生物化学实验课程教学大纲（0830531）.doc

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1、生物化学实验课程教学大纲（0830531）课程名称：课程名称：生物化学实验生物化学实验课程编码：课程编码：08305310830531英文名称：英文名称：Experiment of Biochemistry 学学 时：时：6464其中必做：其中必做：6464学学 分：分：2 2开课学期：开课学期：3 3适用专业：适用专业：生物技术、生物工程生物技术、生物工程课程类别：课程类别：必修必修课程性质：课程性质：专业课专业课先修课程：先修课程：化学实验化学实验一、课程性质及任务生物化学实验与生物化学课程同时开设的实验课程，是理论教学的深化和补充，具有较强的实践性，是一门重要的技术基础课，是生物技术、生

2、物工程、生命科学等专业学生的必修课。通过生物化学实验课程学习，应该使学生掌握生物化学实验的基本知识和基本技术，包括生物化学分离、制备、分析和鉴定技术（如比色、层析、电泳、离心、透析等） ，同时掌握离心机、分光光度计、移液器、酶标仪、凝胶成像系统、柱层析系统等各种生化实验常规仪器的使用。随着生物化学学科的飞速发展，新的实验方法和技术不断出现。还要掌握一些较新的和实用的技术技能，如一些分子生物学的基础实验等。通过该课程的学习，使学生巩固和加深生物化学理论知识，进一步加强学生分析问题和解决问题的能力，尤其是通过综合实验及设计实验的训练，培养了学生的设计和创新能力，同时培养了学生一定的科学研究能力和严

3、谨的科学态度，为学生进入更高层次的生物化学乃至分子生物学实验打下基础。二、课程的教学要求实验课程内容分三个层次：基础实验、综合实验和设计性实验。基础实验是一些加强学生基本实验技能训练的传统实验。综合设计实验包括一些新近发展起来的生化实验技术以及一些实验内容进行系统的优化组合。设计性实验由学生自拟题目或者教师命题，学生自选仪器，独立设计实验方案。经过多层次的训练后，学生应达到下列要求：1进一步巩固和加深对生物化学基本知识的理解，掌握生物化学实验的基本知识和基本操作技能。如生物化学分离、制备、分析和鉴定技术。2提高观察问题、分析问题和解决问题的能力。通过独立思考，深入钻研有关问题，具有初步解决生物

4、化学实验问题的能力。3能正确使用仪器设备，掌握仪器操作原理。4能独立设计实验，利用所学知识准确分析实验结果。5课前准备：仔细阅读实验指导书，了解实验目的、原理、要求、实验方法和步骤。6. 实验中：遵守实验室规则。严格按照实验步骤进行操作，正确使用仪器。实验中要认真操作，仔细观察，如实记录，做到理论联系实际。实验操作遇有疑难时，要随时找老师或实验员解决。应爱护实验器材，节省动物与实验消耗用品。7. 实验后：清理实验器材，擦洗干净，请老师验收后放回指定地点。如有缺少或损坏，应立即报告负责老师并进行登记。整理实验记录，书写实验报告，并按时交给负责老师批阅。三、实验项目与学时分配序号 项目内容提要学时

5、性质要 求1氨基酸的分离 鉴定-纸层析 法通过氨基酸的分离,学习纸层 析法的基本原理及操作方法4验证必做2SDS-PAGE 测 蛋白质分子量 及蛋白纯度鉴 定技术1.学习 SDS-PAGE 电泳技 术 2.学习测蛋白质分子量及 蛋白纯度的鉴定方法8综合必做3血清蛋白醋酸 纤维素薄膜电 泳鉴定技术1.学习用醋酸纤维素薄膜 电泳技术 2.学习分离血清蛋白及鉴 定技术6综合选做4离子交换柱层 析技术分离蛋 白质1.通过对凝胶的处理、装 柱、加样、洗脱技术的 学习，掌握层析技术。 2.用层析技术分离蛋白质6综合选做5单向定量免疫 电泳技术1.学习免疫电泳的原理和 方法。 2.掌握单向定量免疫电泳 的方

6、法。6验证选做6大豆蛋白的提 取及定量测定 技术1.学习大豆蛋白的提取方 法； 2.蛋白质几种定量测定方 法比较；8综合选做7蛋氨酸裂解酶 基因工程菌构 建、诱导表达、 纯化及鉴定学习基因工程菌构建方法； 诱导表达技术；酶蛋白下游 分离纯化技术；酶蛋白鉴定 技术。24综合必做8质粒 DNA 的微 量制备（碱裂 解法）及琼脂 糖凝胶电泳鉴 定技术1.学习用碱裂解法进行质 粒 DNA 的分离纯化技 术； 2.学习琼脂糖凝胶电泳技 术。4综合选做9大肠杆菌 DNA 和 RNA 的同步 提取、鉴定及 定量分析1.学习碱裂解细胞，提取 核酸的基本操作方法， 2.掌握琼脂糖电泳技术及 光谱法定量分析核酸。

7、8综合必做10猪脾 DNA 的提 取及定性定量 测定1.学会 SDS 提 DNA。 2.DNA 含量的测定4综合选做11酵母 RNA 的提 取及测定1.学会 SDS 提 RNA。 2.RNA 含量的测定。4综合选做12维生素 C 的提 取及定量测定用染料 2，6-二氯酚靛酚测定 蔬菜或水果中维生素 C 的含 量。8综合必做13还原糖和总糖 含量的测定学习几种方法测定糖含量 包括（3，5-二硝基水杨酸比 色定糖法，酚硫酸法等）8综合必做14黑木耳多糖的 提取、分离、 纯化及初步测 定通过水提法浸提出木耳中的 多糖，并测定多糖组成、含 量8综合选做15酶联免疫吸附 测定蛋白质技 术（ELISA）

8、方法1.学习抗体制备技术 2.学习酶联免疫吸附法 ELISA 方法建立；及抗 体或抗原蛋白测定技术12综合选做16脂肪酶的提取 及测定技术1.学习脂肪酶的提取技术 2.学习脂肪酶的测定技术4综合选做17蔗糖酶的分离 提取及鉴定技 术1.学习蔗糖酶分离提取的 方法。 2.有机溶剂分级及柱层析 技术。12综合选做18用正交试验设 计法测定几种 因素对蔗糖酶 活性的影响1.学习正交试验设计法的 使用。 2.求出蔗糖酶的最适温度 及最适 PH 值。12综合选做19酶的性质实验1.学习激活剂和抑制剂对 用不同酶作用于不同底 物， 2.了解酶的专一性。酶促 反应速度的影响。 3.了解温度对酶促反应速 度的

9、影响。6验证选做20过氧化物酶提 取及活性鉴定 实验1.学习过氧化物酶的提取 技术及鉴定技术 2.学习过氧化物酶的活性 测定技术16综合必做21设计性实验盐析技术分离鸡蛋清蛋白； 透析技术纯化蛋白质4设计 性选做22设计性实验设计一个药用有效成分的分 离纯化及鉴定实验（动物脏 器、植物、微生物）12设计 性选做23设计性实验植物色素的提取与分离技术4设计选做24设计性实验基因克隆、表达载体构建、 蛋白诱导表达及鉴定技术24设计选做25设计性实验蛋白质的几种定性定量检测 方法12设计选做26设计性实验维生素的提取分离及鉴定12设计选做注：项目性质：演示、验证、综合、设计、创新注：项目性质：演示、

10、验证、综合、设计、创新 项目要求：必做、选做项目要求：必做、选做四、考核及成绩评定1.考核方式：平时成绩（出勤率及实验报告）及期末实验技能操作两部分成绩综合。2.考核标准及比例：实验课程采用平时考核，期末考试，综合评定学生成绩。平时实验占 80%，期末考核占 20%。每个实验，预习报告占 30%，实际操作 40%，总结报告 30%。实验成绩分：优、良、中、及格、不及格五级。注：实验考核成绩达不到 60%，不允许参加理论考试。 五、主要参考书1.生物工程与技术专业基础实验教程. 北京：兵器工业出版社. 2007 年2.梁宋平主编.生物化学与分子生物学实验教程.北京：高等教育出版社.2003 年制定人：于源华审定人：李景梅批准者：庞春颖2013 年 3 月