动物细胞融合单克隆抗体.ppt

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1、关于动物细胞融合单克隆抗体现在学习的是第1页，共39页abcde植物细胞杂交技术植物细胞杂交技术现在学习的是第2页，共39页材料材料1: 1970年，有两位科学家做了一个人年，有两位科学家做了一个人鼠细鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人何实现人鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？么用途呢？现在学习的是第3页，共39页A A细细胞胞B B细细胞胞人工诱导人工诱导1 1、动物、动物细胞融合的概念细胞融合的概念杂交细胞杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指交）：是

2、指两个或多个细胞融合两个或多个细胞融合形成一个形成一个单核单核细胞的过程。细胞的过程。一、动物细胞融合一、动物细胞融合如：如：B B淋巴细胞淋巴细胞如：骨髓瘤细胞如：骨髓瘤细胞现在学习的是第4页，共39页细胞膜的流动性细胞膜的流动性灭活病毒、灭活病毒、PEGPEG、电激等、电激等融合后的细胞进行有丝分裂，融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞形成完整的杂交细胞3 3、诱导的手段？、诱导的手段？融合后细胞的类型？融合后细胞的类型？ABAB杂种细胞遗传物质杂种细胞遗传物质有什么特点？有什么特点？三种三种AAAA、ABAB、BBBB（A A、B B）含两种生物的遗传物质含两种生物的遗传物质2

3、2、原理？、原理？现在学习的是第5页，共39页4 4、动物细胞融合过程、动物细胞融合过程灭活丧失感染性灭活丧失感染性保留融合活性保留融合活性病毒表面含有的糖蛋白和病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞排布，细胞膜打开，细胞发生融合。发生融合。灭活是指用物理或化学手段灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗但并不破坏这些病原体的抗原结构。原结构。现在学习的是

4、第6页，共39页比较项比较项目目细胞融合的细胞融合的原理原理细胞融合前细胞融合前的处理方法的处理方法诱导手段诱导手段用途用途植物体植物体细胞杂细胞杂交交纤维素酶、纤维素酶、果胶酶果胶酶去除去除细胞壁后诱细胞壁后诱导原生质体导原生质体融合融合离心、电刺离心、电刺激、振动、激、振动、聚乙二醇聚乙二醇克服远源克服远源杂交不亲杂交不亲和，获得和，获得杂种植株杂种植株动物细动物细胞融合胞融合用用胰蛋白酶胰蛋白酶使细胞分散使细胞分散后诱导细胞后诱导细胞融合融合除应用植物除应用植物细胞杂交手细胞杂交手段外，段外，还有还有灭活病毒灭活病毒获得杂种获得杂种细胞、细胞、制备制备单克隆抗单克隆抗体体5 5、 比较动

5、、植物体细胞杂交技术比较动、植物体细胞杂交技术细胞膜的细胞膜的流动性流动性植物细胞植物细胞的全能性的全能性细胞膜的细胞膜的流动性流动性现在学习的是第7页，共39页1、能使动物细胞融合的、能使动物细胞融合的特有特有的诱导因子是的诱导因子是 A.离心离心 B.灭活的病毒灭活的病毒 C.电刺激电刺激 D.振动振动2、融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点、融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖能无限增殖 C.可形成新个体可形成新个体D.培养过程会贴壁培养过程会贴壁3、动物细胞融合的作用中最重要的是（、动物细胞融合的作用中最重

6、要的是（ ）A.克服远源杂交不亲和克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体制备单克隆抗体 C.培育新物种培育新物种 D.生产杂种细胞生产杂种细胞B BA AB B现在学习的是第8页，共39页第二课时2.2.2 2.2.2 动物细胞融合动物细胞融合与单克隆抗体与单克隆抗体现在学习的是第9页，共39页复习回顾：复习回顾：动动物细胞融合物细胞融合（也称动物细（也称动物细胞杂交技术）胞杂交技术）（1 1）融合前处理）融合前处理（2 2）原理：）原理：（3）诱导融合方法）诱导融合方法（4 4）意义：）意义：现在学习的是第10页，共39页植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比

7、较项比较项目目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理融合前融合前处理处理诱导融诱导融合方法合方法主要用途主要用途获得获得植物新品种植物新品种细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性植细胞膜的流动性植物细胞全能性物细胞全能性酶解法（酶解法（纤维素酶和果纤维素酶和果胶酶胶酶）去除细胞壁）去除细胞壁胰蛋白酶或胶原蛋白胰蛋白酶或胶原蛋白酶酶使细胞分散使细胞分散离心、振荡、电刺离心、振荡、电刺激、聚乙二醇激、聚乙二醇离心、振荡、电刺离心、振荡、电刺激、聚乙二醇激、聚乙二醇灭活的病毒灭活的病毒制备制备单克隆抗体单克隆抗体现在学习的是第11页，共39页二、单克隆抗体二、单克隆抗体现在

8、学习的是第12页，共39页能够与抗原发生特异性能够与抗原发生特异性结合的结合的免疫球蛋白免疫球蛋白。B B淋巴细胞淋巴细胞效应效应B B细胞细胞记忆记忆B B细胞细胞增殖增殖分化分化复习回顾复习回顾抗体抗体现在学习的是第13页，共39页抗体的传统生产方法抗体的传统生产方法抗原抗原 反复注射动物反复注射动物从动物的从动物的血清血清中分离抗体中分离抗体该法制备抗体的缺点：该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度体的特异性差、灵敏度低。低。同时有其它抗同时有其它抗原和抗体的存原和抗体的存在在现在学习的是第14页，共39页 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，

9、体人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的内的B B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个但是每个（效应）（效应）B B细胞只分泌一种化学性质单一、细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个单个B B细胞进行无性繁殖，即克隆。细胞进行无性繁殖，即克隆。1、单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念单个单个B细胞克隆产生的细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强的的抗体抗体单克隆抗体单克隆抗体现在学习的是第15页，共39页提示提示1 1：一种效应一种效应

10、B细胞只能产生一种抗体细胞只能产生一种抗体对（效应）对（效应）B B细胞进行细胞培养细胞进行细胞培养可行吗？正常情况下，可行吗？正常情况下，细胞分裂次数是？细胞分裂次数是？提示提示2 2：我们所学的哪种细胞是可以：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖无限增殖的？的？问题：问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。案。2、单克隆抗体的制备原理单克隆抗体的制备原理现在学习的是第16页，共39页一个（效应）一个（效应）B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培动物细

11、胞培养技术养技术设计方案：设计方案：动物细胞融动物细胞融合技术合技术单克隆单克隆抗体抗体 既能产生特异性抗体，既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞又能大量增殖的细胞实验原理：实验原理：现在学习的是第17页，共39页为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ 融合后会有多少种细胞类型？（考虑融合后会有多少种细胞类型？（考虑2 2个之内）个之内） 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？如何大规模进行培养得到大量的

12、单克隆抗体？学习任务：学习任务：1、带着下列问题阅读课本、带着下列问题阅读课本53-54页第二自然段页第二自然段2、用文字和箭头整理出制备单克隆抗体的过程、用文字和箭头整理出制备单克隆抗体的过程3 3、单克隆抗体的制备过程、单克隆抗体的制备过程现在学习的是第18页，共39页BB BB 、B B瘤瘤 、瘤瘤、瘤瘤 （B B、瘤）、瘤）（一选）（一选）选选择培养基择培养基：只有只有杂交瘤杂交瘤细胞细胞才能存才能存活活获得产生相获得产生相应抗体的效应抗体的效应应B B细胞细胞（二选）：选能（二选）：选能产生所需产生所需专一抗专一抗体的杂交瘤细胞体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞特点：杂交瘤细胞特点：既能产生特

13、异性抗既能产生特异性抗体，又能大量增殖。体，又能大量增殖。现在学习的是第19页，共39页已免疫过的小鼠已免疫过的小鼠检测检测后后提取提取效应效应B B细胞细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞BBBB细胞、细胞、B B瘤细胞瘤细胞、瘤瘤细胞、瘤瘤细胞、B B细胞、瘤细胞细胞、瘤细胞细胞融合细胞融合HATHAT培养基培养基杂交瘤细胞杂交瘤细胞（B瘤细胞）瘤细胞）克隆、检测克隆、检测杂交瘤细胞杂交瘤细胞小鼠腹水小鼠腹水体外培养液体外培养液注入注入提取单克隆抗体提取单克隆抗体产生所需抗体产生所需抗体多种多种现在学习的是第20页，共39页4、单抗制备过程分哪几步？、单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克请用箭

14、头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？顺序是？ 现在学习的是第21页，共39页诊断试剂诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高，化学性质单一，并能化学性质单一，并能大量制备大量制备。4、单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用现在学习的是第22页，共39页“生物导弹生物导弹” ” 单克隆抗体药物单克隆抗体药物 单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头治疗疾病和运载药治疗疾病和运载药物物主要用于治疗癌症治

15、疗，单克隆抗体作为载体，运载抗主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成癌药物，形成“生物导弹生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。，准确杀伤癌变细胞。现在学习的是第23页，共39页两个过程两个过程动物细胞融合过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性强、灵一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势敏度高的优势两个两个“筛选筛选”筛选出杂交瘤细胞筛选出杂交瘤细胞 筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞

16、现在学习的是第24页，共39页5 5、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ）A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞B.B.不经过免疫的不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.不经过免疫的不经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞6 6、单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的、单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ ） B B淋巴细胞淋巴细胞 B BT T淋巴细胞淋巴细胞

17、 A.A. C C骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 D D杂交瘤细胞杂交瘤细胞A AD现在学习的是第25页，共39页7 7、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（验步骤中错误的是（ ）A A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B B淋淋巴细胞巴细胞B B用纤维素酶处理用纤维素酶处理B B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B B淋淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所

18、需抗体的筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体细胞群，培养后提取单克隆抗体B现在学习的是第26页，共39页（20132013海南卷）海南卷）3131单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒型（型（HSV-HSV-）可引起水）可引起水疱性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗疱性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-HSV-的单克隆抗的单克隆抗体可快速检测体可快速检测HSV-HSV-。回答下列问题：回答下列问题：（1 1）在制备抗）在制备抗HSV-HSV-的单克隆抗体的过程中，先给小的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的鼠注射一种纯化的HSV-HSV-蛋白，一段时间后，若小鼠血蛋白，

19、一段时间后，若小鼠血清中抗清中抗 的抗体检测呈阳性，说明小鼠的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了体内产生了 反应，再从小鼠的反应，再从小鼠的 中获取中获取B B淋淋巴细胞。将该巴细胞。将该B B淋巴细胞与小鼠的淋巴细胞与小鼠的 细胞融合，再细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是该细胞具有的特点是 。HSV1蛋白蛋白体液免疫体液免疫脾脏脾脏骨髓瘤骨髓瘤无限增殖且产生专一抗无限增殖且产生专一抗HSV-蛋白的抗体蛋白的抗体现在学习的是第27页，共39页（2 2）若要）若要大量大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该制备抗该蛋

20、白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的杂交瘤细胞注射到小鼠的 中使其增殖，再从中使其增殖，再从 中提取、纯化获得。中提取、纯化获得。（3 3）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种别这种HSV-HSV-蛋白，其原因是该抗体具蛋白，其原因是该抗体具有有 和和 等特性。等特性。腹腔腹腔腹水腹水特异性强特异性强灵敏度高灵敏度高现在学习的是第28页，共39页(1)若若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小细胞是取自小鼠体内的鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射胞之前，应给小鼠

21、注射_类物质。类物质。若本题得到的单克隆抗体是非典抗体，则提取若本题得到的单克隆抗体是非典抗体，则提取B细胞前细胞前可以给小鼠注射可以给小鼠注射 。效应效应B B抗原抗原灭活的非典病毒灭活的非典病毒8、现在学习的是第29页，共39页（2）d过程是一个过程是一个_过程，该过程的进过程，该过程的进行常用行常用_或或_的诱导。的诱导。细胞融合细胞融合灭活的病毒灭活的病毒聚乙二醇聚乙二醇现在学习的是第30页，共39页(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类种类型的型的C细胞，因此需用细胞，因此需用_培养基筛选出培养基筛选出D细胞用于培养，细胞用于培养，D细胞

22、的名称是细胞的名称是 ，其特点是，其特点是_选择性选择性 3 3既能无限增殖又能产生特异性抗体既能无限增殖又能产生特异性抗体杂交瘤细胞杂交瘤细胞现在学习的是第31页，共39页(4)(4)在培养时通过在培养时通过_分裂方式大量繁殖。分裂方式大量繁殖。D D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5 5项）项）_。无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pHpH；适；适宜的气体环境宜的气体环境现在学习的是第32页，共39页（20132013重庆卷）重庆卷）2 2题题2 2图是单克隆抗体制备流程的简图是单克隆抗体制备流程的简

23、明示意图。下列有关叙述，正确的是明示意图。下列有关叙述，正确的是 A A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T T淋巴细淋巴细胞胞B B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群群D D现在学习的是第33页，共39页（20112011年浙江卷）年浙江卷）31.(1231.(12分分) )(1)(1)实验分组：实验分组：甲组：培养液甲组：培养液+Y+Y细胞细胞+ -TdR(+

24、 -TdR(标记的胸腺嘧啶脱氧核标记的胸腺嘧啶脱氧核苷苷)+)+生理盐水生理盐水乙组：培养液乙组：培养液+Y+Y细胞细胞+ -TdR+X(+ -TdR+X(生理盐水配制生理盐水配制) )每组设置若干个重复样品。每组设置若干个重复样品。（2 2）分别测定两组的）分别测定两组的CRDCRD（细胞内的放射性强度），（细胞内的放射性强度），求每组的平均值。求每组的平均值。（3 3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其其CRDCRD，求每组平均值并进行统计分析。（与说明，求每组平均值并进行统计分析。（与说明，答题时用答题时用X X、CRDCRD、3H-Td

25、R3H-TdR表示相关名词；表示相关名词；Y Y细胞是能细胞是能增殖的高等动物体细胞）增殖的高等动物体细胞）请回答：请回答：现在学习的是第34页，共39页（1 1）实验目的：）实验目的：甲组：培养液甲组：培养液+Y细胞细胞+ -TdR(标记的胸腺嘧啶脱氧核苷标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生生理盐水理盐水乙组：培养液乙组：培养液+Y细胞细胞+ -TdR+X(生理盐水配制生理盐水配制)每组设置若干个重复样品。每组设置若干个重复样品。（2）分别测定两组的）分别测定两组的CRD（细胞内的放射性强度），求每（细胞内的放射性强度），求每组的平均值。组的平均值。（3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定）将

26、各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其其CRD，求每组平均值并进行统计分析，求每组平均值并进行统计分析能增殖的高等动物体细胞能增殖的高等动物体细胞探究探究X X对对Y Y细胞增殖（细胞增殖（DNADNA合成）的影响合成）的影响现在学习的是第35页，共39页（2）预测实验结果及结论：）预测实验结果及结论：_。甲组：培养液甲组：培养液+Y细胞细胞+ -TdR(标记的胸腺嘧啶脱氧核苷标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生生理盐水理盐水乙组：培养液乙组：培养液+Y细胞细胞+ -TdR+X(生理盐水配制生理盐水配制)每组设置若干个重复样品。每组设置若干个重复样品。（2）分别测定两组的）分别测定两组的CRD（细胞

27、内的放射性强度），（细胞内的放射性强度），求每组的平均值。求每组的平均值。（3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其CRD，求每组平均值并进行统计分析求每组平均值并进行统计分析若乙组若乙组CRDCRD明显高于甲组，说明明显高于甲组，说明X X对对Y Y细胞增殖（细胞增殖（DNADNA合成）合成）有促进作用。有促进作用。若乙组。与甲组基本相同，说明。无影响。若乙组。与甲组基本相同，说明。无影响。若乙组。明显低于甲组，说明。有抑制作用。若乙组。明显低于甲组，说明。有抑制作用。现在学习的是第36页，共39页（3）实验中采用）实验中采用3H-TdR的原

28、因：的原因：甲组：培养液甲组：培养液+Y细胞细胞+ -TdR(标记的胸腺嘧啶脱氧核标记的胸腺嘧啶脱氧核苷苷)+生理盐水生理盐水乙组：培养液乙组：培养液+Y细胞细胞+ -TdR+X(生理盐水配制生理盐水配制)每组设置若干个重复样品。每组设置若干个重复样品。（2）分别测定两组的）分别测定两组的CRD（细胞内的放射性强度），求（细胞内的放射性强度），求每组的平均值。每组的平均值。（3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定其CRD，求每组平均值并进行统计分析，求每组平均值并进行统计分析3 3H-TdRH-TdR是是DNADNA合成的原料之一，可根据合成的

29、原料之一，可根据CRDCRD变化来判断细变化来判断细胞增殖（胞增殖（DNADNA合成）情况合成）情况现在学习的是第37页，共39页（20112011年江苏卷）关于现代生物技术应用的叙述，年江苏卷）关于现代生物技术应用的叙述，错误的是错误的是 A A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体抗体 C C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育育B B现在学习的是第38页，共39页感谢大家观看8/23/2022现在学习的是第39页，共39页