血清载脂蛋白A1免疫透射比浊法测定法.doc

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1、血清载脂蛋白血清载脂蛋白 A1A1 免疫透射比浊法测定法免疫透射比浊法测定法1 1. . 实实验验原原理理免疫透射比浊终点测定法。使用抗Apo A1 抗体和样品中的 Apo A1 进行抗原 -抗体反应。反应完成后，用透射比浊法检测吸光度的变化反映Apo A1 浓度。2 2. . 标标本本：2.1 病人准备： 12 小时禁食。2.2 类型：血清、肝素或EDTA 血浆。3 3. . 标标本本存存放放： 稳定性： 1525保存可稳定 5 天；28保存可稳定 2 周； -20保存可稳定 3 个月；标本不可反复冻融。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标

2、准准： 标本细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂威特曼 APOA1 测定试剂盒 试剂 1；试剂 2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存试剂保存于 28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30 天。6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品：建议使用威特曼公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，校准稳定期：

3、4 周。具体参见生化检验校准品和质控品 .SOP 文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤：参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参

4、见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 按照公司配套校准品使用要求，用3 个不同水平的校准液，并以9g/L 氯化钠溶液为空白，经校准测定，仪器自动对校准品响应量通过合适的数学模型如Logit/Log，拟合成校准曲线。校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 3 3 女性： 1.201.90g/L男性： 1.101.70g/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1, ,2 2 ：载脂蛋白 A1(

5、Apo A1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要结构蛋白，它可以去除细胞中的胆固醇，因此具有预防动脉粥样硬化的作用。流行病学研究表明以Apo A1 表示的 HDL 水平与冠心病 (CHD)的流行率呈负相关。在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病危险时，除检测脂蛋白 (a)与载脂蛋白 B 之外，同时检测载脂蛋白A1 能对脂类失调提供更多的信息，也可替代高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测。一些研究表明，当Apo B 浓度上升 (女性 Apo B1.50g/L，男性 Apo B1.55g/L)，而 Apo A1浓度下降 (女性 Apo A11.20g/L，男性 Apo A11.10g/L)，对于预测 C

6、HD 危险非常有用。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 0.012.5g/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。批内精密度n=20x(g/L)s(g/L)CV(%)批间精密度n=20(每天校x(g/L)s(g/L)CV(%)准)样品 10.3630.00661.81样品 10.4390.00701.60样品 20.8640.00141.66样品 20.8850.02082.35样品 31.520.00563.65样品 31.460.0

7、2801.92批间精密度n=20(一次校准)x(g/L)s(g/L)CV(%)样品 10.4420.00811.84样品 20.9170.02292.50样品 31.500.03152.1014.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 53 个样品进行 Apo A1 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.15x-0.077g/L；r=0.994。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.002g/L。14.5 病人结果可报告范围： 0.012.50g/L。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法的检测范围为0.012.50g/L。当样

8、品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1+1 稀释后，重新测定，结果乘以2。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理： 无。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法的检测范围为0.012.50g/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1+1 稀释后，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质： DiaSys 公司的 Apo A1 试剂中抗体特异地只与人 Apo A1 发生免疫反应。当样品中抗坏血酸浓度1704 mol/L，胆红素浓度 598mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L 时没有观察到干扰

9、。试剂与 ApoA2 和 ApoB 没有交叉反应。17.3 前带限制：血 清 Apo A1 值5.00g/L 时，没有观察到前带效应。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献1. Bhatnagar D, Durrington PN. Measurement and clinical significance of apolipoproteins A-I and B. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testi

10、ng. Washington: AACC Press, 1997: p. 177-98.2. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B Saunders Company; 1999. p. 809-61.3. Jungner I, Marcovina SM, Walldius G, Hol

11、me I, Kolar W, Steiner E. Apolipoprotein B and A-I values in 147576 Swedish males and females, standardized according to the World Health Organization-International Federation of Clinical Chemistry First International Reference Materials. Clin Chem 1998; 44: 1641-9.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。