微生物发酵培养基.ppt

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1、现在学习的是第1页，共75页l 微生物的营养活动，是依靠向外界分泌大量的微生物的营养活动，是依靠向外界分泌大量的酶将周围环境中大分子的蛋白质、糖类、脂肪等酶将周围环境中大分子的蛋白质、糖类、脂肪等营养物质分解成小分子化合物，再借助细胞膜的渗营养物质分解成小分子化合物，再借助细胞膜的渗透作用，吸收这些小分子营养来实现的。透作用，吸收这些小分子营养来实现的。l 所有发酵培养基都必须提供微生物生长繁殖和产物合所有发酵培养基都必须提供微生物生长繁殖和产物合成所需的能源，包括碳源、氮源、无机元素、生长因成所需的能源，包括碳源、氮源、无机元素、生长因子及水、氧气等。对于大规模发酵生产，除考虑上述子及水、氧

2、气等。对于大规模发酵生产，除考虑上述微生物的需要外，还必须重视培养基原料的价格和来微生物的需要外，还必须重视培养基原料的价格和来源。源。现在学习的是第2页，共75页l 自养菌：光；氢，硫胺；亚硝酸盐，亚铁盐。自养菌：光；氢，硫胺；亚硝酸盐，亚铁盐。l 异养菌：碳水化合物等有机物，石油天然气和异养菌：碳水化合物等有机物，石油天然气和 石油化工产品，如醋酸石油化工产品，如醋酸。（1）能源现在学习的是第3页，共75页l 碳酸气；碳酸气；l 淀粉水解糖，糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等淀粉水解糖，糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等l 石油、正构石蜡，天然气石油、正构石蜡，天然气l 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品醋酸、甲

3、醇、乙醇等石油化工产品（2）碳源：现在学习的是第4页，共75页l 豆饼或蚕蛹水解液，味精废液，玉米浆，酒糟水豆饼或蚕蛹水解液，味精废液，玉米浆，酒糟水等有机氮等有机氮l 尿素，硫酸铵，氨水，硝酸盐等无机氮尿素，硫酸铵，氨水，硝酸盐等无机氮l 气态氮气态氮（3）氮源现在学习的是第5页，共75页(4)(4)无机盐无机盐l 磷酸盐，钾盐，镁盐，钙盐等其他矿盐磷酸盐，钾盐，镁盐，钙盐等其他矿盐l 铁、锰、钴等微量元素铁、锰、钴等微量元素l 其他其他（5 5）特殊生长因子）特殊生长因子 硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌醇等硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌醇等现在学习的是第6页，共75页l 筛选菌种筛选菌

4、种l 保藏菌种保藏菌种l 检验杂菌检验杂菌l 培养种子培养种子l 发酵发酵生产生产现在学习的是第7页，共75页（1 1）按培养基组成物质的化学成分）按培养基组成物质的化学成分 合成培养基、半合成培养基、天然培养基。合成培养基、半合成培养基、天然培养基。（2 2）按物理性质）按物理性质 固体培养基，液体培养基固体培养基，液体培养基（3 3）按用途）按用途 选择性培养基、鉴别培养基、富集培养基等选择性培养基、鉴别培养基、富集培养基等现在学习的是第8页，共75页（1 1）天然培养基）天然培养基 采用化学成分还不清楚或化学成分还不恒采用化学成分还不清楚或化学成分还不恒定的各种植物和动物组织或微生物的浸

5、出物、定的各种植物和动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质水解液等物质(例如牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、蛋例如牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、蛋白胨等白胨等)制成的。制成的。适合于各类异养微生物生长，而一般自养适合于各类异养微生物生长，而一般自养微生物都不能生长。微生物都不能生长。现在学习的是第9页，共75页 用化学成分和数量完全了解的物质配制而成用化学成分和数量完全了解的物质配制而成的。成分精确，重复性强，可以减少不能控制的的。成分精确，重复性强，可以减少不能控制的因素因素 适用于在实验室范围作有关营养、代谢、分适用于在实验室范围作有关营养、代谢、分类鉴定、生物测定及选育菌种、遗传分析等定量类鉴定、生物

6、测定及选育菌种、遗传分析等定量研究工作。研究工作。但一般微生物在合成培养基上生长较慢，有但一般微生物在合成培养基上生长较慢，有些微生物营养要求复杂，在合成培养基上不能生些微生物营养要求复杂，在合成培养基上不能生长。长。现在学习的是第10页，共75页 多数培养基配制是采用一部分天然有机物作多数培养基配制是采用一部分天然有机物作碳源、氮源和生长因子的来源，再适当加入一些碳源、氮源和生长因子的来源，再适当加入一些化学药品以补充无机盐成分，使其更能充分满足化学药品以补充无机盐成分，使其更能充分满足微生物对营养的需要。微生物对营养的需要。大多数微生物都能在此培养基上生长繁殖。大多数微生物都能在此培养基上

7、生长繁殖。因此，在微生物工业生产上和试验研究中被广泛因此，在微生物工业生产上和试验研究中被广泛使用。使用。现在学习的是第11页，共75页（4 4）液体培养基：液体培养基：l 常用于大规模的工业生产及生理代谢等基 本理论研究工作。l 发酵工业多用作培养种子和发酵的培养基。l 根据微生物对氧的要求情况，分别作静止 或通风搅拌培养。l 在菌种筛选工作和菌种培养工作中，也常 用液体培养基进行摇瓶培养l 微生物在液体培养基中生长的情况有时也 可用作鉴定菌种的参考。现在学习的是第12页，共75页生理代谢菌种筛选种子培养发酵培养现在学习的是第13页，共75页（5 5）固体培养基固体培养基是在液体培养基中加入

8、凝固剂配成的，最常用的凝固剂是琼脂。可分为：斜面试管、平板等现在学习的是第14页，共75页作用：作用：l 固体培养基在菌种的分离、保固体培养基在菌种的分离、保藏、菌落特征的观察、活菌计藏、菌落特征的观察、活菌计数和鉴定菌种方面是不可缺少数和鉴定菌种方面是不可缺少的。的。l 在制曲、酶制剂、柠檬酸等生产在制曲、酶制剂、柠檬酸等生产中，用来培养霉菌等的固体种子中，用来培养霉菌等的固体种子和发酵培养基是由麸皮等农作物和发酵培养基是由麸皮等农作物加无机元素等制成的。加无机元素等制成的。现在学习的是第15页，共75页（6 6）增殖培养基：）增殖培养基：可以配制成适合某种微生物生长而不适合其他可以配制成适

9、合某种微生物生长而不适合其他微生物生长，从而达到从自然界分离这种微生物微生物生长，从而达到从自然界分离这种微生物的目的。的目的。（7 7）鉴别培养基：）鉴别培养基：是根据微生物能否利用培养基中某种营养成分，是根据微生物能否利用培养基中某种营养成分，借助指示剂的显色反应，以鉴别不同种类的微生物。借助指示剂的显色反应，以鉴别不同种类的微生物。（8 8）选择培养基：）选择培养基：是在培养基内加入某种化学物质以抑制不需要菌是在培养基内加入某种化学物质以抑制不需要菌的生长，而促进某种需要菌的生长。的生长，而促进某种需要菌的生长。现在学习的是第16页，共75页工业发酵中培养基往往是依据生产流程和作用工业发

10、酵中培养基往往是依据生产流程和作用分为：分为：l斜面培养基l种子培养基l发酵培养基l摇瓶培养基现在学习的是第17页，共75页 作用：作用：供微生物细胞生长繁殖用的，包括细菌，酵母等的供微生物细胞生长繁殖用的，包括细菌，酵母等的斜面培养基以及霉菌、放线菌生孢子培养基或麸曲培养斜面培养基以及霉菌、放线菌生孢子培养基或麸曲培养基等。这类培养基主要作用是供给细胞生长繁殖所需的基等。这类培养基主要作用是供给细胞生长繁殖所需的各类营养物质。各类营养物质。现在学习的是第18页，共75页特点：特点：l 富含有机氮源，少含或不含糖分。有机氮有利于菌富含有机氮源，少含或不含糖分。有机氮有利于菌体的生长繁殖，能获得

11、更多的细胞。体的生长繁殖，能获得更多的细胞。l 对于放线菌或霉菌的产孢子培养基，则氮源和碳源均对于放线菌或霉菌的产孢子培养基，则氮源和碳源均不宜太丰富，否则容易长菌丝而较少形成孢子。不宜太丰富，否则容易长菌丝而较少形成孢子。l 斜面培养基中宜加少量无机盐类，供给必要的生斜面培养基中宜加少量无机盐类，供给必要的生长因子和微量元素。长因子和微量元素。现在学习的是第19页，共75页培养种子的目的：培养种子的目的：l 扩大培养，增加细胞数量；扩大培养，增加细胞数量；l 同时也必须培养出强壮、健康、活性高的细同时也必须培养出强壮、健康、活性高的细 胞。为了使细胞迅速进行分裂或菌丝快速生长。胞。为了使细胞

12、迅速进行分裂或菌丝快速生长。现在学习的是第20页，共75页l 必须有较完全和丰富的营养物质，特别需要充足的必须有较完全和丰富的营养物质，特别需要充足的氮源和生长因子。氮源和生长因子。l 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基，可添加一些易被孢子发芽生长用的种子培养基，可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。吸收利用的碳源和氮源。l 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。分相近。种子培养基特点：现在学习的是第21页，共75页 发酵培养基是发酵生产中最主要的培养基，发酵培养基是

13、发酵生产中最主要的培养基，它不仅耗用大量的原材料，而且也是决定发酵生它不仅耗用大量的原材料，而且也是决定发酵生产成功与否的重要因素。产成功与否的重要因素。发酵培养基的选择考虑的因素：发酵培养基的选择考虑的因素：现在学习的是第22页，共75页（1）根据产物合成的特点来设计培养基：对菌体生长与产物相偶联的发酵类型，充分满足细胞生长繁殖的培养基就能获得最大的产物。对于生产氨基酸等含氮的化合物时，它的发酵培养基除供给充足的碳源物质外，还应该添加足够的铵盐或尿素等氮素化合物。现在学习的是第23页，共75页（2 2）发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可）发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可 能高些，这样在

14、同等或相近的转化率条件能高些，这样在同等或相近的转化率条件 下有利于提高单位容积发酵罐的利用率，下有利于提高单位容积发酵罐的利用率，增加经济效益。增加经济效益。（3 3）发酵培养基需耗用大量原料，因此，原料）发酵培养基需耗用大量原料，因此，原料 来源、原材料的质量以及价格等必须予以来源、原材料的质量以及价格等必须予以 重视。重视。现在学习的是第24页，共75页(1)(1)必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。(2)(2)有利于减少培养基原料的单耗，即提高单位营养有利于减少培养基原料的单耗，即提高单位营养 物质所合成产物数量或最大产率。物质所合成

15、产物数量或最大产率。(3)(3)有利于提高培养基和产物的浓度，以提高单位容有利于提高培养基和产物的浓度，以提高单位容 积发酵罐的生产能力。积发酵罐的生产能力。(4)(4)有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期。现在学习的是第25页，共75页(5)(5)尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化。尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化。(6)(6)原料价格低廉，质量稳定，取材容易。原料价格低廉，质量稳定，取材容易。(7)(7)所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的 影响，利于提高氧的利用率，降低能耗。影响，利于提高氧

16、的利用率，降低能耗。(8)(8)有利于产品的分离纯化，并尽可能减少产生有利于产品的分离纯化，并尽可能减少产生“三废三废”的物质。的物质。现在学习的是第26页，共75页1 1、提供必要的营养成分：培养基成分必须满足细、提供必要的营养成分：培养基成分必须满足细胞生长，代谢活动和合成产物所需的基本要求。胞生长，代谢活动和合成产物所需的基本要求。2 2、配制合适的浓度：可以从发酵动力学有关生长、配制合适的浓度：可以从发酵动力学有关生长、产物合成和基质利用物料平衡的关系中大致推算产物合成和基质利用物料平衡的关系中大致推算所需原料或大致计算出所需主要原料的需要量。所需原料或大致计算出所需主要原料的需要量。

17、现在学习的是第27页，共75页3 3、主成分与其他成分的配比。、主成分与其他成分的配比。4 4、控制合适的、控制合适的pHpH：微生物的生长繁殖或产物的合成往：微生物的生长繁殖或产物的合成往往需要往需要定的定的pHpH环境，在最适环境，在最适pHpH值下有利于加快值下有利于加快各种酶的反应。因此在整个发酵过程中应使培养各种酶的反应。因此在整个发酵过程中应使培养基的基的pHpH适合于微生物生长或产物合成所需。适合于微生物生长或产物合成所需。现在学习的是第28页，共75页 pHpH的具体控制方法的具体控制方法l 可以在微生物培养过程中加入酸或碱或流加某些营养可以在微生物培养过程中加入酸或碱或流加某

18、些营养物质调节培养基的物质调节培养基的pHpH，但更应在配制培养基时考虑所，但更应在配制培养基时考虑所用营养物质的组成成分，使其用营养物质的组成成分，使其pHpH值适合该微生物生长值适合该微生物生长或合成代谢产物的需要。或合成代谢产物的需要。l 还要注意有些营养物质被利用后培养基的还要注意有些营养物质被利用后培养基的pHpH变化情况变化情况.现在学习的是第29页，共75页l 控制控制pHpH最常用的方法是在培养基中添加具有一定最常用的方法是在培养基中添加具有一定缓冲能力的物质作为营养物，如以磷酸盐作为磷缓冲能力的物质作为营养物，如以磷酸盐作为磷的成分；或者避免使用容易产生生理酸性或碱性的成分；

19、或者避免使用容易产生生理酸性或碱性使培养基使培养基pHpH波动太大的物质。波动太大的物质。现在学习的是第30页，共75页5 5、避免产生微生物不能利用的物质或形成沉淀、避免产生微生物不能利用的物质或形成沉淀l 葡萄糖与铵盐或氨基酸的氨基在灭菌高温下作用形成葡萄糖与铵盐或氨基酸的氨基在灭菌高温下作用形成深褐色物质。这种物质不被微生物利用。因此这两类深褐色物质。这种物质不被微生物利用。因此这两类营养物不宜直接配在一起进行灭菌，而应采用分开灭营养物不宜直接配在一起进行灭菌，而应采用分开灭菌后再加入发酵罐内。菌后再加入发酵罐内。l 硫酸铵中的硫酸铵中的SOSO4 42-2-与钙盐易形成难溶的硫酸钙，因

20、此与钙盐易形成难溶的硫酸钙，因此二者也不宜直接配成培养基。二者也不宜直接配成培养基。现在学习的是第31页，共75页6 6、注意代谢调节物的影响：、注意代谢调节物的影响：有些物质存在于培养基中往往能明显地促进、有些物质存在于培养基中往往能明显地促进、或抑制发酵产物的形成。或抑制发酵产物的形成。l前体物质l诱导剂l阻遏物l抑制剂l金属离子现在学习的是第32页，共75页l 前作物质：是指当添加到发酵培养基中的某些化学物质基本上不改变其分子结构而直接进入产物中的小分子物质，从而在一定条件下控制产物的合成方向和提高产量。l 在发酵中添加前体物质将有利于产物的合成和显著提高产量，如苯乙酸及其衍生物被认为是

21、青霉素的前体物质。现在学习的是第33页，共75页l 目前工业用微生物酶多数为诱导酶，如蛋白酶、目前工业用微生物酶多数为诱导酶，如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等。淀粉酶、纤维素酶等。l 诱导物的存在能大大强化诱导酶的生物合成。诱导物的存在能大大强化诱导酶的生物合成。l 酶的正常底物或底物的类似物都可作为诱导物。酶的正常底物或底物的类似物都可作为诱导物。l 在各种微生物酶的发酵培养基中必须加入诱在各种微生物酶的发酵培养基中必须加入诱 导物，例如淀粉、糊精或麦芽糖是淀粉酶或导物，例如淀粉、糊精或麦芽糖是淀粉酶或 糖糖化酶的诱导物。只有添加这些物质的培养基，化酶的诱导物。只有添加这些物质的培养基，才能获得

22、高产。才能获得高产。现在学习的是第34页，共75页l 培养基中存在反馈阻遏物或分解阻遏物均能影响酶培养基中存在反馈阻遏物或分解阻遏物均能影响酶的合成，降低发酵产量。的合成，降低发酵产量。l 有些酶的抑制剂却能提高某些代谢产物的产量，最早有些酶的抑制剂却能提高某些代谢产物的产量，最早利用抑制剂提高中间代谢物产量的例子是甘油发酵中利用抑制剂提高中间代谢物产量的例子是甘油发酵中加入亚硫酸钠。加入亚硫酸钠。l 在培养基配制时必须注意加入有益的抑制剂，而在培养基配制时必须注意加入有益的抑制剂，而避免混入有害的抑制物。避免混入有害的抑制物。现在学习的是第35页，共75页7 7、金属离子的影响：、金属离子的

23、影响：l有些种类的发酵生产对金属离子相当敏感，因 为有些金属离子是中间代谢酶的抑制剂或激活 剂。l因此对于有重大影响的金属离子必须严格控制。如柠檬酸发酵中铁、锰和锌离子都能明显影响 产量；钙离子对细菌淀粉酶的生产有促进作 用；钴离子对葡萄糖异构酶的发酵是必需的。这些在培养基配制时都必须予以注意。现在学习的是第36页，共75页l 碳素化合物碳素化合物l 氮素化合物氮素化合物 l 水水 l 微量元素微量元素(无机盐类无机盐类)l 生长因子生长因子 现在学习的是第37页，共75页(a)(a)碳素化合物的作用碳素化合物的作用:l 构成菌体成分的重要元素，构成菌体成分的重要元素，l 产生各种代谢产物和细

24、胞内贮藏物质的主要原料，产生各种代谢产物和细胞内贮藏物质的主要原料，l 同时又是化能异养型微生物的能量来源。同时又是化能异养型微生物的能量来源。现在学习的是第38页，共75页l 糖：单糖中的己糖，寡糖中的蔗糖、麦芽糖、棉糖：单糖中的己糖，寡糖中的蔗糖、麦芽糖、棉子糖，多糖中的淀粉、纤维素、半纤维素、甲壳子糖，多糖中的淀粉、纤维素、半纤维素、甲壳质和果胶质等，其中淀粉是大多数微生物都能利质和果胶质等，其中淀粉是大多数微生物都能利用的碳源。用的碳源。l 有机酸：如糖酸、柠檬酸、反丁烯二酸、琥珀酸、苹有机酸：如糖酸、柠檬酸、反丁烯二酸、琥珀酸、苹果酸、丙酮酸、酒石酸等。果酸、丙酮酸、酒石酸等。注意引

25、起注意引起pHpH变化变化（b）碳源种类现在学习的是第39页，共75页葡萄糖：葡萄糖：l 是最易利用的糖，并且作为加速微生物生长的一种是最易利用的糖，并且作为加速微生物生长的一种有效的糖。有效的糖。l 葡萄糖效应：葡萄糖效应：培养基中含有过多的葡萄糖会抑制微生物的生长培养基中含有过多的葡萄糖会抑制微生物的生长原因：原因：1、过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，以致培、过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，以致培 养基中的溶解氧不能满足需要。养基中的溶解氧不能满足需要。2、葡萄糖代谢产物会产生反馈抑制、葡萄糖代谢产物会产生反馈抑制现在学习的是第40页，共75页l 糖蜜：是制糖厂生产糖时的结晶母液，是蔗

26、糖厂的糖蜜：是制糖厂生产糖时的结晶母液，是蔗糖厂的副产物。含有较丰富的糖、氨素化合物和无机维生副产物。含有较丰富的糖、氨素化合物和无机维生素等，是微生物工业的价廉物美的原料。素等，是微生物工业的价廉物美的原料。注意：注意：不同产地、气候、收获季节、制糖工艺不同，糖不同产地、气候、收获季节、制糖工艺不同，糖蜜的组分也不同蜜的组分也不同l 糖蜜的性质糖蜜的性质 一般为黄褐色或黑褐色，一般为黄褐色或黑褐色，pH5-7.5，略带甜味，有硫，略带甜味，有硫磺火焦糖味，粘稠状磺火焦糖味，粘稠状现在学习的是第41页，共75页l 澄清处理：澄清处理：除灰分（影响纯度）和蛋白（容易产生泡沫）除灰分（影响纯度）和

27、蛋白（容易产生泡沫）硫酸和石灰处理法：硫酸和石灰处理法：稀释（稀释（1：1）调调pH（酸或中性）（酸或中性）加热加热 中中和和 沉淀过滤沉淀过滤 澄清液澄清液l 脱钙：脱钙：Na2CO4 沉淀过滤沉淀过滤l 除生物素除生物素 影响营养缺陷型菌株的生长影响营养缺陷型菌株的生长现在学习的是第42页，共75页l淀粉：一般要经菌体产生的胞外酶水解成单糖后再被淀粉：一般要经菌体产生的胞外酶水解成单糖后再被吸收利用。可克服葡萄代谢过快的弊病。来源丰富，吸收利用。可克服葡萄代谢过快的弊病。来源丰富，价格比较低廉。常用的为玉米淀粉、小麦淀粉和甘薯价格比较低廉。常用的为玉米淀粉、小麦淀粉和甘薯淀。淀。现在学习的

28、是第43页，共75页l 醇类中甘露醇、甘油、低浓度的乙醇。醇类中甘露醇、甘油、低浓度的乙醇。l 脂肪酸如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸等低级脂肪酸都脂肪酸如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸等低级脂肪酸都可用作碳源。油酸和亚油酸等高级脂肪酸可被不少可用作碳源。油酸和亚油酸等高级脂肪酸可被不少放线菌和真菌作为碳源和能源利用，低浓度的高级放线菌和真菌作为碳源和能源利用，低浓度的高级脂肪酸可刺激细菌生长，但浓度较高时往往有毒害脂肪酸可刺激细菌生长，但浓度较高时往往有毒害作用。作用。l 正烷烃：一般是指从石油裂得到的正烷烃：一般是指从石油裂得到的14C14C至至18C18C的直链的直链烷烃混合物。烷烃混合物。现在学习的是

29、第44页，共75页l 糖蜜：是制糖厂生产糖时的结晶母液，是蔗糖厂的糖蜜：是制糖厂生产糖时的结晶母液，是蔗糖厂的副产物。含有较丰富的糖、氨素化合物和无机维生副产物。含有较丰富的糖、氨素化合物和无机维生素等，是微生物工业的价廉物美的原料。素等，是微生物工业的价廉物美的原料。l 淀粉：一般要经菌体产生的胞外酶水解成单糖后淀粉：一般要经菌体产生的胞外酶水解成单糖后再被吸收利用。可克服葡萄代谢过快的弊病。来再被吸收利用。可克服葡萄代谢过快的弊病。来源丰富，价格比较低廉。常用的为玉米淀粉、小源丰富，价格比较低廉。常用的为玉米淀粉、小麦淀粉和甘薯淀。麦淀粉和甘薯淀。现在学习的是第45页，共75页l 油和脂肪

30、：在微生物分泌的脂肪酶作用下水解为甘油和脂肪：在微生物分泌的脂肪酶作用下水解为甘油和脂肪酸，在溶解氧的参与下，氧化成水和油和脂肪酸，在溶解氧的参与下，氧化成水和COCO2 2。因此用脂肪作碳源时需比糖代谢供给更多的氧。因此用脂肪作碳源时需比糖代谢供给更多的氧。现在学习的是第46页，共75页l 氮是构成微生物细胞蛋白质和核酸的主要元素，氮是构成微生物细胞蛋白质和核酸的主要元素，而蛋白质和核酸是微生物原生质的主要组成部分。而蛋白质和核酸是微生物原生质的主要组成部分。氮素一般不提供能量，但硝化细菌却能利用氨作氮素一般不提供能量，但硝化细菌却能利用氨作为氮源和能源。为氮源和能源。l 就某一类微生物而言

31、，由于其合成能力的差异，对就某一类微生物而言，由于其合成能力的差异，对氮营养的需要也有很大区别。氮营养的需要也有很大区别。现在学习的是第47页，共75页氮的来源可分为无机氮和有机氮：氮的来源可分为无机氮和有机氮：l 有机氮源：有机氮源：花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母膏、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、蛋白粉、蛋白胨、酵母膏、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟等。废菌丝体和酒糟等。它们在微生物分泌的蛋白酶作用下，水解成氨它们在微生物分泌的蛋白酶作用下，水解成氨基酸，被菌体进一步分解代谢。基酸，被菌体进一步分解代谢。现在学习的是第48页

32、，共75页 含有丰富的蛋白质、多肽和游离的氨基酸含有丰富的蛋白质、多肽和游离的氨基酸 还含有少量的糖类、脂肪、无机盐、维生素及生长因子。还含有少量的糖类、脂肪、无机盐、维生素及生长因子。有机氮源特点：现在学习的是第49页，共75页 铵盐、硝酸盐、氨水等。铵盐、硝酸盐、氨水等。u无机氮源：无机氮的特点：微生物对其吸收利用比有机物快，所以也称 速 效氮。利用无机氮时应注意引起的pH变化。现在学习的是第50页，共75页 实验室中常用蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等作为有机实验室中常用蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等作为有机氮源；氮源；工业生产上常用硫酸铵、尿素、氨水、豆饼粉、花工业生产上常用硫酸铵、尿素、氨水、豆饼

33、粉、花生饼粉、麸皮等原料作氮源。生饼粉、麸皮等原料作氮源。现在学习的是第51页，共75页l 水是良好的溶剂，菌体所需要的营养物质都是溶水是良好的溶剂，菌体所需要的营养物质都是溶解于水中被吸收的。解于水中被吸收的。l 渗透、分泌、排泄等作用都是以水为媒介的；渗透、分泌、排泄等作用都是以水为媒介的；l 水直接参与代谢作用中的许多反应。所以，水在生水直接参与代谢作用中的许多反应。所以，水在生物化学反应中占有极为重要的地位。物化学反应中占有极为重要的地位。l 水的比热高，能有效地吸收代谢过程中所放出的热，水的比热高，能有效地吸收代谢过程中所放出的热，使细胞内温度不致骤然上升。使细胞内温度不致骤然上升。

34、l 水是热的良导体，有利于放热，可调节细胞的温度。水是热的良导体，有利于放热，可调节细胞的温度。现在学习的是第52页，共75页 无机盐类是微生物生命活动所不可缺少的物质。无机盐类是微生物生命活动所不可缺少的物质。主要功用是：主要功用是：构成菌体成分；构成菌体成分；作为酶活性基的组成部分或维持酶的活性；作为酶活性基的组成部分或维持酶的活性；调节渗透压、调节渗透压、pHpH值、氧化还原电位等；值、氧化还原电位等；作为自养菌的能源。作为自养菌的能源。现在学习的是第53页，共75页 无机元素包括主要元素无机元素包括主要元素(又称大量元素又称大量元素)和微和微量元素两类，这是依据微生物对它们需要量的大量

35、元素两类，这是依据微生物对它们需要量的大小划分的小划分的。主要元素有P、S、Mg、K、Ca等；微量元素有Fe、Cu、Mn、Zn、Mo、Co、B等。当盐浓度太高时，对微生物生长有抑制作用，而在较低浓度时却能刺激生长。一般在复合培养基中由于加入许多动植物原料 等都含有微量元素。现在学习的是第54页，共75页磷：磷：l 是核酸和蛋白质的必要成分，也是是核酸和蛋白质的必要成分，也是ATPATP的成分。的成分。l 在代谢途径调节方面，起着重要作用。促进微生在代谢途径调节方面，起着重要作用。促进微生物生长，但过量时，许多产物的合成受抑制。物生长，但过量时，许多产物的合成受抑制。现在学习的是第55页，共75

36、页l 钙：钙：培养基中钙盐过多时，会形成磷酸钙沉淀。可分别消培养基中钙盐过多时，会形成磷酸钙沉淀。可分别消毒或逐步补加。毒或逐步补加。l 镁：镁：处于离子状态时，是许多酶的辅酶的激活剂，不处于离子状态时，是许多酶的辅酶的激活剂，不但影响基质的氧化，也影响蛋白质的合成。以硫但影响基质的氧化，也影响蛋白质的合成。以硫酸镁加入，但在碱性溶液中会形成沉淀。酸镁加入，但在碱性溶液中会形成沉淀。现在学习的是第56页，共75页元 素人为提供形式生 理 功 能大 量 元 素PKH2PO4 磷酸二氢钾K2HPO4 磷酸氢二钾核酸、磷酸和辅酶的成分SMgSO4 硫酸铵含硫氨基酸（半胱氨酸、甲硫氨酸等）和含硫维生素

37、（生物素、硫胺素等）的成分KKH2PO4 磷酸二氢钾K2HPO4 磷酸氢二钾某些酶（果糖激酶、磷酸丙酮酸转磷酸酶等）的辅因子；维持电位差和渗透压NaNaCl氯化钠维持渗透压；某些细菌和蓝细菌所需CaCa(NO3)2 硝酸钙CaCl2 氯化钙某些胞外酶的稳定剂、蛋白酶等的辅因子；细菌形成芽孢和某些真菌形成孢子所需MgMgSO4 硫酸镁固氮酶等的辅因子；叶绿素等的成分FeFeSO4 硫酸铁细胞色素的成分；合成叶绿素、白喉毒素和氧高铁血红素所需现在学习的是第57页，共75页元 素人为提供形式生 理 功 能微量元素MnMnSO4 硫酸锰超氧化物歧化酶、氨肽酶和L-阿拉伯糖异构酶等的辅因子CuCuSO4

38、 硫酸铜氧化酶、酪氨酸酶的辅因子CoCoSO4 硫酸钴维生素B12复合物的成分；肽酶的辅因子ZnZnSO4 硫酸锌碱性磷酸酶以及多种脱氢酶、肽酶和脱羧酶的辅因子Mo(NH4)6Mo7O24 钼酸铵固氮酶和同化型及异化型硝酸盐还原酶的成分现在学习的是第58页，共75页l 广义说，凡是微生物生长不可缺少的微量有机物质都广义说，凡是微生物生长不可缺少的微量有机物质都称为生长因子称为生长因子(又称生长素又称生长素)，包括氨基酸、嘌呤、嘧，包括氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等；狭义说，生长素仅指维生素。啶、维生素等；狭义说，生长素仅指维生素。l 与微生物有关的维生素主要是与微生物有关的维生素主要是B B族维

39、生素，这些维族维生素，这些维生素是各种酶的活性基的组成部分，没有它们，生素是各种酶的活性基的组成部分，没有它们，酶就不能活动。酶就不能活动。l 凡是缺少合成生长素类物质的微生物凡是缺少合成生长素类物质的微生物(即缺少了合即缺少了合成生长素过程中的某种酶成生长素过程中的某种酶)，统称为，统称为营养缺陷型。营养缺陷型。现在学习的是第59页，共75页（1 1）首先必须做好调查研究工作，了解菌种的）首先必须做好调查研究工作，了解菌种的 来源、生活习惯、生理生化特性和一般的来源、生活习惯、生理生化特性和一般的 营养要求。营养要求。工业生产主要应用细菌、放线菌、酵母菌和霉菌工业生产主要应用细菌、放线菌、酵

40、母菌和霉菌四大类微生物。它们对营养的要求既有共性，也有四大类微生物。它们对营养的要求既有共性，也有各自的特性，应根据不同类型微生物的生理特性考各自的特性，应根据不同类型微生物的生理特性考虑培养基的组成。虑培养基的组成。现在学习的是第60页，共75页现在学习的是第61页，共75页（2 2）其次，对生产菌种的培养条件，生物合成）其次，对生产菌种的培养条件，生物合成 的代谢途径，代谢产物的化学性质、分子结的代谢途径，代谢产物的化学性质、分子结 构、一般提炼方法和产品质量要求等也需要构、一般提炼方法和产品质量要求等也需要 有所了解，以便在选择培养基时做到心中有有所了解，以便在选择培养基时做到心中有 数

41、。数。现在学习的是第62页，共75页（3 3）最好先选择一种较好的化学合成培养基做）最好先选择一种较好的化学合成培养基做 基础，开始时先做一些摇瓶试验基础，开始时先做一些摇瓶试验;然后进一步做小型发酵罐培养，摸索菌种对各种然后进一步做小型发酵罐培养，摸索菌种对各种主要有机碳源和氮源的利用情况和产生代谢产物的能主要有机碳源和氮源的利用情况和产生代谢产物的能力。力。注意培养过程中的注意培养过程中的pHpH变化，观察适合于菌种生长变化，观察适合于菌种生长繁殖和适合于代谢产物形成的两种不同繁殖和适合于代谢产物形成的两种不同pHpH，不断调整，不断调整配比来适应上述各种情况。配比来适应上述各种情况。现在

42、学习的是第63页，共75页（4 4）注意每次只限一个变动条件。有了初步结果以）注意每次只限一个变动条件。有了初步结果以 后，先确定一个培养基配比。后，先确定一个培养基配比。其次再确定各种重要的金属和非金属离子对发其次再确定各种重要的金属和非金属离子对发酵的影响，即对各种无机元素的营养要求，试验其酵的影响，即对各种无机元素的营养要求，试验其最高、最低和最适用量。最高、最低和最适用量。在合成培养基上得出一定结果后，再做复合培养基在合成培养基上得出一定结果后，再做复合培养基试验。试验。最后试验各种发酵条件和培养基的关系。培养基内最后试验各种发酵条件和培养基的关系。培养基内pHpH可由添加碳酸钙来调节

43、，其他如硝酸钠、硫酸铵也可可由添加碳酸钙来调节，其他如硝酸钠、硫酸铵也可用来调节。用来调节。现在学习的是第64页，共75页（5 5）有些发酵产物，如抗生素等，除了配制培）有些发酵产物，如抗生素等，除了配制培 养基以外，还要通过中间补料法，一面对养基以外，还要通过中间补料法，一面对 碳及氮的代谢予以适当的控制，一面间歇碳及氮的代谢予以适当的控制，一面间歇 添加各种养料和前体类物质，引导发酵走添加各种养料和前体类物质，引导发酵走 向合成产物的途径。向合成产物的途径。现在学习的是第65页，共75页（6 6）根据生产和科学研究的需要选择培养基）根据生产和科学研究的需要选择培养基 工业上，液体深层培养具

44、有占地面积小、发酵工业上，液体深层培养具有占地面积小、发酵效率高、操作方便、易于机械化相自动化生产、降效率高、操作方便、易于机械化相自动化生产、降低劳动强度等优点。所以，发酵工业中大多采用液低劳动强度等优点。所以，发酵工业中大多采用液体培养基培养种子和进行液体发酵，并根据微生物体培养基培养种子和进行液体发酵，并根据微生物对氧气的要求，分别作表面静止培养或深层通气培对氧气的要求，分别作表面静止培养或深层通气培养。养。现在学习的是第66页，共75页l 实验室或制种车间进行固体培养常采用试管、扁实验室或制种车间进行固体培养常采用试管、扁瓶和培养皿。工业生产中也常采用固体原料，如瓶和培养皿。工业生产中

45、也常采用固体原料，如小米、大米、铁皮、马铃署等直接制作斜面，或小米、大米、铁皮、马铃署等直接制作斜面，或在茄子瓶表面培养霉菌、放线菌。在茄子瓶表面培养霉菌、放线菌。l 具有设备简单、投资少、易推广等优点。具有设备简单、投资少、易推广等优点。l 大规模生产中，固体培养的缺点是占地面积多，大规模生产中，固体培养的缺点是占地面积多，劳动强度大，生产稳定性差。劳动强度大，生产稳定性差。现在学习的是第67页，共75页(7)根据经济效益选择培养基原料根据经济效益选择培养基原料 考虑经济节约，尽量少用或不用主粮，努力节约用粮，考虑经济节约，尽量少用或不用主粮，努力节约用粮，或以其他原料代粮。或以其他原料代粮

46、。l 糖类是主要的碳源。碳源的代用方向主要是寻找植物淀糖类是主要的碳源。碳源的代用方向主要是寻找植物淀粉、纤维水解物，以废糖蜜代替淀粉、糊精和葡萄糖，粉、纤维水解物，以废糖蜜代替淀粉、糊精和葡萄糖，以工业葡萄糖代替食用葡萄糖。同时，使用稀薄的培养以工业葡萄糖代替食用葡萄糖。同时，使用稀薄的培养基，适当减少碳氮配比基，适当减少碳氮配比现在学习的是第68页，共75页l 有机氮源的节约和代替主要为减少或代替黄豆饼粉、有机氮源的节约和代替主要为减少或代替黄豆饼粉、花生饼粉、食用蛋白胨和酵母粉等含有丰富蛋白质的花生饼粉、食用蛋白胨和酵母粉等含有丰富蛋白质的原料。原料。代用的原料可以是棉籽饼粉、玉米浆、蚕

47、蛹粉、代用的原料可以是棉籽饼粉、玉米浆、蚕蛹粉、杂鱼粉、黄浆水或麸汁、饲料酵母、石油酵母、骨杂鱼粉、黄浆水或麸汁、饲料酵母、石油酵母、骨胶、菌体、酒糟，以及各种食品工业下脚料等。这胶、菌体、酒糟，以及各种食品工业下脚料等。这些代用品大多蛋白质含量丰富，贷源充足，价格低些代用品大多蛋白质含量丰富，贷源充足，价格低廉，便于就地取材，方便运输。廉，便于就地取材，方便运输。现在学习的是第69页，共75页因素水平玉米粉（）A豆饼粉（）B蛋白胨（）CPH D10.540.55.021.050.65.531.560.76.0正交表因素水平 现在学习的是第70页，共75页现在学习的是第71页，共75页现在学习的是第72页，共75页现在学习的是第73页，共75页因素水平玉米粉（）A豆饼粉（）B蛋白胨（）CPH D10.540.55.021.050.65.531.560.76.0现在学习的是第74页，共75页感谢大家观看现在学习的是第75页，共75页