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1、原始记录单控制编号: 耐热大肠菌群检验数据原始记录 委托书编号:委托单位: 检测项目:耐热大肠菌群检测依据: GB/T 5750.12-2006 3.1 多管发酵法 样品名称:样品数量: 样品编号:样品状态: 收样日期:检测日期: 环境温度:环境湿度: 操作方法: 一、乳糖发酵实验 1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中,取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中,混匀后吸取1ml (即0.1ml水样)注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水,需经常检验或每天检验一次的,可直接种5份10ml
2、水样双料培养基,每份接种10ml水样。 2、检验水源水时,如污染较严重,应加大稀释度,可接种1,0.1,0.01ml甚至0.1,0.01,0.001ml,每个稀释度接种5管,每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后,取lml接种,每递增稀释一次,换用1支lml灭菌刻度吸管。 3、将接种管置36lC培养箱内,培养24h2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸,则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则按下列步骤进行。 4、如检测未经氯化消毒的水,且只想检测耐热大肠菌群时,或调查水源水的耐热大肠菌群污染时,可用直接接种乳糖蛋白胨培养液在44.50.5C水浴中培养,其余步骤同。
3、 二、分离培养: 经培养24h后,将产酸产气的发酵管,分别取一滴接种于EC培养基,置于44.5C水浴箱培养24h 2h ,如有产气者,按下列步骤进行。 三、证实试验: 将产气的发酵管,转种于伊红美兰琼脂平板上,置于44.5C培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,即证实为耐热大肠菌群阳性。 培养基 培养温度 培养时间 二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液 361C 24h2h 乳糖蛋白胨培养液 361C/44.50.5C 24h2h EC培养基 44.50.5C 24h2h 第1页共2页 原始记录单控制编号: EMB 44.5C 18-24h 观察结果 样品 乳糖发酵 EC EMB 结果报告 序号 编号 10ml 1ml 0.1ml 10ml 1ml 0.1ml 10ml 1ml 0.1ml (MPN/100mL) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 操作人:复核人: 第2页共2页