单克隆抗体的制备.ppt

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1、高一生物组高一生物组 张张 平平复习提问：复习提问：动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（是（ ）A.A.诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同 B.B.所用的技术手段基本相同所用的技术手段基本相同 C. C. 操作步骤基本相同操作步骤基本相同 D. D. 都能形成杂种细胞都能形成杂种细胞 D单克隆抗体单克隆抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的免疫球蛋白能与该抗原发生特异性结合的免疫球蛋白B B淋巴细胞淋巴细胞3. 3. 抗体的传统生产方法及缺陷是什么抗体的传统生产方法及缺陷

2、是什么？ 产量低产量低、纯度低纯度低， 且抗体的且抗体的特异性差特异性差、灵敏度低灵敏度低一、抗体一、抗体 1 1、概念：、概念： 由单个由单个B B淋巴细胞经过无性繁淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体，称为的抗体，称为单克隆抗体单克隆抗体。二、单克隆抗体二、单克隆抗体2、大量生产、大量生产单克隆抗体思路单克隆抗体思路 B B淋巴细胞具产生抗体的功能淋巴细胞具产生抗体的功能 骨髓瘤细胞具无限增殖的特性骨髓瘤细胞具无限增殖的特性 利用利用细胞融合的技术细胞

3、融合的技术将两种细胞融将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和骨髓瘤细胞合获得具有淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的特性的杂交瘤细胞杂交瘤细胞 利用利用动物细胞培养技术动物细胞培养技术大量培养杂大量培养杂交瘤细胞交瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合（只考虑两两融合）（只考虑两两融合）培养液中细胞有几培养液中细胞有几种类型？融合细胞种类型？融合细胞几种几种类型类型？骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞- B- B淋巴细胞淋巴细胞B B淋巴细胞淋巴细胞-骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞多种多种杂交细杂交细胞胞在具有筛

4、选作用的培养基上培养在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞检验阳性细胞单克隆抗体单克隆抗体注射到小鼠注射到小鼠体内体内体外培体外培养养 该细胞继承该细胞继承双亲细胞双亲细胞的遗传特性，既能的遗传特性，既能产生专产生专一抗体一抗体又能又能无限增殖无限增殖。杂交瘤细胞有何特点？杂交瘤细胞有何特点？特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高免疫小鼠免疫小鼠培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白选择培养基上培

5、养选择培养基上培养专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体克隆杂交细胞克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞专一抗体，检验阳性细胞多种杂交细胞多种杂交细胞杂交瘤细胞有何特点？杂交瘤细胞有何特点？本过程利用的那些技术？本过程利用的那些技术？动物细胞融合技术动物细胞融合技术动物细胞培养技术动物细胞培养技术是否注射抗原是否注射抗原（只考虑两两融合）培（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？几种融合细胞？重点突破重点突破与传统制备的抗体相

6、与传统制备的抗体相比具有什么特点？比具有什么特点？B B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C 1.1.右图为某同学根据杂交瘤技术右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案抗体的实验方案制备单克隆抗体制备单克隆抗体不能，没有将抗原注入小鼠体内，不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的无法获得产生单一抗体的B B淋巴淋巴细胞。细胞。(1).(1).该实验方案的目的是：该实验方案的目的是：_(2).(2).该方案能达到预期效果该方案能达到预期效

7、果吗？为什么？吗？为什么？B B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C (3).A(3).A是从小鼠的脾脏中取是从小鼠的脾脏中取得得_ _ 该细胞能够该细胞能够产生产生_ _ 。(4).(4).图中图中B B为为_过程，过程，常用常用_作作为诱导剂，该细胞继承为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，的遗传特性，既能既能_ ,_ ,又能又能_。B B淋巴细胞淋巴细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活的病毒灭活的病毒双亲细胞双亲细胞产生专一抗体产生专一抗体无限增殖无限增殖B B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C (5)._(5)._ 技术是单克隆抗体的技术技术是单克隆抗体的技术支持。支持。动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合（6 6）单克隆抗体的特点）单克隆抗体的特点 _，并，并可大量制备。可大量制备。特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高