生化实验总结参考.doc

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1、生化实验总结生化实验总结生化实验总结随着实验的顺利完成,意味着生化大实验实习也将结束。虽然只有短短五天的时间,我觉得我们学到了很多很多知识,也认识到自己的问题存在。每个人都应该好好的深思。生化实验我们做的是酵母蔗糖酶的提取、分离和纯化。蔗糖酶又称转化酶。1928年Dumas等首先指出酵母菌发酵蔗糖时必须有这种酶的存在。蔗糖在蔗糖酶的作用下,水解为葡萄糖和果糖,还原力增加,又由于生成果糖,甜度增加。按水解蔗糖的方式,蔗糖酶可分为从果糖末端切开蔗糖的D呋喃果糖苷酶和从葡萄糖末端切开蔗糖的D葡萄糖苷酶。前者存在于酵母中,后者存在于霉菌中。工业上多从酵母中提取。蔗糖酶在工业上用以转化蔗糖,增加甜味,制

2、造人造蜂蜜,防止高浓度糖浆中的蔗糖析出,还用来制造含果糖和巧克力的软心糖等。在老师和学长、学姐的的关心领导下,通过我们每个成员的齐心协力、共同努力顺利完成!取得了让人满意的结果。现就本次实验实习作以简单的总结。实验的流程大致是:蔗糖酶的提取分离纯化以及最后的定性、定量测定。我们每天都有着不同的任务。实验第一天崔老师给我们讲了一些实验的基本操作要求和注意事项。然后进行仪器和用具的清。药品配制。清洗听起来大家都觉得很简单,其实不然。一个实验结果的好坏很大程度与你的仪器有很大的关系,一定要按要求认真的完成。接下来是我们配制药品和粗酶提取:药品配制一定要清楚你所要配制的药品种类和浓度,并准确称量、量取

3、。因为药品的好坏是整个实验成功的关键因素。我们组在配制0.2%的葡萄糖溶液时就出现问题:陈晓花看错数据配成2%的溶度。在后来做标准曲线的时候我们才发现。二组配制的考马斯亮蓝也出现问题,原因有可能是大家去药品是被污染也有可能是配制过程就出错了。不管怎样我们都要重新做,这就浪费了时间。所以每一步每个人都要认真对待,即便是添加蒸馏水也要做到有始有终。粗酶提取我们采用甲苯法进行,有姜丽丽和李海民完成。由于甲苯有毒在使用过程中要戴口罩,在提取过程要采用蔗糖酶的最适温度35。使其充分的混匀水浴30min,隔夜,第二天进去离心。离心过程为保证酶活性必须采用低温离心机,完事后得到粗酶液25ml4保存,样品进行

4、乙醇分级处理。离心过程要明确我们所要的是沉淀还是上清液。第二天我们进行乙醇分级处理,这个还是很简单的。陈晓花和洪宇他们俩个合作完成的。在进行乙醇分级处理时事先计算好每次所需要的乙醇体积。由于乙醇溶解时会产生热,为保证酶活性再添加过程要缓慢加入并不定的搅拌。写到这我就想说实验过程合作真的很重要,并不是其他人都没事情做的。我们同事进行葡糖糖标准曲线和蛋白质标准曲线的绘制。这是一个要有耐心和细心的人去做。我选择了高琳和李荣华去做。绘制曲线过程我们每个都做了四次,结果都不是很理想。后来才知道是使用的考马斯亮蓝有问题。下午进行装柱子,胶液由老师统一给制备的。装柱子过程用滴管慢慢的加入并且不能间断以防止出

5、现断层。众人皆看荣仔一个人操作。最后的时刻又出现问题了,胶面呈现凹凸不平,正好老师过来给我们指正错误。如果不进行处理对后面的分离会造成很大的影响。实验做到第二天其实都不怎么累,我们还都挺欢乐的。第三天的到来让我们彻底改变了,我可以叫它黑色星期三。这一天我们在实验室连续11个小时。早上由老师统一指导进行上样。上样结束后进行分离,这是一个很漫长的时间我们大概做了9个小时。在等待出现结果的时刻每个人都很着急,出现结果那一刻我们都很兴奋。感觉自己的努力没有白费每隔2min记录核酸蛋白仪上的数据同时检测是否有蔗糖酶流出。洗脱柱子采用0.15molNaclpbs溶液。并要测定每收集的蛋白液的蔗糖酶。我觉得

6、这是很繁琐的工程,每收集一管都要进行测量。还好我们组员高琳姜丽丽同学很有耐心的完成,在这里真心感谢他们。其实今天的实验并不是很忙,只不过需要大家一直在等时间。我们组员都坚持到最后,即便那些没有进行操作的人也等在最后走,很高兴大家团结一致。最后庆祝我们的成果和犒劳自己的辛苦我们组的在一起吃饭。真的感谢他们的支持。第四天的任务相比较很简单了,就是电泳纯化蛋白。李萍、荣李文彬、李华、李佳男、姜丽丽他们五个人完成。我和高琳进行定量测定。每人都很认真的负责自己的任务。实验终于在我们的辛苦下顺利的完成。看到自己的结果我们都露出微笑,功夫不负有心人。作为组长我想说说自己在这次实习的感受:首先感谢老师和同学对

7、我的信任和肯定,没有他们的支持我现在也不会心情愉快。刚开始我挺担心自己能不能做好,后来我发现其实很好带领的。作为组长我要根据对每个组员的了解进行任务划分,让他们做自己最拿手的实验。我觉得在这次试验中我分配的还是相当好的。作为一个团队,我认识到团结的重要性。每个组员都要认真对待以最饱满的热情投入到实验中。我们组员很有爱心工作忙的时候有人给我们送饭这是很令人感动的。也是在这四天里我学到了如何在一个团队里工作,如何融合到一个团队里。还有就是要善于交流:交流是最好的老师,做实验遇到问题是很常见的事,而最好的解决办法就是交流。做实验最重要的还是需要有坚忍不拔的毅力,不能因为一时的没有结果就想放弃。我想这

8、对我以后的工作和生活都有很大的帮助。最后感谢我们所有的组员。感谢我们和蔼和亲、幽默的崔老师给我们班这一实习的精彩授课!真诚希望以后有机会还能跟老师学习!扩展阅读:生化实验心得生化实验心得刘欣怡2022001400572022级生物基地班我很喜欢做实验,并且乐于锻炼自己的动手能力。本学期的生化实验,虽然只从第二周上到第十五周,但是我收获了很多并且留下了深刻的印象。对于本次实验心得的撰写,我将分为以下3个部分来进行:本学期实验回顾、本学期实验总结以及对于生化实验课的支持和建议。一、本学期实验回顾:本学期的生化实验课上,我们一共进行了11次实验,分别是Folin-酚试剂法测定血清蛋白质含量、酵母RN

9、A的提取、醋酸纤维薄膜电泳、紫外吸收法测定RNA含量、聚酰胺薄膜层析、纤维素酶活力的测定(三硝基水杨酸法)、还原糖和总糖含量的测定(三硝基水杨酸法)、酶最适PH的测定、费林试剂热滴定糖、肌糖原酵解作用、微量凯氏定氮法。这些实验具有代表性,是典型的生化实验。在这些实验中,涵盖了以前无机实验和有机实验的基础实验操作,还有全新的实验操作以及实验仪器。在这学期的生化实验课上,我既复习并熟练了大一无机实验和有机实验的基本实验操作和仪器(比如移液管、滴定管、蒸馏等),又学习并掌握了许多新操作以及新仪器的使用,比如紫外分光光度计、离心机、聚酰胺薄膜、热滴定、凯氏定氮仪器等。最重要的是,我学习并掌握了一些重要

10、的实验方法和原理,比如Folin-酚试剂法、紫外吸收法、三硝基水杨酸法、费林试剂与糖的反应、微量凯氏定氮法等。掌握了这些实验原理以及方法,有利于我们在以后中灵活运用设计实验。总体来说,本学期生化实验教会了我测定蛋白质、糖、核酸的方法,电泳和层析分离物质、如何测定酶的相关特性、验证肌糖原酵解作用、如何提取RNA。二、本学期实验总结通过这学期的生化实验,我的实验技能的到了大大地提升,同时,实验中的细节、注意事项以及老师拓展的知识令我获益匪浅,也让我深深地认识到科学是非常严谨的,尤其是在做实验的时候,要全神贯注,井井有条,否则很容易出差错,而这个小小的差错很有可能就使实验前功尽弃,既耽误时间又浪费试

11、剂。回顾这一学期我的实验课程,每一次我都能完成实验任务。大多数都比较顺利,小组内两人也大多配合默契,但是有一些美中不足的地方。有的一些实验比较麻烦,实验步骤较为繁琐,我们在做实验时偶尔会产生不耐烦的思想,只想着抓紧结束,但是在这种时候往往更容易出差错。我有两次记忆很深,一次是在测定纤维素酶活力(三硝基水杨酸法)时,没能及时贴上空白标签,导致又重新制作空白,拜拜浪费了时间;另一次是在鉴定肌糖原酵解作用时,实验步骤较为繁琐,并且老师对黑板上的简易实验步骤进行了多个补充,其中一点是要在水浴后取出大块肉再加下一步骤的试剂,结果我们当时产生了不耐烦情绪,就直接加了试剂而没有取出大肉块。对于这两次情况,虽

12、然对最终的实验结果没有产生什么明显的影响,但是,它实实在在体现了自己的操作并不是很严谨,需要注意和努力。在本学期生化实验报告的撰写中,我重点注意老师强调的实验分析部分。上课认真听老师的实验讲解并认真记录有关的可能实验结果的分析。在课后撰写实验报告时对这些点重点分析和总结,有时甚至是查找相关资料然后再进行分析。通过这一些列的做法,我的实验分析能力得到了提升,我能在讨论实验结果或者实验操作时找到更好、更精确的切入点,能得出更好的结论。同时,本学期老师将我们分为两人一组来进行实验,两人之间的磨合和合作是一种锻炼,对今后很有帮助。三、对于生化实验课的支持和建议我非常感谢老师在这一学期中的辛勤劳动。老师

13、在课前为我们做好实验准备很不容易,配试剂等都很辛苦。谢谢老师您了。我觉得咱们的额生化实验课设计的挺好的。两人一组可以分工合作,加快实验效率,同时又避免了因为同组同学人数多而有的同学无事可做的现象。老师在课上讲解实验时,有关实验步骤、实验可能结果、实验注意事项的分析、讲解和拓展令我获益匪浅,有利于培养我的实验思维并且拓宽了知识视野。建议方面,我想和老师提的一点建议其实是有关实验器材方面的。对于老师所提到的有关节约试剂、减少材料浪费等事项我非常赞同,并且大多数时候器材和试剂都很全(这和大一的无机实验和有机实验相比条件进步了很多),只是希望咱们的一些其他实验仪器能更全面一点,举一个例子,可以使用的紫外分光光度计只有3台,有些过少,实验中要等待的时间较长,并且有的仪器还不是很准确,对于我们的实验造成了一定的困扰,希望老师能将实验室内有些问题的仪器同一修一修。总之,我很喜欢咱们的生化实验课,并且从中学到了很多知识、实验方法和应用,锻炼了实验操作,形成了实验要耐心、细心、恒心的观念。同时还培养了团队意识和合作观念。我获益匪浅。第 8 页 共 8 页

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