洁净区微生物及卫生知识培训-根据GMP-2010年版ppt课件.ppt

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1、洁净区微生物及卫生知识培训质保部24:434:431微生物基础知识2微生物的污染与控制3洁净室（区）环境的控制4洁净室（区）环境的监测目目录CONTENTS5微生物室简述34:434:431.微生物的分类2.微生物的特点3.相关术语4.微生物与药品第一章微生物基础知识Chapter 144:434:43第一章微生物基础知识微生物基础知识1.微生物的分类微生物非细胞生物原核生物部分真核生物有细胞结构，但无细胞核无细胞结构病毒亚病毒细菌蓝藻支原体衣原体等有细胞结构，有细胞核霉菌、酵母菌藻类等微生物定义：一类形态微小，结构简单，用肉眼难以看到，必须借助光学显微镜或电子显微镜才能看清的低等微小生物的系

2、统。54:434:43微生物的特点微生物的特点体积小，比表面积大吸收多，转化快适应性强，易变异分布广，种类多生长旺，繁殖速度快第一章微生物基础知识微生物基础知识2.微生物的特点64:434:43第一章微生物基础知识微生物基础知识2.微生物的特点球菌螺旋菌杆菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、肺炎链球菌、脑膜炎球菌（大部分是G+也有G-）分为弧菌和螺菌：幽门螺杆菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌（生活在淡水或海水里）大肠杆菌、鼠疫杆菌、双岐杆菌（常见的益生菌）、结核分歧杆菌微生物按形态分类革兰氏阳性细胞壁含肽聚糖多，脂类少。革兰氏阴性细胞壁含肽聚糖少，脂类多。74:434:43第一章微生物基础知

3、识微生物基础知识2.微生物的特点葡萄球菌 链球菌 双球菌 四联球菌 八叠球菌球杆菌 链杆菌 弧菌 螺菌 放线菌微生物按形态分类球菌杆菌螺旋菌84:434:43第一章微生物基础知识微生物基础知识3.相关术语细菌菌落单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团。细菌的菌落特征可作为鉴定细菌菌种的依据霉菌菌落主要指丝状真菌。往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不像蘑菇那样产生大型的子实体。酵母菌菌落菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，易挑起，菌落颜色均一。3.1菌落是由单个细菌（或其他微生物）、细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养

4、基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。cfu：Colony-Forming Units（菌落形成单位） 在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活菌的数量。94:434:43第一章微生物基础知识微生物基础知识3.相关术语培养基是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。水碳源氮源生长因子无机盐营养物A.营养因素B.微生物生长的影响因素pH温度氧气渗透压3.2培养基104:434:43第一章微生物基础知识微生物基础知识4.微生物与药品微生物与药品 微生物的分布极为广泛，它们在自然界的物质转换作

5、用中，绝大多数对人类是有绝大多数对人类是有益的益的，在制药工业中，有些药品和制剂，本身就是微生物，如菌苗、疫苗、微生物制剂；有些药品是以微生物的代谢物作为原料或经其有效作用参与制药过程，如抗生素制剂、葡萄糖、氨基酸、酶类制剂等。从药品生产的卫生学而论： 微生物对药品原料、生产环境和成品的污染，都是造成生产失败、成品不合格，直接或间接对人类造成危害的重要因素。受到污染的药品会引起使用者的感染甚至引起严重后果。注射了污染微生物的针剂会导致局部感染或败血症；使用了污染的软膏或乳膏会引起皮肤和粘膜感染；服用了污染大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的制剂会导致肠道传染病的发生和流行。受到微生物污染的药品还可能产

6、生化学和物理变化而变质，使药品失效或产生毒害作用。 药品中污染的微生物类型有很多种，如细菌、霉菌、酵母菌、放线菌等。114:434:431.相关术语2.洁净室（区）污染来源3.GMP与微生物控制4.污染途径与预防手段5.污染来源与控制第二章微生物的污染与控制Chapter 2124:434:43第二章微生物的污染与控制微生物的污染与控制1.相关术语1.1污染污染：指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合在一起使该物变得不纯净或不适用时，即受污染。1.2污染源污染源：指向环境排放或释放有害物质或对环境产生有害影响的场所、设备和装置。微生物传播污染的四大媒介：人、空气、水和表面。在无菌药品生产中人员带

7、来的污染是最大的污染源。134:434:431.3微生物的污染定义：因微生物产生、附着而给特定的环境带来的不良影响。微生物对药品、生产环境和成品的污染是造成生产失败、导致产品腐败变质。成品不合格的重要因素。自身污染自身污染由于患者和员工自身携带微生物而污染。0101接触污染接触污染由于和非无菌的用具、机械或人的接触而污染。0202空气污染空气污染由于空气中所含微生物的沉降、附着或被吸入而污染。0303其他污染其他污染由于其他因素（如昆虫）而污染。0404控制污染的途径： 有效地阻止室外的污染侵入室内； 迅速有效地排除室内已发生的污染； 控制污染源，减少污染发生量第二章微生物的污染与控制微生物的

8、污染与控制1.相关术语144:4301污染类型污染类型尘粒污染微生物污染残留物污染02传播污染媒介传播污染媒介空气水表面人员03造成污染的原因造成污染的原因原辅材料内包装材料设备与容器生产环境操作人员生产过程第二章微生物的污染与控制微生物的污染与控制2.洁净室（区）污染来源154:43风险：手部的交叉污染皮肤屑片的脱落与散布不正确的穿着工作服不正确的行为风险：环境控制或屏障系统失控；公用设施（气体、水等）失控风险：通过气锁间传递；在进入之前的消毒失效第二章微生物的污染与控制微生物的污染与控制2.洁净室（区）污染来源164:43坐着不动能产生10万个颗粒走能产生500万个颗粒跑能产生1500万个

9、颗粒第二章微生物的污染与控制微生物的污染与控制2.洁净室（区）污染来源174:434:43微生物控制物料物料验证验证质量控制质量控制与质量保证与质量保证设备设备生产管理生产管理机构与人员机构与人员厂房与设施厂房与设施原料卫生辅料卫生包装材料卫生清洁验证灭菌验证设备验证工艺卫生监测环境卫生监测个人卫生监测工艺用水设备清洁清洁规程卫生管理规程防止污染、交叉污染的措施体检管理生产人员卫生卫生培训空气净化技术生产环境卫生公用设备卫生第二章微生物的污染与控制微生物的污染与控制3.GMP与微生物控制GMP与微生物控制184:43药品生产工艺过程中污染途径与预防手段污染途径污染途径污染物污染物的类型的类型危

10、害程度危害程度无菌工艺无菌工艺要求要求程度程度预防手段预防手段直接污染容器、管道污染人员的手指无菌部件内包装材料严重几率大污染负荷高涉及范围广有可能整批报废无菌（无菌工艺）消毒消毒（非无菌工艺）非无菌工艺：非无菌工艺：器具清洗、干燥或器具清洗、干燥或灭菌灭菌设备容器密封设备容器密封清洁卫生操作清洁卫生操作间接污染操作间的空气操作人员的身体一般几率小污染负荷低涉及范围小消毒消毒区域的封闭控制区域的封闭控制人员的培训与更衣人员的培训与更衣高效过滤器高效过滤器区域的气流设计和区域的气流设计和控制控制日常的消毒与监控日常的消毒与监控第二章微生物的污染与控制微生物的污染与控制4.污染途径与预防手段194

11、:43第二章5.污染来源与控制5.1 空气、压缩空气存在的微生物类型存在的微生物类型来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段产芽孢的细菌：杆菌属、梭菌属的菌种不产芽孢的细菌：葡萄球菌属、链球菌属霉菌：青霉属、曲霉属的菌种酵母菌：红酵母菌属的菌种尘埃人的皮肤人的体液衣服水滴附着的微粒大小空气湿度决定的沉降系数浮游菌监测沉降菌监测表面微生物监测过滤过滤层流技术层流技术化学消毒化学消毒紫外线（紫外线（UV）微生物的污染与控制微生物的污染与控制204:43第二章5.污染来源与控制5.2 水存在的微生物类型存在的微生物类型来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段革

12、兰氏阴性菌（98%）微球菌属酵母菌真菌放线菌原水软化水去离子水蒸馏水反渗透水分配系统原水质量水的处理与分配膜过滤法化学法化学法过滤法过滤法物理处理法物理处理法微生物的污染与控制微生物的污染与控制214:43第二章5.污染来源与控制5.3 人员（皮肤与呼吸道）存在的微生物类型存在的微生物类型来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段金黄色葡萄球菌八叠球菌类白喉菌不动杆菌产碱菌亲脂的酵母菌真菌类的表皮癣菌、小芽胞癣菌、发癣菌浮生细菌（耳道）皮肤头发耳道分泌物不良操作习惯接触药物的几率卫生操作习惯卫生操作习惯人员培训与考核人员培训与考核接触皿法个人卫生措施（个人卫生措施（洗涤、更衣

13、、消洗涤、更衣、消毒）毒）防护衣防护衣微生物的污染与控制微生物的污染与控制224:43第二章5.污染来源与控制5.4 物料存在的微生物类型存在的微生物类型来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段植物源性致病菌如：欧文菌、假单胞菌、乳酸菌、芽孢杆菌、链球菌、黑霉菌、链格菌、镰刀霉菌、无菌丝酵母菌等等未经处理的物料物料操作中的污染，如取样、操作等物料处理的效率储存条件物料未保护，导致污染微生物限度检查热处理热处理过滤过滤辐射辐射环氧乙烷环氧乙烷从灭菌溶剂再结从灭菌溶剂再结晶晶卫生操作卫生操作微生物的污染与控制微生物的污染与控制234:43第二章5.污染来源与控制5.5 建筑、设

14、备存在的微生物类型存在的微生物类型来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段霉菌：分歧孢子霉菌、曲霉菌墙壁天花板地板排水门窗设备管道材料选型施工维护洁净设计接触皿法清洁验证卫生设计卫生设计卫生材料卫生材料清洁（清洁（SOP、清、清洁剂、消毒剂）洁剂、消毒剂）灭菌灭菌清洗室设计清洗室设计清洁工具清洁工具微生物的污染与控制微生物的污染与控制244:434:431.洁净室（区）的简介2.洁净室（区）的布局图3.洁净室（区）的管理第三章洁净室（区）环境的控制Chapter 3254:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介洁净室（区）：需要对悬浮粒

15、子及微生物含量进行控制的房间（区域）。其建筑结构、装备及其使用均具有防止该区域内污染物的引入、产生和滞留的功能。HVAC：Heating, Ventilation and Air Conditioning或者Heating, Ventilation, Air-conditioning and Cooling的英文缩写，就是供热通风与空气调节。1.1相关定义空气调节去除污染物制冷or采暖除湿or加湿去除粒子保证房间压差提供新鲜的空气18264565%HVAC不能做什么？不能做什么？不能对已污染的表面进行清洁；不能弥补操作人员不按程序操作带来的负面影响；不能创造奇迹！HVAC旨在：确保人员的舒适性

16、；保护设施内部人员和设施外部人员不受空气中有害物质的危害；保证产品质量；保证产品生产所要求的空气环境。264:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介1.1相关定义单向流 （ unidirectional airflow）：沿着平行流线，以一定流速、单一通路、单一方向流动的气流，曾被称为层流。 非单向流 （ nonunidirectional airflow ）：具有多个通路循环特性或气流方向不平行的，不满足单向流定义的气流，曾被称为乱流。送风口送风口：含静压箱，高效过滤器，散流板，在改建和新建各级洁净室，可作为终端高效过滤装置在洁净顶棚等处。回风口回风口：

17、回风用的。室内负荷一定时，需要给室内送的冷风量是一定的。室内风相对于新风来说，夏季温度一般较低，所以利用回风道回一些风进空调箱，跟少量新风混后，制成冷风送入室内。相对于全部用新风制冷风来说，可以有效地节能。排风口排风口：排风用的。274:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介1.1相关定义传递窗（Transfer window）：主要适用于洁净区与非洁净区之间，或洁净室与洁净室之间的小货物传递，可有效的减少洁净室门的开启次数，把洁净区的污染减少到最低程度。气锁室（air lock）：一般设置在洁净室的出入口，是用以阻隔外界污染气流和控制压差而设置的缓冲间，

18、这些气锁室通过若干扇门对出入空间进行控制，同时还为穿/脱洁净服、消毒、净化等操作提供场所。284:434:43洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径悬浮粒子的统计数量来区分的洁净程度。悬浮粒子悬浮粒子用于空气洁净度分级的空气悬浮粒子尺寸范围在0.1m1000m的固体和液体粒子。用标准（GB/T 16294）提及的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。浮游菌浮游菌用标准（GB/T 16293）提及的方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。洁净工作服洁净工作服为把工作人员产生的粒子限制在最小程

19、度所使用的发尘量少的洁净服装。洁净室被污染后，净化空调系统开始运行至恢复到稳定的规定室内洁净度等级的时间。第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制洁净室（区）的洁净度必须以尘粒和微生物为环境控制对象。二者相比，微生物更难控制。因为：1、存在范围广2、生长速度快3、生存能力强1.1相关定义1.洁净室（区）的简介294:434:43指杀灭或去除物体上所有微生物的方法，包括抵抗力极强的细菌芽胞。 sterilization灭菌杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。通常用化学的方法来达到消毒的作用。用以消毒的药品称为消毒剂。disinfection消毒杀灭物体中的致病菌，物体中还含有

20、芽孢、嗜热菌等非致病菌anticorrosive杀菌指没有活菌的意思。防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，称为无菌操作。sterile无菌第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.1相关定义1.洁净室（区）的简介利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖anticorrosive防腐304:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介1.2 HVAC工作原理简介u 利用过滤器有效地控制送入室内的全部空气的洁净度，由于细菌都会依附在微粒上，微粒过滤同时也滤掉了细菌；u 利用合理的气流组织排除已经发生的污染，由送风口送入洁净空气，使室内产生的微粒和细

21、菌被洁净空气稀释后强迫其由回风口进入系统的回风管路，在空调设备的混合段和从室外引入的经过过滤的新风混合，再经过进一步过滤后又进入室内，通过反复的循环就可以把污染控制在一个稳定的水平上，这个水平就应该低于相应的洁净度级别；u 通过调整，洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差不低于洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差不低于10帕帕，相同洁净度级别的不同功能操作间之间保持适当的压差梯度，防止污染或交叉污染。314:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介1.2 HVAC工作原理简介空调系统换气次数空气流型气流方向排风位置空气速率过滤效率空气流量房

22、间压力A级：0.360.54m/sC级：25次/hD级：15次/hC、D级：非单向流A级：单向流324:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介1.3洁净室（区）的特点表面光滑、易于清洁、无死角；不同洁净度级别的房间有足够的压差；天花板密封；A级区无地漏、其他区域地漏应液封设置更衣室；更衣室的洁净度级别与高级别的房间相同门设计成连锁；HVAC系统有报警装置；气流流型有效。334:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.洁净室（区）的简介1.4洁净室（区）分级A级高风险操作区，应当用单向流操作台（罩）维持该区域的环境状态。单向流系统在其工作区

23、域必须均匀送风。（0.360.54m/s）|B级高风险A级洁净区所处的背景区域|CD无菌药品生产过程中重要程度较低操作步骤的洁净区|344:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制2.洁净室（区）的布局图2.1洁净室（区）布局图洁净厂房354:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制2.洁净室（区）的布局图清洗灭菌室l培养基的配制、灭菌；l污染物的处理、灭菌；l平皿、三角瓶的洗刷；l器皿的晾干微生物限度室微生物阳性室l对试样进行微生物限度检查；l培养基平板制备；l致病菌检查时的初步增菌试验；l限度检查方法学验证试验l阳性对照试验；l菌种的传代等；l增菌培养后的检查；

24、l培养基适用性检查培养室l增菌及培养生化室l微生物计数及结果观察；l菌种保存；l已灭菌培养基的储存2.2洁净室（区）布局图微生物室364:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理物理消毒：机械、热力、辐射（紫外和电离）化学消毒：含氯化合物（漂白粉、次氯酸钙、二氧化氯、二氯异氰尿酸钠等）、醇类（75%乙醇）、酸类（乳酸）、过氧化物类（过氧乙酸、过氧化氢、臭氧等）3.1洁净室（区）卫生3.1.1消毒方法物理消毒清洁工具如拖布、擦布等紫外灯照射等化学消毒0.1%新洁尔灭溶液（临用现配）75%乙醇溶液（保存期一周）374:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）

25、环境的控制3.洁净室（区）的管理3.1洁净室（区）卫生3.1.2灭菌方法p 常用的灭菌方法有湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法和过滤除菌法。p 只要物品允许，应尽可能选用最终灭菌法灭菌。p 湿热灭菌法应确认灭菌柜在不同装载时可能存在的冷点。当用生物指示剂进一步确认灭菌效果时，应将其置于冷点处。本法常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子。p 微生物室常用的灭菌方式是湿热灭菌法，灭菌条件有 12115min和12130min。384:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理人员：v 只允许经过批准并受过专门训练的工作人员进入洁净区，进入洁净区的人员不

26、得化妆，不得佩戴饰物。v 工作人员首先在入口处换上专用洁净鞋，进入一更，脱去普通工作服，洗手进入二更。v 自上而下穿戴好相应洁净级别的口罩、工作服、工作鞋，进入缓冲间，用75%乙醇消毒双手及手腕部，方可进入洁净室。v 工作结束后，进入二更自下而上脱掉洁净工作鞋、工作服、口罩，折好放入布袋中。v 进入一更，穿上普通工作服，在入口处脱下专用洁净鞋，方可走出洁净区。物品：v 物品由一般区进入洁净区时，先将物品用浸润75%乙醇的擦布擦拭干净，将一般区传递窗打开，把物品放入传递窗中，将门关闭。打开传递窗紫外灯照射消毒30分钟，关闭紫外灯后，方可从洁净区内将传递窗打开，取出物品，将门关闭。v 物品由洁净区

27、传递至一般区时，将洁净区传递窗打开，把物品放入传递窗中，将门关闭。从一般区将传递窗打开，取出物品，将门关闭。v 不能通过传递窗进入洁净区的大的物品，先要在一般区清洁干净，然后在缓冲间内进一步用75%乙醇擦拭消毒后，再搬进洁净室。3.2进出管理394:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理3.2进出管理3.2.1进出一般区走廊换鞋洗手更衣操作工序进出3.2.2进出洁净区走廊脱（穿）鞋脱（穿）衣洗手穿（脱）洁净服操作工序进出手消毒404:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理洁净区清洁卫生管理规程 正常生产情况下，洁净区的

28、清洁内容和频率见附表。 长期停产的房间必须经彻底清洁并消毒后方可使用。 生产工序彻底清场后需用消毒剂全面消毒，每周一次。生产前再用75%乙醇对接触物料的设备、器具表面消毒。 大扫除：彻底清洗地板、墙、房顶、电气设备、窗、固定和可移动设备，每年至少4次。在大扫除期间，不得进行生产。3.3清洁、消毒方法清洁内容清洁内容清洁方法清洁方法清洁周期清洁周期清洁剂、消毒清洁剂、消毒剂剂走 廊洗衣房更衣室清洁间 地面、墙湿拖、擦1次天 水池、清洁工具、地漏湿擦、水冲1次天 房顶湿擦1次周 衣柜、门窗及相关设施湿擦1次周器具清洗间器具存放间内包材暂存间原料暂存间中间站等房间 地面、墙湿拖、擦1次天 水池、清洁

29、工具、地漏湿擦、水冲1次天 托盘、运输车、秤、吸尘器湿擦1次天 门窗及相关设施湿擦1次周 房顶湿擦1次周生产操作间 地面、墙湿拖、擦1次天 门窗及相关设施湿擦1次天 房顶及相关设施湿擦1次/周整个级区 清洁工具消毒1次/周消毒剂1或3 墙、房顶及相关设施消毒1次/周消毒剂1或3 水池、地漏、地框消毒每天生产结束后消毒剂2或3消毒剂1、75%乙醇；2、0.5%醋酸洗必泰，3、0.1新吉尔灭。414:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理3.4常用的清洁剂、消毒剂3.4.1清洁剂BDACE洗洁精管道，设备油渍处理；地板，墙面的油渍处理；洁净区工作服、帽、鞋的洗

30、涤，拖布的洗涤；视污渍严重程度予以稀释使用。高效洁厕灵各种陶瓷制品表面清洁；不得用于搪瓷表面清洁皂液、洗涤剂、洗衣粉溶液：按说明书使用玻璃清洗剂玻璃，瓷表面的清洁；喷雾至玻璃上揩擦1%氢氧化钠溶液供设备、管道等清洗用424:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理3.4常用的清洁剂、消毒剂3.4.2消毒剂BDACE0.1%新洁尔灭：与普通肥皂或肥皂粉接触时能使灭菌效果消除或减弱，因此必须用水充分清洗后使用。0.5%醋酸洗必泰：贮存在加锁的房间内，避开日光和热源。供地漏消毒用含0.5%醋酸洗必泰的75%乙醇液：贮存在加锁的房间内，避开日光和热源。供洁净室和设备

31、消毒用75%乙醇：储存在加锁的房间内，避开日光直射和热源3%双氧水：兼有洁净和杀菌作用，可用于洁净室生产用具和设备的清洗和消毒灭菌消毒剂的配制区域：根据使用区域，一般区直接在使用地点或清洗间配制，洁净区在清洗间配制。434:43第三章洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3.洁净室（区）的管理3.5关键控制参数控制参数控制参数影响影响温度()和相对湿度(%)影响产品工艺条件和细菌的繁殖条件、由操作舒适度带来的对产品质量的影响换气次数(次/h)影响洁净度和人员舒适度静压差(pa)影响洁净度悬浮粒子(粒/m3)主要影响产品纯度微生物限度(cfu/皿)影响产品质量、交叉污染和无菌程度照度(lu

32、x)影响产品的工艺条件（课件异物检测）系统自净时间(t)代表洁净室系统的洁净状态的“恢复能力”第五十三条 产尘操作间（如干燥物料或产品的取样、称量、混合、包装等操作间）应保持相对负压或采取专门的措施，防止粉尘扩散、避免交叉污染并便于清洁。444:434:431.环境监测简述2.环境监测相关术语3.环境监测标准及频率4.环境监测操作步骤简述第四章洁净室（区）环境的监测Chapter 4454:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测1.环境监测简述第四章 厂房与设施第二节 生产区第四十八条 应当根据药品品种、生产操作要求及外部环境状况等配置空调净化系统，使生产区有效通风，并有温度、

33、湿度控制和空气净化过滤，保证药品的生产环境符合要求。第九章 生产管理第二节 防止生产过程中的污染和交叉污染第一百九十八条 应定期检查防止污染和交叉污染的措施并评估其适用性和有效性。u 药品制造厂房洁净生产区和其他控制过程都是药品生产保证程序中的一个重要部分重要部分。u 环境监测是用于评价生产环境控制效果的一种工具。u 环境监测的数据是用来评价清洁与灭菌程序的有效性。环境监测的目的464:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测1.环境监测简述环境监测的必要性满足供应充分利用产能质量符合性法规符合性降低质量成本缩短放行周期474:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监

34、测2.环境监测相关术语相关术语相关术语21超出关键参数的正常工作范围，应采取调查和纠偏措施以防止达到纠偏限度。当超出某一关键参数的可接受标准，应进行调查并采取纠偏措施。警戒限警戒限纠偏限纠偏限484:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测2.环境监测相关术语空态动态静态010302空态：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，但是没有生产设备、原材料或人员的状态。静态：静态a：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，生产工艺设备已安装、洁净室（区）内没有生产人员的状态。静态b：洁净室（区）在生产操作全部结束，生产操作人员撤离现场并经过20

35、min自净后。动态：洁净室（区）已处于正常生产状态，设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作。测试状态测试状态494:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测洁净度等级洁净度等级air cleanliness class洁净空间单位体积空气中，以大于或等于被考虑粒径的粒子最大浓度限值进行划分的等级标准。洁净度级别洁净度级别悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数0.5m（静态）（静态）悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数5m（静（静态）态）A级352020B级3 520029C级35 20002900D级352 00002 9000洁净级别沉降菌cfu/4小时（动态）A级

36、1B级5C级50D级100沉降菌洁净度级别浮游菌cfu/m3（动态）A级1B级10C级100D级200浮游菌3.环境监测标准及频率504:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测洁净级别气流组织空气流速换气次数压差温度相对湿度标准频率标准频率标准频率标准频率标准频率标准频率A级单向流24个月0.360.54m/s12个月洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差不小于10Pa每周一次1826每次实验4565%每次实验C级非单向流2040/h12个月D级非单向流620/h12个月3.环境监测标准及频率引自中国药典2015年版514:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环

37、境的监测洁净级别分类空气悬浮粒子浮游菌沉降菌标准频率（静态静态）标准cfu/m3警戒限/纠偏限频率（动态）标准cfu/4小时小时警戒限/纠偏限频率（动态）A级层流净化台见下表每月每月11/1每月每月11/1每次实验每次实验C级限度室、阳性室见下表每季度每季度10050/70每季度每季度5025/35每季度每季度微生物室辅助间见下表每半年每半年10050/70每半年每半年5025/35每半年每半年D级操作间见下表每季度每季度200100/140每季度每季度10050/70每季度每季度辅助间见下表每半年每半年每半年每半年每半年每半年3.环境监测标准及频率洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米静态动态

38、0.5m5.0m0.5m5.0m标准警戒限/纠偏限标准警戒限/纠偏限标准警戒限/纠偏限标准警戒限/纠偏限A级35201700/24002010/143520不监测20不监测C级35200017000/2400029001400/2000352000017000002900014000D级3520000 170000/2400002900014000/20000不作规定不作规定不作规定不作规定524:43悬浮粒子 仪器：CLJ-E301型激光尘埃粒子计数器。 将悬浮粒子计数器表面消毒后，放入物料缓冲间。 检测人员按人员进入洁净区的要求穿好相应级别洁净服，戴好口罩进入洁净室。悬浮粒子01沉降菌02

39、浮游菌03悬浮粒子计数器原理示意图沉降菌 采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。浮游菌 采样时，带浮游微生物的空气高速通过微孔，被均匀撞击在培养皿内的琼脂表面；这些活体微生物在琼脂表面获得营养均匀和充分，在培养过程中，快速发生动态再水化过程，高速生长，从而更快得出结果。第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测4.环境监测操作步骤简述4.1洁净区环境监测534:43第四章洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测在空

40、态或静态a测试时，对单向流洁净室（区）测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。对非单向流洁净室（区）测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。在静态b测试时，对单向流流洁净室（区）测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10min自净后开始。对非单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。在动态测试时，应记录生产开始的时间以及测试时间。空态或静态aC、D级A级净化至少30分钟后人员撤离后，净化至少10分钟后人员撤离后，净化至少20分钟后C、D级静态b4.环境监测操作步骤简述4.2测试时间544:434:431.微生物洁净室简介2.

41、微生物室管理3.相关工作第五章微生物室简述Chapter 5554:444:44第五章微生物室简述微生物室简述1.微生物洁净室简介1.1洁净室分布中国药典2015年版 非无菌产品微生物限度检查用于检查非无菌制品受微生物污染的程度。检查项目包括需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、大肠埃希菌、沙门菌等。限度检查室用于对菌种的处理，以及阳性对照试验等。阳性对照室564:444:44第五章微生物室简述微生物室简述1.微生物洁净室简介1.2产品检测项目项目执行标准企业标准中国药典2015年版四部性状鉴别溶液的澄清度与颜色氯化物干燥失重炽灼残渣钙盐铅重金属砷盐黏度pH值微生物限度项目执行标准企业标准中国药典20

42、15年版四部性状鉴别酸度淀粉氯化物干燥失重炽灼残渣铁盐重金属砷盐含量微生物限度574:444:44第五章微生物室简述微生物室简述1.微生物洁净室简介胰酪大豆胨液体培养基麦康凯液体培养基麦康凯琼脂培养基大肠埃希菌检查大肠埃希菌检查03沙氏葡萄糖琼脂培养基霉菌和酵母菌总数计数霉菌和酵母菌总数计数02胰酪大豆胨琼脂培养基胰酪大豆胨液体培养基需氧菌总数计数需氧菌总数计数01胰酪大豆胨液体培养基RV沙门菌增菌液体培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基三糖铁琼脂培养基沙门菌检查沙门菌检查04微生物计数控制菌检查1.2产品检测项目用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数用于在规定的试验条件下，检查供试品种

43、是否存在特定的微生物微生物限度检查：微生物限度检查：584:444:44第五章微生物室简述微生物室简述1.微生物洁净室简介1.3相关术语复壮复壮Rejuvenation对已衰退的菌种(群体)进行纯种分离和选择性培养，使其中未衰退的个体获得大量繁殖，重新成为纯种群体的措施。0101培养培养Culture在实验室条件下，以人工使纯菌种大量生长和繁殖的方法，叫做培养。0202接种接种Inoculation按无菌操作技术要求将目的微生物移接到培养基质中的过程。0303无菌操作无菌操作Aseptic technique用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作。在各种生物实验中,为了

44、防止微生物地生长和繁殖影响实验的进行,也要在无菌的环境下进行。0404阳性对照阳性对照Positive control加入不大于100cfu的对照菌，按供试品检查。阳性对照试验应检出相应菌.0 05 5594:444:44第五章微生物室简述微生物室简述2.微生物室管理2.1非洁净区管理与检验中心其他区域类似。l 新员工和转岗人员由所在岗位负责人具体培训，原则上三个月后进行岗位技能鉴定，合格后方可签字，岗位技能鉴定由岗位负责人和部门负责人进行。l 实验人员进入实验室应更衣、换鞋，着装整齐，工作服、鞋保持清洁，严禁将食品带入实验室。每天晨会后，进行卫生的清扫。实验过程中，保持实验区域包括操作面、房

45、间、实验走廊的卫生。实验结束后及时进行后清场。非本区域工作人员，在未经部门负责人批准前禁止进入实验区域。604:444:44第五章微生物室简述微生物室简述2.微生物室管理2.2洁净区管理环境环境 微生物限度室和阳性室应为C C级条件下局部级条件下局部A A级单级单向流空气区域向流空气区域。室内温度控制在18182626，相对湿度45%45%65%65%，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差、洁净室（区）与室外大气的静压差应大于10Pa。室内紫外线杀菌灯的使用寿命为1000小时（或根据厂家说明书时间为准），根据累积使用时间进行更换，填写紫外灯使用记录，并由专人于每月5日之前汇总上月紫外灯使用累

46、积时间。清场清场 进入洁净区前保证紫外灯和洁净区空气过滤器工作至少一个小时，进入操作室后先打开净化台开关，运行2030分钟，同时用0.1%新洁尔灭、75%酒精或其它适宜消毒液（消毒剂每月更换一次）擦拭操作台面、仪器，同时观察记录温度、相对湿度及压差。每次操作完毕后将实验物品通过传递窗一并移出洁净区，然后进行后清场，清洁操作台面、仪器、地面，达到无积水无杂物。检查确认各项仪器设备处于停止状态并断电。人员离开操作室前对操作台面、仪器、地面进行擦拭消毒，所有操作人员离开后，打开紫外灯开关，照射30分钟，填写实验室洁净区清场记录。每周至少一次对洁净区进行全面清洁和消毒，用浸有消毒液的毛巾擦遍各房间六面

47、、墙角等后，打开紫外灯照射30分钟，完毕后填写实验室洁净区消毒记录，按照相应的环境监测规程进行环境监测。614:444:44第五章微生物室简述微生物室简述3.相关工作概述相关工作1.产品、工艺用水等微生物限度检查产品、工艺用水等微生物限度检查；2.洁净室（区）的环境监测洁净室（区）的环境监测；3.培养基适用性检查；4.微生物检查方法适用性检查试验；5.微生物检验相关仪器的验证；6.菌种的复壮与传代；7.培养基、菌种的储藏；8.部分菌种的鉴别624:444:44第五章3.1微生物计数法产品1产品2纯化水生活饮用水胰酪大豆胨琼脂培养基R2A琼脂培养基沙氏葡萄糖琼脂培养基3035培养35天3035培养不少于5天2025培养57天需氧菌总数需氧菌总数霉菌和酵母菌总数3.相关工作概述微生物室简述微生物室简述结果观察634:444:44第五章3.2控制菌检查产品1产品2胰酪大豆胨液体培养基麦康凯液体培养基RV沙门菌增菌液体培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基三糖铁琼脂培养基大肠埃希菌沙门菌30351824h麦康凯琼脂培养基42442448h30351872h结果观察胰酪大豆胨液体培养基30351824h30351824h30351848h30351824h3.相关工作概述微生物室简述微生物室简述644:44