动物细胞与组织培养成体干细胞讲稿.ppt

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1、动物细胞与组织培养成体动物细胞与组织培养成体干细胞干细胞第一页，讲稿共四十一页哦一、概 论l2020世纪初，世纪初，PappenheimPappenheim等首次提出了等首次提出了成体干细成体干细胞胞的概念。的概念。l胚胎干细胞继续进行分化，形成具有特定功能胚胎干细胞继续进行分化，形成具有特定功能的干细胞，这些专门化的干细胞统称的干细胞，这些专门化的干细胞统称多能干细多能干细胞。胞。l在胎儿、儿童和成人组织中存在的多能干细胞在胎儿、儿童和成人组织中存在的多能干细胞统称统称“成体干细胞（成体干细胞（Adult stem cellAdult stem cell）”。l如血液干细胞可分化成白细胞、红

2、细胞和血小如血液干细胞可分化成白细胞、红细胞和血小板板;皮肤干细胞可形成各种不同类型的皮肤细皮肤干细胞可形成各种不同类型的皮肤细胞。胞。第二页，讲稿共四十一页哦 成体干细胞成体干细胞是指一群分布在成体组织中尚未分化是指一群分布在成体组织中尚未分化的、具有自我更新、并负有构建和补充某种组织的各的、具有自我更新、并负有构建和补充某种组织的各种类型细胞潜能的干细胞种类型细胞潜能的干细胞 1997 1997年年WilmutWilmut用体外培养的、高度分化的母羊乳腺用体外培养的、高度分化的母羊乳腺细胞核移植入去核卵细胞，克隆出了新绵羊细胞核移植入去核卵细胞，克隆出了新绵羊“DollyDolly”克隆羊

3、的诞生表明：高度分化的体细胞仍具有完整克隆羊的诞生表明：高度分化的体细胞仍具有完整的遗传信息，能重新编排发育程序，指导胚胎发育成为的遗传信息，能重新编排发育程序，指导胚胎发育成为一个完整的新个体。一个完整的新个体。第三页，讲稿共四十一页哦 成体干细胞具有跨越组织或胚层分化的特性称为成体干细胞的可塑性或横向分化l2001年斯坦福大学的年斯坦福大学的Blau博士等人对成体博士等人对成体干细胞提出了一个全新的概念：干细胞提出了一个全新的概念：成体干细成体干细胞是来自许多不同类型细胞（包括已分化胞是来自许多不同类型细胞（包括已分化细胞）的一种细胞）的一种“状态状态”，这类细胞不仅存这类细胞不仅存在特定

4、组织中，还可通过血液到达躯体的在特定组织中，还可通过血液到达躯体的各个部分，参与各种组织的再生和修复各个部分，参与各种组织的再生和修复第四页，讲稿共四十一页哦l成体干细胞是一种处于尚未分化的、处于成体干细胞是一种处于尚未分化的、处于干细胞干细胞/祖细胞祖细胞/前体细胞状态的成体细胞前体细胞状态的成体细胞，它来源于成年和未成年个体的组织干细，它来源于成年和未成年个体的组织干细胞。胞。l在正常生理条件下，它倾向于更新、并分在正常生理条件下，它倾向于更新、并分化为所在特定组织的若干种细胞。化为所在特定组织的若干种细胞。l但在特殊条件诱导下，成体干细胞能超越但在特殊条件诱导下，成体干细胞能超越特定组织

5、、分化呈其他组织的功能性细胞特定组织、分化呈其他组织的功能性细胞，参与其他损伤组织的修复，参与其他损伤组织的修复第五页，讲稿共四十一页哦 最近几年的研究表明，这些干细胞的分化能力远最近几年的研究表明，这些干细胞的分化能力远 超过传统观点局限的范围。超过传统观点局限的范围。例如骨髓成体干细胞在合适的体内外环境中可长期生长，也例如骨髓成体干细胞在合适的体内外环境中可长期生长，也可分化为成骨细胞可分化为成骨细胞 、软骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、脂肪细胞 、平滑肌细胞、平滑肌细胞 、成纤维细胞、骨髓基质细胞及多种血管内皮细胞。还可形成成纤维细胞、骨髓基质细胞及多种血管内皮细胞。还可形成一种肝脏前体细胞

6、肝卵园细胞，神经、胶质细胞和心肌细一种肝脏前体细胞肝卵园细胞，神经、胶质细胞和心肌细胞。胞。高度纯化的造血干细胞可分化形成肝细胞、内皮细胞和心肌高度纯化的造血干细胞可分化形成肝细胞、内皮细胞和心肌细胞；骨骼肌细胞能分化出造血细胞；中枢神经系统干细胞细胞；骨骼肌细胞能分化出造血细胞；中枢神经系统干细胞可形成血液细胞、肌肉和许多其它体细胞。可形成血液细胞、肌肉和许多其它体细胞。成体干细胞这种跨系统分化特性称为成体干细胞这种跨系统分化特性称为“可塑性（可塑性（Plasticity）”。第六页，讲稿共四十一页哦二、成体干细胞的可塑性1、骨髓干细胞、骨髓干细胞各种血细胞各种血细胞内皮细胞内皮细胞脂肪细胞

7、脂肪细胞成纤维细胞成纤维细胞HSC和和MSC的分化全能具有很大的可塑性，可分化为甚的分化全能具有很大的可塑性，可分化为甚至跨越胚层的各种类型细胞，如神经细胞、软骨细胞，至跨越胚层的各种类型细胞，如神经细胞、软骨细胞，骨细胞，干细胞、肌肉细胞等不同类型的细胞骨细胞，干细胞、肌肉细胞等不同类型的细胞间质干细胞（间质干细胞（MSC）造血干细胞（造血干细胞（HSC）骨髓干细胞骨髓干细胞第七页，讲稿共四十一页哦a.间质干细胞间质干细胞 间质干细胞在体外培养时，可分化为内皮细间质干细胞在体外培养时，可分化为内皮细胞、脂肪细胞、成纤维细胞、软骨细胞、骨细胞胞、脂肪细胞、成纤维细胞、软骨细胞、骨细胞、肌肉等细

8、胞的潜能、肌肉等细胞的潜能 MSC MSC细胞在异常环境中，细胞分化的可塑性细胞在异常环境中，细胞分化的可塑性增加增加第八页，讲稿共四十一页哦b.造血干细胞造血干细胞 造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。HSC HSC表面存在一些标志，可用流式细胞仪和免疫磁性分表面存在一些标志，可用流式细胞仪和免疫磁性分选技术从骨髓细胞中分离和纯化出选技术从骨髓细胞中分离和纯化出HSCHSC。HSC HSC移植到不同的环境可分化为各种不同类型细胞。移植到不同的环境可分化为各种不同类型细胞。造血干细胞

9、的移植造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。第九页，讲稿共四十一页哦 神经干细胞神经干细胞是神经系统中一类能自我更新、并产是神经系统中一类能自我更新、并产生神经原和神经胶质细胞的前体细胞生神经原和神经胶质细胞的前体细胞 2、神经干细胞、神经干细胞神经干细胞等只能向一种类型神经干细胞等只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞或密切相关的两种类型的细胞分化。分化。说明成体干细胞的分化说明成体干细胞的分化潜能已经受到一定限制。潜能已经受到一定限制。第十页，讲稿共四十一

10、页哦 神经干细胞移植发现，神经干细胞分化为神神经干细胞移植发现，神经干细胞分化为神经细胞的潜能具有发育的依赖性，说明神经干细经细胞的潜能具有发育的依赖性，说明神经干细胞的分化潜能已受到一定的限制。但体外培养移胞的分化潜能已受到一定的限制。但体外培养移植试验表明在一定的为环境下仍有可塑性。植试验表明在一定的为环境下仍有可塑性。1999 1999年年BjounsonBjounson将神经干细胞分化成造血细胞。开将神经干细胞分化成造血细胞。开创了成体干细胞跨越组织和胚层分化研究的先例。创了成体干细胞跨越组织和胚层分化研究的先例。神经干细胞的可塑性神经干细胞的可塑性第十一页，讲稿共四十一页哦 神经干细

11、胞的分布神经干细胞的分布 神经管形成以前神经管形成以前,在整个神经板检测到神经干细胞的在整个神经板检测到神经干细胞的选择性标记物神经巢蛋白选择性标记物神经巢蛋白(nestin)nestin),是细胞的骨架蛋白。是细胞的骨架蛋白。神经干细胞主要存在于神经发生区：海马回和次脑室区神经干细胞主要存在于神经发生区：海马回和次脑室区,此此外，成年嗅球、皮层、室管膜层或者室管膜下层、纹状体、外，成年嗅球、皮层、室管膜层或者室管膜下层、纹状体、海马的齿状回颗粒细胞下层等脑组织中分布着神经干细胞。海马的齿状回颗粒细胞下层等脑组织中分布着神经干细胞。研究发现脊髓、隔区也分离出神经干细胞研究发现脊髓、隔区也分离出

12、神经干细胞 脊髓损伤时脊髓损伤时,来自于神经干细胞的神经元新生受到抑制来自于神经干细胞的神经元新生受到抑制,而而神经胶质细胞明显增多神经胶质细胞明显增多,其机制可能与生成神经元的微环境有关其机制可能与生成神经元的微环境有关。第十二页，讲稿共四十一页哦3、肝干细胞l19581958年年WilsonWilson等认为肝组织中存在着干细等认为肝组织中存在着干细胞，因为肝组织均有营养损伤和部分切除胞，因为肝组织均有营养损伤和部分切除时再生能力。时再生能力。l肝卵圆细胞能在体外大量增值，细胞移植肝卵圆细胞能在体外大量增值，细胞移植后可分化为肝细胞和胆管上皮细胞，后可分化为肝细胞和胆管上皮细胞，表明表明肝

13、卵圆细胞是肝干细胞肝卵圆细胞是肝干细胞。第十三页，讲稿共四十一页哦肝干细胞的可塑性l肝干细胞移植到胰腺和十二指肠时可分化肝干细胞移植到胰腺和十二指肠时可分化胰腺细胞和肠上皮细胞，胰腺细胞和肠上皮细胞，表明肝干细胞在表明肝干细胞在适当的微环境中能被诱导分化为内胚层的适当的微环境中能被诱导分化为内胚层的其他组织细胞。其他组织细胞。l丁酸钠或二甲亚砜丁酸钠或二甲亚砜可诱导肝干细胞分化为可诱导肝干细胞分化为肝细胞肝细胞l转化生长因子（转化生长因子（TGF-bata）或肝细胞生长或肝细胞生长因子（因子（HGF）可诱导肝干细胞分化为胆上可诱导肝干细胞分化为胆上皮细胞皮细胞第十四页，讲稿共四十一页哦4、骨骼

14、肌干细胞l肌肉的生长、更新和修复是由肌纤维周围的肌肉的生长、更新和修复是由肌纤维周围的卫星细胞卫星细胞介导的介导的即骨骼肌干细胞即骨骼肌干细胞l骨骼肌干细胞不仅可分化为肌肉，而且可分骨骼肌干细胞不仅可分化为肌肉，而且可分化为血液细胞成分。化为血液细胞成分。具有分化的可塑性具有分化的可塑性第十五页，讲稿共四十一页哦四、成体干细胞的体外培养和特性l1 1、骨髓间质干细胞、骨髓间质干细胞l半世纪来造血干细胞移植治疗血液病、自半世纪来造血干细胞移植治疗血液病、自身免疫病和遗传疾病取得瞩目的进展。身免疫病和遗传疾病取得瞩目的进展。l间质干细胞（间质干细胞（MSCMSC）能向软骨、骨、脂肪、能向软骨、骨、

15、脂肪、造血基质和神经原样等细胞分化。造血基质和神经原样等细胞分化。使其首使其首选为组织工程中的种子细胞。选为组织工程中的种子细胞。lMSCMSC主要来源于骨髓，还可来源于脂肪组织主要来源于骨髓，还可来源于脂肪组织吸取物（吸取物（PLAPLA）第十六页，讲稿共四十一页哦2、造血干细胞l造血干细胞来源于胚胎期的肝脏和骨髓。造血干细胞来源于胚胎期的肝脏和骨髓。l全能造血干细胞可分化为多能淋巴干细胞全能造血干细胞可分化为多能淋巴干细胞和髓性造血干细胞和髓性造血干细胞l全能造血干细胞全能造血干细胞 造血祖细胞造血祖细胞 造血前体细胞造血前体细胞l判断造血干细胞通常用判断造血干细胞通常用体内间接法。体内间

16、接法。l脾脏中脾脏中造血灶造血灶称为称为集落形成单位集落形成单位（CFUCFU）l造血干细胞的造血干细胞的表面抗原表面抗原CD34 CD34 为强阳性为强阳性第十七页，讲稿共四十一页哦3、神经干细胞 神经干细胞体外培养和建系，必须满足神经干细胞体外培养和建系，必须满足两两个基本条件：个基本条件：1.1.具有永生化特性具有永生化特性 2.2.具有神经干细胞世系遗传明显特性，具有神经干细胞世系遗传明显特性，即神经干细胞表型。即神经干细胞表型。第十八页，讲稿共四十一页哦 神经干细胞的特点神经干细胞的特点 神经干细胞可以分化神经干细胞可以分化通过分裂产生相同的神经干细胞来维持自身的存在通过分裂产生相同

17、的神经干细胞来维持自身的存在,同时同时,也能产生子细胞并进一步分化成各种成熟细胞也能产生子细胞并进一步分化成各种成熟细胞神经干细胞通过两种方式生长神经干细胞通过两种方式生长,一种是对称分裂一种是对称分裂,形形成两个相同的神经干细胞成两个相同的神经干细胞;另一种是非对称分裂另一种是非对称分裂,由于由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀的分配细胞质中的调节分化蛋白不均匀的分配,使得使得一个子细一个子细胞不可逆的走向分化的终端而成为功能专一的分化细胞胞不可逆的走向分化的终端而成为功能专一的分化细胞,另一另一个子细胞则保持亲代的特征个子细胞则保持亲代的特征,仍作为神经干细胞保留下来。仍作为神经干细胞保留下来

18、。分分化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数控制。化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数控制。第十九页，讲稿共四十一页哦神经干细胞神经干细胞l由于分离神经干细胞所需的胎儿脑组织较难取材，由于分离神经干细胞所需的胎儿脑组织较难取材，加之胚胎细胞研究的争议尚未平息，神经干细胞的加之胚胎细胞研究的争议尚未平息，神经干细胞的研究仍处于初级阶段。研究仍处于初级阶段。l理论上讲，任何一种中枢神经系统疾病都可归结为神经理论上讲，任何一种中枢神经系统疾病都可归结为神经干细胞功能的紊乱。干细胞功能的紊乱。脑和脊髓由于血脑屏障的存在使之在脑和脊髓由于血脑屏障的存在使之在干细胞移植到中枢神经系统后不会产生免

19、疫排斥反应。如干细胞移植到中枢神经系统后不会产生免疫排斥反应。如：给帕金森氏综合症患者的脑内移植含有多巴胺生成细胞：给帕金森氏综合症患者的脑内移植含有多巴胺生成细胞的神经干细胞，可治愈部分患者症状。的神经干细胞，可治愈部分患者症状。第二十页，讲稿共四十一页哦五、成体干细胞研究中的问题 1 1、异质性、异质性l可塑性可能是由于混杂的几种和不同类干细胞分化的可塑性可能是由于混杂的几种和不同类干细胞分化的结果结果l一些干细胞可塑性使用，人们质疑所谓一些干细胞可塑性使用，人们质疑所谓“可塑性可塑性”可能可能是混杂几种或一群不同类型干细胞分化的结果是混杂几种或一群不同类型干细胞分化的结果l干细胞的异质性

20、在遗传学种是指由于不同遗传机制干细胞的异质性在遗传学种是指由于不同遗传机制而产生的相同或类似的表现型而产生的相同或类似的表现型l异质性在某种程度上是干细胞固有的特性。异质性在某种程度上是干细胞固有的特性。第二十一页，讲稿共四十一页哦2、干细胞所处环境l干细胞所处的环境对于干细胞的分化命运干细胞所处的环境对于干细胞的分化命运有着重要影响。有着重要影响。l干细胞所处的环境之间精巧而默契的协调干细胞所处的环境之间精巧而默契的协调作用可能是干细胞作用可能是干细胞“可塑性可塑性”的重要原因的重要原因第二十二页，讲稿共四十一页哦 对于干细胞对于干细胞“可塑性可塑性”现象的解释有现象的解释有4 4种：种：l

21、1 1）机体有多种来源和不同分化方向的成体干细胞群体，）机体有多种来源和不同分化方向的成体干细胞群体，能分布定向的向各自来源的细胞分化能分布定向的向各自来源的细胞分化l2 2）机体存在多潜能成体干细胞，微环境导致不同分化方向）机体存在多潜能成体干细胞，微环境导致不同分化方向l3 3）特定组织来源的成体干细胞除分化为特定组织细胞外，可重）特定组织来源的成体干细胞除分化为特定组织细胞外，可重新编程，分化为其他细胞。新编程，分化为其他细胞。l4 4）某种成体干细胞与特定组织来源的干细胞发生融合，产）某种成体干细胞与特定组织来源的干细胞发生融合，产生生“杂交细胞杂交细胞”，获得向后者分化潜能。，获得向

22、后者分化潜能。可塑性的调控受外源性因素和内源性因子调控可塑性的调控受外源性因素和内源性因子调控3 3、可塑性的调控、可塑性的调控第二十三页，讲稿共四十一页哦4、分化细胞的功能l可塑性研究的结果大多是基于检测新生组织的特定可塑性研究的结果大多是基于检测新生组织的特定蛋白或标志物，很少检测分化细胞的功能，但有限蛋白或标志物，很少检测分化细胞的功能，但有限不同细胞具有相同的标志物。不同细胞具有相同的标志物。l欲提供干细胞的终末分还状态，应基于细胞表面标志鉴欲提供干细胞的终末分还状态，应基于细胞表面标志鉴别和细胞功能证明两方面的依据。别和细胞功能证明两方面的依据。l如神经细胞移植后，可塑为血细胞，即要

23、检测起表面如神经细胞移植后，可塑为血细胞，即要检测起表面标志，又要检测其造血的功能。标志，又要检测其造血的功能。第二十四页，讲稿共四十一页哦5、体外增殖l成体干细胞分离后，目前尚无有效的能较长成体干细胞分离后，目前尚无有效的能较长期在体外维持未分化状态并大量增殖的体外期在体外维持未分化状态并大量增殖的体外培养方法。培养方法。l常用的手段：常用的手段：l1 1）分离的干细胞直接移植入动物或病人）分离的干细胞直接移植入动物或病人l2 2）体外将干细胞诱导分化为所需的成熟细）体外将干细胞诱导分化为所需的成熟细胞，随后进行移植。胞，随后进行移植。l如皮肤干细胞移植到烫伤病人，虽可愈合，如皮肤干细胞移植

24、到烫伤病人，虽可愈合，但不能产生汗腺。但不能产生汗腺。第二十五页，讲稿共四十一页哦六、成体干细胞在再生医学中的应用l在医学中，可利用成体干细胞于创伤修复在医学中，可利用成体干细胞于创伤修复、疾病的细胞治疗、整形外科学和组织工、疾病的细胞治疗、整形外科学和组织工程学等需要程学等需要l组织工程的核心是由种子细胞和生物活性组织工程的核心是由种子细胞和生物活性材料构成三维空间复合体材料构成三维空间复合体l具有足够数量并保持特定生物学活性的重具有足够数量并保持特定生物学活性的重组细胞是组织工程最基本的要素。组细胞是组织工程最基本的要素。第二十六页，讲稿共四十一页哦通过组织工程构建的组织，不仅能对病损组织

25、进通过组织工程构建的组织，不仅能对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代的行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代的目的，而且还可以随着身体生长的变化而一同变目的，而且还可以随着身体生长的变化而一同变化。化。第二十七页，讲稿共四十一页哦1、组织工程化皮肤l完全克隆是皮肤真正的干细胞，具有超常完全克隆是皮肤真正的干细胞，具有超常的自我更新能力，可被作为皮肤移植的种的自我更新能力，可被作为皮肤移植的种子细胞，且子细胞，且P63P63蛋白是角质细胞干细胞的标蛋白是角质细胞干细胞的标志物志物第二十八页，讲稿共四十一页哦2、组织化骨骼l骨骼涉及三维立体结构，所需组织包括骨骨骼涉及三维立体结构

26、，所需组织包括骨、软骨、脂肪、血发生支持基质等。必须、软骨、脂肪、血发生支持基质等。必须由适当的生物活性材料构建成三维支架进由适当的生物活性材料构建成三维支架进行培养行培养第二十九页，讲稿共四十一页哦3、骨髓组织工程l骨髓至少含两类干细胞（骨髓至少含两类干细胞（HSC和和SSC）l能产生血管、骨、软骨、骨骼肌、心肌、能产生血管、骨、软骨、骨骼肌、心肌、肝以及神经细胞等肝以及神经细胞等l在组织工程中常在组织工程中常优先考虑作为种子细胞来优先考虑作为种子细胞来源。源。l优点：容易收集，具有明显的表面标志物优点：容易收集，具有明显的表面标志物第三十页，讲稿共四十一页哦七、成体干细胞的去向l成体干细胞

27、经常位于特定的微环境中。微成体干细胞经常位于特定的微环境中。微环境中的间质细胞能够产生一系列环境中的间质细胞能够产生一系列生长因生长因子或配体，子或配体，与干细胞相互作用，控制干细与干细胞相互作用，控制干细胞的去向。胞的去向。l或者产生新的干细胞。或者产生新的干细胞。l或者按一定的程序分化，形成新的功能细或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡动态平衡 。第三十一页，讲稿共四十一页哦（1 1）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控:细胞细胞的结构蛋白，特别是细胞骨架成分对细胞的结构蛋白，特别是细胞骨

28、架成分对细胞的发育非常重要。收缩体与纺锤体的结合的发育非常重要。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位。决定了干细胞分裂的部位。（2 2）转录因子的调控）转录因子的调控 1.1.内源性调控内源性调控第三十二页，讲稿共四十一页哦2.外源性调控（1 1）分泌因子分泌因子 间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。分化和存活。（2 2）膜蛋白介导的细胞间的相互作用膜蛋白介导的细胞间的相互作用 有些信号是通过细胞有些信号是通过细胞-细胞的直接接触起作用的细胞的直接接触起作用的。（3 3）整合素与细胞外基质整合素与细胞外基质 整合素家族是介导

29、干细胞与细胞外基质粘附的最主整合素家族是介导干细胞与细胞外基质粘附的最主要的分子。整合素与其配体的相互作用为干细胞的非要的分子。整合素与其配体的相互作用为干细胞的非分化增殖提供了适当的微环境。分化增殖提供了适当的微环境。第三十三页，讲稿共四十一页哦八、成体干细胞优势1 1、成体干细胞可从患者自身获得，而成体干细胞可从患者自身获得，而不存在组织相容不存在组织相容性的问题，性的问题，治疗时可避免长期应用免疫抑制剂对患者治疗时可避免长期应用免疫抑制剂对患者的伤害。的伤害。l胚胎干细胞免疫排斥胚胎干细胞免疫排斥，因此要对患者进行长期免疫抑，因此要对患者进行长期免疫抑制剂治疗或将患者的造血系统和外来细胞

30、形成嵌合制剂治疗或将患者的造血系统和外来细胞形成嵌合体。体。l治疗性克隆治疗性克隆：将患者的体细胞核移植到去核的健康供体卵：将患者的体细胞核移植到去核的健康供体卵细胞中，在体外克隆并随后发育分化产生携带患者自己细胞中，在体外克隆并随后发育分化产生携带患者自己MHCMHC的胚胎干细胞。的胚胎干细胞。l胚胎干细胞发育分化过程中极高的非整倍体发生率。胚胎干细胞发育分化过程中极高的非整倍体发生率。l体细胞克隆所需的卵细胞难以获得。体细胞克隆所需的卵细胞难以获得。第三十四页，讲稿共四十一页哦 2、胚胎干细胞能分化成各种细胞类型，、胚胎干细胞能分化成各种细胞类型，但这种分化但这种分化是是“非定位性非定位性

31、”的的。当前的做。当前的做法法容易导致畸胎瘤。容易导致畸胎瘤。l在应用胚胎干细胞治疗前，必须先进行初在应用胚胎干细胞治疗前，必须先进行初步的细胞诱导分化，以防止畸胎瘤的发生步的细胞诱导分化，以防止畸胎瘤的发生。也必须确认胚胎干细胞供者没有诸如（。也必须确认胚胎干细胞供者没有诸如（肌）营养失调症之类的遗传性疾病。肌）营养失调症之类的遗传性疾病。l相对而言，相对而言，成体干细胞不存在上述问题，成体干细胞不存在上述问题，例如骨髓移植实验并不引发畸胎瘤。例如骨髓移植实验并不引发畸胎瘤。第三十五页，讲稿共四十一页哦 3、成体干细胞也具有类胚、成体干细胞也具有类胚胎干细胞的高胎干细胞的高度分化能力度分化能

32、力l有科学家提出了成体干细胞研究的新假说有科学家提出了成体干细胞研究的新假说，即在人体发育的过程中，成体干细胞是，即在人体发育的过程中，成体干细胞是存留在多种组织中、具有多系分化能力的存留在多种组织中、具有多系分化能力的亚全能干细胞群体，这些细胞都具有相同亚全能干细胞群体，这些细胞都具有相同或相似的细胞表型，在适合的微环境下可或相似的细胞表型，在适合的微环境下可分化成多种组织细胞。分化成多种组织细胞。l成体干细胞移植是治疗血液系统疾病、先成体干细胞移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。瘤疾病的最有效方法。第三十六页

33、，讲稿共四十一页哦五、干细胞技术应用 1.1.疾病治疗疾病治疗l研究干细胞增殖和分化机制的最终目的是应用研究干细胞增殖和分化机制的最终目的是应用干细胞治疗疾病。理论上讲，干细胞可以用于干细胞治疗疾病。理论上讲，干细胞可以用于各种疾病的治疗，但其最适合的疾病主要是组各种疾病的治疗，但其最适合的疾病主要是组织坏死性疾病如缺血引起的心肌坏死，退行性织坏死性疾病如缺血引起的心肌坏死，退行性病变如帕金森综合症，自体免疫性疾病如胰岛病变如帕金森综合症，自体免疫性疾病如胰岛素依赖型糖尿病等。素依赖型糖尿病等。第三十七页，讲稿共四十一页哦 2.2.体外制造人体器官体外制造人体器官l干细胞和动物工程的结合将有可

34、能解决这干细胞和动物工程的结合将有可能解决这一问题。一问题。l比如通过形成嵌合体，在严格的控制下，比如通过形成嵌合体，在严格的控制下，使动物的某些器官来源于人体干细胞。这使动物的某些器官来源于人体干细胞。这些来自人体干细胞的器官可应用于临床移些来自人体干细胞的器官可应用于临床移植治疗。植治疗。第三十八页，讲稿共四十一页哦（1 1）应用干细胞治疗疾病有着广泛的前景。）应用干细胞治疗疾病有着广泛的前景。干细胞的应用涉及到医学的多个领域。干细胞的应用涉及到医学的多个领域。目前，在干细胞生物学上已能在体外鉴别、分离纯化、扩目前，在干细胞生物学上已能在体外鉴别、分离纯化、扩增和培养人体胚胎干细胞、原始生

35、殖干细胞以及多种组织干增和培养人体胚胎干细胞、原始生殖干细胞以及多种组织干细胞。用干细胞治疗疾病的设想已进入实践检验。细胞。用干细胞治疗疾病的设想已进入实践检验。造血干细胞工程产品如骨髓、扩增及定向诱导分化的造血细造血干细胞工程产品如骨髓、扩增及定向诱导分化的造血细胞和免疫细胞、转基因的基质细胞等，已经进入临床应用。胞和免疫细胞、转基因的基质细胞等，已经进入临床应用。造血干细胞移植已成为治疗白血病、各种恶性肿瘤放、化造血干细胞移植已成为治疗白血病、各种恶性肿瘤放、化疗后引起的造血和免疫系统功能障碍等疾病的重要手段。疗后引起的造血和免疫系统功能障碍等疾病的重要手段。干细胞技术对医学研究和治疗技术

36、将产干细胞技术对医学研究和治疗技术将产生重大影响生重大影响：第三十九页，讲稿共四十一页哦组织工程是利用细胞培养技术在体外人工控制细组织工程是利用细胞培养技术在体外人工控制细胞分化、增殖并生长成需要的组织，使之批量产出，胞分化、增殖并生长成需要的组织，使之批量产出，用来修补由于意外损伤等引起功能丧失的体内组织，用来修补由于意外损伤等引起功能丧失的体内组织，满足临床康复的需要，并有可能对一些目前尚无根治满足临床康复的需要，并有可能对一些目前尚无根治办法的疾病，如恶性肿瘤、帕金森病、中风等提供解办法的疾病，如恶性肿瘤、帕金森病、中风等提供解决方案。以干细胞工程为代表的现代组织工程是一个决方案。以干细

37、胞工程为代表的现代组织工程是一个迅速发展的新领域。迅速发展的新领域。（2 2）干细胞为解决组织工程所需要的细胞）干细胞为解决组织工程所需要的细胞带来了希望。带来了希望。第四十页，讲稿共四十一页哦体外克隆人体器官应用于临床移植治疗是干细胞体外克隆人体器官应用于临床移植治疗是干细胞研究的重要方向。其目标是用病人的体细胞移植到去研究的重要方向。其目标是用病人的体细胞移植到去核的卵母细胞内，经过一定的处理使其发育成囊胚，核的卵母细胞内，经过一定的处理使其发育成囊胚，再利用囊胚建立胚胎干细胞，在体外进行诱导分化成再利用囊胚建立胚胎干细胞，在体外进行诱导分化成特定的组织或器官，再将这些组织或器官移植到病人特定的组织或器官，再将这些组织或器官移植到病人身上。从理论上讲，利用干细胞技术，将从根本上解身上。从理论上讲，利用干细胞技术，将从根本上解决同种异体器官移植过程中最难的免疫排斥反应问题决同种异体器官移植过程中最难的免疫排斥反应问题，同时还较好地解决了组织器官的来源问题。，同时还较好地解决了组织器官的来源问题。（3 3）利用干细胞技术体外克隆人体器官用于临床移植）利用干细胞技术体外克隆人体器官用于临床移植治疗，将引起传统治疗方式的重大变革。治疗，将引起传统治疗方式的重大变革。第四十一页，讲稿共四十一页哦