12环境因素对微生物生长的影响.pdf

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1、环境因素对微生物生长的影响 环境因素对微生物生长的影响 3 实验内容 1.温度对微生物的影响 2.化学因素对微生物的影响 3.生物因素对微生物的影响 4.紫外线对微生物的影响 5.紫外线对微生物的诱变效应 第I部分 温度对微生物生长的影响 5 用连续划线法分别接种大肠杆菌和酵母菌在4 4块LBLB和4 4块PDAPDA平板上， 写好标记，将平板分别放置在4 4、室温、2828和3737培养箱中进行 培养，24h24h后取出，观察不同温度培养下的微生物生长状况，注意记 录室温的实际温度。（小平板） 菌种培养基4 4室温28283737 大肠杆菌LB 酵母菌PDA 第II部分 化学因素对微生物的影

2、响 7 化学 消毒 剂 基本原理 重金属及其盐类 与菌体蛋白质结合而使之变性或 与某些酶蛋白的巯基相结合而使 酶失活 蛋白质沉淀剂，或与代谢产物发 生鳌合作用而使之变为无效化合 物 有机溶剂(酚、醛、醇等) 使蛋白质及其核酸变性，也可破 坏细胞膜透性使内含物外溢 卤族元素及其化合物 碘可与蛋白质酪氨酸残基不可逆结合而使蛋 白质失活；氯气与水发生反应产生的强氧化 剂也具有杀菌作用。 染料：低浓度条件下可抑制细菌生长，染料 对细菌的作用具有选择性，革兰氏阳性菌普 遍比革兰氏阴性菌对染料更加敏感 表面活性剂 降低溶液表面张力，这类物质作用于微生物 细胞膜，改变其透性，同时也能使蛋白质发 生变性。 8

3、 器材 1、菌种 金黄色葡萄球菌 2、培养基 Luria-Bertani（LB）培养基 3、溶液或试剂 70%乙醇(1红)， 95%乙醇(2黄)，双氧水（3蓝），饱和次氯酸钠(4绿)，碘酊 (5 棕)，其他(6白)（自选：洗手液、洗洁精、舒肤佳、染色液） 4、仪器或其他用具 无菌培养皿，无菌滤纸片，试管，吸管，三角涂棒等 9 操作步骤 1、在无菌环境下用移液枪吸取0.2ml金黄色葡萄球菌菌液置 于LB板上，涂布均匀。 2、将已涂布好的平板底皿划分成5-6等份，每一等份内标好 试剂名称。 10 操作步骤 3、用无菌镊子将已灭菌的小圆滤纸片(D5mm)分别浸入装有各种消毒 剂溶液的试管中浸湿。 注

4、意取出滤纸片时保证过滤纸片所含消毒剂溶液量基本一致，并在管 内壁沥去多余药液，圆片一定要贴平。 11 4、将上述贴好滤纸片的含菌平板倒置放于37温室中，24h后取出 观察抑(杀)菌圈的大小。 生物因素对微生物的影响 2018/9/14 第III部分： 1313 目的要求 了解抗生素对其他微生物的作用； 许多微生物在其生命活动过程中能产生某些能选 择性地抑制或杀死其他微生物的特殊代谢产物， 称为抗生素； 14 取链霉菌和青霉菌的孢子，在LB平板一侧划一直线接种，置于28培 养5-7天。待形成菌苔后，从距菌苔边缘5mm处用接种环分别垂直向外 划直线接种大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌。在37培养

5、箱中 培养48h，观察链霉菌和青霉菌对三种细菌的抑菌情况。 第IV部分 紫外线的杀菌作用 16 诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成DNA链 的交联，从而抑制了DNA的复制。 紫外线穿透力不大，所以，只适用于 无菌室，接种箱，手术室内的空气及物体 表面的灭菌。 紫外线灯距照射物以不超过1.2m为宜。 O2O O2 H2O2H2O O3 氧化 电离 基本原理 17 器材 1、培养基 Luria-Bertani（LB）培养基 2、仪器或其他用具 显微镜 紫外线灯 无菌盖玻片 2018/9/14 18 操作步骤 1、在无菌环境下以移液枪吸取0.1ml细菌菌液于平板上，涂布均匀。 19 操作步骤 2、在超净台上

6、用镊子小心夹取一块灭过 菌的盖玻片及其他遮盖无，置于培养皿 中央。 3、各组将培养皿置于超净台，打开皿盖， 紫外线灯下统一照射10 & 30分钟。 4、用镊子无菌操作夹出遮盖物，盖上皿 盖，放入37培养箱培养24小时。 因紫外线对眼结膜及神经有损 伤作用，对皮肤有刺激作用，故不 能直视紫外线灯光，更不能在紫外 线灯光下工作。 20 实验结果 21 实验结果 1、总结各种理化因素对微生物生长的影响的照片及测量数据； 2、如何鉴定某种化学杀菌剂的杀菌效果？ 3、设计表格计算并记录紫外线的致死率和诱变率，紫外诱变的微生 物是否容易恢复突变？为什么？分析紫外线对枯草杆菌产胞外淀粉酶 相关基因的诱变效应 谢谢