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1、精选优质文档-倾情为你奉上酵母菌的培养技术一.酵母菌的培养基的配方1.麦芽汁培养基的配制培养基成分:新鲜麦芽汁一般为10-15波林。配制方法:(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。(2)取一份麦芽粉加四份水,在65水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,
2、搅拌煮沸,再过滤)。(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。(5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2琼脂,加热融化,补充失水。(6)分装、加塞、包扎。(7)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌20 min。2.马铃薯葡萄糖培养基的配制培养基成分:马铃薯20g 葡萄糖2 g 琼脂1.5-2g 水100ml 自然pH 配制方法:(1)配制20马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80浸泡lh用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成
3、20马铃薯浸汁,贮存备用。(2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。(3)分装、加塞、包扎。(4)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌20 min。3.豆芽汁葡萄糖培养基的配制 培养基成分:黄豆芽 10g 葡萄糖 5g 琼脂 1.52g 水 100ml 自然pH 配制方法 :(1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100ml水,小火煮沸30min,用纱布过滤,补足失水,即制成10豆芽汁。 (2)配制时,按每100ml10豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化,补足失水。 (3)分装、加塞、包扎。 (4)高压蒸汽灭菌100
4、Pa灭菌20min。 4.蔡氏(Czapck)培养基的配制 培养基成分:蔗糖 3g NaNO3 0.3g K2HPO4 0.1g KCl 0.05g MgSO47H2O 0.05g FeSO4 0.001g 琼脂 1.52g 蒸馏水 100ml 自然pH 配制方法 :(1)称量及溶化 量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3、K2HPO4、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培养基加入1ml0.1的FeSO4溶液。 (2)定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。 (3)加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。 (4)分装、加塞、包
5、扎。 (5)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。5.YPD培养基的配制YPD 或YPED,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基用于酵母菌的培养配方:1% Yeast Extract(酵母膏) 2% Peptone(蛋白胨) 2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉配制方法:(1) 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉(2) 高压121度2
6、0min (3) 加入100ml 10Dextrose (glucose)(葡萄糖),葡糖糖溶液灭菌后加入注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合。YPEG:除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外,其他成分同YPD二.酵母菌的培养条件营养:酵母菌同其它活的有机体一样需要相似的营养物质,像细菌一样它有一套胞内和胞外酶系统,用以将大分子物质分解成细胞新陈代谢易利用的小分子物质,属于异养生物。酸度:酵母菌能在PH值为3.07.5的范围内生长,最适PH值为4.55.0。水分:像细菌一样,酵母菌必须有水才能存活,但酵母需要的水分比细菌少,某些酵母能在水分极少的环境中生长,如蜂蜜和果酱,这表明它们对渗透压有相当高的耐受性。温度:在低于水的冰点或者高于47的温度下, 酵母细胞一般不能生长,最适生长温度一般在2030。氧气:酵母菌在有氧和无氧的环境中都能生长,即酵母菌是兼性厌氧菌,在有氧的情况下,它把糖分解成二氧化碳和水且酵母菌生长较快。在缺氧的情况下,酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。三.酵母菌培养的工艺流程四.酵母菌培养的设备纯培养罐 种子培养罐 分离机 高温灭菌设备 真空转鼓 造粒机 干燥床 震荡筛 干酵母贮罐 均质器 包装机 专心-专注-专业