2022年常用微生物培养基配方大全 .pdf

《2022年常用微生物培养基配方大全 .pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年常用微生物培养基配方大全 .pdf（24页珍藏版）》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、常用培养基配方目 录：01 糖发酵管02 ONPG 培养基03 西蒙氏柠檬酸盐培养基04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR 和 VP 试验用)05 克氏柠檬酸盐培养基06 丙二酸钠培养基07 葡葡糖铵培养基08 Hugh-Leifson 培养基(O/F 试验用)09 马尿酸钠培养基10 营养明胶11 苯丙氨酸培养基12 氨基酸脱羧酶试验培养基13 蛋白胨水(靛基质试验用)14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)15 尿素琼脂16 氰化钾(KCN)培养基17 氧化酶试验18 硝酸盐培养基19 细胞色素氧化酶试验20 过氧化氢酶试验21 过氧化物酶试验22 磷酸盐缓冲液23 明胶磷酸盐缓冲液24 乳酸-苯酚溶液

2、25 肉浸液肉汤26 肉浸液琼脂27 牛肉(或牛心)消化汤28 血消化汤29 豆粉琼脂30 血琼脂31 营养琼脂32 营养肉汤33 乳糖胆盐发酵管34 乳糖发酵管35 EC 肉汤36 缓冲蛋白胨水(BP)37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)41 GN 增菌液名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 1 页，共 24 页 -42 肠道菌增菌肉汤43 亚硫酸铋琼脂(BS)44 DHL 琼脂45 HE 琼脂46 SS 琼脂47 WS 琼脂48 麦康凯琼脂49 伊红美蓝琼脂(EMB)50 三

3、糖铁琼脂(TSI)51 三糖铁琼脂(换用方法)52 克氏双糖铁琼脂(KI)53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)54 葡萄糖半固体发酵管55 5%乳糖发酵管56 CAYE 培养基57 Honda 氏产毒肉汤58 Elek 氏培养基(毒素测定用)59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60 胰蛋白胨水61 Rustigian 氏尿素培养液62 氯化钠结晶紫增菌液63 氯化钠蔗糖琼脂64 嗜盐菌选择性琼脂65 3.5%氯化钠三糖铁琼脂66 氯化钠血琼脂67 3.5%氯化钠生化试验培养基68 改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)69 CIN-1 培养基70 嗜盐性试验培养基名师资料总结-精品资料欢迎下载

4、-名师精心整理-第 2 页，共 24 页 -01 糖发酵管成分:牛肉膏5g 蛋白胨10g 氯化钠3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4 12H2O)2g 0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:1 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按 0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121高压灭菌15min.2 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶 100mL,121高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌.将 5mL 糖溶液加入于100mL 培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:

5、从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于 36 1培养,一般观察 23d.迟缓反应需观察1430d.02 ONPG 培养基成分:邻硝基酚 -D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O-Nitrophenyl-D-galactopyranoside)0.01mol/L 磷酸钠缓冲液(pH7.5)10mL 1%蛋白胨水(PH7.5)30mL 制法:将 ONPG 溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于 10mm 75mm 试管,每管 0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1 满环接种,于 36 1培养 13h 和 24h 观察结果.如果 -半乳糖苷酶产生,则于 13h 变黄色,如无

6、此酶则24h 不变色.03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g 硫酸镁(MgSO4 7H2O)0.2g 磷酸二氢铵1g 磷酸氢二钾1g 柠檬酸钠5g 琼脂 20g 蒸馏水1000mL 0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mL pH6.8 制法:先将盐类溶解于水内,校正 pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121高压灭菌 15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于 36 1培养 4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 3 页，共 24 页 -04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR 和 VP 试

7、验用)成分:磷酸氢二钾5g 多胨 7g 葡萄糖5g 蒸馏水1000mL pH7.0 制法:溶化后校正pH,分装试管,每管 1mL,121高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于 36 1培养 25d,哈夫尼亚菌则应在2225培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg 甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入 20mL 蒸馏水.V-P 试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于 36 1培养 24d.哈夫尼亚菌则应在2225培养.加入 6%-萘酚-乙醇溶液 0.5mL 和 40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试

8、管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在 36 1下培养 4h 再进行观察.05 克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g 葡萄糖0.2g 酵母浸膏0.5g 单盐酸半胱氨酸0.1g 磷酸二氢钾1g 氯化钠5g 0.2%酚红溶液6mL 琼脂 15g 蒸馏水1000mL 制法:加热溶解,分装试管,121高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在 36 1培养 7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06 丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g 硫酸铵2g 磷酸氢二钾0.6g 磷酸二氢钾0.4g 氯化钠2g 丙二酸钠3g 0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL 蒸

9、馏水1000mL pH6.8 制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正 pH 后再加入指示剂,分装试管,121高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于 36 1培养 48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 4 页，共 24 页 -07 葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g 硫酸镁(MgSO4 7H2O)0.2g 磷酸二氢铵1g 磷酸氢二钾1g 葡萄糖2g 琼脂 20g 蒸馏水1000mL 0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mL pH6.8 制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正 pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121

10、高压灭菌 15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在 20100 之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于 36 1培养 24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08 Hugh-Leifson 培养基(O/F 试验用)成分:蛋白胨2g

11、 氯化钠5g 磷酸氢二钾0.3g 琼脂 4g 葡萄糖10g 0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL 蒸馏水1000mL pH7.2 制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正 pH 至 7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约 1cm,于 36 1培养.09 马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g 肉浸液100mL 制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,高压灭菌 12120min

12、.试剂:三氯化铁(FeCl3 6H2O)12g,溶于 2%盐酸溶液 100mL 中即成.试验方法:用纯培养物接种,于 42培养 48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经 1015min,观察结果.名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 5 页，共 24 页 -结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10 营养明胶成分:蛋白胨5g 牛肉膏3g 明胶 120g 蒸馏水1000mL pH6.8 7.0 制法:加热溶解,校正至 pH7.47.6,分装小管,121高压灭菌10min,取出后迅速冷

13、却,使其凝固.复查最终 pH应为 6.87.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在 2225培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在 36 士 1培养,每天取出,放冰箱内 30min 后再观察结果.11 苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3g DI-苯丙氨酸(或 L-苯丙氨酸 1g)2g 磷酸氢二钠1g 氯化钠5g 琼脂 12g 蒸馏水1000mL 制法:加热溶解后分装试管,121高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在 36 1培养 4h 或 1824h.滴加 10%三氯化铁溶液 23 滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12

14、氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g 酵母浸膏3g 葡萄糖1g 蒸馏水1000mL 1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mL L-氨基酸或 DL-氨基酸0.5 或 1g/100mL pH6.8 制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶 100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按 0.5%加入,DL-氨基酸按 1%加入.再行校正 pH 至 6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管 0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于 36 1培养 1824h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫

15、色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13 蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 6 页，共 24 页 -氯化钠5g 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:按上述成分配制,分装小试管,121高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂:将 5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL 戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将 1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在 36 1培养 12d,必要时可培养45d.加入柯凡克试剂约0.

16、5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约 0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g 酵母浸膏3g 蛋白胨10g 硫酸亚铁0.2g 硫代硫酸钠0.3g 氯化钠5g 琼脂 12g 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:加热溶解,校正 pH,分装试管,115高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于 36 1培养 12d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢

17、的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15 尿素琼脂成分:蛋白胨1g 氯化钠5g 葡萄糖1g 磷酸二氢钾2g 0.4%酚红溶液3mL 琼脂 20g 蒸馏水1000mL 20%尿素溶液100mL pH7.2 0.1 制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正 pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121高压灭菌 15min.冷至5055,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终 pH 应为 7.2 0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在 36 1培养 24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16 氰化钾(KCN)培养基成分:名师资料总结

18、-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 7 页，共 24 页 -蛋白胨10g 氯化钠5g 磷酸二氢钾0.225g 磷酸氢二钠5.64g 蒸馏水1000mL 0.5%氰化钾溶液20mL pH7.6 制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121高压灭菌 15min.放在冰箱内使其充分冷却.每 100mL 培养基加入 0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于 12mm 100mm 灭菌试管,每管约 4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在 4冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17 氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜

19、配制,干冰箱内避光保存.1%-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18 硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g 蛋白 5g 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:溶解,校正 pH,分装试管,每管约 5mL,121高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g 溶解于 2.5mol/L 乙酸溶液 100mL 中.乙液:将甲萘胺 0.5g溶解于 2.5mol/L 乙酸溶液 100mL

20、中.试验方法:接种后在36 1培养 14d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19 细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取 37(或低于 37)培养 20h 的斜面培养物一支,将两种试剂各23 滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于

21、2min 内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min 以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 8 页，共 24 页 -20 过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加 3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加 2%儿茶酚溶液1mL 及 3%过氧化氢溶液1mL.静置于室温(20)中 306

22、0min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾34g 1mol/L 氢氧化钠溶液175mL 蒸馏水825mL pH7.2 制法:先将磷酸盐溶解于500mL 蒸馏水中,用 1mol/L 氢氧化钠溶液校正pH 后,再用蒸馏水稀释至1000mL.稀释液:取储存液 1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL.分装每瓶 100mL 或每管 10mL,121高压灭菌15min.23 明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶 2g 磷酸氢二钠4g 蒸馏水1000mL pH6.2 制法:加热溶解,校正 pH,121 高压灭菌1

23、5min.24 乳酸-苯酚溶液成分:苯酚 10g 乳酸(比重 1.21)10g 甘油 20g 蒸馏水10mL 制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25 肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g 氯化钠5g 蛋白胨10g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 9 页，共 24 页 -磷酸氢二钾2g 蒸馏水1000mL 制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水 1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正 pH7.47.6 煮沸并

24、过滤,分装烧瓶,121高压灭菌30min.26 肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4)1000mL 琼脂 1720g 制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27 牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心)1000g 15%氢氧化钠溶液27mL 胰蛋白酶40mL 三氯甲烷1mL 氯化钠10g 蒸馏水2000mL 制法:1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80,维持 15min.2 加氢氧化钠溶液,对 pH 试纸呈弱碱性,冷至 40.3 加胰蛋白酶,氯仿,在 36 1放置 45h,每小时摇动一二次.4 4h 后,吸取上层液5mL 于试管中,

25、加 5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5 加入 15%乙酸溶液45mL,对 pH 试纸呈酸性.6 煮沸 15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜.7 次日吸取上层清液,加氯化钠 10g,并加水补足原量,煮沸.8 校正 pH7.47.6(加 15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121高压灭菌20min.注:此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇 500mL,蒸馏水 1500mL,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d 后,用绒布过滤挤出其汁,加

26、盐酸至 0.05%,放冰箱内保存备用.28 血消化汤成分:绞碎猪胃100g 绞碎猪血块100g 蒸馏水1000mL 浓盐酸10mL 制法:1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎.2 用绞肉机将猪血块绞碎.3 将蒸馏水加热至55,加入猪胃,猪血块和盐酸,置 55水浴中 24h,时常加以摇动.名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 10 页，共 24 页 -4 从水浴内取出,加入 1moL/L 碳酸钠溶液5mL,煮沸 10min,置于冰箱内一夜.5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至 75,加入 1mol/L 碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正 pH7.27.4.6 用滤纸过滤

27、,分装烧瓶,121高压灭菌20min.29 豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.47.6)1000mL 琼脂 20g 黄豆粉浸液50mL 制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶 100mL,121高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉 5g,氯化钠 10g,加入蒸馏水100mL.置 100水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30 血琼脂成分:pH7.4 7.6 豆粉琼脂100mL 脱纤维羊血(或兔血)510mL 制法:加热溶化琼脂,冷至 50,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培

28、养基配制血琼脂.31 营养琼脂成分:蛋白胨10g 牛肉膏3g 氯化钠5g 琼脂 1520g 蒸馏水1000mL 制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入 15%氢氧化钠溶液约2mL,校正 pH 至 7.27.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为 1.5%;如作成平板或斜面,则应为 2%.32 营养肉汤成分:蛋白陈10g 牛肉膏3g 氯化钠5g 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶 225mL,121高压灭菌15min.33 乳

29、糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 11 页，共 24 页 -猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g 乳糖 10g 0.04%滇甲酚紫水溶液25mL 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正 pH,加入指示剂,分装每管 10mL,并放入一个小倒管,115高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34 乳糖发酵管成分:蛋白胨20g 乳糖 10g 0.04%溴甲酚紫水溶液25mL 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正 pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10mL 或 3m

30、L,并放入一个小倒管,115高压灭菌15min.注:双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.30mL 和 10mL 乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL 乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35 EC 肉汤成分:胰蛋白胨20g 3 号胆盐(或混合胆盐)1.5g 乳糖 5g 磷酸氢二钾4g 磷酸二氢钾1.5g 氯化钠5g 蒸馏水1000mL 制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121高压灭菌15min,最终 pH 为 6.9 0.2.36 缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g 氯化钠5g 磷酸氢二钠(Na2HPO4 12H2O)9g 磷酸二氢钾1.5g 蒸馏水1000mL pH

31、7.2 制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 12 页，共 24 页 -甲液胰蛋白胨5g 氯化钠8g 磷酸二氢钾1.6g 蒸馏水1000mL 乙液氯化镁(化学纯)40g 蒸馏水100mL 4.13.3 丙液0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121高压灭菌15min 备用.临用时取甲液90mL,乙液 9mL,丙液 0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液.38 四硫磺酸

32、钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨5g 胆盐 1g 碳酸钙10g 硫代硫酸钠30g 蒸馏水1000mL 碘溶液碘 6g 碘化钾5g 蒸馏水20mL 制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶 100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121高压灭菌15min 备用.临用时每 100mL 基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液 1mL.39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液:蛋白胨10g 牛肉膏5g 氯化钠3g 碳酸钙45g 蒸馏水1000mL 将各成分加入于蒸馏水中,加热至约 70溶解,校正 pH 至 7.0 0.1,121高压灭菌20min.硫代

33、硫酸钠溶液硫代硫酸钠(Na2S2O3 5H2O)50g 蒸馏水加至 100mL 碘溶液碘片 20g 碘化钾25g 蒸馏水加至100mL 将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 13 页，共 24 页 -棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液煌绿 0.5g 蒸馏水100mL 存放暗处,不少于 1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液干燥的牛胆盐10g 蒸馏水100mL 煮沸溶解,121高压灭菌20min.制备:基础液900mL 硫代硫酸钠溶液100mL 碘液 20mL 煌绿溶液2mL 牛胆盐溶液50mL

34、 临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶 100mL.40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g 乳糖 4g 亚硒酸氢钠4g 磷酸氢二钠5.5g 磷酸二氢钾4.58 L-胱氨酸0.01g 蒸馏水1000mL 1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取 L-胱氨酸 0.1g(或 DL-胱氨酸 0.2g),加 1mol/L 氢氧化钠 1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL 即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL 蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于 100mL 蒸馏水中,

35、加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入 1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶 100mL,pH 应为 7.0 0.1.41 GN 增菌液成分:胰蛋白胨20g 葡萄糖1g 甘露醇2g 柠檬酸钠5g 去氧胆酸钠0.5g 磷酸氢二钾4g 磷酸二氢钾1.5g 氯化钠5g 蒸馏水1000mL 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 14 页，共 24 页 -pH7.0 制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正 pH.分装每瓶 225mL,115高压灭菌15min.42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨 1 10g 葡萄糖5g 牛胆盐20g 磷酸氢二钠8g 磷酸二氢钾2g 煌绿

36、 0.015g 蒸馏水1000mL pH7.2 制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正 pH.分装每瓶 30mL,115高压灭菌 15min.43 亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g 牛肉膏5g 葡萄糖5g 硫酸亚铁0.3g 磷酸氢二钠4g 煌绿 0.025g 柠檬酸铋铵2g 亚硫酸钠6g 琼脂 1820g 蒸馏水1000mL pH7.5 制法:1 将前面 5 种成分溶解于300mL 蒸馏水中.2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL 蒸馏水溶解.3 将琼脂于 600mL 蒸馏水中煮沸溶解,冷至 804 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正 pH,加 0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀

37、.冷至 5055,倾注平皿.注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过 48h 不宜使用.44 DHL 琼脂成分:蛋白胨20g 牛肉膏3g 乳糖 10g 蔗糖 10g 去氧胆酸钠1g 硫代硫酸钠2.3g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 15 页，共 24 页 -柠檬酸钠1g 柠檬酸铁铵1g 中性红0.03g 琼脂 1820g 蒸馏水1000mL pH7.3 制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL 蒸馏水中,校正 pH.再将琼脂于600mL 蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入 0.5%中性红水溶液6mL,

38、待冷至 5055,倾注平板.45 HE 琼脂成分:脙胨 12g 牛肉膏3g 乳糖 12g 蔗糖 12g 水杨素2g 胆盐 20g 氯化钠5g 琼脂 1820g 蒸馏水1000mL 0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL Andrade 指示剂20mL 甲液 20mL 乙液 20mL pH7.5 制法:将前面七种成分溶解于400mL 蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL 蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正 pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至 5055,倾注平板.注:此培养基不可高压灭菌.甲液的配制硫代硫酸钠34g 柠檬酸铁铵4g 蒸馏水100mL 乙液的配制去氧胆酸钠10

39、g 蒸馏水100mL Andrade 指示剂酸性复红0.5g 1mol/L 氢氧化钠溶液16mL 蒸馏水100mL 将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液12mL.46 SS琼脂基础培养基:牛肉膏5g 眎胨 5g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 16 页，共 24 页 -三号胆盐3.5g 琼脂 17g 蒸馏水1000mL 再将两液混合,121高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100mL 乳糖 10g 柠檬酸钠8.5g 硫代硫酸钠8.5g 10%柠檬酸铁溶液10mL 1%中性红溶液2.5mL 0.1%煌绿溶液0.33m

40、L 加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至 pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.煌绿溶液配好后应在10d 以内使用.可以购用SS琼脂的干燥培养基.47 WS琼脂成分:胨 12g 牛肉膏3g 氯化钠5g 乳糖 12g 蔗糖 12g 十二烷基硫酸钠2g 琼脂 15g Andrade 指示剂20mL 0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL 甲液 20mL 蒸馏水1000mL pH7.0 制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正 pH 后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:供沙门氏菌分

41、离用.Andrade 指示剂和甲液的配制均见HE 琼脂.48 麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g 眎胨 3g 猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g 氯化钠5g 琼脂 17g 蒸馏水1000mL 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 17 页，共 24 页 -乳糖 10g 0.01%结晶紫水溶液10mL 0.5%中性红水溶液5mL 制法:1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL 蒸馏水中,校正 pH7.2.将琼脂加入600mL 加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121高压灭菌15min 备用.2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至 5055时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注

42、:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49 伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾2g 琼脂 17g 2%伊红 Y 溶液 20mL 0.65%美蓝溶液10mL 蒸馏水1000mL pH7.1 制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正 pH,分装于烧瓶内,121高压灭菌15min 备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至 5055,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50 三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨20g 牛肉膏5g 乳糖 10g 蔗糖 10g 葡萄糖1g 氯化钠5g 硫酸亚铁铵 Fe(NH4)2(SO4)2 6H2O 0.2g 硫代硫酸钠0.2g

43、琼脂 12g 酚红 0.025g 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正 pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入 0.2%酚红水溶液 12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g 眎胨 5g 牛肉膏3g 酵母膏3g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 18 页，共 24 页 -乳糖 10g 蔗糖 10g 葡萄糖1g 氯化钠5g 硫酸亚铁0.2g 硫代硫酸钠0.3g 琼脂 12g 酚红 0.025g 蒸馏水1000mL pH7

44、.4 制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正 pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入 0.2%酚红水溶液 12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52 克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6)500mL 琼脂 6.5g 硫代硫酸钠0.1g 硫酸亚铁铵0.1g 乳糖 5g 0.2%酚红溶液5mL 下层培养基成分血消化汤(pH7.6)500mL 琼脂 2g 葡萄糖1g 0.2%酚红溶液5mL 制法:1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解.2 分别加入其他各种成分.将上层培养基

45、分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm 100mm 试管内,每管约 2mL.115高压灭菌10min.3 将上层培养基放在56水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固.4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约 1.5mL,放成斜面.53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨20g 牛肉膏3g 酵母膏3g 乳糖 10g 葡萄糖1g 氯化钠5g 柠檬酸铁铵0.5g 硫代硫酸钠0.5g 琼脂 12g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 19 页，共 24 页 -酚红 0.025g 蒸馏水1000mL pH7.4 制法:将除琼脂和酚红

46、以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正 pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入 0.2%酚红水溶液 12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层.121高压灭菌15min.放置高层斜面备用.54 葡萄糖半固体发酵管成分:蛋白胨1g 牛肉膏0.3g 氯化钠0.5g 1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL 葡萄糖1g 琼脂 0.3g 蒸馏水100mL pH7.4 制法:将蛋白胨,牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正 pH 后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌 121 15 min.55 5%乳糖发酵管成分:蛋白胨0.2g 氯化钠0.5g 乳糖 5g 2%溴麝香草酚蓝水溶

47、液1.2mL 蒸馏水100mL pH7.4 制法:除乳糖以外的各成分:溶解于 50mL 蒸馏水内,校正 pH.将乳糖溶解于另外50mL 蒸馏水内,分别灭菌 121 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内.注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d 内发酵.56 CAYE 培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用 Honda 氏产毒肉汤.57 Honda 氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白20g 酵母浸膏粉10g 氯化钠2.5g 磷酸氢二钠15g 葡萄糖5g 微量元素0.5mL 蒸馏水1000mL 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 20 页，共 2

48、4 页 -pH7.5 制法:溶解后校正 pH,高压灭菌 121 15min,待冷至 4550时,加入林可霉素溶液,每毫升培养基内含90g.微量元素配方:硫酸镁5g,氯化铁0.5g,氯化钻2g,蒸馏水100mL 58 Elek 氏培养基(毒素测定用)成分:胨 20g 麦芽糖3g 乳糖 0.7g 氯化钠5g 琼脂 15g 40%氢氧化钠溶液1.5mL 蒸馏水1000mL pH7.8 制法:用 500mL 蒸馏水溶解琼脂以外的成分,煮沸,并用滤纸过滤.用 1mo1/L 氢氧化钠校正pH.用另外 500mL蒸馏水加热溶解琼脂.将两液混合,分装试管 10mL 或 20mL.121高压灭菌15min.临用

49、时加热溶化琼脂倾注平板.59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基成分:甲液:胰蛋白胨10g 蒸馏水1000mL 乙液:磷酸氢二钠9.5g 蒸馏水1000mL 丙液:氯化镁(MgCl2 6H2O)40g 蒸馏水400mL 以上分别在121灭菌 15min.丁液:孔雀绿0.2g 蒸馏水100mL 戊液:羧苄青霉素1mg/mL 制法:取甲液 620mL,乙液 160mL,丙液 212mL 混合,再加入丁液6.4mL 和戊液 2.4mL,即为 1000mL 培养基.分装灭菌烧瓶,每瓶 100mL,或灭菌试管10mL.60 胰蛋白胨水成分:胰蛋白胨10g 蒸馏水1000mL pH7.0 制法:将上述成分溶解,

50、校正 pH.分装试管,121高压灭菌15min.61 Rustigian 氏尿素培养液成分:尿素 20.0g 酵母浸膏0.1g 名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 21 页，共 24 页 -磷酸二氢钾(KH2PO4)0.091g 磷酸氢二钠(Na2HPO4)0.095g 酚红 0.01g 蒸馏水1000mL 制法:将上述成分:于蒸馏水中溶解,校正 pH 为 6.8 0.2.不要加热,过滤除菌,无菌分装于灭菌小试管中,每管为约 3mL.用途:尿素酶试验用.62 氯化钠结晶紫增菌液成分:蛋白胨20g 氯化钠40g 0.01%结晶紫溶液5mL 蒸馏水1000mL pH9.0 制法:除结