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1、血氨Amm测定1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。2原理在乳酸脱氢酶的作用下,血清中干扰氨测定的丙酮酸在预反应中被除去。氨在谷氨酸脱氢酶的作用下与aKG和NADH反应,与同样处理的标准比较,可计算出血清中氨的含量。3标本要求3.1 EDTA抗凝血浆,空腹采用后立即置于冰水中,尽快分离血浆,加盖置于2-4保存,在2h内分析,炎热季节需加冰降温以减慢血中的脱氨作用。3.2 严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1本科使用利德曼有限公司的试剂盒.4.1.1试剂盒组成如下:组成 混合后的浓度R1-a:Tirs缓冲液 50mmol/L pH:8.0LDH 2KU/LE
2、DTA 5.3 mmol/LaKG 18.0 mmol/LR1-b:NADH 0.18 mmol/LR2:ALDH 25.0KU/L稳定剂 1%标准液 150 ug/dl(88umol/L)4.1.2试剂准备:可随时取用, 2-80C可稳定到有效期4.1.3试剂性能可接收性:按测定项目资料手册中质量控制章节规定的内容进行质量控制.结果必须在实验室规定的可接收范围内。4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。4.2 校准品:使用利德曼有限公司提供的AMM校准品对自动分析仪进行校准。5 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P80
3、0生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清
4、水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。8 计算方法 以AMM复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以umool/L报告。9 参考值 1047umool/L 我室的参考值:10-47 umool/L10临床意义 正常情况下,氨在肝脏转变为尿素。严重肝脏疾病时,氨不能从循环中清除,引起血氨增高,高血氨有神经毒,引起肝性脑病(肝昏迷)。故成人血浆氨测定主要用于肝昏迷的监测和处理。此外,血浆氨测定对儿科诊断Reyes综合征非常有用,该征有严重低血糖,大块肝坏死,急性肝衰,并伴有肝脂肪变性,在肝酶谱增高前,即
5、见血氨增高。对诊断某些先天性代谢紊乱,如鸟氨酸循环的氨基酸代谢缺陷(高血氨)也很重要。11操作性能11.1本法的血氨可报告范围为 294umool/L11.2精密度 CV5%11.3准确度 测定值在正常及异常质控范围内12 超出范围结果处理 如果超过线性范围联系临床重新抽血复查。13 病危报警值的处理 无警告/危急值。14干扰 溶血使血氨结果偏高,血浆中LDH、AST等也可利用NAD(P)H而产生内源性的消耗,直接影响血浆氨测定结果。15 补救措施 当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献:16.1叶应妩,王毓山,申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社,2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。