血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定作业指导书.doc

《血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定作业指导书.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定作业指导书.doc（8页珍藏版）》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、血血清清 谷谷氨氨酰酰转转移移酶酶 G GG GT T 速速率率法法 测测定定作作业业指指导导书书 1 1. . 实实验验原原理理 GGT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以- 谷氨酰 -3-羧基-对硝基苯胺为底物，将底物上的谷氨酰 基转移至受体双甘肽，生成对硝基苯胺和-谷氨酰双 甘肽。在 405nm 进行吸光度检测，吸光度升高的速率与 标本中 GGT 活力成正比。 -谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺+ 双甘肽 GGT 对 硝基苯胺 + -谷氨酰双甘肽 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备：无特殊。 2.2 类型：血清或 EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 室温可保存 8

2、小时； 28可保存 3 天；-20保存至少可稳定 1 周。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 利德曼 -GGT 测定试剂盒（试剂1 664ml 试剂 2 616ml） 6.1.1 试剂组成 试剂 1（R1）： Tris 缓冲液 pH8.25 100mmol/L 甘氨酰甘氨酸 150mmol/L 试剂 2（R2）： -谷氨酰 -3-羧基-对硝基苯胺 2.9mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若 无污染，可稳定

3、至失效期。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊 度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不 能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防 腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品： 具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器：奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见AU1

4、000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控 警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品 GGT 校准值 校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告 可靠的检测结果。 不使用校准品进行GGT 活

5、力检测，可以直接使用 A/min 均值乘以计算因子得到结果，但是这样所得结 果的可靠性不如使用校准品。计算GGT 活力的计算因 子见下表： A A/ /m mi in n因因子子 = = G GG GT T 活活力力 U U/ /L L 底物起始的反应（ 37） 样品起始的反 应（37） 405nm 1421 1158 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 3、4：女性 7-32U/L；男性 11- 49U/L。 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参 考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1 ： ：-谷氨酰转移酶（ GG

6、T）又称 -谷 氨酰转肽酶。存在于肝脏和胆汁中，是肝胆疾病最敏感 的指示物。因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值，因 此-谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病。 结合丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯 酶等其它酶， -谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断 非常有价值。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 2-500U/L。 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标 准方法， AU1000 批内精密度小于 3%，总精密度小于 3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS 的规则。 批内精密 xsCV 批间精密 xsCV 度 n=20

7、 (U/L ) (U/L)(%) 度 n=20 (U/L ) (U/L)(%) 样品 1 39.90.992.48 样品 1 41.50.621.49 样品 2 73.60.851.16 样品 2 72.30.610.85 样品 3 2061.320.64 样品 3 2040.740.36 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试 剂盒(x)，同时对 78 个样品进行 GGT 活力检测，将检 测结果作方法学比较，其统计结果如下： y=1.00 x+1.00U/L；r=0.999。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为2U/L。 14.5 病人结果可报告范围： 2-500U/L。 1

8、 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法对 GGT 活力检测的最大 500U/L，当样品测定值超过上限时，应将样品用 9g/L 氯化钠溶液作 1+5 稀释，重新测定，结果乘以 6。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法对 GGT 活力检测的最大 500U/L，当样品测 定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1+5 稀释，重新测定，结果乘6。 17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度 1704mol/L ，胆红素浓度 684mol/L，血红蛋白 浓度4.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmo

9、l/L 时没有观 察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂 家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.80-6. 2.Persijn JP, van der Silk W. A new method for the determination of gamma- glutamyltransferase in serum. J Clin Che

10、m Clin Biochem 1976; 14:421-7. 3.Szasz G. Gamma-Glutamyltranspeptidase. In: Bergmeyer HU. Methoden der enzymatischen Analyse. Weinheim: Verlag Chemie, 1974.p. 757. 4. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent reference limits of several enzymes in plasma at different measuring temperatures. Klin Lab 1992;38:555-61. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按检验科废物处置管理规定 执行。