细胞转染 步骤(2页).doc

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-细胞转染 步骤-第 2 页细胞转染 汉恒生物 HANBIO实验前一天铺板293T细胞准备转染；实验当天从细胞培养箱中取出前一天的细胞于显微镜下观察细胞密度，达到70%80%的汇合率即可进行转染 转染前，吸去细胞原有培养基，加入新鲜的完全培养基，轻轻八字混匀后放入培养箱中，待转染以100mm培养皿为例， 转染时取2个EP管，各加入500l无血清培养基，然后一份加入常温溶解好的质粒，另一份加入本公司转染试剂lipofiterTM 加好后轻轻振荡EP管，使之混匀，静置室温孵育5min 5min后，将两个EP管中的液体混合，吹匀后静置室温孵育20min 20min后，取出培养箱中的培养皿，加入EP管中混好的脂质体，8字摇晃后，放入培养箱培养6h 6h后，取出培养箱中的培养皿，吸去旧的培养基，加入10ml完全培养基后放入培养箱，继续于37培养箱培养24h 24h后取出培养皿，荧光显微镜观察转染效果