天门冬氨酸氨基转移酶测定.doc

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1、精品文档，仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除天门冬氨酸氨基转移酶测定（AST）- IFCC法用途：用于自动生化分析仪测定血清或血浆中AST活力。AST是常用的肝功能试验和心肌梗塞酶学指标。方法学原理：L天门冬氨酸+a酮戊二酸AST草酰乙酸+L谷氨酸草酰乙酸+NADH+H MDH L苹果酸+NAD试剂成分以及浓度： R1成 份浓 度成 份浓 度NADH0.18mmol/LLDH0.8KU/LMDH0.6KU/L-R2L门冬氨酸200mmol/L酮戊二酸12mmol/L使用方法：1.仪器要求：适用于各类自动生化分析仪或半自动生化分析仪。2.标本要求：样品为空腹新鲜血清、EDTA或肝素抗凝血浆，

2、溶血会产生干扰。3.稳定性与保存：试剂在28避光保存可稳定一年。单试剂工作液28 避光保存可稳定一周。4.基本参数： 主波长340nm标本5l反应方法速率法延滞时间90秒辅助波长410nmR1200l反应方法向 下读数时间150秒反应温度37R2100l计算因子3376（340nm/410nm，1cm光径）4118（340nm/380nm，1cm光径）5.测定方法： 加 入 物空 白 管（B）测 定 管（T）R1200l200l蒸 馏 水15l-标 本-15l混合，置37孵育35分钟。R2100l100l混合，置37孵育90秒，在主波长340 nm/辅助波长410nm下连续监测13分钟各管吸光

3、度变化，计算DA/min. 单试剂操作：工作液配制：临用时将R1与R2按2:1混合 加 入 物空 白 管（B）测 定 管（T）工 作 液300l300l蒸 馏 水15l -标 本-15l混合，置37孵育90秒，在主波长340 nm/辅助波长410nm下连续监测13分钟各管吸光度变化， 计算A/min。6.结果计算： AST活性（U/L）=（D A测定/minD A空白/min）3376（340nm/410nm，1cm光径） AST活性（U/L）=（D A测定/minD A空白/min）4118（340nm/380nm，1cm光径）7.正常参考值： 男1149U/L 女1140U/L （37）

4、建议各实验室建立自己的正常参考值范围注意事项：1.如果试剂变混浊或试剂空白吸光度值（340nm）小于1.0，试剂已失效。2.如果标本中AST活力700U/L（30）或1000U/L（37），需用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。3.NADH在340nm的理论摩尔吸光吸数6.22103，计算因子最好根据实测摩尔吸光系数计算。4.试剂中不含有磷酸吡哆醛。5.用底物启动的双试剂可有效消除内源性丙酮酸和GLDH的干扰。性能特征：1.线性范围：700U/L（30）；1000U/L（37）2.准 确 度：r=0.996 线性回归方程y=1.01x0.52（与相同方法商3.精 密 度：批内CV：1.83.5% 批间CV：2.23.8%【精品文档】第 2 页