免疫学技术原理PPT课件.ppt

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1、关于免疫学技术原理第一张，PPT共三十八页，创作于2022年6月（一）抗原抗体反应的原理（一）抗原抗体反应的原理 抗原抗体反应抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的抗原抗体之间的结合力结合力 亲水胶体亲水胶体转化为转化为疏水胶体疏水胶体 物质基础物质基础:第二张，PPT共三十八页，创作于2022年6月体内体内：表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素或：表现为溶菌、杀菌、促进

2、吞噬或中和毒素或引起免疫病理的损伤引起免疫病理的损伤体外体外：凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应：凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应第三张，PPT共三十八页，创作于2022年6月（二）（二）抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点特异性特异性 可逆性可逆性比例性比例性 阶段性阶段性第四张，PPT共三十八页，创作于2022年6月特异性：特异性：抗原与抗体抗原与抗体结合反应的专一性结合反应的专一性抗原抗体反应特异性示意图抗原抗体反应特异性示意图分子基础分子基础:抗原表位与抗体分子抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性高变区之间空间构型的互补性（1 1）特异性）特异性第五张，PPT共三十八页，

3、创作于2022年6月两种不同的抗原分两种不同的抗原分子具有部分相同或子具有部分相同或类似结构的抗原表类似结构的抗原表位，可与彼此相应位，可与彼此相应的抗血清发生反应的抗血清发生反应交叉反应交叉反应（cross reactions）抗原抗体交叉反应示意图抗原抗体交叉反应示意图Ag B第六张，PPT共三十八页，创作于2022年6月(2)(2)可逆性可逆性可逆性：可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性又可解离为游离抗原与抗体的特性 影响因素：影响因素：抗体对相应抗原的抗体对相应抗原的亲合力亲合力亲合力越高，结合越亲合

4、力越高，结合越牢固，越不易解离牢固，越不易解离 环境因素对复合物的影响环境因素对复合物的影响pHpH、离子强度、离子强度 第七张，PPT共三十八页，创作于2022年6月前带前带(prezone)(prezone)：抗体过量：抗体过量后带后带(postzone)(postzone)：抗原过量：抗原过量等价带等价带(equivalence zone)(equivalence zone)：抗原抗体比例合适抗原抗体比例合适 抗原抗体反应比例性示意图抗原抗体反应比例性示意图比例性：比例性：抗原与抗体发生可抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关见反应需遵循一定的量比关系系(3)(3)比例性比例性第八张，

5、PPT共三十八页，创作于2022年6月第一阶段：第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：第二阶段：反应可见阶段，反应慢反应可见阶段，反应慢，出现凝集、出现凝集、沉淀和细胞沉淀和细胞溶解等现象溶解等现象 (4)(4)阶段性阶段性第九张，PPT共三十八页，创作于2022年6月A.A.抗原、抗体反应物的自身因素抗原、抗体反应物的自身因素环境因素环境因素（三）（三）影响抗原抗体反应的因素影响抗原抗体反应的因素抗原抗原:理化性状、表位种类和数目理化性状、表位种类和数目抗体抗体:来源、特异性、亲和性、效价来源、特异性、亲和性、效价第十张，PPT共三十八页，创作于2

6、022年6月B.B.环境因素环境因素电电解解质质:生理生理盐盐水或水或缓缓冲液冲液酸碱度酸碱度:pH6pH9温温 度度:1540，37最适最适第十一张，PPT共三十八页，创作于2022年6月反应类型反应类型实验技术实验技术结果判断结果判断凝集反应凝集反应直接凝集试验直接凝集试验观察凝集现象观察凝集现象间接凝集试验间接凝集试验同上同上抗球蛋白试验抗球蛋白试验同上同上沉淀反应沉淀反应液相沉淀试验液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与补体参与的反应的反应补体溶血试验补体溶血试验观察测定溶血现象观察测定溶血现象补体结

7、合试验补体结合试验同上同上(四）免疫学检测技术的类型四）免疫学检测技术的类型第十二张，PPT共三十八页，创作于2022年6月反应类型反应类型实验技术实验技术结果判断结果判断中和反应中和反应病毒中和试验病毒中和试验检测病毒感染性检测病毒感染性毒素中和试验毒素中和试验检测外毒素毒性检测外毒素毒性标记免疫反应标记免疫反应荧光免疫技术荧光免疫技术检测荧光现象检测荧光现象放射免疫技术放射免疫技术检测放射性强度检测放射性强度酶免疫技术酶免疫技术检测酶底物显色检测酶底物显色发光免疫技术发光免疫技术检测发光强度检测发光强度金免疫技术金免疫技术检测金颗粒沉淀检测金颗粒沉淀第十三张，PPT共三十八页，创作于202

8、2年6月按实际用途分为按实际用途分为:e e免疫组织化学技术免疫组织化学技术(immunohistochemistry techniqu,IHCT)(immunohistochemistry techniqu,IHCT)免疫测定免疫测定(immunoassay)(immunoassay)标记免疫技术标记免疫技术：用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标记物等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析第十四张，PPT共三十八页，创

9、作于2022年6月按测定反应体系的物理状态分为按测定反应体系的物理状态分为:均相免疫测定均相免疫测定(homogenous immunoassay(homogenous immunoassay）非均相免疫测定非均相免疫测定(heterogenous immunoassay)(heterogenous immunoassay)按检测现象分为按检测现象分为:放射免疫技术放射免疫技术 荧光免疫技术荧光免疫技术酶免疫技术酶免疫技术 化学发光免疫技术化学发光免疫技术金免疫技术金免疫技术第十五张，PPT共三十八页，创作于2022年6月1 1什么是抗原抗体反应？什么是抗原抗体反应？抗原抗体反应的原理是什么？

10、抗原抗体反应的原理是什么？2.2.抗原抗体反应有哪些特点？抗原抗体反应有哪些特点？3.3.如何理解抗原抗体反应的特异性？如何理解抗原抗体反应的特异性？4 4什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？5 5抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？6 6抗原抗体反应有哪些影响因素？抗原抗体反应有哪些影响因素？7 7基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？思考题思考题思考题思考题第十六张，PPT共三十八页，创作于2022年6月小结小结 抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之

11、间所发生的特抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。异性结合反应。抗原抗体反应的特点是特异性、可逆性、比例性和阶抗原抗体反应的特点是特异性、可逆性、比例性和阶段性。段性。第十七张，PPT共三十八页，创作于2022年6月 影响抗原抗体反应的因素包影响抗原抗体反应的因素包括反应物的自身因素和环境因括反应物的自身因素和环境因素。素。免疫学检测技术的基础是免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应抗原抗体反应，免疫学技术有，免疫学技术有凝凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型反应五种类型。第十八张，PPT共三十八

12、页，创作于2022年6月抗原抗原抗原抗原排斥排斥抗原抗原抗体抗体Y Y抗原抗原抗原抗原抗原抗原Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY Y 颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体结合，在电解质参与下所形成的肉眼可见的凝颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体结合，在电解质参与下所形成的肉眼可见的凝集现象，称为集现象，称为凝集反应。凝集反应。第二节 凝集反应第十九张，PPT共三十八页，创作于2022年6月 分类直接凝集反应直接凝集反应-颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集

13、现象出现肉眼可见的凝集现象。细胞性抗原：细胞性抗原：细菌和红细胞细菌和红细胞第二十张，PPT共三十八页，创作于2022年6月凝集原凝集原(agglutinogen)(agglutinogen)：凝集反应中的抗原。凝集反应中的抗原。凝集素凝集素(agglutinin)(agglutinin)：凝集参与反应的抗体凝集参与反应的抗体第二十一张，PPT共三十八页，创作于2022年6月颗粒性抗原颗粒性抗原凝集素凝集素 直接凝集反应直接凝集反应第二十二张，PPT共三十八页，创作于2022年6月1、玻片凝集反应玻片凝集反应:已知抗原已知抗原+未知抗体未知抗体凝集团块凝集团块 混浊混浊?2、试管凝集反应：、试

14、管凝集反应：定量抗原定量抗原+系列稀释抗体系列稀释抗体不同程度的凝集反应不同程度的凝集反应YES NO确定抗体的滴度确定抗体的滴度第二十三张，PPT共三十八页，创作于2022年6月 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。象。试管凝集试验试管凝集试验第二十四张，PPT共三十八页，创作于2022年6月第二十五张，PPT共三十八页，创作于2022年6月鲜血者红细胞鲜血者红细胞受血者血清受血者血清O型型(抗抗A、抗抗B)A型型(抗抗B)B型型(抗抗A)AB型型(无无)O型型-A型型+-+-B型

15、型+-AB型型+-注注:“+”表示有凝集反应表示有凝集反应,“-”表示表示无凝集反应无凝集反应第二十六张，PPT共三十八页，创作于2022年6月间接凝集反应间接凝集反应(indirect(indirect agglutination)agglutination):将可溶性抗原或抗体吸附于将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象用下，出现肉眼可见的凝集现象.第二十七张，PPT共三十八页，创作于2022年6月载体载体可溶性抗原可溶性抗原致敏致敏致致敏敏颗颗粒粒NSNS凝凝集集

16、颗颗粒粒 间接凝集试验示意图间接凝集试验示意图第二十八张，PPT共三十八页，创作于2022年6月 载体种类及其处理方法载体种类及其处理方法红细胞：红细胞：新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一般先醛化后应用。新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一般先醛化后应用。聚苯乙烯胶乳颗粒：聚苯乙烯胶乳颗粒：可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团的颗粒可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团的颗粒第二十九张，PPT共三十八页，创作于2022年6月1 1.正向间接凝集试验正向间接凝集试验2 2.反向间接凝集试验反向间接凝集试验3 3.间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验间接凝集反应的类型间接凝集反应的类型第三十张，PPT

17、共三十八页，创作于2022年6月用抗原致敏载体用抗原致敏载体-检测抗体检测抗体正向间接凝集试验正向间接凝集试验第三十一张，PPT共三十八页，创作于2022年6月反向间接凝集试验反向间接凝集试验用抗体致敏载体用抗体致敏载体-检测抗原检测抗原第三十二张，PPT共三十八页，创作于2022年6月间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验用抗原致敏载体用抗原致敏载体-检测抗原检测抗原第三十三张，PPT共三十八页，创作于2022年6月间接血凝试验间接血凝试验第三十四张，PPT共三十八页，创作于2022年6月间接乳胶凝集试验间接乳胶凝集试验概念概念金黄色葡萄球菌协同凝集试验金黄色葡萄球菌协同凝集试验第三十五张，PPT

18、共三十八页，创作于2022年6月间接凝集反应的应用间接凝集反应的应用抗原的检测抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。成分。抗体的检测抗体的检测检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。生的抗体。第三十六张，PPT共三十八页，创作于2022年6月1.1.孕妇尿中绒毛末促性腺激素含量明显增高孕妇尿中绒毛末促性腺激素含量明显增高2.2.糖脂是结核杆菌细胞壁中的重要致病物质糖脂是结核杆菌细胞壁中的重要致病物质3.3.检测猪血清中的猪瘟病毒抗体检测猪血清中的猪瘟病毒抗体4.4.猪口蹄疫的反向间接血凝集试验致敏红细胞诊断液的研制猪口蹄疫的反向间接血凝集试验致敏红细胞诊断液的研制应用举例应用举例第三十七张，PPT共三十八页，创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看第三十八张，PPT共三十八页，创作于2022年6月2022/9/18