致癌作用精选PPT.ppt

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1、关于致癌作用第1页，讲稿共64张，创作于星期三第一节、背景第一节、背景o近年来肿瘤发病率和死亡率不断增高，发癌年龄年轻化；近年来肿瘤发病率和死亡率不断增高，发癌年龄年轻化；o查明了遗传因素和病毒的生物学因素虽与肿瘤发生有查明了遗传因素和病毒的生物学因素虽与肿瘤发生有关。但并非是导致肿瘤发病率增高的主要原因；关。但并非是导致肿瘤发病率增高的主要原因；o发现环境化学污染和某些物理有害因素（如紫外线）发现环境化学污染和某些物理有害因素（如紫外线）与肿瘤发病率密切相关。与肿瘤发病率密切相关。WHO指出指出,人类癌症人类癌症90%与与环境因素有关，其中主要是化学因素。环境因素有关，其中主要是化学因素。第

2、2页，讲稿共64张，创作于星期三l 恶性肿瘤已成为人类死亡的第一位或第二位恶性肿瘤已成为人类死亡的第一位或第二位 原因，每年全世界约有原因，每年全世界约有700700万人死于癌症万人死于癌症l 近些年，我国恶性肿瘤在各种死因中排列第一位。近些年，我国恶性肿瘤在各种死因中排列第一位。第3页，讲稿共64张，创作于星期三第4页，讲稿共64张，创作于星期三第5页，讲稿共64张，创作于星期三认识化学致癌的历史认识化学致癌的历史1775年年 珀西瓦尔珀西瓦尔波特波特（percival pott）扫烟囱工扫烟囱工阴阴囊癌囊癌;1875年年 德国德国 褐煤干馏工人褐煤干馏工人肺癌高发肺癌高发;1919年年 动

3、物实验证实煤焦油诱发兔耳上皮癌。动物实验证实煤焦油诱发兔耳上皮癌。1930年年 3-4苯并芘，动物实验可引起皮肤癌、肉瘤等。苯并芘，动物实验可引起皮肤癌、肉瘤等。生产合成染料生产合成染料膀胱癌高发膀胱癌高发 在手表指针上涂抹发冷光的镭的妇女，因为常常在手表指针上涂抹发冷光的镭的妇女，因为常常舔刷毛，经诊断患有舌癌。舔刷毛，经诊断患有舌癌。第6页，讲稿共64张，创作于星期三20世纪世纪50年代早期年代早期 吸烟人群的肺癌发病率日渐上升，比不抽烟吸烟人群的肺癌发病率日渐上升，比不抽烟的人群高上的人群高上20至至30倍。倍。第7页，讲稿共64张，创作于星期三0 0202040406060808010

4、0100120120140140160160肿瘤死亡率（肿瘤死亡率（1/101/10万）万）1945194519601960197519751990199020052005年份年份36.936.9115.34115.34123.92123.92135.59135.59114.23114.2346.1246.121950-2005年间我国肿瘤死亡率趋势年间我国肿瘤死亡率趋势第8页，讲稿共64张，创作于星期三5.175.178.598.5918.8418.8420.5720.5722.3922.3924.9324.930 0151530304545606075759090105105构成比（）构成

5、比（）195719571963196319751975198219821991199120012001年份年份恶性肿瘤恶性肿瘤其他死因其他死因1950-2001年间我国肿瘤死亡人数占总死亡人数的构年间我国肿瘤死亡人数占总死亡人数的构成比变化趋势成比变化趋势第9页，讲稿共64张，创作于星期三第二节、基本概念第二节、基本概念o致癌作用致癌作用(carcinogenesis)是指环境有害因素引起或增进正常细胞发生恶性转化并发展成为肿瘤的过程过程。o化学致癌化学致癌(chemical carcinogenesis)是指化学物质引起或增进正常细胞发生恶性转化并发展成为肿瘤的过程过程。o具有这类作用的化学

6、物质称为化学致癌物化学致癌物(chemical carcinogen)。第10页，讲稿共64张，创作于星期三第三节、化学致癌物的分类第三节、化学致癌物的分类 按化学性质按化学性质1 烷化剂烷化剂 直接烷化剂：芥子气、氯甲甲醚、环氧乙烷等；直接烷化剂：芥子气、氯甲甲醚、环氧乙烷等；间接烷化剂：氯乙烯、苯、丁二烯等；间接烷化剂：氯乙烯、苯、丁二烯等；2 多环芳烃：苯并芘、煤焦油、沥青等多环芳烃：苯并芘、煤焦油、沥青等3 芳香胺类：联苯胺、硝基联苯、氨基联苯等芳香胺类：联苯胺、硝基联苯、氨基联苯等4 金属和类金属：镍、铬、镉、砷等金属和类金属：镍、铬、镉、砷等5 霉菌和植物毒素霉菌和植物毒素6 药物

7、：环磷酰胺、己烯雌酚等。药物：环磷酰胺、己烯雌酚等。第11页，讲稿共64张，创作于星期三 按作用形式按作用形式1 直直接接致致癌癌物物：有有些些致致癌癌物物可可以以不不经经过过代代谢谢活活化化就就具具有活性，称为直接致癌物有活性，称为直接致癌物2 间间接接致致癌癌物物：大大多多数数致致癌癌物物必必须须经经过过代代谢谢活活化化才才具具有有致癌活性，这些致癌物称为间接致癌物。致癌活性，这些致癌物称为间接致癌物。前致癌物、近致癌物、终致癌物。前致癌物、近致癌物、终致癌物。第12页，讲稿共64张，创作于星期三苯并芘苯并芘联苯胺联苯胺2-乙酰氨基芴乙酰氨基芴第13页，讲稿共64张，创作于星期三前致癌物前

8、致癌物近致癌物近致癌物终致癌物终致癌物代谢酶代谢酶前致癌物前致癌物:化学物原型无致癌作用，须在体化学物原型无致癌作用，须在体内经代谢转化才具有致癌作用，尚未代谢内经代谢转化才具有致癌作用，尚未代谢活化的形式，即母体化合物活化的形式，即母体化合物。如亚硝胺类，多环芳烃如亚硝胺类，多环芳烃第14页，讲稿共64张，创作于星期三前致癌物前致癌物近致癌物近致癌物终致癌物终致癌物代谢酶代谢酶近致癌物近致癌物:指前致癌物经代谢活化过程形指前致癌物经代谢活化过程形成的中间产物，必须进一步代谢活化才具成的中间产物，必须进一步代谢活化才具有致癌作用的物质有致癌作用的物质。第15页，讲稿共64张，创作于星期三前致癌

9、物前致癌物近致癌物近致癌物终致癌物终致癌物代谢酶代谢酶终致癌物终致癌物:不需代谢活化的直接致癌物不需代谢活化的直接致癌物和间接致癌物经过代谢转化最后产生的和间接致癌物经过代谢转化最后产生的活性代谢产物的统称。活性代谢产物的统称。第16页，讲稿共64张，创作于星期三黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1（aflatoxin AFB1）J 代谢：代谢：脱甲基、羟化、环氧化反应脱甲基、羟化、环氧化反应J 羟化代谢产物：羟化代谢产物：与谷胱甘肽、葡萄糖醛酸、硫酸结合与谷胱甘肽、葡萄糖醛酸、硫酸结合 由尿和胆汁排出由尿和胆汁排出L 环氧化反应产物：环氧化反应产物：黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1B1，2 2，3-3-环氧化物

10、环氧化物 可与可与DNA DNA 脱氧鸟嘌呤第脱氧鸟嘌呤第7 7位位N N结合结合 形成加合物形成加合物第17页，讲稿共64张，创作于星期三多环芳烃（多环芳烃（polycyclic aromatic hydrocarbons，PAH）苯并（苯并（a）芘）芘 benzo(a)pyrene，BaPJ 代谢：代谢：羟化、环氧化反应羟化、环氧化反应J 羟化代谢：羟化代谢：产物与谷胱甘肽结合排出产物与谷胱甘肽结合排出L 环氧化反应：环氧化反应：主要终致癌物主要终致癌物7 7，8-8-二醇二醇9 9，10-10-环氧苯并（环氧苯并（a）芘）芘可与可与DNADNA结合结合第18页，讲稿共64张，创作于星期三

11、N-亚硝胺（亚硝胺（nitrosamines）二甲基亚硝胺二甲基亚硝胺（dimethynitrosamine DMA）J 代谢代谢：脱甲基、脱亚硝基反应脱甲基、脱亚硝基反应J 脱亚硝基代谢：脱亚硝基代谢：P450P450催化下生成醛和胺催化下生成醛和胺L 脱甲基代谢：脱甲基代谢：终致癌物终致癌物甲基碳鎓离子甲基碳鎓离子 可使核酸和蛋白质的亲核部位甲基化可使核酸和蛋白质的亲核部位甲基化第19页，讲稿共64张，创作于星期三3 遗传毒性致癌物：化学物进入细胞后与遗传毒性致癌物：化学物进入细胞后与 DNA共价结合，引起基因突变或染色体畸共价结合，引起基因突变或染色体畸变，从而导致肿瘤形成，称遗传毒性致

12、癌物。变，从而导致肿瘤形成，称遗传毒性致癌物。4 非遗传毒性致癌物：以非遗传物质为靶的致非遗传毒性致癌物：以非遗传物质为靶的致癌物，称非遗传毒性致癌物。癌物，称非遗传毒性致癌物。按作用机制按作用机制第20页，讲稿共64张，创作于星期三 按作用结果按作用结果WHO下下 属属 的的 国国 际际 癌癌 症症 研研 究究 所所（International Agency for Research on Cancer,IARC）按按动动物物实实验验、临临床床观观察察和和人人群群流流行行病病学资料，将致癌物分为四类学资料，将致癌物分为四类 人类致癌物人类致癌物。对人类致癌证据充分，三方面证据充分。对人类致癌

13、证据充分，三方面证据充分。107107种。种。a a 对对人人类类很很可可能能是是致致癌癌物物。人人类类致致癌癌证证据据有有限限（临临床床观观察察到到但但无无流流行行病病学学资料或无直接因果关系证据）、动物致癌证据充分。资料或无直接因果关系证据）、动物致癌证据充分。5858种。种。b b 对人类可能是致癌物对人类可能是致癌物。人类致癌证据有限、动物也不充分。人类致癌证据有限、动物也不充分。249249种。种。对人类致癌性未定对人类致癌性未定。现有资料不能进行分类。现有资料不能进行分类。512512种。种。人类非致癌物人类非致癌物。1 1种（己内酰胺）。种（己内酰胺）。第21页，讲稿共64张，创

14、作于星期三第四节、化学致癌机制第四节、化学致癌机制o是多因素、多基因参与的多阶段过程是多因素、多基因参与的多阶段过程n致癌过程与多个肿瘤基因有关；致癌过程与多个肿瘤基因有关；n不同器官来源、不同组织类型、临床阶段乃至同一肿瘤在不同不同器官来源、不同组织类型、临床阶段乃至同一肿瘤在不同地区所见的遗传变化是不同的；地区所见的遗传变化是不同的；n多种环境致癌物、致癌因子或条件可协同作用；多种环境致癌物、致癌因子或条件可协同作用；n个体的不同遗传背景对肿瘤的发生发展有重要影响。个体的不同遗传背景对肿瘤的发生发展有重要影响。第22页，讲稿共64张，创作于星期三 遗传损伤致癌遗传损伤致癌 DNA加合物形成

15、 癌基因激活与抑癌基因失活 修复功能受损 非遗传损伤致癌非遗传损伤致癌 细胞信号传导障碍 免疫抑制 内分泌失衡 纺锤丝功能受损 第23页，讲稿共64张，创作于星期三1.DNA加合物加合物亲电性化合物亲电性化合物DNA,RNA,蛋白质蛋白质亲核基团亲核基团加合物加合物基因突变基因突变结构改变结构改变肿瘤肿瘤细胞，血液，尿等细胞，血液，尿等共价结合共价结合第24页，讲稿共64张，创作于星期三第25页，讲稿共64张，创作于星期三第26页，讲稿共64张，创作于星期三2.癌基因与抑癌基因癌基因与抑癌基因 第27页，讲稿共64张，创作于星期三第28页，讲稿共64张，创作于星期三第29页，讲稿共64张，创作

16、于星期三3.DNA损伤的修复能力损伤的修复能力n正常细胞使受损伤的正常细胞使受损伤的DNA分子迅速恢复正常，分子迅速恢复正常，使细胞的遗传稳定性和正常功能得以保持而不使细胞的遗传稳定性和正常功能得以保持而不致发生恶变；致发生恶变；n化学致癌物可使机体对损伤化学致癌物可使机体对损伤DNA的修复能力减的修复能力减弱；弱；nDNA损伤修复缺陷在化学致癌机制中也起重要损伤修复缺陷在化学致癌机制中也起重要作用。作用。第30页，讲稿共64张，创作于星期三前致癌物前致癌物终致癌物终致癌物细胞含错细胞含错配碱基配碱基细胞死亡细胞死亡不分化的癌不分化的癌分化的肿瘤分化的肿瘤致癌物致癌物-DNA加加合物合物引发的

17、细胞引发的细胞正常细胞正常细胞活化活化转移转移DNA结合结合修复修复DNA复制复制错配修复失败错配修复失败DNA修复修复促长促长进展进展第31页，讲稿共64张，创作于星期三第32页，讲稿共64张，创作于星期三第五节、化学致癌过程第五节、化学致癌过程o引发阶段引发阶段(Initiation)主要涉及三种细胞功能：主要涉及三种细胞功能：致癌物代谢致癌物代谢活化致癌物活化致癌物DNA修复修复 修复错误修复错误细胞增殖细胞增殖 “固定固定”错误，产生引发细胞，因为引发细胞错误，产生引发细胞，因为引发细胞不具有自主生长性，因此不是肿瘤细胞。不具有自主生长性，因此不是肿瘤细胞。第33页，讲稿共64张，创作

18、于星期三o促长阶段促长阶段(Promotion)引发细胞增殖成为癌前病变或良性肿瘤的过程。引发细胞增殖成为癌前病变或良性肿瘤的过程。促长剂：影响引发细胞增殖，引起良性局灶性促长剂：影响引发细胞增殖，引起良性局灶性病理损害。如结节、息肉、乳头瘤。病理损害。如结节、息肉、乳头瘤。促长剂本身为非致突变物，单独使用不具有致促长剂本身为非致突变物，单独使用不具有致癌性。癌性。第34页，讲稿共64张，创作于星期三主要促癌剂主要促癌剂o佛波酯佛波酯(TPA)促进细胞增殖、信号转导促进细胞增殖、信号转导o灭蚁灵灭蚁灵皮肤、肝癌皮肤、肝癌o苯巴比妥苯巴比妥肝癌肝癌o胆酸胆酸结肠癌结肠癌第35页，讲稿共64张，创

19、作于星期三促长阶段特点：促长阶段特点：o引发剂作用之后，在促癌剂慢性作用下引起引发剂作用之后，在促癌剂慢性作用下引起肿瘤；肿瘤；o引发剂单独作用不会引起肿瘤；引发剂单独作用不会引起肿瘤；o促癌剂单独作用也不会引起肿瘤；促癌剂单独作用也不会引起肿瘤；o必须先引发剂作用，再促癌剂作用；必须先引发剂作用，再促癌剂作用；o引发作用是不可逆的，早期促长作用可逆。引发作用是不可逆的，早期促长作用可逆。第36页，讲稿共64张，创作于星期三o进展阶段进展阶段(progression)引发细胞群转变成恶性肿瘤的过程，是不可引发细胞群转变成恶性肿瘤的过程，是不可逆的。逆的。第37页，讲稿共64张，创作于星期三第3

20、8页，讲稿共64张，创作于星期三第六节、致癌作用的影响因素第六节、致癌作用的影响因素联合作用()致癌性的增强致癌性的增强1增强致癌物的吸收；增强致癌物的吸收；2增强遗传毒性致癌物的代谢活化或使其解毒减弱；增强遗传毒性致癌物的代谢活化或使其解毒减弱；3抑制抑制DNA修复；修复；4选择性增强选择性增强DNA受损细胞的增殖。受损细胞的增殖。(二二)致癌性的抑制致癌性的抑制1在靶器官中发生竞争性的取代；在靶器官中发生竞争性的取代；2活化作用酶系统活力发生改变；活化作用酶系统活力发生改变；第39页，讲稿共64张，创作于星期三营养因素营养因素 1 蛋白质蛋白质 2 脂肪脂肪 动物试验中高脂肪饲料可使致癌作

21、用增强。动物试验中高脂肪饲料可使致癌作用增强。3 碳水化合物碳水化合物 人人类类结结肠肠癌癌的的发发生生与与低低渣渣易易消消化化食食物物有有关关。动动物物试试验验证证实实麦麦麸麸、米米糠糠和和果果胶胶能能降降低低某某些些大大肠肠致致癌癌物物的的致致癌癌性性。高高溶溶解解度度的碳水化合物可增加饲料中致癌物的吸收。的碳水化合物可增加饲料中致癌物的吸收。4 矿物质与维生素矿物质与维生素第40页，讲稿共64张，创作于星期三宿主因素 1物种、品系和器官特异性物种、品系和器官特异性o如如豚豚鼠鼠对对芳芳香香胺胺、2-AAF有有抗抗性性，其其原原因因是是该该致致癌癌物物仅仅能能小小量量转转化化为为近近致致癌

22、癌物物N-羟羟化化衍衍生生物物，而而大大量量转转化化为为不不致致癌癌的的7-羟羟化化衍衍生生物物。再再如如2-萘萘胺胺可可诱诱导导人人、犬犬、猴猴和和仓仓鼠鼠膀膀胱胱癌癌，但但对对小小鼠鼠仅仅诱诱发发肝肝癌癌和和肺肺癌癌，在在大大鼠鼠和和兔兔几几乎乎对对各各器器官官均均不不能能诱诱发发肿肿瘤。瘤。第41页，讲稿共64张，创作于星期三2年龄年龄o如如多多环环芳芳烃烃类类在在新新生生大大鼠鼠或或小小鼠鼠能能很很快快诱诱发发肝肝脏脏肿肿瘤瘤，但但在在初初成成年年者者则则不不易易诱诱发发。同同样样，黄黄曲曲霉霉毒毒素素B1可可对对新新生生小小鼠鼠诱诱发发肝肝脏脏肿肿瘤瘤，对对断断奶奶小小鼠鼠则则不不能

23、能诱发。诱发。第42页，讲稿共64张，创作于星期三3性别和内分泌平衡性别和内分泌平衡o如如2-AAF主主要要在在雄雄性性大大鼠鼠诱诱发发肝肝癌癌；邻邻氨氨基基偶偶氮甲苯对雌性小鼠比雄性更易诱发肝癌。氮甲苯对雌性小鼠比雄性更易诱发肝癌。o如如孕孕妇妇用用大大量量的的二二乙乙基基已已烯烯雌雌酚酚可可使使其其女女儿儿青青春春期期前前的阴道癌危险性增高。的阴道癌危险性增高。第43页，讲稿共64张，创作于星期三第七节、致癌作用评价方法第七节、致癌作用评价方法一、构效关系分析一、构效关系分析 从一种同系物着手，找出该系物质化学从一种同系物着手，找出该系物质化学结构中与致癌性关系最密切的结构成份，以结构中与

24、致癌性关系最密切的结构成份，以及其它结构成份改变时所产生的影响。及其它结构成份改变时所产生的影响。构效关系分析结果可靠性的关键在于样构效关系分析结果可靠性的关键在于样本含量。本含量。第44页，讲稿共64张，创作于星期三二、筛检试验二、筛检试验(致突变试验致突变试验)主要用于遗传毒性致主要用于遗传毒性致 癌物检测癌物检测 灵敏度、特异度、预报价值、总符合率灵敏度、特异度、预报价值、总符合率 目前常用的致突变试验还不能可靠地检测出：目前常用的致突变试验还不能可靠地检测出：非整倍性或重组所导致的隐性癌基因的纯合子或半合非整倍性或重组所导致的隐性癌基因的纯合子或半合子；子；可使癌基因截短的重组；可使癌

25、基因截短的重组；能活化原癌基因的基因扩增；能活化原癌基因的基因扩增；线粒体线粒体DNA突变。突变。第45页，讲稿共64张，创作于星期三三、细胞转化试验三、细胞转化试验:可检出遗传毒性致癌物和非遗传毒性致癌物。可检出遗传毒性致癌物和非遗传毒性致癌物。1 1 原代细胞：原代细胞：SHESHE细胞、人成纤维细胞细胞、人成纤维细胞2 2 细胞系：细胞系：BALB/C-3T3BALB/C-3T3、BHK-21BHK-213 3 病毒感染细胞：病毒感染细胞：RLV/RERLV/RE、SA7/SHESA7/SHE第46页，讲稿共64张，创作于星期三四、哺乳动物短期诱癌试验四、哺乳动物短期诱癌试验1小鼠皮肤肿

26、瘤诱发试验：小鼠皮肤肿瘤诱发试验：o于小鼠皮肤局部连续涂抹受试物，以观察皮肤于小鼠皮肤局部连续涂抹受试物，以观察皮肤乳头瘤和癌的发生，一般乳头瘤和癌的发生，一般20周可结束实验，较周可结束实验，较敏感的小鼠为敏感的小鼠为SENCAR小鼠。小鼠。o此试验也可设计为检测受试物的引发活性或促长活此试验也可设计为检测受试物的引发活性或促长活性。性。o典型的引发剂为致癌性多环芳烃；典型的引发剂为致癌性多环芳烃；促长剂为佛波醇酯促长剂为佛波醇酯(TPA)。第47页，讲稿共64张，创作于星期三2小鼠肺瘤诱发试验小鼠肺瘤诱发试验n染毒途径常用腹腔注射，也可灌胃或吸入，一般染毒途径常用腹腔注射，也可灌胃或吸入，

27、一般30周可结束实验，观察肺肿瘤的发生。周可结束实验，观察肺肿瘤的发生。n较敏感的小鼠为较敏感的小鼠为A系小鼠。系小鼠。n此试验也可设计为检测受试物的引发活性或促长此试验也可设计为检测受试物的引发活性或促长活性。活性。n典型的引发剂为乌拉坦；典型的引发剂为乌拉坦；促长剂为二丁基羟基甲苯促长剂为二丁基羟基甲苯(BHT)。第48页，讲稿共64张，创作于星期三3大鼠肝转化灶诱发试验大鼠肝转化灶诱发试验l对对大大鼠鼠进进行行肝肝大大部部切切除除术术后后，给给予予受受试试物物，一一般般可可在在814周周结束实验，观察肝转化灶生成。结束实验，观察肝转化灶生成。l肝肝转转化化灶灶是是癌癌前前病病变变，有有-

28、谷谷氨氨酰酰转转肽肽酶酶活活性性升升高高，G6P酶酶和和ATP酶活性降低，以及铁摄取能力降低。酶活性降低，以及铁摄取能力降低。l转化灶可用组织化学或免疫化学方法鉴定。转化灶可用组织化学或免疫化学方法鉴定。l此试验也可设计为检测受试物的引发活性或促长活性。此试验也可设计为检测受试物的引发活性或促长活性。l典典型型的的引引发发剂剂为为二二乙乙基基亚亚硝硝胺胺(DEN)，促促长长剂剂为为苯苯巴巴比比妥妥(PB)。第49页，讲稿共64张，创作于星期三4雌性大鼠乳腺癌诱发试验：雌性大鼠乳腺癌诱发试验：l一一般般可可用用SD大大鼠鼠(或或Wistar大大鼠鼠)，实实验验周周期期为为6个月。个月。l以以上上

29、四四个个试试验验不不是是成成组组试试验验，应应根根据据受受试试物物的的特特点点选选择择使使用用。此此四四个个试试验验任任一一试试验验得得到到阳阳性性结结果果的的意意义义与与长长期期动动物物致致癌癌试试验验相相似似，但但阴阴性性结果并不能排除受试物的致癌性。结果并不能排除受试物的致癌性。第50页，讲稿共64张，创作于星期三五、哺乳动物长期致癌试验五、哺乳动物长期致癌试验 化学物长期致癌试验优先原则化学物长期致癌试验优先原则 人体可能长期暴露于该化学物；人体可能长期暴露于该化学物；该化学物或其代谢物的化学结构与已知致该化学物或其代谢物的化学结构与已知致癌物相似；癌物相似；重复染毒毒性试验提示该化学

30、物可能产生重复染毒毒性试验提示该化学物可能产生癌前病变。癌前病变。第51页，讲稿共64张，创作于星期三药物进行长期致癌试验的优先原则药物进行长期致癌试验的优先原则 临床上连续应用临床上连续应用6个月以上的药品；个月以上的药品；已知属于对人具有潜在致癌性的同类化合物；已知属于对人具有潜在致癌性的同类化合物；具有遗传毒性的物质往往具有致癌性，如拟长期使用，应进行慢性具有遗传毒性的物质往往具有致癌性，如拟长期使用，应进行慢性毒性试验毒性试验(1年年)，检测早期致癌反应，检测早期致癌反应 拟用于病人预期寿命少于拟用于病人预期寿命少于3年的药品不必进行致癌试验，如肿瘤治疗药年的药品不必进行致癌试验，如肿

31、瘤治疗药等。等。局部使用吸收很差的药物不必进行经口致癌试验局部使用吸收很差的药物不必进行经口致癌试验 下列生物制品可考虑进行致癌试验：下列生物制品可考虑进行致癌试验：生物学作用明显不同于天然相应物质的制品；生物学作用明显不同于天然相应物质的制品；结构明显不同于天然相应物质的制品；结构明显不同于天然相应物质的制品；在人体引起局部或全身浓度明显增加的制品。在人体引起局部或全身浓度明显增加的制品。第52页，讲稿共64张，创作于星期三1 动物选择动物选择 o物种和品系：要求用两种实验动物，常规选物种和品系：要求用两种实验动物，常规选用大鼠和小鼠，在选择品系时应选择较敏感、用大鼠和小鼠，在选择品系时应选

32、择较敏感、自发肿瘤率低、生活力强及寿命较长的品系。自发肿瘤率低、生活力强及寿命较长的品系。o性别：雌雄两种性别的动物。性别：雌雄两种性别的动物。o年龄：使用刚断乳的动物，以保证有足够长年龄：使用刚断乳的动物，以保证有足够长的染毒和发生癌症的时间，而且幼年动物解的染毒和发生癌症的时间，而且幼年动物解毒酶及免疫系统尚未完善，对致癌作用比较毒酶及免疫系统尚未完善，对致癌作用比较敏感。敏感。第53页，讲稿共64张，创作于星期三2 剂量选择剂量选择 o致癌试验一般设三个试验组。即无作用剂致癌试验一般设三个试验组。即无作用剂量、阈剂量和发生肿瘤剂量。量、阈剂量和发生肿瘤剂量。o美国癌症研究所（美国癌症研究

33、所（NCI）推荐以最大耐受）推荐以最大耐受剂量剂量(MTD)为高剂量。为高剂量。第54页，讲稿共64张，创作于星期三3 动物数动物数o 每组至少有雌雄各每组至少有雌雄各50只动物，在出现第一例只动物，在出现第一例肿瘤时，每组还有不少于肿瘤时，每组还有不少于25只存活动物。只存活动物。第55页，讲稿共64张，创作于星期三第56页，讲稿共64张，创作于星期三4 染毒途径染毒途径 o经口染毒：一般把受试物掺人饲料或饮水中连续给予动物经口染毒：一般把受试物掺人饲料或饮水中连续给予动物(57天天/周周)。掺入浓度要定期监测，观察其均匀性和稳定。掺入浓度要定期监测，观察其均匀性和稳定性，掺入的浓度一般不超

34、过性，掺入的浓度一般不超过5。o经皮染毒，涂敷受试物的面积一般不少于动物体表总面积的经皮染毒，涂敷受试物的面积一般不少于动物体表总面积的10。必须保证受试物与皮肤良好接触，并防止动物舔食。每天。必须保证受试物与皮肤良好接触，并防止动物舔食。每天涂抹一次，每周涂抹一次，每周37次。次。o吸入染毒，每天染毒吸入染毒，每天染毒4小时，每周小时，每周57天。染毒柜内受试物天。染毒柜内受试物浓度应定期或连续监测，其分布应均匀、恒定。浓度应定期或连续监测，其分布应均匀、恒定。o其他注射途径可根据需要采用。其他注射途径可根据需要采用。第57页，讲稿共64张，创作于星期三5 试验期限试验期限o ICH(199

35、7)建议参考下面几条准则：建议参考下面几条准则：(1)一般情况下，试验期限小鼠和仓鼠应为一般情况下，试验期限小鼠和仓鼠应为18个月，大鼠个月，大鼠为为24个月；然而对于某些生命期较长或自发肿瘤率低个月；然而对于某些生命期较长或自发肿瘤率低的动物品系，小鼠和仓鼠可持续的动物品系，小鼠和仓鼠可持续24个月，大鼠可持续个月，大鼠可持续30个月。个月。(2)当最低剂量组或对照组存活的动物只有当最低剂量组或对照组存活的动物只有25时，也可以时，也可以结束试验，对于有明显性别差异的试验，则试验结束的时结束试验，对于有明显性别差异的试验，则试验结束的时间对不同的性别应有所不同，在某种情况下因明显的毒性间对不

36、同的性别应有所不同，在某种情况下因明显的毒性作用，只造成高剂量组动物过早死亡，此时不应结束试验。作用，只造成高剂量组动物过早死亡，此时不应结束试验。第58页，讲稿共64张，创作于星期三6观察和结果分析观察和结果分析o一般观察一般观察 1 外表、活动、摄食情况等。外表、活动、摄食情况等。2 在实验最初三个月每周称体重一次，以在实验最初三个月每周称体重一次，以后每两周称体重一次。后每两周称体重一次。3 观察时要注意有无肿瘤出现、肿瘤出现观察时要注意有无肿瘤出现、肿瘤出现时间及死亡时间。时间及死亡时间。第59页，讲稿共64张，创作于星期三o病理检查病理检查 动物自然死亡或处死后必须及时进行病动物自然

37、死亡或处死后必须及时进行病理检查理检查:包括肉眼和组织切片检查。组织切包括肉眼和组织切片检查。组织切片检查应包括已出现肿瘤或可疑肿瘤的器官片检查应包括已出现肿瘤或可疑肿瘤的器官和肉眼检查有明显病变的器官，应注意观察和肉眼检查有明显病变的器官，应注意观察癌前病变。通过病理检查确定肿瘤的性质和癌前病变。通过病理检查确定肿瘤的性质和靶器官。靶器官。第60页，讲稿共64张，创作于星期三结果分析结果分析 统计各种肿瘤的数量统计各种肿瘤的数量(包括良性和恶性肿瘤包括良性和恶性肿瘤)及及任何少见的肿瘤、患肿瘤的动物数、每只动任何少见的肿瘤、患肿瘤的动物数、每只动物的肿瘤数及肿瘤潜伏期。物的肿瘤数及肿瘤潜伏期

38、。1 肿瘤发生率肿瘤发生率()(实验结束时患肿瘤动物总实验结束时患肿瘤动物总 数数/有效动物总数有效动物总数)1002 肿瘤多发性肿瘤多发性3 潜伏期潜伏期第61页，讲稿共64张，创作于星期三致癌试验阳性的判定：致癌试验阳性的判定：o有明显的剂量反应关系，与对照组相比差异有明显的剂量反应关系，与对照组相比差异显著。显著。o试验组发生对照组没有的肿瘤类型；试验组发生对照组没有的肿瘤类型；o试验组动物中多发性肿瘤明显，对照组中无试验组动物中多发性肿瘤明显，对照组中无多发性肿瘤或只少数动物有多发性肿瘤；多发性肿瘤或只少数动物有多发性肿瘤；o试验组与对照组动物肿瘤的发生率无显著性试验组与对照组动物肿瘤的发生率无显著性差异，但剂量组中肿瘤发生的时间较早。差异，但剂量组中肿瘤发生的时间较早。第62页，讲稿共64张，创作于星期三致癌试验阴性的判定：致癌试验阴性的判定：阴性结果实验设计的最低要求：阴性结果实验设计的最低要求：两个物种、两种性别、至少三个剂量组两个物种、两种性别、至少三个剂量组其中一个接近其中一个接近MTD，有效动物数为，有效动物数为50只。只。有效动物数有效动物数指最早出现肿瘤时的存活动物数。指最早出现肿瘤时的存活动物数。第63页，讲稿共64张，创作于星期三感感谢谢大大家家观观看看第64页，讲稿共64张，创作于星期三