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1、第1页,此课件共15页哦 同位素示踪法(isotopic tracer method)是利用放射性核素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析方法,示踪实验的创建者是Hevesy。Hevesy于1923年首先用天然放射性212Pb研究铅盐在豆科植物内的分布和转移。继后Jolit和Curie于1934年发现了人工放射性,以及其后生产方法的建立(加速器、反应堆等),为放射性同位素示踪法的更快的发展和广泛应用提供了基本的条件和有力的保障 第2页,此课件共15页哦 灵敏度高:它比目前较敏感的分析天平要敏感107-108倍,而迄今最准确的化学分析法很难测定到10-12克水平。.方法简便:不受其它非放射性物
2、质的干扰,可以省略许多复杂的物质分离步骤。定位定量准确:能准确定量地测定代谢物质的转移和转变 符合生理条件:重量改变是微不足道,体内生理过程仍保持正常的平衡状态。第3页,此课件共15页哦 实验准备阶段 正式实验阶段 放射性去污染和放射性废物处理 第4页,此课件共15页哦 示踪剂的选择:选定放射性示踪剂的比活度q的值必须足够大,以保证实验所需要的灵敏度,而又要尽可能地小,使得在该实验条件下辐射自分解可忽略。放射性同位素测量方法的选择:测量方法的选择取决于射线种类,对于射线通常可用硫化锌晶体、电离室、核乳胶等方法探测。进行非放射性的模拟实验,把实验全过程预演一遍 第5页,此课件共15页哦 选择放射
3、性同位素的剂量:应以相关部位对示踪剂的蓄积率来考虑示踪剂用量。选择示踪剂给入途径:根据实验目的,选择易吸收、易操作的给入途径。放射性生物样品的制备:根据实验目的和示踪剂的标记放射性同位素的性质制备放射性生物样品。放射性样品的测量:要纠正一些因素对测量结果的影响。第6页,此课件共15页哦 放射性实验,无论是每次实验或阶段性实验结束后,都可能有不同程度的放射性污染和放射性废物的出现,因此,在实验结束后,要作去污染处理和放射性废物处理。必要时在实验过程进行中,就要作除污染和清理放射性废物的工作。第7页,此课件共15页哦 放射性同位素示踪法在生物化学和分子生物学领域应用极为广泛。近几年来,同位素示踪技
4、术在原基础上又有许多新发展,如双标记和多标记技术,稳定性同位素示踪技术,活化分析,电子显微镜技术,同位素技术与其它新技术相结合等。阐明了一系列重大问题,如遗传密码、细胞膜受体、RNA-DNA逆转录等,使人类对生命基本现象的认识开辟了一条新的途径。第8页,此课件共15页哦 体内存在着很多种物质,究竟它们之间是如何转变的,如果在研究中应用适当的同位素标记物作示踪剂分析这些物质中同位素含量的变化,就可以知道它们之间相互转变的关系,还能分辩出谁是前身物,谁是产物,分析同位素示踪剂存在于物质分子的哪些原子上,可以进一步推断各种物质之间的转变机制。第9页,此课件共15页哦 物质在机体内相互转化的规律是生命
5、活动中重要的本质内容,在过去的物质转化研究中,一般都采用用离体酶学方法,但是离体酶学方法的研究结果,不一定能代表整体情况,同位素示踪技术的应用,使有关物质转化的实验的周期大大缩短,而且在离体、整体、无细胞体系的情况下都可应用,操作简化,测定灵敏度提高,不仅能定性,还可作定量分析。第10页,此课件共15页哦 阐明生物体内物质处于不断更新的动态平衡之中,是放射性同位素示踪法对生命科学的重大贡献之一,向体内引入适当的同位素标记物,在不同时间测定物质中同位素含量的变化,就能了解该物质在体内的变动情况,定量计算出体内物质的代谢率,计算出物质的更新速度和更新时间等等。第11页,此课件共15页哦 在放射性同
6、位素示踪技术被应用之前,由于制备样品时的丢失而造成回收率低以及测量灵敏度不高等问题,使得对机体正常功能起很重要作用的微量物质不易被测定。近年来迅速发展、应用愈来愈广泛的放射免疫分(radioimmunoassay)技术是一种超微量的分析方法,它可测定的物质300多种,其中激素类居多,包括类固醇激素,多肽类激素,非肽类激素,蛋白质物质,环核苷酸,酶,肿瘤相关的抗原,抗体以及病原体,微量药物等其它物质。第12页,此课件共15页哦 放射性同位素示踪技术,是分子生物学研究中的重要手段之一,对蛋白质生物合成的研究,从DNA复制、RNA转录到蛋白质翻译均起了很大的作用。为了更好地应用放射性同位素示踪技术,除了有赖于示踪剂的高质量和核探测器的高灵敏度外,关键还在于有科学根据的设想和创造性的实验设计以及各种新技术的综合应用。第13页,此课件共15页哦 谢谢观看第14页,此课件共15页哦感谢大家观看感谢大家观看第15页,此课件共15页哦