YY动物细胞工程12ppt.ppt

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1、提问：提问：v植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养植物组织培养, 植物体细胞杂交植物体细胞杂交这些技术的理论基础：这些技术的理论基础：植物细胞的全能性植物细胞的全能性动物细胞全能性如何？动物细胞全能性如何？动物细胞动物细胞工程常用的技术有哪些？工程常用的技术有哪些？动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体制备单克隆抗体制备细胞核移植细胞核移植动物动物细胞细胞工程工程技术技术动物细胞工程的基础动物细胞工程的基础教学目标教学目标 简述动物细胞培养的过程、条件简述动物细胞培养的过程、条件及应用。及应用。 简述通过动物体细胞核移植技术简述通

2、过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。克隆动物的过程和应用前景。重点重点 动物细胞培养的过程及条件。动物细胞培养的过程及条件。 用动物体细胞核移植技术克隆动物用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。的过程。难点难点 用动物体细胞核移植技术克隆动物用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。的过程。重点难点重点难点 烧伤病人图片烧伤病人图片异体皮肤移植图片异体皮肤移植图片 皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需要的健真皮受损面积

3、较大，常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的，人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的，取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施，合过程中为保护创面而采取的措施，10101414天后就天后就要被身体排斥。要被身体排斥。 如果一个大面积烧伤的病人来说，自体如果一个大面积烧伤的病人来说，自体皮肤有限，其他渠道的皮肤来

4、源不足。如何皮肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何才能获得大量的自体健康皮肤？才能获得大量的自体健康皮肤？人耳鼠“人耳鼠人耳鼠”再出风头再出风头 20012001年，一只特别的活老鼠在年，一只特别的活老鼠在北京引起轰动北京引起轰动这是有着一对红这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是，这只小白小白鼠。值得一提的是，这只小白鼠的背上，竟长着一只几乎与身子鼠的背上，竟长着一只几乎与身子一般大小的一般大小的“人耳人耳”。这只老鼠背。这只老鼠背上的上的“人耳人耳”是由上海市第九人民是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林医院副院长、整复外科

5、主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的教授利用组织工程技术复制出来的。 在京展出的数天，尽管门票高达在京展出的数天，尽管门票高达2020元，但还是有将近元，但还是有将近2020万人，心甘情愿地掏钱一睹万人，心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠人耳鼠”的风采。的风采。 人耳鼠的出现，透露了怎样的信息？1、概念、概念 是指从动物机体内取出相关的是指从动物机体内取出相关的组组织织，将它分散成，将它分散成单个细胞单个细胞，然后放，然后放在适宜的在适宜的培养基培养基中，让这些细胞中，让这些细胞生生长长和和增殖增殖。2、原理、原理细胞分裂增殖细胞分裂增殖一、动物细胞培养一、动物细胞培养如何进行细胞培养如何进行细胞

6、培养? ?请同学阅读教材和图请同学阅读教材和图2-12-16 6来描述细胞培养的基本过程：来描述细胞培养的基本过程：取动物动取动物动的组织块的组织块胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个单个细胞细胞加培加培养液养液细胞细胞悬浮悬浮液液接触接触抑制抑制部分细胞部分细胞“癌癌变变”，无限传代，无限传代动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成动物体最终培养成动物体10代代细胞细胞原代培养原代培养传代培养传代培养细胞贴壁细胞贴壁胰蛋白胰蛋白酶处理、酶处理、细胞株细胞株细胞细胞细胞系细胞系2.动物细胞培养过程：动物细胞培养过程：培养瓶培养瓶适宜条适宜条件培养件培养分瓶分瓶培养培养强调一：细胞贴壁过程强调一：细胞

7、贴壁过程细胞贴壁：细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。培养瓶或培养皿壁要求：培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易表面光滑、无毒、易于于 贴贴 附。附。当贴壁细胞分裂生当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时长到表面相互接触时, ,细胞就会停止分裂增细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细殖，这种现象称为细胞的接触抑制。胞的接触抑制。强调二：接触抑制强调二：接触抑制有关概念有关概念:1 1、原代培养：原代培养：将动物组织消化后的初次将动物组织消化后的初次 培养培养。（分瓶前）（分瓶前）2 2、传代培养：传代培养：

8、将将贴满瓶壁的需要重新用胰蛋贴满瓶壁的需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续白酶等处理，然后分瓶继续培养培养，让细胞继，让细胞继续增殖。这样的续增殖。这样的培养培养过程过程称为传代培养。称为传代培养。 （分瓶后）（分瓶后）在传代培养过程中在传代培养过程中 10代以前的代以前的细胞核型不变细胞核型不变 1050代，增殖逐渐减慢，以至于完全停代，增殖逐渐减慢，以至于完全停止，部分细胞的细止，部分细胞的细胞细胞核型可能发生改变胞细胞核型可能发生改变 50代以后的细胞发生突变，获得不死性，代以后的细胞发生突变，获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展。朝着等同于癌细胞的方向发展。应用：目前应用：目前使用

9、的使用的或或冷冻保存的冷冻保存的正常细胞通常正常细胞通常为为1010代以内代以内，以保持细胞，以保持细胞正常的二倍体核型正常的二倍体核型。有关概念有关概念3 3、细胞株：细胞株：10到到40、50代的细胞，代的细胞，遗传物质没发生改变。遗传物质没发生改变。 4 4、细胞系：、细胞系：超过超过50代的细胞，遗传代的细胞，遗传物质发生改变，可无限增殖。物质发生改变，可无限增殖。 细胞株和细胞系的区别细胞株和细胞系的区别： 细胞系的细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。去接触抑制，容易传代培养。细胞细胞悬浮悬浮液液1010代代细胞细胞5

10、050代代细胞细胞无限无限传代传代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？多数组织细胞固定在表面生多数组织细胞固定在表面生长和分裂长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变思考题：思考题：1 1、选用健康动物体内什么样的组织块做细胞培养、选用健康动物体内什么样的组织块做细胞培养材料？为什么？材料？为什么？因为这些组织或器官，分裂能力因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。旺盛，易于培养。动物胚胎或幼龄个体的器官或组织动物胚胎或幼龄个体

11、的器官或组织拓展拓展-动物组织或细胞培养的难易程度动物组织或细胞培养的难易程度幼体组织或细胞幼体组织或细胞 老龄组织或细胞老龄组织或细胞分化程度低的组织或细胞分化程度低的组织或细胞 分化程度高的组织分化程度高的组织 或细胞或细胞肿瘤组织或细胞肿瘤组织或细胞 正常组织或细胞正常组织或细胞3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？的物质是什么成份？催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质白质( (胶原蛋白等胶原蛋白等) )。4、细胞膜的主要成份是什么？、细胞膜的主要成份是什么？蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂

12、成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。培养。2 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？6 6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？7 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？注意时间的控制注意时间的控制 不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适PHPH不同，而正常组织不同，

13、而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PHPH较接近较接近5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？能能3.3.总结：动物细胞总结：动物细胞培养过程培养过程动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液剪碎用胰蛋白酶处理剪碎用胰蛋白酶处理1010代细胞代细胞转入培养瓶转入培养瓶40-5040-50代细胞代细胞传传代代培培养养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液稀释加培养液稀释传代传代1010代以内，代以内，遗传物质不改变，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型保持正常二倍体核型。传代传代10-5010-50代左右

14、，增长缓慢以代左右，增长缓慢以至于完全停止，至于完全停止，部分细胞核型可部分细胞核型可能发生变化能发生变化（遗传物质可能改变（遗传物质可能改变）为什么用胰蛋白酶处理？为什么用胰蛋白酶处理？原代培养特点：原代培养特点：细胞贴壁、接触细胞贴壁、接触抑制抑制继续传代培养少部分细胞继续传代培养少部分细胞获得不获得不死性死性，细胞突变细胞突变，遗传物质已经遗传物质已经改变改变，等同于癌细胞等同于癌细胞。原原代代培培养养归纳归纳过程过程取取 的组织、器官的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液 酶酶 细胞贴壁、细胞贴壁、接触抑制接触抑制 培养培养 10 10代细胞代细胞 培养培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系

15、细胞系单个细胞单个细胞加加 液液遗传物质遗传物质 改变改变遗传物质遗传物质 改变改变动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物物胰蛋白胰蛋白培养培养原代原代传代传代未未已已50代细胞代细胞 多细胞动物和人体的细胞多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所都生活在内环境中，根据你所学的知识，思考并讨论下列问学的知识，思考并讨论下列问题？题？1、体外培养细胞时需要哪些、体外培养细胞时需要哪些提供那些物质？提供那些物质？2、体外培养的细胞需要什么、体外培养的细胞需要什么样的环境条件？样的环境条件？1 1、无菌、无毒的环境（先、无菌、无毒的环境（先培养液培养液、培养器具培养器具无无菌处理；添加一定量的菌

16、处理；添加一定量的抗生素抗生素，防止污染；定，防止污染；定期期更换培养液更换培养液，清除代谢产物清除代谢产物) )2 2、营养、营养 糖糖（葡萄糖）、（葡萄糖）、氨基酸氨基酸、促生长因子促生长因子、无机无机盐盐和和微微 量元素量元素等（合成培养基）；通常等（合成培养基）；通常+ +血血清或血浆清或血浆等天然成分。等天然成分。 （二）（二） 动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件3 3、温度温度(36.5(36.50.5)0.5)和和P PH H(7.2(7.27.4)7.4)4 4、气体环境：、气体环境： 主要有主要有O O2 2和和COCO2 2（操作中用的是（操作中用的是95%95%空气和空

17、气和5% CO5% CO2 2 ）提醒提醒 CO2 2作用作用调节培养基调节培养基pH; O2 2作用作用细胞有氧呼吸，细胞代谢必需细胞有氧呼吸，细胞代谢必需 所用装置所用装置培养皿或松盖培养瓶培养皿或松盖培养瓶+培养箱。培养箱。获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果或细胞产物或细胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动葡萄糖、动物血清物血清蔗糖、植物蔗糖、植物激素激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动

18、物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织和动物细胞培养的比较植物组织和动物细胞培养的比较（三）（三） 动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用v1大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）扰素、单克隆抗体）v2作为基因工程中的受体细胞作为基因工程中的受体细胞v3培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性判断某种物质的毒性v4培养正常或各种病变的细胞，用于生理、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等研究，为治疗和预防癌症及病理、药理等研究，为治疗和预防癌症及其他疾病提供

19、理论依据其他疾病提供理论依据二二. .动物细胞核移植技术和克隆动物动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个将动物的一个细胞核细胞核，移入一个已经，移入一个已经去去掉细胞核掉细胞核的的卵母细胞卵母细胞中，使其中，使其重组重组并发育并发育成一个成一个新的胚胎新的胚胎，这个新的胚胎最终发育，这个新的胚胎最终发育为为动物个体动物个体（克隆动物）（克隆动物）分分类类胚胎细胞核移植：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全细胞分化程度低，恢复全能性容易能性容易 细胞分化程度高，恢复全能细胞分化程度高，恢复全能性不容易性不容易1 、动物细胞核移植概念：动物细胞核移植概念：2、体细

20、胞核移植的过程：体细胞核移植的过程：( (2 2）核移植的受体细胞核移植的受体细胞M中期卵母细胞中期卵母细胞用物理或化学方法激活受体细胞，完成细用物理或化学方法激活受体细胞，完成细胞分裂和发育进程。胞分裂和发育进程。（4 4）. .再激活受体细胞，构建重组胚胎方法再激活受体细胞，构建重组胚胎方法 归纳：归纳：( (1 1) ). .原理：动物原理：动物 细胞核细胞核 的全能性的全能性( (不能说动物细胞不能说动物细胞 全能性全能性) )（3 3）核移植时，先用核移植时，先用 电刺激电刺激 使供、受体细使供、受体细胞融合胞融合 （5 5）选卵母细胞做受体细胞原因选卵母细胞做受体细胞原因体积大，易

21、操作体积大，易操作 ；含有促使细胞核全含有促使细胞核全能性表达的能性表达的物质和营养条件。物质和营养条件。（6 6）去掉受体卵母细胞的核的原因去掉受体卵母细胞的核的原因保证核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自保证核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自（有重要利用价值的动物提供的）供体细胞。（有重要利用价值的动物提供的）供体细胞。（8.8.）属无性生殖，基因型不变（与供属无性生殖，基因型不变（与供核核动物动物基基因因型一致）型一致）（7 7）. .核移植的供体细胞选用传代核移植的供体细胞选用传代1010代以内代以内细胞的原因细胞的原因因为因为1010代以内的细胞一般能代以内的细胞一般能保持正常的二

22、倍保持正常的二倍体核型体核型, ,保证了供体细胞正常的遗传基础。保证了供体细胞正常的遗传基础。（9.9.）移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不本不100%100%相同的原因相同的原因1)1)绝大部分绝大部分DNADNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量来自于供体细胞核，但其核外还有少量的的DNADNA，即线粒体中的，即线粒体中的DNADNA（细胞质遗传）是来自于受（细胞质遗传）是来自于受体卵母细胞。体卵母细胞。2)2)外界外界环境条件环境条件的影响引起的影响引起不可遗传的变异不可遗传的变异。3)3)在发育过程中可能发生在发育过程中可能发生 基因突变基因突变,

23、 ,染色体变异染色体变异 导导 致性状改变。致性状改变。（10.10.）该过程用到的技术手段：该过程用到的技术手段： 动物细胞培养动物细胞培养、 动物细胞融合动物细胞融合、 早期胚胎培养早期胚胎培养 和和 胚胎移植胚胎移植。3、体细胞核移植技术的应用前景：体细胞核移植技术的应用前景：（1）、在畜牧业中、在畜牧业中可以可以加速家畜遗传加速家畜遗传改良的进程改良的进程（2）、保护保护濒危物种濒危物种（3）、医药卫生领、医药卫生领域域生产医用蛋白质生产医用蛋白质及组及组织器官的移植织器官的移植（4）、了解胚胎发育和衰老了解胚胎发育和衰老过程过程；追踪研究疾病的发展过追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病程

24、和治疗疾病4、体细胞核移植技术存在的问题：体细胞核移植技术存在的问题：成活率低成活率低; ;克隆动物的健康问题克隆动物的健康问题; ;克隆动物食品的安全性问题。克隆动物食品的安全性问题。克隆人的伦理问题克隆人的伦理问题思考与探究思考与探究2.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？ 为什么？为什么？动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱也就没有类似植物组织

25、或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。其分化成所需要的组织或器官。3.1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为）的奶牛，年产奶量为30.8 t，创造了世，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产

26、奶量年平均水平仅为水平仅为34 t。（1）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由。说明理由。可以。卢辛达的产奶量很高，有高产奶的遗传基础可以。卢辛达的产奶量很高，有高产奶的遗传基础，利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本，利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础，如果精心培育和饲养，有可能在世界范围内推广，如果精心培育和饲养，有可能在世界范围内推广，克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高，克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高产的

27、后代，从而加快奶牛改良进程。产的后代，从而加快奶牛改良进程。该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多，尤该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多，尤其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛群出其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛群出现近亲繁殖而引起种质衰退。现近亲繁殖而引起种质衰退。（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进行克隆？对它进行克隆？从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵在活体从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外培养获得该组上容易取）上剪取一小块组织，在体外培养获得该组

28、织（如软骨组织）的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢织（如软骨组织）的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵卵母细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核母细胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细胞，使其完成减数分裂和发育过程。核移植的卵母细胞，使其完成减数分裂和发育过程。核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎植入胚

29、胎在体外短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。经同期发情处理的受体母牛体内。4.体细胞核移植技术在研究和应用上还存在什么体细胞核移植技术在研究和应用上还存在什么问题？请你查阅资料，了解这方面的前沿动态。问题？请你查阅资料，了解这方面的前沿动态。研究方面：克隆动物基因组重新编程的机制尚不清研究方面：克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、死亡率楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。应用上：生产克隆动物费用昂贵，距大规模应用还应用上：生产克隆动物费用

30、昂贵，距大规模应用还有一定距离。有一定距离。 2 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是细胞是 （ ） A A获得不死性的细胞获得不死性的细胞 B B1010代以内细胞代以内细胞 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞1 1、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 （ ） A.A.动物细胞融合动物细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养A AD D课堂反馈练习课堂反馈练习3 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（ ）A A、动

31、物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白分泌蛋白B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过程中过程中D D、培养至、培养至5050代后传代细胞遗传物质没有发生改变代后传代细胞遗传物质没有发生改变B B4 4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ）无毒的环境无毒的环境 无菌的环境无菌的环境 培养基需要加入血培养基需要加入血清清 温度与动物体温相似温度与动物体温

32、相似 需要需要O O2 2，不需要，不需要COCO2 2 COCO2 2能调节培养液能调节培养液PHPHA A、 B B、 C C、 D D、 D D5 5、动物细胞培养的特点、动物细胞培养的特点 （ ）细胞贴壁细胞贴壁 有丝分裂有丝分裂 细胞分化细胞分化 接触抑制接触抑制 减数分裂减数分裂 原代培养一般传原代培养一般传1 11010代代A A、 B B、C C、 D D、A A6 6、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：此回答：（1 1）容器）容器A A中放置的是动物器官或组织。它一中放置的是动物器官或组织。它一般取自般取自_。（2 2）

33、容器）容器A A中的动物器官或组织首先要进行的中的动物器官或组织首先要进行的处理是处理是 ，然后用，然后用 酶处理，酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是是 。动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物物剪碎剪碎胰蛋白胰蛋白使细胞与培养液充分接触，便于培养使细胞与培养液充分接触，便于培养（3 3）培养首先在）培养首先在B B瓶中进行，瓶中的培养基成瓶中进行，瓶中的培养基成分有分有 _等。在此瓶中培养等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第到第 代。代。（4 4）为了把）为了把B B瓶中的细胞分装到瓶中的细胞分装到C C瓶中，用瓶中，用 处理，然后配置成处理，然后配置成 ，再，再分装。分装。 动物血清动物血清10胰蛋白酶胰蛋白酶细胞悬浮液细胞悬浮液