血清无机磷Pi测定.doc

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1、血清无机磷Pi测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理磷钼酸紫外终点比色法。钼酸铵+硫酸+磷酸盐 磷钼酸络合物；该络合物在340nm有最大光吸收峰。在340nm的吸光度与标本中无机磷的浓度成正比3 标本采集3.1 病人准备：无特殊要求。3.2 类型：血清、或尿液。3.3 标本存放：血清/血浆稳定性：425保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月。尿液稳定性：425在pH5保存可稳定2天；不可使用已被污染的标本。收集24h尿液时，应在收集瓶中加入10%（W/V）盐酸10ml，以防止磷酸盐沉淀。测定前尿液应用蒸馏水作1：20稀释，测定结果乘以21。3.4

2、 标本运输：室温条件下运输3.5 标本拒收标准：细菌污染不能做测定。4 实验材料：4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司磷试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成 硫酸 420mmol/L 钼酸铵 1.0mmol/L 氯化钠 77 mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：在225避光、密封的储存条件下，试剂盒自检定合格之日起有效期为18个月。4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。4.1.5 注意事项：试剂中含硫酸，如与皮肤及粘膜接触，请仔细地用大量水冲

3、洗。应采取必要的预防措施使用试剂。4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的P校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参

4、数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以P复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。9 参考值范围： 儿童/青少年：130天 1.252.50mmol/L112个月 1.152.15mmol/L13岁 1.001.95mmol/L46岁 1.051.80mmo

5、l/L79岁 0.951.75mmol/L1012岁 1.051.85mmol/L1315岁 0.951.65mmol/L1618岁 0.851.60mmol/L 成人 0.801.5mmol/L 尿液： 1242.0mmol/24H（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 我室参考值 0.85-1.51 mmol/L10 临床意义 无机磷在体内多数以磷酸盐形式存在，主要为骨骼的无机成分，但是在细胞中也以磷脂和核酸形式存在，如腺苷三磷酸（ATP）还参与体内的能量转换。血浆中的无机磷呈磷酸钙的形式，因此

6、血浆无机磷的水平与钙水平息息相关。血清或尿液中无机磷的检测主要用于肾功能失调，骨骼和甲状旁腺疾病等的诊断。在肾功能衰竭、甲状旁腺功能减退、假性甲状旁腺功能减退以及骨骼和细胞内磷酸钙流失时，无机磷浓度上升。因吸收不良、甲状腺功能亢进和维生素D缺乏时，无机磷浓度下降。同时进行钙监测可获得更多的信息。11 操作性能11.1试剂空白：应不大于0.40。11.2分析灵敏度：0.10 mmol/L样本的吸光度差值（A）应不小于0.025。 11.3线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖05.0 mmol/L。a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) 0.0-1.3 mmol/L 范围内的线性偏差应不超

7、过0.3 mmol/L，1.4-5.0 mmol/L 范围内的线性偏差应不超过10。 11.4准确度：回收率应在（10015）%。 11.5精密度：(1)重复性：变异系数（CV）应不大于5%；(2)批间差：相对极差（R）应不大于5%。 12 超出范围结果处理 本法线性上限为5.0mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。13 病危报警值的处理 无警告/危急值。14 方法局限性14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。 14.2溶血、脂血及黄疸等样本会引起测定结果的假性增高，测定时应避免使用。 14.3反应形成的颜色可稳定1小时。 14.4若试剂混浊或以水为空白在波长340nm处的吸光度值大于0.8A时，则不能使用。15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。