抗药性监测讲稿.ppt

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1、关于抗药性监测第一页，讲稿共五十页哦 抗药性是影响全球公共卫生、农业、林业、畜抗药性是影响全球公共卫生、农业、林业、畜牧业等领域中有害生物控制的重要问题，是影响媒牧业等领域中有害生物控制的重要问题，是影响媒介生物性传染病疾病预防控制的关键因素。抗药性介生物性传染病疾病预防控制的关键因素。抗药性的产生和发展与药剂的使用有非常密切的关系。开的产生和发展与药剂的使用有非常密切的关系。开展和加强重要病媒生物抗药性监测，可以指导化学展和加强重要病媒生物抗药性监测，可以指导化学药剂的合理使用，提高控制效果，延缓抗药性发展药剂的合理使用，提高控制效果，延缓抗药性发展速度，减少人畜中毒事件的发生，保护有益生物

2、，速度，减少人畜中毒事件的发生，保护有益生物，维持生态平衡。维持生态平衡。第二页，讲稿共五十页哦主主 要要 内内 容容第一部分第一部分：抗药性概况及基本知识抗药性概况及基本知识 一、背景一、背景 二、抗药性的基本概念二、抗药性的基本概念 三、害虫对杀虫剂产生抗药性的机制三、害虫对杀虫剂产生抗药性的机制 四、影响抗性发展的因素四、影响抗性发展的因素第二部分：第二部分：抗药性监测方法抗药性监测方法第三部分：第三部分：抗性治理抗性治理 第四部分：第四部分：全国重要病媒生物抗药性监测（试行）方案全国重要病媒生物抗药性监测（试行）方案第三页，讲稿共五十页哦第一部分第一部分 抗药性的基本知识抗药性的基本知

3、识一、背景一、背景v 抗药性监测在疾病预防控制中的重要性抗药性监测在疾病预防控制中的重要性v 抗药性概况抗药性概况v 抗药性监测的基础条件抗药性监测的基础条件 疫情控制的需要疫情控制的需要 人民生活和社会与经济的需要人民生活和社会与经济的需要第四页，讲稿共五十页哦v 当前抗药性监测中存在的问题当前抗药性监测中存在的问题 专业技术人员缺乏专业技术人员缺乏 测定方法不统一测定方法不统一 抗药性监测结果的利用率低抗药性监测结果的利用率低第五页，讲稿共五十页哦抗药性：抗药性：某一昆虫的一个品系中，形成了对某一剂量毒物的耐受某一昆虫的一个品系中，形成了对某一剂量毒物的耐受能力，而这一剂量对同种正常种群的

4、大多数仍然是敏感的为抗药能力，而这一剂量对同种正常种群的大多数仍然是敏感的为抗药性。性。交互抗性：交互抗性：是指一种害虫对某种药剂产生抗药性后，对其它化是指一种害虫对某种药剂产生抗药性后，对其它化学结构类似或具有相同作用机制的农药品种，虽然不曾使用过学结构类似或具有相同作用机制的农药品种，虽然不曾使用过也产生抗性。也产生抗性。二、抗药性的基本概念和特点二、抗药性的基本概念和特点 第六页，讲稿共五十页哦负交互抗性：负交互抗性：一种昆虫对某一药剂产生抗性后，对另一种药剂的敏一种昆虫对某一药剂产生抗性后，对另一种药剂的敏感性增强。感性增强。多抗性：多抗性：一种害虫体内存在一种或多种不同的抗性基因或抗

5、性一种害虫体内存在一种或多种不同的抗性基因或抗性等位基因，能对几种不同作用机制的农药同时产生抗性。等位基因，能对几种不同作用机制的农药同时产生抗性。耐药性：耐药性：有些昆虫对某些杀虫药剂表现出先天性的抗药能力，或有些昆虫对某些杀虫药剂表现出先天性的抗药能力，或昆虫的某些发育时期或某些生理状态下对药剂的敏感性降低，称为昆虫的某些发育时期或某些生理状态下对药剂的敏感性降低，称为耐药性。耐药性。第七页，讲稿共五十页哦抗药性的特点抗药性的特点抗药性是一个抗药性是一个种群特征种群特征：普遍普遍性：杀虫剂普遍有抗性产生杀虫剂普遍有抗性产生 广泛性：广泛性：全球现象，分布很广全球现象，分布很广 区域性：区域

6、性：抗性发展程度的高低与当地的药剂选择压力抗性发展程度的高低与当地的药剂选择压力 是正相是正相关。抗药性的发展过程是月点关。抗药性的发展过程是月点面面片。片。遗传性遗传性 卫生害虫更易卫生害虫更易产生抗药性产生抗药性 害虫对新的杀虫剂抗性的产生有害虫对新的杀虫剂抗性的产生有加快加快的趋势的趋势 第八页，讲稿共五十页哦三、昆虫对杀虫剂产生抗药性的机制三、昆虫对杀虫剂产生抗药性的机制 杀虫剂经昆虫表皮、跗节、口器等途径进入体内直至引起杀虫剂经昆虫表皮、跗节、口器等途径进入体内直至引起死亡的过程死亡的过程:第九页，讲稿共五十页哦昆虫对杀虫剂产生抗性的原因昆虫对杀虫剂产生抗性的原因老鼠嘴巴越来越刁老鼠

7、嘴巴越来越刁蟑螂、蚊子练就蟑螂、蚊子练就“不坏金身不坏金身”第十页，讲稿共五十页哦v 行为机制行为机制 昆虫通过改变自身行为习性而避免或减少与昆虫通过改变自身行为习性而避免或减少与药剂接触，使其不被杀死。药剂接触，使其不被杀死。v 表皮穿透性降低表皮穿透性降低 由于表皮穿透性的降低而造成的抗性倍由于表皮穿透性的降低而造成的抗性倍数很低，然而如果和其他抗性机制结合，将会产生极高水平的数很低，然而如果和其他抗性机制结合，将会产生极高水平的抗药性。抗药性。v 代谢作用增强代谢作用增强 与害虫对有机氯、有机磷、氨基甲酸与害虫对有机氯、有机磷、氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类等重要药剂的抗性有关。酯和拟除虫菊酯

8、类等重要药剂的抗性有关。v 靶标敏感性降低靶标敏感性降低 靶标是各类杀虫剂重要的毒杀作用场靶标是各类杀虫剂重要的毒杀作用场所。所。第十一页，讲稿共五十页哦杀虫剂杀虫剂与抗药性有关的作用靶标或代谢酶与抗药性有关的作用靶标或代谢酶DDTNa+通道，多功能氧化酶，通道，多功能氧化酶，DDT-脱氢酶脱氢酶六六六六六六氯离子通道，多功能氧化酶氯离子通道，多功能氧化酶有机磷有机磷乙酰胆碱酯酶、多功能氧化酶、酯酶、谷胱甘肽乙酰胆碱酯酶、多功能氧化酶、酯酶、谷胱甘肽-s-转移酶系转移酶系氨基甲酸酯氨基甲酸酯多功能氧化酶、酯酶多功能氧化酶、酯酶拟除虫菊酯拟除虫菊酯神经不敏感、多功能氧化酶、酯酶、表皮穿透性神经不

9、敏感、多功能氧化酶、酯酶、表皮穿透性烟碱、吡虫啉烟碱、吡虫啉乙酰胆碱酯酶受体乙酰胆碱酯酶受体环戊二烯类、劲锐特环戊二烯类、劲锐特-氨基丁酸（氨基丁酸（GABA)受体受体苏云金杆菌苏云金杆菌中肠受体中肠受体常见杀虫剂的作用靶标或代谢酶常见杀虫剂的作用靶标或代谢酶第十二页，讲稿共五十页哦 四、影响抗性发展的因素四、影响抗性发展的因素u 遗传因子遗传因子 抗性的发展是基因突变、基因流动及随机遗传漂抗性的发展是基因突变、基因流动及随机遗传漂移等因素间复杂的相互作用，而引起基因频率的改变。移等因素间复杂的相互作用，而引起基因频率的改变。抗性等位基因的起始频率抗性等位基因的起始频率 抗性等位基因数量抗性等

10、位基因数量 显性等位基因显性等位基因 抗性基因的外显率抗性基因的外显率 农药的使用历史农药的使用历史 抗性个体的适合度抗性个体的适合度 第十三页，讲稿共五十页哦u 生物学因子生物学因子 世代周期和繁殖力世代周期和繁殖力 单配偶、多配偶和孤雌生殖单配偶、多配偶和孤雌生殖 种群流动性种群流动性 昆虫的食性昆虫的食性 抗性个体的生存竞争力和庇护抗性个体的生存竞争力和庇护 第十四页，讲稿共五十页哦 其中主要涉及农药的使用次数和使用量。其中主要涉及农药的使用次数和使用量。农药的使用次数越多、剂量越大，其持效期越长，对害虫的农药的使用次数越多、剂量越大，其持效期越长，对害虫的选择时间越长。昆虫对药剂产生抗

11、性的速度越快，反之则慢。选择时间越长。昆虫对药剂产生抗性的速度越快，反之则慢。u 操作因子操作因子 药剂对昆虫的选择压力对害虫抗性产生有十分重要的作药剂对昆虫的选择压力对害虫抗性产生有十分重要的作用，它是受人类活动直接影响的。这类影响因素属于人为抗用，它是受人类活动直接影响的。这类影响因素属于人为抗性因子。性因子。第十五页，讲稿共五十页哦第二部分第二部分 抗药性的监测方法抗药性的监测方法 抗性监测方法有生测法、生理生化测定方法和分子生抗性监测方法有生测法、生理生化测定方法和分子生物测定方法。物测定方法。一、生测法一、生测法 该类方法测定出抗药性的表现型，不能发现早期抗性该类方法测定出抗药性的表

12、现型，不能发现早期抗性基因频率的变化。基因频率的变化。第十六页，讲稿共五十页哦 区分剂量法区分剂量法 毒力回归线测定方法毒力回归线测定方法 生测的注意事项生测的注意事项试验方法的标准化、试虫标准化、药剂标准化试验方法的标准化、试虫标准化、药剂标准化;根据根据药剂的作用方式选择生测方法，触杀作用：药剂的作用方式选择生测方法，触杀作用：a)点滴法点滴法;b)喷喷雾法雾法;c)药膜法药膜法;d)浸渍法。胃毒作用多用饲料喂食法；浸渍法。胃毒作用多用饲料喂食法；内吸作用多用寄主局部施药法或寄主喂食法等。内吸作用多用寄主局部施药法或寄主喂食法等。第十七页，讲稿共五十页哦二、生物化学监测二、生物化学监测 生

13、化监测方法可以使用酶标仪监测到每个个体靶标酶或代谢酶生化监测方法可以使用酶标仪监测到每个个体靶标酶或代谢酶的变化，一般用的变化，一般用I50(药剂对酶的抑制中浓度药剂对酶的抑制中浓度)表示药剂对离体酶表示药剂对离体酶的抑制能力；的抑制能力；Ki表示酶与底物的结合能力的大小。乙酰胆表示酶与底物的结合能力的大小。乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的测定方法见附录碱酯酶和羧酸酯酶的测定方法见附录2，谷胱甘肽，谷胱甘肽-s-转移酶转移酶的测定方法见附录的测定方法见附录3。生物化学测定的缺陷只能测定一种酶的变化，抗药性生物化学测定的缺陷只能测定一种酶的变化，抗药性的产生常常是多种酶共同参与的结果。的产生常常是多种酶

14、共同参与的结果。第十八页，讲稿共五十页哦 乙酰胆碱酯酶基因乙酰胆碱酯酶基因 钠离子通道基因钠离子通道基因 -氨基丁酸受体突变与抗性的关系氨基丁酸受体突变与抗性的关系 酯酶扩增与抗药性的关系酯酶扩增与抗药性的关系 多功能氧化酶多功能氧化酶-P450与抗药性的关系与抗药性的关系 三、分子监测方法三、分子监测方法第十九页，讲稿共五十页哦杀虫药剂对靶标生物毒力的表示方法杀虫药剂对靶标生物毒力的表示方法半数致死量半数致死量LD50:受试生物死亡一半需要的剂量值受试生物死亡一半需要的剂量值 单位：单位：mg/kg，ug/g等，有时用等，有时用ug/头头LC50:受试生物死亡一半需要的浓度值受试生物死亡一半

15、需要的浓度值 单位：单位：mg/L,g/m2等等LT50:在固定浓度下，受试生物死亡一半需要的时间在固定浓度下，受试生物死亡一半需要的时间 单位：分钟（单位：分钟（min）或小时（）或小时（hr）第二十页，讲稿共五十页哦击倒中时或中量击倒中时或中量KT50：击倒受试生物一半需要的时间，单位击倒受试生物一半需要的时间，单位:min或或hrKD50：击倒受试生物一半需要的剂量，单位击倒受试生物一半需要的剂量，单位:mg/kg，ug/g等，有时用等，有时用ug/头头奔出效应奔出效应FT50：使蜚蠊跑出一半需要的时间，单位使蜚蠊跑出一半需要的时间，单位:min或或hrFD50或或FC50：使蜚蠊跑出一

16、半需要的剂量，单位使蜚蠊跑出一半需要的剂量，单位:mg/L,g/m2等等第二十一页，讲稿共五十页哦时间浓度积时间浓度积CT50：受试生物死亡一半需要的时间浓度积，即药剂浓受试生物死亡一半需要的时间浓度积，即药剂浓 度和接触时间的乘积，单位是度和接触时间的乘积，单位是ming/L半数有效量半数有效量ED50：受试生物一半产生所希望的反应，需要的剂量值。受试生物一半产生所希望的反应，需要的剂量值。单位：单位：mg/kg，ug/g，有时用，有时用ug/头头EC50：受试生物一半产生所希望的反应，需要的浓度值。受试生物一半产生所希望的反应，需要的浓度值。单位：单位：mg/L，g/m2等等第二十二页，讲

17、稿共五十页哦第三部分第三部分 抗性治理抗性治理 抗药性问题中面临的最主要的难题抗药性问题中面临的最主要的难题 克服或延缓抗性的产生和发展，以及延长杀虫剂克服或延缓抗性的产生和发展，以及延长杀虫剂的有效使用寿命。的有效使用寿命。依赖于害虫的抗性遗传及种群生态学，通过选择相应依赖于害虫的抗性遗传及种群生态学，通过选择相应的防治策略，来达到这一目的抗性治理便应运而生。的防治策略，来达到这一目的抗性治理便应运而生。第二十三页，讲稿共五十页哦一、抗性治理的一般概念一、抗性治理的一般概念 在抗性产生的选择过程中，目标虫种的敏感性及施在抗性产生的选择过程中，目标虫种的敏感性及施加于改虫种的选择压力（即杀虫剂

18、等），是抗性形成加于改虫种的选择压力（即杀虫剂等），是抗性形成的主要因素。的主要因素。抗性治理最基本的出发点抗性治理最基本的出发点:v 降低杀虫剂的选择压；降低杀虫剂的选择压；v 利用抗性个体在停止用药后的繁殖劣势；利用抗性个体在停止用药后的繁殖劣势；v 敏感个体的稀释作用。敏感个体的稀释作用。第二十四页，讲稿共五十页哦 抗性治理的实质抗性治理的实质 根据群体遗传学的原理，综合影响目标虫种，抗性根据群体遗传学的原理，综合影响目标虫种，抗性变化的遗传学和生物学因子，使用不同的杀虫剂选择变化的遗传学和生物学因子，使用不同的杀虫剂选择压，以达到阻止或延缓抗性的发展，同时又将目标种压，以达到阻止或延缓

19、抗性的发展，同时又将目标种群的为害控制在经济阈值之下。也就是说，在控制目群的为害控制在经济阈值之下。也就是说，在控制目标种群的为害在经济阈值之下的前提下，保持该种群标种群的为害在经济阈值之下的前提下，保持该种群的敏感性。的敏感性。第二十五页，讲稿共五十页哦v 尽可能将目标害虫的抗性等位基因频率控制在最低水平，以防尽可能将目标害虫的抗性等位基因频率控制在最低水平，以防止或延缓抗性发展止或延缓抗性发展 v 根据各类杀虫剂的作用机制，制定科学合理的用药防治方案根据各类杀虫剂的作用机制，制定科学合理的用药防治方案 v 根据杀虫剂的特点和为害习性施药，尽可能在低的选择压力下，根据杀虫剂的特点和为害习性施

20、药，尽可能在低的选择压力下，得到较好的防治效果得到较好的防治效果 v 害虫抗性治理与害虫综合治理相结合害虫抗性治理与害虫综合治理相结合抗性治理的基本原则抗性治理的基本原则第二十六页，讲稿共五十页哦敏感性资源的意义敏感性资源的意义 杀虫剂的使用杀虫剂的使用v 减少害虫数量的同时，增加了抗性基因频率。减少害虫数量的同时，增加了抗性基因频率。v 消耗了一部分害虫的敏感性。害虫对杀虫剂的敏感消耗了一部分害虫的敏感性。害虫对杀虫剂的敏感 性，在多次重复的使用一种药剂的过程中逐步丧失。性，在多次重复的使用一种药剂的过程中逐步丧失。敏感性消失后，再想恢复基本不可能。敏感性消失后，再想恢复基本不可能。第二十七

21、页，讲稿共五十页哦v 抗性的发展通常是在它开始出现后的很短时间内遍及整抗性的发展通常是在它开始出现后的很短时间内遍及整个地区个地区v 敏感性资源的再分配问题敏感性资源的再分配问题 使用敏感性资源，必须考虑两点使用敏感性资源，必须考虑两点 代别间和年度间的敏感性分配，取决于一定代别间和年度间的敏感性分配，取决于一定时间内害虫为害和杀虫剂的费用以及抗性发生的时间内害虫为害和杀虫剂的费用以及抗性发生的代价。代价。第二十八页，讲稿共五十页哦二、抗性治理策略二、抗性治理策略 有害生物综合治理有害生物综合治理（IPM）的防治策略，通过以下措的防治策略，通过以下措施施降低药剂的选择压降低药剂的选择压：只有把

22、只有把IPM和化学防治有机的相结合才能真正控制和化学防治有机的相结合才能真正控制抗性的发展。抗性的发展。v 天敌的引入和培育天敌的引入和培育v 昆虫疾病的利用昆虫疾病的利用v 杀虫植物的栽培杀虫植物的栽培v 其它非化学防治其它非化学防治 第二十九页，讲稿共五十页哦v 保护性治理保护性治理 即在昆虫对药剂产生抗性以前就实施抗性治理策略。即在昆虫对药剂产生抗性以前就实施抗性治理策略。v 治疗性治理治疗性治理 即监测到害虫已经对某些药剂产生抗药性或防治即监测到害虫已经对某些药剂产生抗药性或防治 效果下降时实施抗性治理。效果下降时实施抗性治理。抗药性治理分为抗药性治理分为第三十页，讲稿共五十页哦抗性治

23、理抗性治理适度治理适度治理饱和治理饱和治理复合作用复合作用治理治理抗性治理的三个基本策略抗性治理的三个基本策略从化学防治的角度从化学防治的角度【Georghiou(1983)】“复合作用”这个术语用来表示长期或短期的多种作用的化学选择压。“适度”和“饱和”主要是指防治时所用药剂的剂量而言。第三十一页，讲稿共五十页哦适度治理适度治理饱和治理饱和治理复合作用治理复合作用治理限制药剂使用次数、用药时间限制药剂使用次数、用药时间及用药量，降低药剂总的选择压及用药量，降低药剂总的选择压力；应用残效期短的药剂；避免力；应用残效期短的药剂；避免使用缓释剂；定向选择成虫；在使用缓释剂；定向选择成虫；在不用药阶

24、段，利用种群中抗性个不用药阶段，利用种群中抗性个体适合度低的特点，使敏感个体体适合度低的特点，使敏感个体的繁殖快于抗性个体，以降低整的繁殖快于抗性个体，以降低整个种群的抗性基因频率。阻止或个种群的抗性基因频率。阻止或延缓抗性的发展。延缓抗性的发展。某一代或留下一部分种群不处某一代或留下一部分种群不处理；保持理；保持“庇护所庇护所”；提高防治；提高防治限阈。限阈。当抗性基因为隐当抗性基因为隐性时，使用高剂量的性时，使用高剂量的杀虫剂施于靶标害虫，杀虫剂施于靶标害虫，杀死抗性杂合子和敏杀死抗性杂合子和敏感纯合子个体，并有感纯合子个体，并有敏感个体迁入，以稀敏感个体迁入，以稀释存活的少数抗性纯释存活

25、的少数抗性纯合子。降低抗性等位合子。降低抗性等位基因频率，延缓抗性基因频率，延缓抗性发展。发展。用增效剂抑制解用增效剂抑制解毒机制。毒机制。药剂混用；药药剂混用；药剂轮用；药剂镶剂轮用；药剂镶嵌式交替防治。嵌式交替防治。这些药剂因作这些药剂因作用于不同的靶标用于不同的靶标、无交互抗性，、无交互抗性，使各种药剂在低使各种药剂在低的选择压力下，的选择压力下，取得较好的杀虫取得较好的杀虫效果，从而延缓效果，从而延缓抗性的发展。抗性的发展。换用改变靶标的新药剂；杀虫剂的剂型工艺。换用改变靶标的新药剂；杀虫剂的剂型工艺。第三十二页，讲稿共五十页哦 卫生害虫防治中饱和治理和复合卫生害虫防治中饱和治理和复合

26、作用治理的应用较多作用治理的应用较多适度适度治理治理饱和饱和治理治理复合复合作用作用治理治理 以上三种策略并非完以上三种策略并非完全孤立，在同一个防治全孤立，在同一个防治计划中，这些措施可相计划中，这些措施可相互渗透。这完全取决于互渗透。这完全取决于所处的实际情况。所处的实际情况。第三十三页，讲稿共五十页哦v 设计抗性治理方案的依据设计抗性治理方案的依据 通过抗性监测可以及时准确地知道抗性水平及其分布，通过抗性监测可以及时准确地知道抗性水平及其分布，尤其是早期抗性监测，对及时实施抗性治理可争得时间上尤其是早期抗性监测，对及时实施抗性治理可争得时间上的主动。的主动。一般抗性恢复所用的时间比抗性产

27、生要慢的多。一般抗性恢复所用的时间比抗性产生要慢的多。v 明确重点应治理保护的药剂类别及品种明确重点应治理保护的药剂类别及品种抗性监测在抗性治理中的作用抗性监测在抗性治理中的作用第三十四页，讲稿共五十页哦v 评估抗性治理的实际效果评估抗性治理的实际效果 通过监测害虫抗性水平的变化，对整个治理方案或不同阶段通过监测害虫抗性水平的变化，对整个治理方案或不同阶段抗性治理效果提供评估，也为抗性治理方案的修订补充提供依据抗性治理效果提供评估，也为抗性治理方案的修订补充提供依据。为了达到将昆虫控制在危害的阀值以下，保护害虫对药剂的为了达到将昆虫控制在危害的阀值以下，保护害虫对药剂的敏感性和延缓药剂的有效使

28、用寿命的目的，抗性治理在综合治敏感性和延缓药剂的有效使用寿命的目的，抗性治理在综合治理策略原则的指导下，强调采取非化学方法，化学农药使用应理策略原则的指导下，强调采取非化学方法，化学农药使用应科学合理，尽可能降低农药对昆虫的选择压力，延缓抗性发展科学合理，尽可能降低农药对昆虫的选择压力，延缓抗性发展，减少环境污染及破坏生态平衡等问题，减少环境污染及破坏生态平衡等问题。第三十五页，讲稿共五十页哦第四第四部分部分 全国重要病媒生物全国重要病媒生物 抗药性监测（试行）方案抗药性监测（试行）方案1.方案方案背景背景 2.监测目的监测目的2.1 掌握抗药性水平，指导防制掌握抗药性水平，指导防制 2.2

29、制定控制预案，提高疾控能力制定控制预案，提高疾控能力 3.监测的组织、分工和职责监测的组织、分工和职责 第三十六页，讲稿共五十页哦3.1 监测网络监测网络 以中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室以中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室为依托，为依托，以各省以各省(自治区，直辖市自治区，直辖市)为监测试点单位，监测点由监为监测试点单位，监测点由监测试点单位设立。测试点单位设立。3.2 分工和职责分工和职责 3.2.1 中国疾病预防控制中心传染病所中国疾病预防控制中心传染病所 3.2.1 省省(自治区，直辖市自治区，直辖市)疾病预防控制部门疾病预防控制部门 第三十七页，讲

30、稿共五十页哦4.监测内容和方法监测内容和方法 4.1 靶标昆虫（监测对象）靶标昆虫（监测对象）v 淡色库蚊淡色库蚊/致倦库蚊的幼虫和成虫致倦库蚊的幼虫和成虫v 家蝇成虫家蝇成虫4.2 监测点的选择监测点的选择 监测点要考虑地理分布（经纬度、生境），每省选两个有代监测点要考虑地理分布（经纬度、生境），每省选两个有代表性的监测点进行。表性的监测点进行。监测点要相对固定。监测点要相对固定。第三十八页，讲稿共五十页哦监测点的选择必须考虑以下几点：监测点的选择必须考虑以下几点：v 当地媒介生物性传染病的发生情况当地媒介生物性传染病的发生情况v 相关疾病媒介生物的种类和发生强度相关疾病媒介生物的种类和发生

31、强度v 病媒生物对人的骚扰程度等选择病媒生物对人的骚扰程度等选择4.3 监测时间监测时间 在当地的发生高峰期，每在当地的发生高峰期，每两两年进行一次，不同监测年份年进行一次，不同监测年份测定时间相对固定。测定时间相对固定。第三十九页，讲稿共五十页哦4.4 试虫采集试虫采集 试虫的采集以居民区（城市或农村）及人活动频繁的区试虫的采集以居民区（城市或农村）及人活动频繁的区域（公园、绿化带、村庄周围域（公园、绿化带、村庄周围500米内等）为主。米内等）为主。在其东、西、南、北、中在其东、西、南、北、中5个方位采集样本，按接近个方位采集样本，按接近等比等比例混合例混合后进行抗药性测定。后进行抗药性测定

32、。抗药性监测，在采集试虫的当代或室内饲养的抗药性监测，在采集试虫的当代或室内饲养的12代代进进行。行。第四十页，讲稿共五十页哦4.5 监测药剂监测药剂4.5.1 淡色库蚊淡色库蚊/致倦库蚊的监测药剂致倦库蚊的监测药剂 高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、双硫磷、仲丁威高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、双硫磷、仲丁威4.5.2 家蝇的监测药剂家蝇的监测药剂 溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、敌敌畏、残杀威。溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、敌敌畏、残杀威。其它药剂根据当地用药情况进行选择监测。其它药剂根据当地用药情况进行选择监测。第四十一页，讲稿共五十页哦4.6 设施和器材设施和器材 养虫室养虫室吸蚊磁吸蚊磁通风橱通风橱光照培养箱光照培

33、养箱 点滴器点滴器 诱蚊灯诱蚊灯 第四十二页，讲稿共五十页哦吸虫器吸虫器 捕虫网捕虫网 防蚊帽防蚊帽 移液器移液器 电子天平电子天平 磁力搅拌器磁力搅拌器 第四十三页，讲稿共五十页哦4.7 监测方法监测方法 4.7.1 蚊虫幼虫浸渍法蚊虫幼虫浸渍法 以以4龄初幼虫为测试对象，以丙酮将原药稀释，将待测药剂配龄初幼虫为测试对象，以丙酮将原药稀释，将待测药剂配置置57个系列浓度，即在个系列浓度，即在250毫升的烧杯（或白瓷碗等）中加入毫升的烧杯（或白瓷碗等）中加入200毫升脱氯水和毫升脱氯水和0.5毫升相应的药液，加入毫升相应的药液，加入2030头试虫，以头试虫，以200mL脱氯水为对照。脱氯水为对

34、照。试虫在试虫在251、相对湿度为、相对湿度为7010、光照、光照 黑暗黑暗16 8的条件下，的条件下，24小时调查并记录各处理的死亡数。死亡判断标准，小时调查并记录各处理的死亡数。死亡判断标准，用锐器触动不能动的幼虫为死亡，只是震颤也视为死亡。试验重用锐器触动不能动的幼虫为死亡，只是震颤也视为死亡。试验重复复3次。对照死亡率超过次。对照死亡率超过20，试验视为无效。，试验视为无效。第四十四页，讲稿共五十页哦4.7.2 成蚊接触桶法成蚊接触桶法 药纸的制备药纸的制备 将白油和乙醚将白油和乙醚(AR)按按 1 2 比例混合作为溶剂。比例混合作为溶剂。杀虫杀虫剂按需要量溶解其中，配成一定浓度剂按需

35、要量溶解其中，配成一定浓度附录附录 2，吸取，吸取 2.14 毫升均匀滴于毫升均匀滴于 16 厘米厘米12.5 厘米的新华厘米的新华1号滤纸或其他质量相近的滤纸上。号滤纸或其他质量相近的滤纸上。2小小时后待乙醚完全挥发即可应用。时后待乙醚完全挥发即可应用。药纸制备后应在药纸制备后应在 6 小时内使用，如需要可以把小时内使用，如需要可以把 l020 张药纸用张药纸用大小相同的玻璃板夹紧，用橡皮膏把间缝封实，再装入黑纸袋大小相同的玻璃板夹紧，用橡皮膏把间缝封实，再装入黑纸袋中，在较低温下大约可以存放一个月，但一经开启即不能储存中，在较低温下大约可以存放一个月，但一经开启即不能储存，必须在，必须在

36、23 天内用完，如果已经装入接触筒，就只能用一次天内用完，如果已经装入接触筒，就只能用一次。第四十五页，讲稿共五十页哦 先把恢复筒安装在放隔板的一面，先把恢复筒安装在放隔板的一面，用吸蚊器吸取用吸蚊器吸取 2025 只雌蚊只雌蚊（羽化后（羽化后 2448 小时，未吸血）吹入筒内，然后关闭隔板，在小时，未吸血）吹入筒内，然后关闭隔板，在隔板另一面装上已衬贴药纸的接触筒，把隔板抽开，将恢复筒内隔板另一面装上已衬贴药纸的接触筒，把隔板抽开，将恢复筒内蚊虫轻吹入接触筒，迅速关上隔板，将筒平放，即开始计算接触蚊虫轻吹入接触筒，迅速关上隔板，将筒平放，即开始计算接触时间，接触时间，接触 60 分钟，完毕后

37、再抽开隔板将蚊虫再吹入恢复筒，关上分钟，完毕后再抽开隔板将蚊虫再吹入恢复筒，关上隔板，隔板，将筒直放，将筒直放，用浸有用浸有 5葡萄糖水的棉花团置于尼龙网上。葡萄糖水的棉花团置于尼龙网上。室室温温 252，从接触完毕后，从接触完毕后 24 小时计算死亡率。为了便于蚊虫小时计算死亡率。为了便于蚊虫在恢复筒内停留，可用白纸衬贴在筒内上端在恢复筒内停留，可用白纸衬贴在筒内上端 l2 或或 23，空，空出下端，以便于观察死亡掉下的蚊虫。在出下端，以便于观察死亡掉下的蚊虫。在 45次重复中，每剂次重复中，每剂量应至少测量应至少测 100 只蚊。只蚊。第四十六页，讲稿共五十页哦4.7.3 家蝇的监测方法家

38、蝇的监测方法 用丙酮（分析纯）将原药配成用丙酮（分析纯）将原药配成 57 个系列浓度。取个系列浓度。取37日龄，日龄，体重为体重为1820mg的家蝇成虫。的家蝇成虫。把含有乙醚（分析纯）的棉球将指形管口堵塞、轻度麻醉后，选健把含有乙醚（分析纯）的棉球将指形管口堵塞、轻度麻醉后，选健康雌虫，每处理康雌虫，每处理 30 只置于平皿中，用点滴器（类型）将药液按浓只置于平皿中，用点滴器（类型）将药液按浓度由低到高的顺序，点滴于中胸背板上，放入加有少量奶粉的度由低到高的顺序，点滴于中胸背板上，放入加有少量奶粉的500 mL洁净的烧杯中，以海绵或脱脂棉供水，在温度为洁净的烧杯中，以海绵或脱脂棉供水，在温度

39、为251，相对湿度，相对湿度60%70%的条件下用的条件下用 1:1 白糖和奶粉混合物饲养白糖和奶粉混合物饲养 24 h。记录各处理的死亡虫数。对照以丙酮处理，死亡率超过。记录各处理的死亡虫数。对照以丙酮处理，死亡率超过 20时需要重新进行。试验重复时需要重新进行。试验重复 3 次。死亡判断标准：凡腹部上翻次。死亡判断标准：凡腹部上翻，六足抽搐，用探针触之不能翻身爬行者判为死亡。，六足抽搐，用探针触之不能翻身爬行者判为死亡。第四十七页，讲稿共五十页哦附录附录2 成蚊测定用药纸的计算成蚊测定用药纸的计算 WHO 对纸上的剂量标准系以对纸上的剂量标准系以杀虫剂在白油中的浓度杀虫剂在白油中的浓度计算

40、。计算。如混合液的如混合液的 l%实际为实际为 0.33%。按照这种方法，每平方米滤纸滴混。按照这种方法，每平方米滤纸滴混合液应为合液应为 107.1 毫升，乙醚全部挥发后仅残留白油毫升，乙醚全部挥发后仅残留白油 35.7 毫升，毫升，如含药量如含药量 1，即为，即为 0.357 克。滤纸的面积定为克。滤纸的面积定为1612.5=200 平平方厘米，为方厘米，为1平方米平方米1/50。WHO多年来皆以杀虫剂在溶剂中的百分率为剂量标准，如溴多年来皆以杀虫剂在溶剂中的百分率为剂量标准，如溴氰菊酯的标准剂量为氰菊酯的标准剂量为 0.025，实际每平方米药量，实际每平方米药量0.0089 克。克。WH

41、O专家委员会认为百分率与墙面药量无直接联系，建议今后使用专家委员会认为百分率与墙面药量无直接联系，建议今后使用“克平方米克平方米 的计量单位。的计量单位。第四十八页，讲稿共五十页哦4.8 统计与计算统计与计算 用用POLO软件或软件或DPS软件进行数据统计，记录处理虫数、自由软件进行数据统计，记录处理虫数、自由度。通过分析获得致死中浓度（度。通过分析获得致死中浓度（LC50）或致死剂量（）或致死剂量（LD50）值）值及其及其95置信限，置信限，LC90(或或LD90）及其）及其95置信限，毒力回归线置信限，毒力回归线的斜率的斜率b值及其标准差，卡方值。值及其标准差，卡方值。方法：用统计学生物测定中的机率分析。方法：用统计学生物测定中的机率分析。机率分析的经验模型及其参数拟合方法由机率分析的经验模型及其参数拟合方法由Finney(1947)提提出，且长期以来是杀虫剂毒力测定的通用方法。出，且长期以来是杀虫剂毒力测定的通用方法。第四十九页，讲稿共五十页哦感谢大家观看感谢大家观看第五十页，讲稿共五十页哦