组织分散成单个细胞单个细胞细胞生长增殖细胞生长增殖单个细胞单个细胞剪碎剪碎培养液培养液细胞分裂细胞分裂能力强能力强使细胞与培养液充分接触，使细胞与培养液充分接触，利于对营养物质的吸收利于对营养物质的吸收遗传物质改变，遗传物质改变，有癌变的特点有癌变的特点培养瓶培养瓶细胞贴壁生长细胞贴壁生长（110代）代）（10代以后）代以后）本讲稿第三页，共十一页3、结果：、结果：培养成细胞株或细胞系培养成细胞株或细胞系4、原理：、原理：细胞的增殖细胞的增殖5、目的：、目的：获得细胞或细胞产物获得细胞或细胞产物概念：概念：原代培养原代培养

3、传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系本讲稿第四页，共十一页6 6、应用：、应用：（1 1）大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品）大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品（2 2）检测有毒物质）检测有毒物质（许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色（许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。）数，可以判断某种物质的毒性。）（3 3）为烧伤病人植皮）为烧伤病人植皮（利用动物细胞培养技术，可以用烧伤病人自己的健康皮肤细（利用动物细胞培养技术，可以用烧伤

4、病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身皮肤细胞供植皮所需。）胞培养出大量的自身皮肤细胞供植皮所需。）（4 4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。疾病提供理论依据。如：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等如：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等本讲稿第五页，共十一页（二）动物细胞融合（二）动物细胞融合1、原理：细胞膜的流动性、原理：细胞膜的流动性5、用途：、用途：制备单克隆抗体制备单克隆抗体2 2、诱导融合、诱导融合 的方法的方法物理方法物理方法化学方法化学方法灭活的病毒灭活的病毒（有诱导细胞融（有诱导细胞融 合的能力，合的能力，

5、不会感染细胞）不会感染细胞）4、结果：形成杂种细胞、结果：形成杂种细胞3 3、过程、过程本讲稿第六页，共十一页（三）单克隆抗体（三）单克隆抗体1、定义：、定义：单个单个B淋巴细胞通过克隆（无性生殖）形成淋巴细胞通过克隆（无性生殖）形成的细胞群所产生的的细胞群所产生的化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强的抗的抗体体单克隆抗体单克隆抗体克隆克隆分子水平上分子水平上细胞水平上细胞水平上个体水平上个体水平上DNA克隆：克隆：DNA片段扩增片段扩增一个细胞通过分裂形成的细胞株一个细胞通过分裂形成的细胞株植物个体的克隆植物个体的克隆动物个体的克隆动物个体的克隆（无性生殖）（无性生殖）本讲稿第七页，

6、共十一页1、过程：、过程：小鼠骨髓小鼠骨髓瘤细胞瘤细胞效应效应B细胞细胞产生特定抗产生特定抗体的细胞群体的细胞群筛选筛选增殖增殖单克隆抗体单克隆抗体体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔细胞融合细胞融合促融剂：促融剂：灭活的病毒灭活的病毒（灭活的仙台病毒（灭活的仙台病毒）聚乙二醇聚乙二醇继承了双亲的遗传物质，既继承了双亲的遗传物质，既有有B B淋巴细胞分泌特异性抗淋巴细胞分泌特异性抗体的能力，又有骨髓瘤细胞体的能力，又有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖在体外培养条件下大量增殖的本领的本领筛选筛选筛选出产生所筛选出产生所需抗体的细胞需抗体的细胞群群筛选出杂筛选出杂交瘤细胞交瘤细胞杂交瘤细

7、胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养小鼠小鼠抗原抗原在体外培养能大在体外培养能大量增殖量增殖本讲稿第八页，共十一页3 3、应用、应用理论：用于生物学基础理论的研究理论：用于生物学基础理论的研究实践：用于疾病的诊断、治疗和预防等方面实践：用于疾病的诊断、治疗和预防等方面单克隆抗体的优越性：单克隆抗体的优越性：特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高单克隆抗体治疗癌症单克隆抗体治疗癌症“生物导弹生物导弹”在单抗上连接抗癌药物，将药物定在单抗上连接抗癌药物，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞，又不会伤害健康细胞。胞，又不会伤害健康细胞。本讲稿第九页，共十一页例析：例析

8、：材料材料1、：美国科学家、：美国科学家2001年年11月月25日宣布，他们首次成功克隆日宣布，他们首次成功克隆了人类胚胎。但是这些科学家同时声称，他们这样做的目的，不了人类胚胎。但是这些科学家同时声称，他们这样做的目的，不是为了克隆人，而是为了制造胚胎干细胞治疗多种疾病之用。是为了克隆人，而是为了制造胚胎干细胞治疗多种疾病之用。克隆就是将一个体细胞的克隆就是将一个体细胞的DNA移入一个已经被去掉细胞核的卵细移入一个已经被去掉细胞核的卵细胞中，然后用电或者化学方法剌激这个改造后的卵细胞，使它开始胞中，然后用电或者化学方法剌激这个改造后的卵细胞，使它开始分裂并成为一个胚胎。这个胚胎的基因与体细胞

9、提供者的基因绝大分裂并成为一个胚胎。这个胚胎的基因与体细胞提供者的基因绝大部分是相同的。部分是相同的。材料材料2：2001年年11月月3日日18时时05分，我国首例分，我国首例“胎儿上皮细胞胎儿上皮细胞”克隆牛克隆牛“康康康康”在山东莱阳农学院诞生。现场公证人员公证，在山东莱阳农学院诞生。现场公证人员公证，这是我国唯一健康存活的体细胞克隆牛。上皮细胞是高度分化这是我国唯一健康存活的体细胞克隆牛。上皮细胞是高度分化的体细胞，分化程度越高，克隆越难，把它作为供核细胞尚属的体细胞，分化程度越高，克隆越难，把它作为供核细胞尚属首例首例。本讲稿第十页，共十一页材料材料4：植物细胞植物细胞a植物细胞植物细

10、胞bcd杂种细胞杂种细胞细胞分裂细胞分裂。据材料分析：据材料分析：1、“改造后的卵细胞改造后的卵细胞”的分裂是的分裂是 分裂。分裂。2、“胚胎的基因与体细胞提供者的基因绝大部分是相同的。胚胎的基因与体细胞提供者的基因绝大部分是相同的。”那么那么“不相同的基因不相同的基因”控制的性状遗传方式属控制的性状遗传方式属 遗传遗传3、写出以下、写出以下过程或结构的名称过程或结构的名称 A B C D 。4、请例举出与材料、请例举出与材料2有关的有关的生物技术（至少两种）生物技术（至少两种）5、名贵花卉进行离休培养时不应、名贵花卉进行离休培养时不应采用该株的采用该株的 A、茎尖、茎尖 B、子房壁、子房壁 C、花粉粒、花粉粒 D、叶片、叶片 植物体植物体植物的器官、植物的器官、组织或细胞组织或细胞培养基培养基中培养中培养BA胚状体胚状体再分化再分化材料材料3：本讲稿第十一页，共十一页